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TEVProtease產(chǎn)品概述TEVProtease(煙草蝕紋病毒蛋白酶；Tobaccoetchvirusprotease)是來源于煙草蝕紋病毒(TEV)Nla的重組蛋白酶，此蛋白酶被用來切除純化后融合蛋白的親和標簽oTEV蛋白酶具有很強的位點特異性，能夠識別EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly),最普通的是ENLYFQG,其切割位點在谷氨酰胺和甘氨酸或絲氨酸之間。該酶在PH5.5-8.5和4-30°C的廣泛范圍內(nèi)皆有活性，使得反應(yīng)條件的選擇可根據(jù)目的蛋白的情況而修改。該酶帶有His-sumoTag經(jīng)6XHis標簽純化，剪切反應(yīng)完畢后可通過Ni-NTA(產(chǎn)品貨號：PAN001)去除。本蛋白酶來源于大腸桿菌重組表達。酶活性單位定義在1XTEVBuffer(50mMTris-HCl,pH8.0,0.5mMEDTA,1mMDTT)中，30C條件下反應(yīng)1小時，能夠切割3網(wǎng)的反應(yīng)底物達85%以上所需的酶量定義為一個活性單位。產(chǎn)品溶液組分TEVprotease儲存液10XCleavageBuffer25mMTris-HCl，pH8.0500mMTris-HCl，pH8.0150mMNaCl5mMEDTA

1mMEDTA10mMDTT5mMDTT50%(V/V)Glycerin推薦反應(yīng)體系反應(yīng)物組成體積融合蛋白50網(wǎng)TEVProtease2m(10U/M)10XTEVBuffer10MddH2O至100M不同溫度下的參考反應(yīng)時間:4°C反應(yīng)16小時20C反應(yīng)6小時30C反應(yīng)2小時活性測試kDaMarker9572554534lb——礎(chǔ)奇*白JU.-畛撲H的蛋白待測融合蛋白100網(wǎng)，加入TEVprotease2M,4°C反應(yīng)16小時，取酶切前后樣品SDS檢測，如右圖所示＞90%融合蛋白被切割。儲存條件長期儲存于-80C，可保存2年；或小量分裝后保存于-20C，可保存6個月，避免反復(fù)凍融。10XTEVBuffer置于-20C保存。包裝規(guī)格貨號

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