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經(jīng)典免疫學(xué)技術(shù)演示文稿本文檔共81頁;當(dāng)前第1頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分(優(yōu)選)經(jīng)典免疫學(xué)技術(shù)本文檔共81頁;當(dāng)前第2頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分第一節(jié)沉淀反應(yīng)第二節(jié)凝集反應(yīng)第三節(jié)補(bǔ)體參與的抗原 抗體反應(yīng)第四節(jié)中和反應(yīng)第五章 經(jīng)典免疫學(xué)技術(shù)本文檔共81頁;當(dāng)前第3頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分第一節(jié)沉淀反應(yīng)根據(jù)抗原與抗體反應(yīng)的條件及附加因素,沉淀反應(yīng)可分為兩種主要形式:1.溶液中沉淀反應(yīng)
2.凝膠中沉淀反應(yīng)本文檔共81頁;當(dāng)前第4頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分第一節(jié)沉淀反應(yīng)根據(jù)抗原與抗體反應(yīng)的條件及附加因素,沉淀反應(yīng)可分為兩種主要形式:
1.溶液中沉淀反應(yīng)
2.凝膠中沉淀反應(yīng)本文檔共81頁;當(dāng)前第5頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分1.溶液中沉淀反應(yīng)
(Precipitationreactioninsolution)
是指在清徹透明的液體中,呈溶解狀態(tài)的抗原與抗體在試管內(nèi)或凹玻片上混勻,可凝聚成為肉眼可見的絮狀或顆粒狀的不溶性沉淀物。本文檔共81頁;當(dāng)前第6頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分溶液中沉淀反應(yīng)
鹽溶液抗原+抗體———沉淀
20~56℃、pH6~8
抗原:沉淀原抗體:沉淀素本文檔共81頁;當(dāng)前第7頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分1.溶液中沉淀反應(yīng)
(Precipitationreactioninsolution)
(1)環(huán)狀沉淀試驗(yàn)(2)免疫比濁法(3)免疫沉淀技術(shù)本文檔共81頁;當(dāng)前第8頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分(1)環(huán)狀沉淀試驗(yàn)
環(huán)狀沉淀試驗(yàn)
(ringprecipitationtest)或毛細(xì)管內(nèi)沉淀反應(yīng) (precipitationin capillarytube)本文檔共81頁;當(dāng)前第9頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第10頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分(2)免疫比濁法(immunonephelomytry)
可溶性的抗原、抗體在液相中特異結(jié)合,形成一定大小的抗原抗體復(fù)合物,使反應(yīng)液出現(xiàn)渾濁。復(fù)合物的量與濁度成正比。與標(biāo)準(zhǔn)品比較即可計(jì)算出樣品中的抗原或抗體含量。本文檔共81頁;當(dāng)前第11頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第12頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分免疫沉淀技術(shù)本文檔共81頁;當(dāng)前第13頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第14頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分免疫共沉淀本文檔共81頁;當(dāng)前第15頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分GSTpull-down技術(shù)
本文檔共81頁;當(dāng)前第16頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分第一節(jié)沉淀反應(yīng)根據(jù)抗原與抗體反應(yīng)的條件及附加因素,沉淀反應(yīng)可分為兩種主要形式:1.溶液中沉淀反應(yīng)
2.凝膠中沉淀反應(yīng)本文檔共81頁;當(dāng)前第17頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分2.凝膠中沉淀反應(yīng)(Precipitationreactioningel)
1968年Ouchterlong發(fā)明的。即將抗原抗體溶液放在瓊脂凝膠板上的小孔中,使它們彼此對(duì)向擴(kuò)散,在抗原抗體相遇的地方形成沉淀線。本文檔共81頁;當(dāng)前第18頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分2.凝膠中沉淀反應(yīng)
此沉淀線的突出性質(zhì)是:特異性抗原抗體不能通過;與沉淀線無關(guān)的抗原和抗體分子則可自由通過此沉淀線。本文檔共81頁;當(dāng)前第19頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分2.凝膠中沉淀反應(yīng)(1)單相免疫擴(kuò)散試驗(yàn)(2)雙相免疫擴(kuò)散試驗(yàn)(3)免疫電泳(4)火箭電泳試驗(yàn)(5)免疫印跡技術(shù)本文檔共81頁;當(dāng)前第20頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分單相免疫擴(kuò)散試驗(yàn)本文檔共81頁;當(dāng)前第21頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第22頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分雙相免疫擴(kuò)散試驗(yàn)本文檔共81頁;當(dāng)前第23頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分(3)免疫電泳(immunoelectrophoresis)本文檔共81頁;當(dāng)前第24頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第25頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分(4)火箭電泳試驗(yàn)本文檔共81頁;當(dāng)前第26頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第27頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第28頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分又稱Westernblotting電泳印漬及檢測(cè)(5)免疫印漬技術(shù)(immunoblotting)本文檔共81頁;當(dāng)前第29頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分免疫印漬本文檔共81頁;當(dāng)前第30頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第31頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分第一節(jié)沉淀反應(yīng)第二節(jié)凝集反應(yīng)第三節(jié)補(bǔ)體參與的抗原 抗體反應(yīng)第四節(jié)中和反應(yīng)第五章 經(jīng)典免疫學(xué)技術(shù)本文檔共81頁;當(dāng)前第32頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分第二節(jié)凝集反應(yīng)1.直接凝集反應(yīng)2.間接凝集反應(yīng)3.橋梁凝集反應(yīng)4.共同凝集反應(yīng)
本文檔共81頁;當(dāng)前第33頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分第二節(jié)凝集反應(yīng)1.直接凝集反應(yīng)2.間接凝集反應(yīng)3.橋梁凝集反應(yīng)4.共同凝集反應(yīng)
本文檔共81頁;當(dāng)前第34頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分1.直接凝集反應(yīng)
(directagglutination)
是將細(xì)菌或紅細(xì)胞與其相應(yīng)抗體結(jié)合產(chǎn)生的細(xì)菌凝集或紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。本文檔共81頁;當(dāng)前第35頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分1.直接凝集反應(yīng)(1)微生物凝集反應(yīng) 如診斷傷寒病的肥達(dá)氏(Widalreaction)反應(yīng)(2)同種紅細(xì)胞凝集反應(yīng)如檢查血型的血細(xì)胞凝集現(xiàn)象本文檔共81頁;當(dāng)前第36頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第37頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分第二節(jié)凝集反應(yīng)1.直接凝集反應(yīng)2.間接凝集反應(yīng)3.橋梁凝集反應(yīng)4.共同凝集反應(yīng)
本文檔共81頁;當(dāng)前第38頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分2.間接凝集反應(yīng)
(indirectagglutination)
用可溶性抗原(或抗體)包被在一種與免疫無關(guān)的、具一定大小的不溶性顆粒(即載體顆粒,如:乳膠顆?;蚣t細(xì)胞)的表面,然后與相應(yīng)抗體(或抗原)作用,在有適宜電解質(zhì)存在的條件下,結(jié)合產(chǎn)生的凝集現(xiàn)象。本文檔共81頁;當(dāng)前第39頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分2.間接凝集反應(yīng)正向間接凝集反應(yīng):將抗原先吸附在載體表面,然后與相應(yīng)抗體結(jié)合產(chǎn)生的凝集反應(yīng)。反向間接凝集反應(yīng):將特異性抗體先吸附在載體表面,然后與相應(yīng)抗原結(jié)合產(chǎn)生的凝集反應(yīng)。既可檢測(cè)抗原,也可檢測(cè)抗體;方法簡(jiǎn)便、敏感。本文檔共81頁;當(dāng)前第40頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分正向間接凝集反應(yīng)本文檔共81頁;當(dāng)前第41頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分
此方法對(duì)檢測(cè)微量抗原具有較高的敏感性。而且由于相關(guān)病原體的抗原成分一般情況下比血清抗體出現(xiàn)早,所以可用于某些傳染病如鉤端螺旋體抗原和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)或原發(fā)性肝癌AFP的檢測(cè)等。反向間接凝集反應(yīng)本文檔共81頁;當(dāng)前第42頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第43頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分第二節(jié)凝集反應(yīng)1.直接凝集反應(yīng)2.間接凝集反應(yīng)3.橋梁凝集反應(yīng)4.共同凝集反應(yīng)
本文檔共81頁;當(dāng)前第44頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分3.橋梁凝集反應(yīng)
又稱Coombs抗球蛋白試驗(yàn)。此試驗(yàn)用于檢測(cè)不完全抗體。本文檔共81頁;當(dāng)前第45頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第46頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第47頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分第二節(jié)凝集反應(yīng)1.直接凝集反應(yīng)2.間接凝集反應(yīng)3.橋梁凝集反應(yīng)4.共同凝集反應(yīng)
本文檔共81頁;當(dāng)前第48頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分4.共同凝集反應(yīng)
又稱協(xié)同凝集反應(yīng)。指由兩種顆粒成分相互作用而發(fā)生的凝集反應(yīng)。本文檔共81頁;當(dāng)前第49頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分4.共同凝集反應(yīng)(1)細(xì)菌抗體與攜帶蛋白A的金黃色葡萄球菌CowanⅠ系致敏,即通過其IgG的Fc段與蛋白A結(jié)合,再與相應(yīng)細(xì)菌發(fā)生凝集反應(yīng)。(2)玫瑰花結(jié)試驗(yàn):主要用于研究各種淋巴細(xì)胞特性。本文檔共81頁;當(dāng)前第50頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第51頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分E花環(huán)形成示意圖本文檔共81頁;當(dāng)前第52頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分
B細(xì)胞EA、EAC玫瑰花環(huán)形成示意圖
本文檔共81頁;當(dāng)前第53頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分淋巴細(xì)胞的分離本文檔共81頁;當(dāng)前第54頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分玫瑰花結(jié)本文檔共81頁;當(dāng)前第55頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分淋巴細(xì)胞與紅細(xì)胞形成
玫瑰花結(jié)的主要模式玫瑰花結(jié)的類型紅細(xì)胞的類型及處理淋巴細(xì)胞類型E花結(jié)綿羊紅細(xì)胞T、50%NKEA花結(jié)抗體致敏的紅細(xì)胞B、T、NK、粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及巨噬細(xì)胞EAC花結(jié)補(bǔ)體致敏的紅細(xì)胞B本文檔共81頁;當(dāng)前第56頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分第一節(jié)沉淀反應(yīng)第二節(jié)凝集反應(yīng)第三節(jié)補(bǔ)體參與的抗原 抗體反應(yīng)第四節(jié)中和反應(yīng)第五章 經(jīng)典免疫學(xué)技術(shù)本文檔共81頁;當(dāng)前第57頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分
第三節(jié)
補(bǔ)體參與的抗原抗體反應(yīng)
1.補(bǔ)體參與直接的抗原抗體反應(yīng)2.補(bǔ)體參與間接的抗原抗體反應(yīng)本文檔共81頁;當(dāng)前第58頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分
第三節(jié)
補(bǔ)體參與的抗原抗體反應(yīng)
1.補(bǔ)體參與直接的抗原抗體反應(yīng)2.補(bǔ)體參與間接的抗原抗體反應(yīng)本文檔共81頁;當(dāng)前第59頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分1.補(bǔ)體參與直接的
抗原抗體反應(yīng)
(1)溶血反應(yīng)(2)溶菌反應(yīng)本文檔共81頁;當(dāng)前第60頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分(1)溶血反應(yīng)
(hemolyticassay)
溶血反應(yīng)常作為是否存在游離補(bǔ)體的指示系統(tǒng)。本文檔共81頁;當(dāng)前第61頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分(1)溶血反應(yīng)1942年Rutstein和Walker根據(jù)補(bǔ)體能使兔抗羊紅細(xì)胞抗體致敏的羊紅細(xì)胞發(fā)生溶血的特點(diǎn),建立了測(cè)定血清中總補(bǔ)體活性的方法(即50%溶血反應(yīng)CH50
測(cè)定方法)本文檔共81頁;當(dāng)前第62頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分(2)溶菌反應(yīng)
溶菌反應(yīng)常作為某血清中是否存在相應(yīng)抗體的檢測(cè)方法。本文檔共81頁;當(dāng)前第63頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分
第三節(jié)
補(bǔ)體參與的抗原抗體反應(yīng)
1.補(bǔ)體參與直接的抗原抗體反應(yīng)2.補(bǔ)體參與間接的抗原抗體反應(yīng)本文檔共81頁;當(dāng)前第64頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分2.補(bǔ)體參與間接的
抗原抗體反應(yīng)
(1)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(2)被動(dòng)紅細(xì)胞溶解試驗(yàn)(3)溶血空斑試驗(yàn)本文檔共81頁;當(dāng)前第65頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分(1)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(complementfixationtest)
1901年由Bordet和Gengou首先應(yīng)用溶血反應(yīng)作為指示系統(tǒng),建立的檢測(cè)抗原抗體反應(yīng)的方法。本文檔共81頁;當(dāng)前第66頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第67頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)原理本文檔共81頁;當(dāng)前第68頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第69頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分(2)被動(dòng)紅細(xì)胞溶解試驗(yàn)
即吸附抗原的紅細(xì)胞在有相應(yīng)抗體和補(bǔ)體存在時(shí),出現(xiàn)紅細(xì)胞溶解反應(yīng)??乖旅艏t細(xì)胞——加入待測(cè)血清和補(bǔ)體——判斷結(jié)果(陽性對(duì)照:加入相應(yīng)抗體和補(bǔ)體)
本文檔共81頁;當(dāng)前第70頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分(3)溶血空斑試驗(yàn)
是測(cè)定B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生和分泌抗體功能的一種體外試驗(yàn)方法。本文檔共81頁;當(dāng)前第71頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第72頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分本文檔共81頁;當(dāng)前第73頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分溶血空斑試驗(yàn)本文檔共81頁;當(dāng)前第74頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分第一節(jié)沉淀反應(yīng)第二節(jié)凝集反應(yīng)第三節(jié)補(bǔ)體參與的抗原 抗體反應(yīng)第四節(jié)中和反應(yīng)第五章 經(jīng)典免疫學(xué)技術(shù)本文檔共81頁;當(dāng)前第75頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分第四節(jié)中和反應(yīng)中和反應(yīng)(neutralization):是免疫學(xué)和病毒學(xué)中常用于檢測(cè)中和抗體是否存在及其效價(jià)的試驗(yàn),反映抗體中和病毒感染性或細(xì)菌毒素的生物學(xué)效應(yīng)。本文檔共81頁;當(dāng)前第76頁;編輯于星期二\18點(diǎn)35分
中和抗體:病原微
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