第四章藥物的雜質(zhì)分析一、藥物的純度

藥物的純度指藥物純凈程度，反映了藥物質(zhì)量的優(yōu)劣，含有雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素。

第一節(jié)藥物中的雜質(zhì)與雜質(zhì)限量雜質(zhì)（forin、impurities）是指：

1.有毒副作用的物質(zhì)

2.本身無毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì)

3.本身無毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學(xué)管理的物質(zhì)二、藥物中雜質(zhì)的來源1.生產(chǎn)過程中引入（1）原料、反應(yīng)中間體及副產(chǎn)物（2）試劑、溶劑、催化劑類

（3）生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來的雜質(zhì)2.貯藏過程中產(chǎn)生

水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶形轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等

易發(fā)生水解反應(yīng)的結(jié)構(gòu)：

酯、內(nèi)酯、酰胺、鹵代烴、苷類等易發(fā)生氧化反應(yīng)的結(jié)構(gòu)：

醚、醛、酚羥基、巰基、亞硝基、雙鍵等96：131．在藥物生產(chǎn)過程中引入雜質(zhì)的途徑為

A.原料不純或部分未反應(yīng)完全的原料造成

B.合成過程中產(chǎn)生的中間體或副產(chǎn)物分離不凈造成

C.需加入的各種試劑產(chǎn)生吸附，共沉淀生成混晶等造成

D.所用金屬器皿及裝置等引入雜質(zhì)

E.由于操作不妥，日光曝曬而使產(chǎn)品發(fā)生分解引入的雜質(zhì)三、藥物雜質(zhì)的分類

（一）按化學(xué)類別和特性分為：

無機(jī)雜質(zhì)、有機(jī)雜質(zhì)、有機(jī)揮發(fā)性雜質(zhì)（二）按毒性分為：毒性雜質(zhì)（如重金屬、砷鹽等）、信號雜質(zhì)（氯化物、硫酸鹽等）（三）藥物中的雜質(zhì)按來源分為

1.一般雜質(zhì)（generalimpurities）是指在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)或貯藏過程中容易引入的雜質(zhì)。如氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽、酸、堿、水分、易炭化物、熾灼殘?jiān)取Ｒ话汶s質(zhì)的檢查方法收載在中國藥典的通則中。

2.特殊雜質(zhì)（specialimpurities）

是指在特定藥物的生產(chǎn)或貯藏過程中引入的雜質(zhì)，多指有關(guān)物質(zhì)。如阿司匹林中的游離水楊酸、異煙肼中的游離肼、甾體激素中的有關(guān)物質(zhì)。

特殊雜質(zhì)檢查方法收載在中國藥典正文各藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。例：中國藥典（2015年版）中規(guī)定的一般雜質(zhì)檢查中不包括的項(xiàng)目是

A.硫酸鹽檢查

B.氯化物檢查

C.溶出度檢查

D.重金屬檢查

E.砷鹽檢查

四、藥物的純度與化學(xué)試劑的純度

藥物的純度考慮雜質(zhì)的生理作用，藥物必須進(jìn)行臨床試驗(yàn)。藥品只有兩個等級：合格或不合格?；瘜W(xué)試劑有很多等級，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級純（GR）、分析純（AR）、化學(xué)純（CP）、色譜純、光譜純。例.臨床所用藥物的純度與化學(xué)品及試劑純度的主要區(qū)別是A.所含雜質(zhì)的生理效應(yīng)不同B.所含有效成分的量不同C.所含雜質(zhì)的絕對量不同D.化學(xué)性質(zhì)及化學(xué)反應(yīng)速度不同E.所含有效成分的生理效應(yīng)不同五、雜質(zhì)的限量與限量計(jì)算（一）雜質(zhì)限量

指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬分之幾來表示雜質(zhì)量≤雜質(zhì)限量＜雜質(zhì)量藥品合格藥品不合格

（二）藥物中一般雜質(zhì)檢查常用的檢查方法

1.對照法限量檢查法（LimitTest）供試品供試溶液對照物質(zhì)對照溶液同一條件下反應(yīng)顏色渾濁色斑比色比濁比較色斑特點(diǎn)：不需知道雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量2.靈敏度法

系指在供試品溶液中加入試劑，在一定反應(yīng)條件下，不得有正反應(yīng)出現(xiàn)。

特點(diǎn)：不需對照物質(zhì)

3.比較法

限值法、含量測定法：測定雜質(zhì)的絕對含量，如測定吸光度、pH值等。

特點(diǎn)：準(zhǔn)確測定雜質(zhì)的量，不需對照物質(zhì)（三）雜質(zhì)限量的計(jì)算97：71．檢查某藥物中的砷鹽，取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml（每1ml相當(dāng)于1g的As）制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑，砷鹽限量為0.0001％，應(yīng)取供試品的量為

A.0.20gB.2.0gC．0.020gD.1.0gE.0.10g已知：c＝1g/ml＝1×106g/mlV＝2mlL＝0.0001%96：79．檢查維生素C中的重金屬時，若取樣量為1.0g，要求含重金屬不得過百萬分之十，問應(yīng)吸取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（每1ml＝0.01mg的Pb）多少ml？A.0.2mlB.0.4mlC．2.0mlD.1.0mlE.20ml第二節(jié)藥物中一般雜質(zhì)的檢查一、一般雜質(zhì)檢查規(guī)則

《藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定：

1.遵循平行操作原則（1）儀器的配對性如納氏比色管應(yīng)配對，刻度線高低相差不超過2mm，砷鹽檢查時導(dǎo)氣管長度及孔的大小要一致（2）對照與供試同步操作2.正確的比色、比濁方法

3.檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在限度邊緣時應(yīng)對供試和對照各復(fù)查二份二、氯化物檢查法（一）原理對照法

（二）檢查方法

藥典通則除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置50ml納氏比色管中，加水使成約40m1，搖勻，即得供試溶液。另取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，搖勻，即得對照溶液。于供試溶液與對照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0m1，用水稀釋使成50m1，搖勻，在暗處放置5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，即得（三）測定條件

1.標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液10gCl/ml，50ml溶液中含50～80g的Cl所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液5.0～8.0ml。

（1）加速AgCl渾濁的形成；

2.反應(yīng)需在硝酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。

（3）避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀沉淀的形成。

（2）產(chǎn)生較好的乳濁；

3.試劑：硝酸銀

4.供試液和對照液稀釋后，再加硝酸銀溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀

6.比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。7.平行操作原則

5.避光、暗處放置5分鐘后比濁，因氯化銀見光易分解。（四）干擾及排除

1.若供試品有色，需經(jīng)處理后方可檢查。

（1）內(nèi)消色法：倍量法2倍量的供試品20ml稀硝酸水約80ml供試溶液對照溶液硝酸銀試液1.0ml加水至50ml硝酸銀試液1.0ml反復(fù)過濾等分濾液+↓

（棄去）標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液加水至50ml氯法齊明中氯化物的檢查：取本品約0.40g，加冰醋酸5ml溶解，加水適量與硝酸1ml，再加水使成50ml，溶液如不澄清，濾過，將濾液分為兩等份，1份中加硝酸銀試液1ml，放置15分鐘，如顯渾濁，濾過，至溶液澄清，加水使成約40ml，加標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液2.0ml與水適量使成50ml，搖勻，在暗處放置5分鐘，作為對照液；另1份加水使成40ml，加硝酸銀試液lml與水適量使成50ml，搖勻，在暗處放置5分鐘，如發(fā)生渾濁，與上述對照液比較，不得更濃（0.01%）

（2）外消色法：如高錳酸鉀中氯化物的檢查，可先加乙醇適量，使其還原褪色后再依法檢查。具體為：取本品2.0g，加熱水60ml溶解后，置水浴上加熱，在不斷攪拌下滴加乙醇適量（約8ml），使溶液完全褪色后，移入100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過；取續(xù)濾液25ml，依法檢查（通則0801)，與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液5.0ml制成的對照液比較，不得更濃（0.010%）。

2.當(dāng)有其它干擾物質(zhì)存在時，必需在檢查前除去

I2Cl-還原劑

I-Cl-NH3·H2OAgNO3AgI↓+Ag(NH3)2Cl過濾Ag(NH3)2ClHNO3AgCl白色渾濁（1）碘中氯化物的檢查（2）碘化鉀（鈉）中氯化物的檢查

I-Cl-NH3·H2OAgNO3AgI↓+Ag(NH3)2Cl過濾Ag(NH3)2ClHNO3AgCl白色渾濁方法一

I-Cl-I2↑Cl-方法二ChPH2O2+H3PO4△（3）溴化物中氯化物的檢查Br-Cl-HNO3+H2O2△Br2↑Cl-Cl-Cl-

3.不溶于水的有機(jī)藥物

（1）加水振搖，過濾，取濾液進(jìn)行檢查。

（2）溶于有機(jī)溶劑如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后進(jìn)行檢查。

4.有機(jī)藥物中有機(jī)氯雜質(zhì)的檢查，具體情況，具體分析。

酒石酸唑吡坦（ZolpidemTartrate）：含氯化合物取本品約75mg，精密稱定，照氧瓶燃燒法（通則0703）進(jìn)行有機(jī)破壞，以0.1mol/L氫氧化鈉溶液10ml為吸收液，待生成的煙霧完全吸入吸收液后，移至50ml納氏比色管中，照氯化物檢查法（通則0801）檢査，與對照液（與供試品同法操作，但燃燒時濾紙中不含供試品，并加標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液5.0ml）比較，不得更濃（0.07%）。95：82.藥物中氯化物雜質(zhì)檢查，是使該雜質(zhì)在酸性溶液中與硝酸銀作用生成氯化物渾濁，所用的稀酸是（B）A.硫酸B.硝酸C.鹽酸D.醋酸E.磷酸

例1.中國藥典（2015年版）規(guī)定，檢查氯化物雜質(zhì)時，一般取用標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（10μgCl－/ml）5～8ml的原因是（D）A.使檢查反應(yīng)完全B.藥物中含氯化物的量均在此范圍C.加速反應(yīng)D.所產(chǎn)生的濁度梯度明顯E.避免干擾

例2.采用硝酸銀試液檢查氯化物時，加入硝酸使溶液酸化的目的是（ABCDE）A．加速生成氯化銀渾濁反應(yīng)B．消除某些弱酸鹽的干擾C．消除碳酸鹽干擾D．消除磷酸鹽干擾E．避免氧化銀沉淀生成例3.當(dāng)采用比濁法檢查氯化物雜質(zhì)時，若藥物本身有顏色而干擾檢查的話，應(yīng)該選用的處理方法為（AB）A．內(nèi)消色法B．外消色法C．比色法D．差示比濁法

E．差示可見分光法

例4.若要進(jìn)行高錳酸鉀中氯化物的檢查，最佳方法是（D）A.加入一定量氯仿提取后測定B.氧瓶燃燒C.倍量法D.加入一定量乙醇E.以上都不對例5.下列哪些條件為藥物中氯化物檢查的必要條件（ABC）A.所用比色管需配套B.稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C.避光放置5分鐘D.用硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)溶液做對照E.在白色背景下觀察

三、硫酸鹽檢查法（一）原理

對照法（二）測定條件

1.標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.1～0.5mg所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液1.0～5.0ml。

2.反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸2ml為宜。

3.試劑：氯化鋇

4.供試液和對照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀

若供試品有色，也可用內(nèi)消色法或外消色法處理。

（三）干擾及排除

5.比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。

例：藥物中硫酸鹽檢查時，所用的標(biāo)準(zhǔn)對照液是（D）A.標(biāo)準(zhǔn)氯化鋇B.標(biāo)準(zhǔn)醋酸鉛溶液C.標(biāo)準(zhǔn)硝酸銀溶液D.標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液

E.以上都不對

四、鐵鹽檢查法1.原理

對照法（一）硫氰酸鹽法

ChP、USP

2.檢查方法

藥典通則

除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml，移置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成

35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻；如顯色，立即與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液一定量制成的對照溶液（取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，置50ml納氏比色管中，

加水使成25ml，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻）比較，即得

3.測定條件

（1）用FeNH4(SO4)2·12H2O（硫酸鐵銨）配制標(biāo)準(zhǔn)鐵貯備液（加入硫酸防止Fe3+的水解），標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液10gFe3+/ml，50ml溶液中含10～50g的Fe3+顯色梯度明顯，一般取標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.0～5.0ml

（2）反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸4ml為宜。

（3）試劑：硫氰酸銨。加過量硫氰酸銨，使反應(yīng)向正反應(yīng)方向進(jìn)行

（4）檢查Fe2+和Fe3+

（5）鐵鹽檢查時，加過硫酸銨可氧化Fe2+為Fe3+，同時可防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。加硝酸后加熱也可氧化Fe2+為Fe3+

（6）比色方法：同置于白色背景上，自上向下觀察。

4.干擾及排除

（1）為了提高靈敏度或供試管與對照管色調(diào)不一致時，可用正丁醇提取后，分取正丁醇層比色。

ChP枸櫞酸鈉中鐵鹽的檢查：取本品1.0g，依法檢査（通則0807）,加正丁醇提取后，與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.0ml用同一方法制成的對照液比較，不

得更深（0.001%）

。

（2）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，需經(jīng)700～800℃熾灼破壞處理后再依法檢查。

ChP對氨基水楊酸鈉中鐵鹽的檢查：

取本品1.0g，置鉑坩堝中，加無水碳酸鈉2g，混合，在約740℃熾灼，放冷，殘?jiān)酉←}酸15ml溶解后，依法檢查（通則0807），與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.5ml制成的對照液比較，不得更深（0.0015%）。（二）巰基醋酸酸法

BP對照法本法靈敏度較高，但試劑較貴

例1.中國藥典（2015年版）規(guī)定鐵鹽的檢查方法為（A）A.硫氰酸鹽法B.巰基醋酸法C.普魯士藍(lán)法D鄰二氮菲法E.水楊酸顯色法例2.中國藥典（2015年版）規(guī)定，硫氰酸鹽法檢查鐵鹽時，加入過硫酸銨的目的是（AB）

A.使藥物中鐵鹽都轉(zhuǎn)變?yōu)镕e3+B.防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色

C.使產(chǎn)生的紅色產(chǎn)物顏色更深

D．防止干擾

E．便于觀察、比較

例3.某藥物（黃色）欲進(jìn)行鐵鹽檢查，應(yīng)采用下面哪種方法（E）A.倍量法B.微孔濾膜過濾法C.調(diào)色法D.600～700℃熾灼殘?jiān)鬁y定E.以上都不對

例4.中國藥典收載的鐵鹽檢查，主要是檢查（D）A.FeB.Fe2+C.Fe3+D.Fe2+和Fe3+E.以上都不對

五、重金屬檢查法以鉛為代表

中國藥典（2015年版）共收載三法。

（一）第一法硫代乙酰胺法1.原理

對照法

適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。

2.檢查方法除另有規(guī)定外，取25ml納氏比色管三支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml后，加水或各品種項(xiàng)下規(guī)定的溶劑稀釋成25ml，乙管中加入按各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法制成的供試品溶液25ml，丙管中加入與乙管相同量的供試品，加配制供試品溶液的溶劑適量使溶解，再加與甲管相同量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml后，用溶劑稀釋成25ml；再在甲、乙、丙三管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，當(dāng)丙管中顯出的顏色不淺于甲管時，乙管中顯示的顏色與甲管比較，不得更深。如丙管中顯出的顏色淺于甲管，應(yīng)取樣按第二法重新檢查。若供試品溶液帶顏色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液，使之與乙管、丙管一致；再在甲、乙、丙三管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml進(jìn)行檢查。

如在甲管中滴加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液，仍不能使顏色一致時，應(yīng)取樣按第二法檢查。

3.測定條件

（1）用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（加硝酸防止Pb2+水解），標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液10gPb2+/ml，適宜比色范圍為27ml溶液中含10～20g的Pb2+。

（2）本法用2mlpH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為3～3.5

（3）顯色劑：從ChP（1990）開始改用硫代乙酰胺做顯色劑

（1）供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查。

A.在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。

B.第二法3.干擾及排除

（2）若供試品中有微量Fe3+存在，會氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸或鹽酸羥胺（0.5～1.0g）還原Fe3+為Fe2+，可消除干擾ChP葡萄糖酸亞鐵中重金屬的檢查：

取50ml納氏比色管兩支，甲管中加水適量，加稀醋酸2ml與抗壞血酸1g，滴加稀焦糖溶液調(diào)節(jié)溶液顏色與供試品一致，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液1.25ml，再加水使成25ml，作為對照液；另取本品0.5g，加水20ml溶解后，量取5ml，置乙管中，加稀醋酸2ml、抗壞血酸1g、標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液1ml，加水適量使成25ml，作為供試液；甲乙兩管中分別加硫化氫試液10ml，搖勻，在暗處放置10分鐘；同置白紙上，自上面透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深，含重金屬不得過百萬分之二十。（3）若供試品為鐵鹽，可利用Fe3+在鹽酸中生成HFeCl，用有機(jī)溶劑提取除去后再進(jìn)行檢查

（4）若藥物本身能生成不溶性硫化物時，可加入掩蔽劑消除干擾后，用第三法檢查。ChP葡萄糖酸銻鈉中鉛鹽的檢查：

取本品1.0g，加水10ml與酒石酸1.0g，溶解后，加10%氫氧化鈉溶液10ml、氰化鉀試液2ml與硫化鈉試液5滴，放置2分鐘，如顯色，與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液2.0ml用同法制成的對照液比較，不得更深（0.002%）。

（二）第二法熾灼后的硫代乙酰胺法

適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及難溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機(jī)藥物。

500～600℃熾灼后的殘?jiān)?，?jīng)處理后，依一法檢查。

1.原理對照法2.操作方法

含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）

（三）第三法硫化鈉法

適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。1.原理對照法

2.測定條件

（1）NaOH堿性條件下（2）顯色劑：硫化鈉

97：78．重金屬檢查中，加入硫代乙酰胺時溶液控制最佳的pH值是（B）A.1.5B.3.5C．7.5D.9.5E.11.5例1.中國藥典(2015年版)重金屬檢查法中，所使用的顯色劑是（BC）

A.硫化氫試液

B.硫代乙酰胺試液

C.硫化鈉試液

D.氰化鉀試液

E.硫氰酸銨試液例2.葡萄糖中進(jìn)行重金屬檢查時，適宜的條件是（C）A.用硫代乙酰胺為標(biāo)準(zhǔn)對照液B.用10ml稀硝酸/50ml酸化C.在pH3.5醋酸鹽緩沖溶液中D.用硫化鈉為試液E.結(jié)果需在黑色背景下觀察

例3.現(xiàn)有一藥物為苯巴比妥，欲進(jìn)行重金屬檢查，應(yīng)采用《中國藥典》上收載的重金屬檢查的哪種方法（C）A.一法B.二法C.三法D.四法E.以上都不對例4.下面哪些方法為《中國藥典》收載的重金屬檢查方法（ACD）

A.500～600℃熾灼殘?jiān)?按一法操作

B.pH3～3.5條件下，加入硫化氫試液

C.堿性下，加入硫化鈉試液

D.按一法操作，結(jié)果用微孔濾膜過濾后觀察色斑

E.以上都對六、砷鹽檢查法

（一）古蔡氏法

ChP、BP、JP遇HgBr2試紙生成黃色～棕色的砷斑，與2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較1.原理對照法

2.操作方法（1）標(biāo)準(zhǔn)砷斑用2.0ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液制備（2）供試品需經(jīng)有機(jī)破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作3.測定條件

（1）標(biāo)準(zhǔn)砷溶液臨用新配，1gAs/ml（2）酸為反應(yīng)物，酸量應(yīng)足夠，所以加濃鹽酸5ml

（3）酸性氯化亞錫及碘化鉀的作用是：A.還原As5+為As3+，加快反應(yīng)速度；

B.碘化鉀被氧化生成的I2又可被氯化亞錫還原為I-，I-與反應(yīng)中生成的Zn2+能形成穩(wěn)定的配位離子，有利于生成砷化氫的反應(yīng)不斷進(jìn)行；

C.氯化亞錫與鋅作用，在鋅表面形成鋅錫齊，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生；

D.可抑制微量Sb的干擾，在實(shí)驗(yàn)條件下，100gSb存在不干擾。（4）醋酸鉛棉花的作用是消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾，醋酸鉛棉花60mg裝管高度60～80mm。

（5）鋅粒應(yīng)無砷（6）砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)立即觀察4.干擾及排除（1）供試品若為亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽等，在酸性溶液中生成二氧化硫氣體，與溴化汞試紙作用生成黑色硫化汞或金屬汞，干擾檢查。如為亞硫酸鹽，可于反應(yīng)前加硫酸加熱，使亞硫酸鹽分解，除去干擾。如為硫代硫酸鹽，應(yīng)于反應(yīng)前先加硝酸處理，使氧化成硫酸鹽，除去干擾。ChP硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查：

取本品0.20g，加水5ml溶解后，加硝酸3ml，置水浴上，注意蒸干，殘?jiān)屑铀當(dāng)?shù)毫升，攪勻，濾過，濾渣用水洗凈，合并濾液與洗液，蒸干后，加鹽酸5ml與水23ml使溶解，依法檢查（通則0822第一法），應(yīng)符合規(guī)定（0.001%）。（2）供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫、碘化鉀等還原劑，將Fe3+還原為Fe2+。如棕氧化鐵中砷鹽的檢查。（3）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，要先行有機(jī)破壞后再進(jìn)行檢查。常用的有機(jī)破壞方法：（4）本法適用于不含Sb或含Sb量小于100g的供試品。

堿破壞法：石灰法、無水碳酸鈉堿融法酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查（二）Ag-DDC法檢查、含量測定

ChP、USP、JP

對照法

直接比色或于510nm波長處測定吸光度，進(jìn)行比較。

用有機(jī)堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDC有利于反應(yīng)的進(jìn)行。USP用吡啶，ChP用三乙胺。

本法適用于含Sb量小于500g的供試品。（三）白田道夫法ChP含Sb藥物中砷鹽的檢查如葡萄糖酸銻鈉原理對照法ChP葡萄糖酸銻鈉：取本品0.1g，置比色管中，加0.01%二氯化汞溶液0.3ml與鹽酸9.2ml，再加氯化亞錫溶液（取氯化亞錫22.5g，加鹽酸12ml，加熱使溶解）0.5ml，混勻，靜置30分鐘后，如顯色，與對照液（取每lml中含As5g的溶液0.3ml，加0.01%二氯化汞溶液0.3ml與鹽酸8.9ml，再加氯化亞錫溶液0.5ml，混勻，靜置30分鐘）比較，不得更深（0.0015%）。（四）次磷酸法BP原理對照法98：82.在藥物的雜質(zhì)檢查中，其限量一般不超過百萬分之十的是（D）A.氯化物B.硫酸鹽C.醋酸鹽D.砷鹽E.淀粉

97：79.在用古蔡法檢查砷鹽時，導(dǎo)氣管中塞入醋酸鉛棉花的目的是（C）A.除去I2

B.除去AsH3C.除去H2SD.除去HBrE.除去SbH399x：75．砷鹽檢查法中，在檢砷裝置導(dǎo)氣管中塞入醋酸鉛棉花的作用是（C）A.吸收砷化氫B.吸收溴化氫C.吸收硫化氫D.吸收氯化氫E.吸收銻化氫

95：140.古蔡氏法中，SnC12的作用有（ACD）A.使As5+→As3+

B.除去H2SC.除去I2

D.組成鋅錫齊E.除去其它雜質(zhì)

95：83.Ag—DDC法檢查砷鹽的原理為：砷化氫與Ag—DDC吡啶作用，生成的物質(zhì)是（E）A.砷斑B.銻斑C.膠態(tài)砷D.三氧化二砷E.膠態(tài)銀98：137.中國藥典（2015年版）收載的古蔡法檢查砷鹽的基本原理是（BE）

A.與鋅、酸作用生成H2S氣體

B.與鋅、酸作用生成AsH3氣體

C.產(chǎn)生的氣體遇氯化汞試紙產(chǎn)生砷斑

D.比較供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)品砷斑的面積大小

E.比較供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)品砷斑的顏色強(qiáng)度

例[1～5]用古蔡氏法檢查下列藥物中的砷鹽時，排除干擾的方法：

A.先用硝酸或溴水氧化

B.先加酸性氯化亞銻還原

C.改用白田道夫法D.先加氰化鉀掩蔽

E.先加草酸生成沉淀

1.硫化物（A）

2.亞硫酸鹽（A）

3.硫代硫酸鹽（A）

4.高鐵鹽（B）

5.銻鹽（C）例6.Ag—DDC法檢查砷鹽時，所產(chǎn)生的紅色溶液為（C）

A.HDDC吡啶溶液

B.Ag吡啶溶液

C.Ag的膠態(tài)溶液

D.Ag(DDC)溶液

E.AsAg3溶液例7.ChP2015檢查葡萄糖酸銻鈉中的砷鹽時，應(yīng)選用（B）A.古蔡氏法B.白田道夫法C.碘量法D.Ag—DDC法E.契列法例8.葡萄糖中砷鹽的檢查，需要的試劑應(yīng)有（BCDE）

A．Pb2+標(biāo)準(zhǔn)液

B．SnCl2試液

C．KI試液

D．ZnE．醋酸鉛棉花例9.Ag-DDC法檢查砷鹽時，加入碘化鉀和酸性氯化亞錫的作用為（ABCDE）A．將As5+還原為As3+B．有利于AsH3生成反應(yīng)C．抑制SbH3的生成D．形成Zn-Sn齊以均勻而連續(xù)地發(fā)生氫氣E．催化加速生成AsH3例10.古蔡氏法檢砷，藥典規(guī)定制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑時，應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（C）A.1mlB.5mlC.2mlD.依限量大小決定E.以上都不對例11.古蔡氏法檢查所用的溶液是(B)A.強(qiáng)堿性溶液B.強(qiáng)酸性溶液C.含稀鹽酸10ml/50ml溶液D.含稀硝酸10ml/50ml溶液E.含強(qiáng)氧化劑(硝酸或過硫酸銨)溶液96：[96—100]所含待測雜質(zhì)的適宜檢測量為A.0.002mgB.0.01～0.02mgC.0.01～0.05mgD.0.05～0.08mgE.0.1～0.5mg

96：96.硫酸鹽檢查法中，50ml溶液中(E)96：97.鐵鹽檢查法中，50ml溶液中(C)96：98.重金屬檢查法中，35ml溶液中(B)96：99.古蔡氏法中，反應(yīng)液中(A)96：100.氯化物檢查法中，50ml溶液中(D)97：[106—110]A.硝酸銀試液B.氯化鋇試液C.硫代乙酰胺試液D.硫化鈉試液E.硫氰酸鹽試液97：106．藥物中鐵鹽檢查（E）97：107．磺胺嘧啶中重金屬檢查（D）97：108．藥物中硫酸鹽檢查（B）97：109．葡萄糖中重金屬檢查（C）97：110．藥物中氯化物檢查（A）98：[96—100]可用于檢查的雜質(zhì)為A.氯化物B.砷鹽C.鐵鹽D.硫酸鹽E.重金屬98：96．在酸性溶液中與氯化鋇生成渾濁液的方法（D）98：97．在酸性溶液中與硫氰酸鹽生成紅色的方法（C）98：98．在實(shí)驗(yàn)條件下與硫代乙酰胺形成均勻混懸溶液的方法（E）98：99．Ag-DDC法（B）98：100．古蔡法（B）例[1～5]雜質(zhì)檢查中所用的酸是A.稀硝酸B.稀鹽酸C.硝酸D.鹽酸E.醋酸鹽緩沖液1.氯化物檢查法（A）2.硫酸鹽檢查法（B）3.鐵鹽檢查法（B）4.重金屬檢查法（E）5.砷鹽檢查法（D）

檢查不含金屬的有機(jī)藥物或揮發(fā)性無機(jī)藥物中混入的非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)（金屬氧化物或無機(jī)鹽類）。

七、熾灼殘?jiān)鼨z查法1.原理

樣品炭化后+H2SO4濕潤→700～800℃熾灼至恒重→熾灼殘?jiān)蛩峄曳郑┫蘖恳话銥?.1%～0.2%

2.操作方法

3.注意事項(xiàng)

（1）供試品的取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘?jiān)蘖亢头Q量誤差決定。

（3）若殘?jiān)枇糇髦亟饘贆z查，則500～600℃熾灼至恒重。

（2）含氟的藥品對瓷坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝。（4）加硫酸處理是使雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硫酸鹽，并幫助有機(jī)物炭化例1.熾灼殘?jiān)鼨z查法一般加熱恒重的溫度為（C）A.500～600℃B.600～700℃C.700～800℃D.800～1000℃E.1000～1200℃例2.熾灼殘?jiān)鼨z查后，將殘?jiān)糇髦亟饘贆z查時，熾灼溫度應(yīng)為（A）A.500～600℃B.600～700℃C.700～800℃D.800～1000℃E.1000～1200℃例3.熾灼殘?jiān)南蘖恳话銥椋‥）A.1％B.0.5％～1％C.0.4％～0.5％D.0.2％～0.3％E.0.1％～0.2％例4.熾灼殘?jiān)鼨z查時，炭化后經(jīng)硫酸處理后灰化至完全的稱為（C）A.灰分B.殘?jiān)麮.硫酸灰分D.熾灼灰分E.殘余灰分八、溶液顏色檢查法

控制藥物中有色雜質(zhì)限量的方法。

ChP

采用三種方法檢查。

品種項(xiàng)下規(guī)定的“無色”系指供試品溶液的顏色相同于水或所用溶劑，“幾乎無色”系指供試品溶液的顏色不深于相應(yīng)色調(diào)0.5號標(biāo)準(zhǔn)比色液。第一法目視比色法即與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較的方法，全波長范圍定性觀察觀察方法

平視顏色較深時從上向下顏色較淺時標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制

第二法分光光度法單一波長定量第三法色差計(jì)法全波長范圍定量本法是使用具備透射測量功能的測色色差計(jì)直接測定溶液的透射三刺激值，對其顏色進(jìn)行定量表述和分析的方法。當(dāng)目視比色法較難判定供試品與標(biāo)準(zhǔn)比色液之間的差異時，應(yīng)采用本法進(jìn)行測定與判斷。色差計(jì)的工作原理簡單地說即是模擬人眼的視覺系統(tǒng)，利用儀器內(nèi)部的模擬積分光學(xué)系統(tǒng)，把光譜光度數(shù)據(jù)的三刺激值進(jìn)行積分而得到顏色的數(shù)學(xué)表達(dá)式，從而計(jì)算出對比色的色差。測定法：除另有規(guī)定外，用水對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，取按各品種項(xiàng)下規(guī)定的方法分別制得的供試品溶液和標(biāo)準(zhǔn)比色液，置儀器上進(jìn)行測定，供試品溶液與水的色差值應(yīng)不超過標(biāo)準(zhǔn)比色液與水的色差值

。九、易炭化物檢查法

檢查藥物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有機(jī)雜質(zhì)。

方法：H2SO4炭化后與對照液比較。

對照液：（1）“溶液顏色檢查”項(xiàng)下的標(biāo)準(zhǔn)比色液；（2）由比色用氯化鈷液，比色用重鉻酸鉀液，比色用硫酸銅液按規(guī)定方法配成的對照液；比色：同置白色背景前，平視觀察比較。（3）高錳酸鉀液檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，用作注射劑的原料藥一般應(yīng)作此項(xiàng)檢查。ChP收載二法。

除另有規(guī)定外，應(yīng)采用第一法進(jìn)行檢測。十、溶液澄清度檢查法

第一法（目視法）

系將藥品溶液與規(guī)定的濁度標(biāo)準(zhǔn)液相比較，用以檢查溶液的澄清程度。

濁度標(biāo)準(zhǔn)液的配制

中國藥典規(guī)定用濁度標(biāo)準(zhǔn)液作為澄清度檢查的標(biāo)準(zhǔn)。

反應(yīng)原理：烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色渾濁。1.00％硫酸肼溶液與10％烏洛托品溶液等量混合配制濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液（2個月內(nèi)使用濁度標(biāo)準(zhǔn)原液（48小時內(nèi)使用）濁度標(biāo)準(zhǔn)液（5個級號）第二法（濁度儀法）供試品溶液的濁度用濁度儀測定。溶液中不同大小、不同特性的微粒物質(zhì)包括有色物質(zhì)均可使入射光產(chǎn)生散射，通過測定透射光或散射光的強(qiáng)度，可以檢查供試品溶液的濁度。供試品溶液濁度值不得大于相應(yīng)濁度標(biāo)準(zhǔn)液的濁度值。判斷品種項(xiàng)下規(guī)定的“澄清”，系指供試品溶液的澄清度與所用溶劑相同，或不超過0.5號濁度標(biāo)準(zhǔn)液的濁度?！皫缀醭螠[”，系指供試品溶液的濁度介于0.5號至1號濁度標(biāo)準(zhǔn)液的濁度之間。溶劑：水、酸、堿、有機(jī)溶劑有機(jī)酸的堿金屬鹽類藥物強(qiáng)調(diào)用“新沸過的冷水”十一、干燥失重測定法

干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。測定方法：

（一）常壓恒溫干燥法

適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。干燥溫度一般為105℃。

干燥失重：第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。

熾灼殘?jiān)旱诙渭耙院蟾鞔畏Q重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)熾灼0.5h后進(jìn)行。

（二）干燥劑干燥法

適用于受熱易分解或揮發(fā)的供試品。干燥劑：P2O5、硫酸、硅膠

。（三）減壓干燥法

適用于熔點(diǎn)低，受熱不穩(wěn)定或水分難趕除的藥物。

除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)在2.67kPa（20mmHg）以下。除此還有減壓干燥劑干燥法、減壓恒溫干燥劑干燥法例[1～5]A．干燥失重測定法B．熾灼殘?jiān)鼨z查

C．兩者皆是D．兩者皆不是1.有機(jī)物雜質(zhì)檢測法（D）2.不溶物的測定法（D）3.雜質(zhì)檢查法（C）4.有機(jī)藥物中不揮發(fā)無機(jī)物的檢測法(B)5.藥物中揮發(fā)性物質(zhì)的檢測法（A）例6.干燥失重測定的方法有（BCDE）A．熾灼（500～600℃）法B．常壓恒溫干澡法C．減壓干燥法D．干燥劑干燥法E．減壓干燥劑干燥法例7.干燥失重測定中應(yīng)注意哪幾個方面（ABCD）

A.供試品平鋪在稱量瓶中的厚度一般不超過5mmB.干燥溫度一般為105℃C.可用干燥劑干燥

D.主要指水分和揮發(fā)性物質(zhì)

E.測定時間不超過3小時（四）熱分析法熱分析法是在程序控制溫度下，精確記錄待測物質(zhì)理化性質(zhì)與溫度的關(guān)系，研究其受熱過程所發(fā)生的晶型轉(zhuǎn)變、熔融、升華、吸附等物理變化和脫水、熱分解、氧化還原等化學(xué)變化，對物質(zhì)進(jìn)行物理常數(shù)（如熔點(diǎn)和沸點(diǎn)）的確定、鑒別和純度檢查的方法。

亦可用于藥物的穩(wěn)定性研究及制劑輔料的優(yōu)選1.熱重法（TGA）

熱重法是在程序控制溫度下，測量物質(zhì)質(zhì)量與溫度關(guān)系的一種技術(shù)。

記錄質(zhì)量變化對溫度的關(guān)系曲線即熱重曲線。熱重曲線的縱坐標(biāo)為質(zhì)量(m)，橫坐標(biāo)為溫度(T)或時間(t)。

m

本法適用于藥物結(jié)晶水的測定和貴重藥物或在空氣中極易氧化藥物的干燥失重分析。

特點(diǎn)：準(zhǔn)確測量物質(zhì)的質(zhì)量變化及變化速度、樣品用量少、速度快

2.差熱分析法（DTA）

差熱分析法是在程序控制溫度下，測量待測物質(zhì)和參比物之間的溫度差（△T）與溫度(或時間)之間的關(guān)系的一種技術(shù)。

差熱分析曲線記錄的縱坐標(biāo)為樣品與參比物的溫度差(T)，T與熱容量差(CR—Cs)成正比，橫坐標(biāo)為溫度。

△T

本法可鑒別藥物或其多晶形，可檢查藥物的純度3.差示掃描量熱法（DSC）

差示掃描量熱法是在程序控制溫度下，測量輸給待測物質(zhì)和參比物的能量差與溫度(或時間)關(guān)系的一種技術(shù)。

對照品

本法可鑒別藥物或其多晶形、純度檢查以及熔點(diǎn)和水分等的測定。十二、水分測定法藥物中的水分包括結(jié)晶水和吸附水。第一法（費(fèi)休氏法）1.容量滴定法本法是根據(jù)碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中與水定量反應(yīng)的原理來測定水分。根據(jù)消耗碘的量測定水分的含量。式中A為供試品所消耗費(fèi)休氏試液的容積，ml；B為空白所消耗費(fèi)休氏試液的容積，ml；F為每1ml費(fèi)休氏試液相當(dāng)于水的重量，mg；W為供試品的重量，mg。

費(fèi)休氏試液中加無水吡啶與無水甲醇溶液，不僅參與反應(yīng)，而且還起溶劑作用。測定時，所用儀器應(yīng)干燥，并能避免空氣中水分的侵入；測定操作宜在干燥處進(jìn)行。2.庫侖滴定法本法仍以卡爾-費(fèi)休氏反應(yīng)為基礎(chǔ)，應(yīng)用永停滴定法（通則0701）測定水分。

第二法（烘干法）本法適用于不含或少含揮發(fā)性成分的藥品。第三法（減壓干燥法）本法適用于含有揮發(fā)性成分的貴重藥品。第四法（甲苯法）第五法（氣相色譜法）十三、殘留溶劑測定法

（一）殘留溶劑測定法藥品中的殘留溶劑系指在原料藥或輔料的生產(chǎn)中，以及在制劑制備過程中使用的，但在工藝過程中未能完全去除的有機(jī)溶劑。

藥品中常見的殘留溶劑（第一、第二、第三類溶劑）的殘留限度應(yīng)符合規(guī)定。對其他溶劑，應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)工藝的特點(diǎn)，制定相應(yīng)的限度，使其符合產(chǎn)品規(guī)范、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）或其他基本的質(zhì)量要求。（二）檢查方法中國藥典采用氣相色譜法檢查殘留有機(jī)溶劑

色譜柱（1）毛細(xì)管柱（2）填充柱直徑為0.18～0.25mm的二乙烯苯－乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他適宜的填料2.系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：中國藥典規(guī)定，在殘留溶劑測定前應(yīng)作色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。（1）用待測物的色譜峰計(jì)算，毛細(xì)管色譜柱的理論板數(shù)應(yīng)不低于5000，填充柱的理論板數(shù)一般不低于1000；（2）色譜圖中，待測物色譜峰與其相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5；（3）以內(nèi)標(biāo)法測定時，對照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，待測物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于5％；若以外標(biāo)法測定，待測物峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于10％3.測定法第一法毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法

當(dāng)需要檢查有機(jī)溶劑的數(shù)量不多，且極性差異較小時，可采用此法。第二法毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣系統(tǒng)程序升溫法

當(dāng)需要檢查有機(jī)溶劑的數(shù)量較多，且極性差異較大時，可采用此法。第三法溶液直接進(jìn)樣法

十四、酸堿度檢查法

1.概述酸度：pH值低于7.0

堿度：pH值高于7.0

酸堿度：pH值在7.0上下兩側(cè)酸堿度檢查所用的水應(yīng)是新沸并放冷至室溫的水。2.酸堿度檢查法（1）酸堿滴定法取一定量的供試品溶于一定體積的溶液中，加入一定量的指示液，用規(guī)定濃度的酸堿滴定液測定酸堿性雜質(zhì)的限量，判斷供試品是否符合規(guī)定柳氮磺吡啶【檢査】酸度取本品

1.0g，加水100ml，置水浴中加熱5分鐘，放冷，濾過，取濾液50ml，加酚酞指示液

2滴與氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）0.5ml，應(yīng)顯紅色。（2）指示劑法在一定量的供試品中加入規(guī)定指示液，根據(jù)指示液的顏色變化來控制酸堿性雜質(zhì)的限量（3）pH值測定法常用于制備注射劑原料藥中酸堿性雜質(zhì)的控制純化水（PurifiedWater）（pH4.4～7.6）【檢査】酸堿度

取本品10ml，加甲基紅指示液2滴，不得顯紅色；另取10ml，加溴麝香草酚藍(lán)指示液5滴，不得顯藍(lán)色。第三節(jié)藥物中特殊雜質(zhì)的檢查物理性質(zhì)外觀性狀分配或吸附

化學(xué)性質(zhì)性質(zhì)差異酸堿性

氧化還原性質(zhì)

對光的吸收化學(xué)反應(yīng)

1.雜質(zhì)對照法——適用于已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對照品的情況

方法：

供試品→供試品溶液雜質(zhì)對照品→對照品溶液一、色譜法（一）TLC供試品對照品

判斷：供試品中所含雜質(zhì)斑點(diǎn)不得超過相應(yīng)的雜質(zhì)對照斑點(diǎn)

優(yōu)點(diǎn)：同一物質(zhì)，同一Rf值比較，準(zhǔn)確度高、直觀性強(qiáng)；缺點(diǎn)：需要雜質(zhì)對照品。

ChP卡比馬唑中甲巰咪唑的檢查：

取本品，加三氯甲烷溶解并稀釋制成每1ml中約含10mg的溶液，作為供試品溶液。另取甲巰咪唑?qū)φ掌?，加三氯甲烷溶解并稀釋制成?ml中約含50μg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，吸取上述溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-丙酮（4∶1）為展開劑，展開，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液使顯色。供試品溶液如顯與對照品溶液相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對照品溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深（0.5%）。

2.供試品溶液自身稀釋對照法——高低濃度對比法適用于雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不確定，無雜質(zhì)對照品的情況

方法：

供試品對照品

判斷：

②供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)不得深于對照溶液的主斑點(diǎn)（或熒光強(qiáng)度）

①控制雜質(zhì)斑點(diǎn)個數(shù)，控制雜質(zhì)種類

缺點(diǎn)：不同物質(zhì)，不同Rf值比較，準(zhǔn)確度差、直觀性差。

優(yōu)點(diǎn)：以供試品的稀溶液作為對照液，不需要雜質(zhì)對照品，簡單、價(jià)廉，還可配成幾種限量的對照溶液；

ChP潑尼松龍中有關(guān)物質(zhì)的檢查：取本品，加三氯甲烷-甲醇（9∶1）溶解并稀釋制成每1ml中約含3mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取2ml，置100ml量瓶中，用三氯甲烷-甲醇（9∶1）稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-乙醚-甲醇-水（77∶12∶6∶0.4）為展開劑，展開，晾干，在105℃干燥10分鐘，放冷，噴以堿性四氮唑藍(lán)試液，立即檢視。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，不得多于3個，其顏色與對照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深。

3.雜質(zhì)對照法與供試品溶液自身稀釋對照法并用ChP鹽酸黃酮哌酯中有關(guān)物質(zhì)的檢查：取本品，加三氯甲烷-甲醇（1∶1）溶解并稀釋制成每1ml中含20mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取適量，加上述溶劑定量稀釋制成每1ml中含0.10mg的溶液，作為對照溶液；另取3-甲基黃酮-8-羧酸（雜質(zhì)Ⅰ）對照品，精密稱定，加上述溶劑溶解并定量稀釋制成每1ml中含0.10mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲醇-二乙胺（8∶2∶2∶1）為展開劑，展開，晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視，供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，不得多于2個，其中在與對照品溶液相同位置上所顯雜質(zhì)斑點(diǎn)的顏色與對照品溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深，另一雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與對照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深。（二）HPLC1.外標(biāo)法供試品→供試品溶液

雜質(zhì)對照品→對照品溶液進(jìn)樣，測定，計(jì)算雜質(zhì)的含量

缺點(diǎn)：不易準(zhǔn)確控制進(jìn)樣量，宜用定量環(huán)或自動進(jìn)樣器進(jìn)樣Ch.P阿司匹林中游離水楊酸的檢查

取本品約0.1g，精密稱定，置10ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液適量，振搖使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液（臨用新制）；取水楊酸對照品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。照高效液相色譜法（通則0512）試驗(yàn)。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20∶5∶5∶70）為流動相；檢測波長為303nm。理論板數(shù)按水楊酸峰計(jì)算不低于5000，阿司匹林峰與水楊酸峰的分離度應(yīng)符合要求。立即精密量取供試品溶液、對照品溶液各10l，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如有與水楊酸峰保留時間一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得過0.1%。2.加校正因子的主成分自身對照法用于有雜質(zhì)對照品時雜質(zhì)的含量測定方法

待測成分對照品+雜質(zhì)對照品→溶液，進(jìn)樣，記錄色譜圖，計(jì)算雜質(zhì)的校正因子測定雜質(zhì)含量時，按各品種項(xiàng)下規(guī)定的雜質(zhì)限度，將供試品溶液稀釋成與雜質(zhì)限度相當(dāng)?shù)娜芤?，作為對照溶液；進(jìn)樣，記錄色譜圖，必要時，調(diào)節(jié)縱坐標(biāo)范圍（以噪聲水平可接受為限）使對照溶液的主成分色譜峰的峰高約達(dá)滿量程的10%～25%。然后，取供試品溶液和對照溶液適量，分別進(jìn)樣，除另有規(guī)定外，供試品溶液的記錄時間，應(yīng)為主成分色譜峰保留時間的2倍，測量供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)的峰面積，分別乘以相應(yīng)的校正因子后與對照溶液主成分的峰面積比較，計(jì)算各雜質(zhì)含量。3.不加校正因子的主成分自身對照法

測定雜質(zhì)含量時，若無法獲得待測雜質(zhì)的校正因子，或校正因子可以忽略，也可采用不加校正因子的主成分自身對照法。方法為：將供試品溶液稀釋成與雜質(zhì)限度相當(dāng)?shù)娜芤海鳛閷φ杖芤?，進(jìn)樣調(diào)節(jié)縱坐標(biāo)范圍和計(jì)算峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差后，取供試品溶液和對照品溶液適量，分別進(jìn)樣。除另有規(guī)定外，供試品溶液的記錄時間應(yīng)為主成分色譜峰保留時間的2倍，測量供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)的峰面積并與對照溶液主成分的峰面積比較，依法計(jì)算雜質(zhì)含量。

缺點(diǎn)：檢測波長處，各雜質(zhì)和藥物的吸收強(qiáng)度可能有差異，準(zhǔn)確度差

優(yōu)點(diǎn)：不需雜質(zhì)對照品，可同時控制各個雜質(zhì)及其總量限度

ChP紅霉素中有關(guān)物質(zhì)的檢查：

取本品約40mg，置10ml量瓶中，加甲醇4ml使溶解，用pH8.0磷酸鹽溶液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用上述pH8.0磷酸鹽溶液-甲醇（3∶2）稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液；精密量取對照溶液適量，用pH8.0磷酸鹽溶液-甲醇（3∶2）定量稀釋制成每1ml中約含4g的溶液，作為靈敏度溶液。照紅霉素組分檢查項(xiàng)下的色譜條件，量取靈敏度溶液100μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，主成分色譜峰峰高的信噪比應(yīng)大于10。精密量取供試品溶液與對照溶液各100μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖如有雜質(zhì)峰，雜質(zhì)C峰面積不得大于對照溶液主峰面積的3倍（3.0%），雜質(zhì)E與雜質(zhì)F校正后的峰面積（乘以校正因子0.08）均不得大于對照溶液主峰面積的2倍（2.0%），雜質(zhì)D校正后的峰面積（乘以校正因子2）不得大于對照溶液主峰面積的2倍（2.0%），雜質(zhì)A、雜質(zhì)B及其他單個雜質(zhì)的峰面積均不得大于對照溶液主峰面積的2倍（2.0%），各雜質(zhì)校正后的峰面積之和不得大于對照溶液主峰面積的7倍（7.0%）。供試品溶液色譜圖中小于靈敏度溶液主峰面積的峰可忽略不計(jì)。ChP吡拉西坦中有關(guān)物質(zhì)的檢查：

取本品，加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含0.5mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取適量，用流動相定量稀釋制成每1ml中約含5μg的溶液，作為對照溶液；照含量測定項(xiàng)下的色譜條件，精密量取供試品溶液與對照溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的3倍。供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的0.5倍（0.5%）。4.面積歸一化法用于粗略考察供試品中的雜質(zhì)按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，配制供試品溶液，取一定量進(jìn)樣，記錄色譜圖。測量各峰的面積和色譜圖上除溶劑峰以外的總色譜峰面積，計(jì)算各峰面積占總峰面積的百分率。

優(yōu)點(diǎn)：不需雜質(zhì)對照品，簡便易行。

缺點(diǎn)：檢測波長處，各雜質(zhì)和藥物的吸收強(qiáng)度可能有差異，控制雜質(zhì)峰面積百分率不一定就是雜質(zhì)限量，準(zhǔn)確度差。

用于雜質(zhì)檢查時，由于儀器響應(yīng)的線性限制，峰面積歸一化法一般不宜用于微量雜質(zhì)的檢查。ChP維生素K1中順式異構(gòu)體的檢查：

照含量測定項(xiàng)下的方法，按峰面積歸一化法計(jì)算，順式異構(gòu)體的含量不得過21.0%。①檢測器的選擇：應(yīng)根據(jù)對雜質(zhì)結(jié)構(gòu)的分析進(jìn)行有目的的選擇。對于在紫外光區(qū)吸收較弱或無吸收的雜質(zhì)，可采用其他通用型檢測器（如蒸發(fā)光散射檢測器、質(zhì)譜檢測器等）。二極管陣列檢測器(diodearraydetector，DAD)是雜質(zhì)研究，特別是復(fù)方制劑中雜質(zhì)研究的有效手段。通過該檢測器可獲得各雜質(zhì)的光譜信息，有助于判斷雜質(zhì)檢測波長選擇的合理性，并可進(jìn)行峰純度檢查。注意以下問題②檢測波長的選擇：應(yīng)選用對各雜質(zhì)均有較強(qiáng)吸收的波長作為檢測波長，當(dāng)一個測定波長無法兼顧所有雜質(zhì)時，可選用不同波長分別測定。例如在氯喹那多（chlorquinaldol）及有關(guān)物質(zhì)的HPLC分析中，用DAD檢測器選擇測定波長，氯喹那多在251nm和360nm處有最大吸收，有關(guān)物質(zhì)的最大吸收分別在251,253，254nm處，為了兼顧氯喹那多的含量測定，選擇測定波長在251nm處。（三）GC1.內(nèi)標(biāo)法3.面積歸一化法用于粗略考察供試品中的雜質(zhì)2.外標(biāo)法4.標(biāo)準(zhǔn)溶液加入法測定供試品中某個雜質(zhì)含量

雜質(zhì)對照品→對照品溶液，取一定量，精密加入到供試品溶液中，根據(jù)外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法測定雜質(zhì)含量，再扣除加入對照品溶液含量，即得供試品溶液中某個雜質(zhì)含量。ChP異氟烷中的有關(guān)物質(zhì)的檢查色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：固定相為2-硝基對苯二酸改性的聚乙二醇，柱溫60℃；進(jìn)樣口溫度150℃；電子捕獲檢測器，溫度220℃。理論板數(shù)按異氟烷峰計(jì)算不低于15000，異氟烷峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。測定法：精密量取供試品溶液

[0.1%（v/v）]1μl，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，按面積歸一化法，各雜質(zhì)峰面積的和不得大于總峰面積的0.5%。（四）毛細(xì)管電泳法（CE）ChP鹽酸頭孢吡肟中N-甲基吡咯烷的檢查電泳條件：彈性石英毛細(xì)管（內(nèi)徑75μm，有效長度56cm），柱溫25℃，操作緩沖溶液為pH4.7

咪唑-醋酸緩沖溶液，檢測波長214nm，操

作電壓30kV，壓力進(jìn)樣。供試品溶液：20mg/ml內(nèi)標(biāo)溶液：0.1mg/ml對照品溶液：N-甲基吡咯烷對照品，0.1mg/ml

進(jìn)樣：供試品溶液

對照品溶液按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算，不得過0.3%系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：遷移順序：乙胺和N-甲基吡咯烷，

N-甲基吡咯烷峰與乙胺峰的分離度

應(yīng)大于2.0，進(jìn)樣數(shù)次，RSD不得過

5.0%。二、分光光度法（一）紫外-可見分光光度法1.在某一波長處藥物無吸收，而雜質(zhì)有吸收，可測定該波長處的吸光度，控制雜質(zhì)的限量。ChP鹽酸甲氧明中酮胺的檢查：取本品，加水溶解并稀釋制成每1ml中約含1.5mg的溶液，照紫外-可見分光光度法（通則0401），在347nm波長處測定，吸光度不得過0.06。

已知酮胺在347nm波長處的

為154，求酮胺的限量。二羥基蒽醌地蒽酚ChP地蒽酚中二羥基蒽醌的檢查均有紫外吸收432nm

地蒽酚無吸收二羥基蒽醌有最大吸收規(guī)定0.01%地蒽酚三氯甲烷溶液A432nm<0.122.藥物和雜質(zhì)紫外吸收光譜重疊，雜質(zhì)的存在可以改變藥物在兩個波長處的吸光度比值，可通過測定供試品溶液的吸光度比值，控制雜質(zhì)的量。ChP苯丙醇中苯丙酮的檢查：取本品，加乙醇制成每1ml中含0.5mg的溶液，照紫外-可見分光光度法（通則0401）測定，247nm處吸光度與258nm處吸光度的比值，不得過0.79。3.根據(jù)雜質(zhì)的紫外吸收特征，測定供試品吸光度的范圍，控制藥物的純度。ChP頭孢噻吩鈉中吸光度的檢查：取本品，加水制成每1ml中含20g的溶液，照紫外-可見分光光度法，在237nm的波長處測定，其吸光度為0.65～0.72。（二）紅外分光光度法紅外分光光度法在雜質(zhì)檢查中主要用于藥物中無效或低效晶型的檢查。ChP甲苯咪唑中A晶型的檢查：取本品與含Ａ晶型為10%的甲苯咪唑?qū)φ掌犯骷s25mg，分別加液體石蠟0.3ml，研磨均勻，制成厚度約0.15mm的石蠟糊片，同時制作厚度相同的空白液體石蠟糊片作參比，照紅外分光光度法（通則0402）測定，并調(diào)節(jié)供試品與對照品在803cm-1

波數(shù)處的透光率為90%～95%，分別記錄620～803cm-1

波數(shù)處的紅外光吸收圖譜。在約620cm-1和803cm-1

波數(shù)處的最小吸收峰間連接一基線，再在約640cm-1和662cm-1波數(shù)處的最大吸收峰之頂處作垂線與基線相交，用基線吸光度法求出相應(yīng)吸收峰的吸光度值，供試品在約640cm-1與662cm-1波數(shù)處吸光度之比，不得大于含Ａ晶型為10%的甲苯咪唑?qū)φ掌吩谠摬〝?shù)處的吸光度之比。

對照品＋10％A晶型

662cm-1640cm-1D2D1供試品D2’D1’>結(jié)果判斷A晶型C晶型640cm-1有強(qiáng)吸收吸收很弱662cm-1吸收很弱有強(qiáng)吸收（三）原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法主要用于金屬雜質(zhì)的檢查。檢查時，為消除背景對測定的影響，通常采用“標(biāo)準(zhǔn)加入法”，即取供試品，按規(guī)定配制成供試品溶液；另取等量的供試品，加入限度量的待測元素溶液，制成對照品溶液。設(shè)對照品溶液讀數(shù)為a，供試品溶液讀數(shù)為b，則b相當(dāng)于供試品溶液中待檢元素的量，（a-b）相當(dāng)于對照品溶液中加入的待檢元素對照品的量，b小于（a-b）時，表示符合規(guī)定。限量檢查對照品液：供試品＋對照品a供試品液bb<(a-b)符合規(guī)定b>(a-b)不合格吸光度ChP碳酸鋰中鉀的檢查：取本品0.10g兩份，分別置50ml量瓶中，各加鹽酸溶液（12）10ml溶解后，一份中加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另一份中加標(biāo)準(zhǔn)氯化鉀溶液（精密稱取150℃干燥1小時的分析純氯化鉀191mg，置1000ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻）3.0ml，并用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照原子吸收分光光度法（通則0406第二法），在766.5nm的波長處測定，應(yīng)符合規(guī)定（0.030%）。已知KCl分子量為74.551，K原子量為39.0983，限量為：（四）X射線衍射法蒙脫石（Montmorillonite）【檢查】方英石及其他雜質(zhì)取本品適量，置于載樣架上，將載樣架放入干燥器（含飽和氯化鈉溶液，20℃時相對濕度約75%）中約12小時，取出，將載樣架上的樣品壓平，照X射線衍射法（通則0451粉末X射線衍射法）測定，以

CuK為光源，光管電壓和光管電流分別為40kV和

40mA，發(fā)射狹縫、散射狹縫和接受狹縫分別設(shè)置為1°、1°和0.15mm（或相當(dāng)參數(shù)要求），在衍射角（2）15°?35°的范圍內(nèi)以每分鐘1°的速度掃描，記錄衍射圖譜，以圖譜的基線為底線，分別量取蒙脫石特征峰（2約為19.8°）、方英石衍射峰（2約為22°）和其他雜質(zhì)衍射峰的峰頂至底線的高度，計(jì)算各峰高相對于蒙脫石特征峰高的比值。在供試品的X射線粉末衍射圖譜中，方英石衍射峰的峰高比不得過50%，其他單個雜質(zhì)衍射峰的峰高比不得過70%。三、其他方法（一）直接檢查法1.利用臭味及揮發(fā)性的差異ChP麻醉乙醚中異臭的檢查：取本品10ml，置瓷蒸發(fā)皿中，使自然揮發(fā)，揮散完畢后，不得有異臭。2.利用藥物與雜質(zhì)溶解行為的差異ChP葡萄糖中乙醇溶液的澄清度檢查：取本品1.0g，加乙醇20ml，置水浴上加熱回流約40分鐘，溶液應(yīng)澄清。（二）比色法或比濁法1.比色法（1）利用藥物與雜質(zhì)顏色的差異ChP鹽酸胺碘酮中游離碘的檢查：取本品0.5g，加水10ml，振搖30秒，放置5分鐘，濾過，濾液加稀硫酸1ml，加三氯甲烷2ml，振搖，三氯甲烷層不得顯色。（2）利用雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色ChP鹽酸普萘洛爾中游離萘酚的檢查：取本品20mg，加乙醇與10%氫氧化鈉溶液各2ml，振搖使溶解，加重氮苯磺酸試液1ml，搖勻，放置3分鐘，如顯色，與α-萘酚的乙醇溶液（20μgα-萘酚/ml）0.30ml同法制成的對照液比較不得更深（0.03%）。（3）利用雜質(zhì)使一定試劑改變顏色的檢查ChP苯甲酸中易氧化物的檢查：取水100ml，加硫酸1.5ml，煮沸后，滴加高錳酸鉀滴定液（0.02mol/L）適量，至顯示的粉紅色持續(xù)30秒不消失，趁熱加本品1.0g，溶解后