生物選修一植物組織培養(yǎng)知識點(diǎn)總結(jié)生物選修一植物組織造就學(xué)問點(diǎn)：菊花的組織造就

植物組織造就的根本過程：

細(xì)胞分化：在生物個(gè)體發(fā)育過程中，細(xì)胞在形態(tài)、構(gòu)造和生理功能上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過程。

離體的植物組織或細(xì)胞，在造就了一段時(shí)間以后，會通過細(xì)胞分裂，形成愈傷組織，愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)那么，是一種高度液泡化的呈無定形態(tài)態(tài)的薄壁細(xì)胞。

由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細(xì)胞的脫分化，或者叫做去分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織接著進(jìn)展造就，又可以重新分化成根或芽等器官，這個(gè)過程叫做再分化。再分化形成的試管苗，移栽到地里，可以發(fā)育成完整的植物體。

植物細(xì)胞工程：具有某種生物全套遺傳信息的任何一個(gè)活細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整個(gè)體的實(shí)力，即每個(gè)生物細(xì)胞都具有全能性。但在生物體的生長發(fā)育過程中并不表現(xiàn)出來，這是因?yàn)樵谔囟ǖ臅r(shí)間和空間條件下，通過基因的選擇性表達(dá)，構(gòu)成不同組織和器官。

植物組織造就技術(shù)的應(yīng)用有：實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖;培育脫毒作物;制作人工種子;培育作物新品種以及細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等。

細(xì)胞分化是一種長久性的改變，它的生理意義是：使多細(xì)胞生物體中細(xì)胞構(gòu)造和功能趨向特地化，有利于提高各種生理功能的效率。

比擬根尖分生組織和愈傷組織的異同：

影響條件

材料：不同的植物組織，造就的難易程度差異很大。植物材料的選擇干脆關(guān)系到試驗(yàn)的成敗。植物的種類、材料的年齡和保存時(shí)間的長短等都會影響試驗(yàn)結(jié)果。菊花組織造就一般選擇未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝作材料。

一般來說，簡單進(jìn)展無性繁殖的植物簡單進(jìn)展組織造就。選取生長旺盛嫩枝進(jìn)展組培的是嫩枝生理狀態(tài)好，簡單誘導(dǎo)脫分化和再分化。

養(yǎng)分：離體的植物組織和細(xì)胞，對養(yǎng)分、環(huán)境等條件的要求相對特別，須要配制相宜的造就基。常用的造就基是MS造就基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有機(jī)物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。

激素：植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長素存在的狀況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)趨勢。在造就基中須要添加生長素和細(xì)胞分裂素等植物激素，其濃度、運(yùn)用的先后依次、用量的比例等都影響結(jié)果。

運(yùn)用依次

試驗(yàn)結(jié)果

先生長素，

后細(xì)胞分裂素

有利于分裂但不分化

先細(xì)胞分裂素，

后生長素

細(xì)胞既分裂也分化

同時(shí)運(yùn)用

分化頻率提高

生長素／細(xì)胞分裂素比值與結(jié)果

比值高時(shí)

促根分化，

抑芽形成

比值低時(shí)

促芽分化，

抑根形成

比值適中

促進(jìn)愈傷組織生長

環(huán)境條件：PH、溫度、光等環(huán)境條件。

不同的植物對各種條件的要求往往不同。進(jìn)展菊花的組織造就，一般將pH限制在5.8左右，溫度限制在18~22℃，并且每日用日光燈照耀12h。

操作流程：

配制MS固體造就基：

配制各種母液：將各種成分按配方比例配制成的濃縮液(造就基母液)。

運(yùn)用時(shí)依據(jù)母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量，并加蒸餾水稀釋。

配制造就基：應(yīng)參加的物質(zhì)有瓊脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素的母液，并用蒸餾水定容到1010毫升。

在菊花組織造就中，可以不添加植物激素。

緣由是菊花莖段組織造就比擬簡單。

滅菌：采納的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。

MS造就基中各種養(yǎng)分物質(zhì)的作用是什么?與肉湯造就基相比，MS造就基有哪些特點(diǎn)?

答：大量元素和微量元素供應(yīng)植物細(xì)胞所必需的無機(jī)鹽;蔗糖供應(yīng)碳源，維持細(xì)胞滲透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿意離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到必須影響后所產(chǎn)生的特別養(yǎng)分需求。

微生物造就基以有機(jī)養(yǎng)分為主，MS造就基那么需供應(yīng)大量無機(jī)養(yǎng)分。

外植體的消毒：

外植體：用于離體造就的植物器官或組織片段。

選取菊花莖段時(shí)，要取生長旺盛的嫩枝。菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗20min左右。

用無菌吸水紙吸干外植體外表的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中搖動(dòng)2~3次，持續(xù)6~7s，馬上將外植體取出，在無菌水中清洗。

取出后仍用無菌吸水紙吸干外植體外表水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中1~2min。取出后，在無菌水中至少清洗3次，漂洗消毒液。

留意：對外植體進(jìn)展外表消毒時(shí)，就要考慮藥劑的消毒效果，又要考慮植物的耐受實(shí)力。

接種：接種過程中插入外植體時(shí)形態(tài)學(xué)上端朝上，每個(gè)錐形瓶接種7～8個(gè)外植體。外植體接種與細(xì)菌接種相像，操作步驟一樣，而且都要求無菌操作。

造就：應(yīng)當(dāng)放在無菌箱中進(jìn)展，并定期進(jìn)展消毒，保持相宜的溫度(18~22℃)和光照(12h)。

移栽：栽前應(yīng)先翻開造就瓶的封口膜，讓其在造就間生長幾日，然后用流水清洗根部造就基。然后將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時(shí)間，進(jìn)展壯苗。最終進(jìn)展露天栽培。

栽培：

外植體在造就過程中可能會被污染，緣由有外植體消毒不徹底;造就基滅菌不徹底;接種中被雜菌污染;錐形瓶密封性差等。生物選修一植物組織造就學(xué)問點(diǎn)：月季的花藥造就

被子植物的花粉發(fā)育被子植物的雄蕊通常包含花絲、花藥兩局部。花藥為囊狀構(gòu)造，內(nèi)部含有很多花粉。花粉是由花粉母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的，因此，花粉是單倍體的生殖細(xì)胞。

被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)驗(yàn)小孢子四分體時(shí)期、單核期和雙核期等階段。在小孢子四分體時(shí)期，4個(gè)單倍體細(xì)胞連在一起，進(jìn)入單核期時(shí)，四分體的4個(gè)單倍體細(xì)胞彼此分別，形成4個(gè)具有單細(xì)胞核的花粉粒。

這時(shí)的細(xì)胞含深厚的原生質(zhì)，核位于細(xì)胞的中心(單核居中期)。隨著細(xì)胞不斷長大，細(xì)胞核由中心移向細(xì)胞一側(cè)(單核靠邊期)，并分裂成1個(gè)生殖細(xì)胞核和1個(gè)花粉管細(xì)胞核，進(jìn)而形成兩個(gè)細(xì)胞，一個(gè)是生殖細(xì)胞，一個(gè)是養(yǎng)分細(xì)胞。生殖細(xì)胞將在分裂一次，形成兩個(gè)精子。

留意：

①成熟的花粉粒有兩類，一類是二核花粉粒，其花粉粒中只含花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核，二核花粉粒的精子是在花粉管中形成的;另一類是三核花粉粒，花粉在成熟前，生殖細(xì)胞就進(jìn)展一次有絲分裂，形成兩個(gè)精子，此花粉粒中含有兩個(gè)精子核和一個(gè)花粉管核(養(yǎng)分核)

②花粉發(fā)育過程中的四分體和動(dòng)物細(xì)胞減數(shù)分裂的四分體不同。花粉發(fā)育過程中的四分體是花粉母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成的4個(gè)連在一起的單倍體細(xì)胞;而動(dòng)物細(xì)胞減數(shù)分裂過程中的四分體是聯(lián)會配對后的一對同源染色體，由于含有四條染色單體而稱為四分體。

③同一生殖細(xì)胞形成的兩個(gè)精子，其基因組成完全一樣。

產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑通過花藥造就產(chǎn)生花粉植株(即單倍體植株)一般有兩種途徑，一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植物，另一種是花粉在誘導(dǎo)造就基上先形成愈傷組織，再將其誘導(dǎo)分化成植株。這兩種途徑之間并沒有肯定的界限，主要取決于造就基中激素的種類及其濃度配比。

留意：

①無論哪種產(chǎn)生方式，都要先誘導(dǎo)生芽，再誘導(dǎo)生根

②胚狀體：植物體細(xì)胞組織造就過程中，誘導(dǎo)產(chǎn)生的形態(tài)與受精卵發(fā)育成的胚特別類似的構(gòu)造，其發(fā)育也與受精卵發(fā)育成的胚類似，有胚芽、胚根、胚軸等完整構(gòu)造，就像一粒種子，又稱為細(xì)胞胚。

影響花藥造就的因素誘導(dǎo)花粉能否勝利及誘導(dǎo)勝利率的凹凸，受多種因素影響，其中材料的選擇與造就基的組成是主要的影響因素。

親本的生理狀況：花粉早期是的花藥比后期的更簡單產(chǎn)生花粉植株，選擇月季的初花期。

適宜的花粉發(fā)育時(shí)期：一般來說，在單核期，細(xì)胞核由中心移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期，花藥造就勝利率最高。

花蕾：選擇完全未開放的花蕾。

親本植株的生長條件、材料的低溫預(yù)處理以及接種密度等對誘導(dǎo)勝利率都有必須影響。

材料的選?。哼x擇花藥時(shí)，一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于相宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時(shí)期的最常用的方法是醋酸洋紅法。但是，某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色，需采納焙花青-鉻礬法，這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色

接種和造就：滅菌后的花蕾，要在無菌條件下除去萼片和花瓣，并馬上將花藥接種到造就基上。

在剝離花藥時(shí)，要盡量不損傷花藥(否那么接種后簡單從受傷部位長生愈傷組織)，同時(shí)還要徹底去除花絲，因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成，通常每瓶接種花藥7～10個(gè),造就溫度限制在25℃左右,不須要光照。

幼小植株形成后才須要光照。

一般經(jīng)過20～30天造就后,會發(fā)覺花藥開裂,長出愈傷組織或形成胚狀體。將愈傷組織剛好轉(zhuǎn)移到分化造就基上，以便進(jìn)一步分化出再生植株。

假如花藥開裂釋放出胚狀體，那么一個(gè)花藥內(nèi)就會產(chǎn)生大量幼小植株，必需在花藥開裂后盡快將幼小植株分開，分別移植到新的造就基上，否那么這些植株將很難分開。還須要對造就出來的植株做進(jìn)一步的鑒定和篩選。

植物組織造就技術(shù)與花藥造就技術(shù)的一樣之處是：造就基配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等根本一樣。

兩者的不同之處在于：