微生物學(xué)沙門菌弧菌第1頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月一、生物學(xué)性狀形態(tài)染色第2頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月1.未接種細菌3.分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、硫化氫陰性2.分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫陰性4.不分解乳糖、分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫5.不分解乳糖、分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫主要生化特性第3頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月第4頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月第5頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月主要沙門菌的生化特性菌名 葡萄糖乳糖硫化氫動力甲型副傷寒沙門菌肖氏沙門菌鼠傷寒沙門菌希氏沙門菌豬霍亂沙門菌傷寒沙門菌腸炎沙門菌⊕⊕⊕⊕⊕+⊕––––––––/+++++++++/––/+++++++++++第6頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月抗原結(jié)構(gòu)（O抗原、H抗原、Vi抗原）

1、沙門菌“O”抗原---耐熱菌體抗原

用阿拉伯數(shù)字1、2、3、…表示（從1~67），實際上共有58種。不同沙門菌可有相同的O抗原，故將有共同O抗原沙門菌歸一群（組），共可分40多組。引起人類疾病的沙門菌，其O抗原大多屬于A~E組（P126表10-5）。第7頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月

2、沙門菌“H”抗原---不耐熱鞭毛抗原

H抗原分為第1相、第2相第1相特異性高，以英文小寫字母表示第2相特異性較低，以阿拉伯數(shù)字表示各組沙門菌可依H抗原不同分種、型，

H抗原為特異性抗原?；瘜W(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)。第8頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月3、沙門菌“Vi”抗原---表面抗原

少數(shù)沙門菌（傷寒桿菌等）新從病人體內(nèi)分離標本常有表面抗原

Vi---virulence毒力

Vi抗原可阻斷O抗原與相應(yīng)抗體的凝集，在細菌鑒定中應(yīng)予注意。

Vi抗原可刺激機體產(chǎn)生低效價抗體，隨細菌清除，此抗體消失，故測定Vi抗體有利于檢出帶菌者。

第9頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月二、致病性

1、侵襲力

沙門菌有毒株經(jīng)口感染小腸末端派伊爾淋巴結(jié)M細胞被吞噬在吞噬細胞內(nèi)增殖（不完全吞噬）

致病物質(zhì)第10頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月

2、內(nèi)毒素

導(dǎo)致體溫升高、白細胞數(shù)變化等

3、腸毒素

個別沙門菌可產(chǎn)生腸毒素（鼠傷寒），作用與大腸桿菌、霍亂弧菌腸毒素相似，引起胃腸炎

致病物質(zhì)第11頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月致病菌

傷寒沙門菌，副傷寒甲、乙等沙門傳染源

病人、帶菌者（尤為重要）傳播途徑

經(jīng)糞-口途徑傳播易感者

人群普遍易感所致疾病1、腸熱癥（傷寒、副傷寒）第12頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月血流（第？次菌血癥、內(nèi)毒素）全身淋巴組織中大量增殖（肝、脾、腎、骨髓）傷寒沙門菌胃小腸末端M細胞腸粘膜局部淋巴組織中增殖局部炎癥、癥狀加重局部炎癥潰瘍、穿孔全身癥狀（發(fā)熱、不適、全身疼痛）潛伏期/前驅(qū)期（病程第1周）①①②②全身癥狀（稽留高熱肝脾腫大等）極期（病程第2-3周）第13頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月整個病期約一個月左右少數(shù)患者病后帶菌（腸道內(nèi)、膽囊?guī)Ь┏蔀橹匾膫魅驹?/p>

感染后體內(nèi)有抗體產(chǎn)生，但對胞內(nèi)菌無免疫作用，常用抗體測定作為傷寒病的輔助診斷——肥達反應(yīng)。細胞免疫逐漸增強細胞內(nèi)細菌被清除逐步痊愈病后免疫以細胞免疫為主，終身免疫第14頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月因攝入大量（108）其它沙門菌污染食物后引起潛伏期6-12小時主要表現(xiàn)

惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、

發(fā)熱持續(xù)3-5天2、胃腸炎（食物中毒）第15頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月3、敗血癥多見小兒及免疫功能低下者病原菌為其它沙門菌（豬霍亂、鼠傷寒等）可致全身感染，敗血癥、腦膜炎、骨髓炎、心內(nèi)膜炎等。局部胃腸炎少見。4、無癥狀帶菌者多見傷寒、副傷寒患者帶菌部位膽囊與年齡性別關(guān)系密切第16頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月三、微生物學(xué)檢查

傷寒病人按病程不同取不同標本第一周第二周起病程全程食物中毒者取排泄物、嘔吐物、可疑食物敗血癥患者取血液細菌的分離鑒定標本血尿、糞便骨髓第17頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月細菌分離鑒定步驟糞便、尿增菌培養(yǎng)SS中國蘭挑取不發(fā)酵乳糖菌落血清學(xué)鑒定：直接玻片凝集血液骨髓標本①②③傷寒桿菌表現(xiàn)葡萄糖+

乳糖—

動力+H2S+/—雙糖管第18頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月第19頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月用已知的傷寒桿菌“O”、“H”抗原及副傷寒甲、乙的“H”抗原與不同稀釋度的病人血清作試管凝集試驗。根據(jù)血清中抗體效價及動態(tài)變化，可作為傷寒、副傷寒病人的輔助診斷試驗。

血清學(xué)試驗——肥達反應(yīng)（Widaltest)概念第20頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月1、正常效價

O抗體≤1:80H抗體≤1:160PA抗體≤1:80PB抗體≤1:80

2、病程中動態(tài)觀察

二份血清,第二次效價增長四倍以上有意義3、O、H抗體的區(qū)別

O-Ab-IgM（特點）

H-Ab-IgG（特點）分析肥達反應(yīng)結(jié)果第21頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月

▲

O、H均不增高——傷寒、副傷寒可能性小

▲

O增高、H不增高——感染早期、其它沙門

菌感染

▲O不增高、H增高——預(yù)防接種后、非特異性回憶

反應(yīng)▲O、H均增高——傷寒、副傷寒可能性大

4、抗體始終不升高的可能因素早期使用抗生素、免疫功能低下等第22頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月例：發(fā)熱兩周后入院，肥達反應(yīng)結(jié)果如下甲：O1:160H1:80PA1:40PB1:40乙O1:80H1:320PA1:40PB1:40丙O1:160H1:80PA1:40PB1:320丁O1:320H1:640PA1:40PB1:40第23頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月傷寒病人微生物檢查陽性率系列1-尿液中細菌培養(yǎng)；系列2-血液中細菌培養(yǎng)；系列3-糞便中細菌培養(yǎng)；系列4-肥達反應(yīng)抗體效價陽性率病程：發(fā)病后周次第24頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月細菌培養(yǎng)（按前面步驟進行）Vi抗體效價測定Vi抗體≥1：10有意義。四、防治原則（了解）▲預(yù)防接種：死菌苗、活菌苗（Ty21a株）▲徹底治療病人及帶菌者▲注意飲食衛(wèi)生，防止病從口入

傷寒帶菌者檢查第25頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月變形桿菌屬（簡述P181

）變形桿菌屬腸桿菌科有周身鞭毛，運動活潑，培養(yǎng)基中遷徙生長能分解尿素（重要特征）主要引起各種創(chuàng)傷感染、尿路感染等變形桿菌的遷徙生長現(xiàn)象第26頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月變形桿菌的遷徙生長現(xiàn)象第27頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月

變形桿菌某些菌株的菌體抗原，與部分立克次體間有共同抗原成分。因此可用變形桿菌作為抗原與立克次體感染者血清做交叉凝集反應(yīng)，稱外裴試驗（Weil-Felixtest)——輔助診斷斑疹傷寒等疾病外裴試驗第28頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月第11章弧菌屬(Vibrio)為一大群菌體彎曲呈弧狀的革蘭陰性菌主要特點：有單鞭毛，運動活潑培養(yǎng)要求為堿性環(huán)境自然界廣泛分布,尤其是水體中，致病菌主要有霍亂弧菌、副溶血性弧菌。與腸桿菌科不同的是氧化酶試驗陽性。第29頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月※自1817年已發(fā)生過7次世界性霍亂大流行，前6次由霍亂弧菌古典生物型引起，第7次由霍亂弧菌ElTor生物型引起?！魜y弧菌古典生物型的發(fā)現(xiàn)與命名——1854年首次發(fā)現(xiàn)，1884年分離成功-Koch第一節(jié)霍亂弧菌霍亂弧菌病原菌的發(fā)現(xiàn)與命名第30頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月※

EITor弧菌的發(fā)現(xiàn)與命名——1905年在埃及EITor檢疫所檢出，當時未發(fā)現(xiàn)與霍亂發(fā)病有關(guān)系。1961年確定為霍亂病原菌，命名為EITor型霍亂弧菌※

1992年出現(xiàn)新流行菌株O139，是目前在東南亞各國流行的主要病原菌，這是首次由非O1群霍亂弧菌引起的流行霍亂弧菌病原菌的發(fā)現(xiàn)與命名第31頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月一、生物學(xué)性狀■形態(tài)與染色

G—

弧形，有單鞭毛，運動十分活潑?；魜y弧菌掃描電鏡×15000第32頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月第33頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月※營養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基上生長良好?！?/p>

耐堿怕酸—pH8.8~9.0堿性蛋白胨水/堿性瓊脂平板?！魜y弧菌可在無鹽的環(huán)境中生長，其他弧菌不能。■

培養(yǎng)特性第34頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月第35頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月※霍亂弧菌具有O抗原、H抗原※

O抗原目前發(fā)現(xiàn)的已有155個血清群，O1、O139群引起霍亂，其他血清群引起人類胃腸炎等疾病?！?/p>

O1群又可分為3個血清型?！?/p>

抗原構(gòu)造與分型第36頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月霍亂弧菌O1群血清型血清型(抗原組分)01多克隆抗體01單克隆抗體ABC出現(xiàn)頻率造成流行小川型(AB)＋＋＋－常見是稻葉型(AC)＋＋－＋常見是彥島型(ABC)＋＋＋＋極少見未知第37頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月■

抗原構(gòu)造與分型※根據(jù)表型差異，O1群霍亂弧菌的每一個血清型還可分為2個生物型。性狀古典生物型（classicalbiotype）EITor生物型（EITorbiotype）溶解羊紅細胞—+凝集雞紅細胞—+多粘菌素+—Ⅳ群噬菌體裂解+—第38頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月第39頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月第40頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月

●

1992年在印度、盂加拉國暴發(fā)O139群霍亂流行。

O139群在抗原性方面與O1群無交叉。

WHO規(guī)定，霍亂的病原體包括O1群和O139群霍亂弧菌

●O-1群有3個血清型，每一血清型均含有

二種生物型，古典生物型、EITor

生物型,

二種生物型均可引起霍亂流行第41頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月

■

抵抗力

對酸、含氯的化學(xué)消毒劑敏感正常胃酸4min漂白粉：水=1：4，1h

第42頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月二、致病性致病物質(zhì)1、侵襲力

鞭毛---穿透能力強，穿過腸道粘液層，有利于細菌粘附于腸壁上皮細胞。

菌毛---定居因子，是細菌定居于小腸粘膜上皮細胞的重要因素。

2、霍亂腸毒素第43頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月第44頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月第45頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月霍亂腸毒素化學(xué)結(jié)構(gòu)與致病機理性質(zhì)

外毒素，是腸毒素的典型代表結(jié)構(gòu)

A+B亞單位構(gòu)成，A是毒性部分，

B是運載和保護部分

致病機理

B與腸粘膜上皮細胞受體(GM1)結(jié)合，形成穿膜孔道A進入細胞內(nèi)，作用于細胞內(nèi)腺苷環(huán)化酶細胞內(nèi)cAMP分泌增多>>再吸收劇烈吐泄第46頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月第47頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月2、所致疾病------霍亂傳染源

病人，帶菌者傳播途徑

經(jīng)口傳播人類為唯一易感者

霍亂弧菌對酸敏感，正常胃酸可殺死細菌?；魜y弧菌腸毒素作用后，引起劇烈腹瀉、嘔吐，典型病例大便為米泔水樣。病人可嚴重脫水、酸中毒；最終因循環(huán)衰竭，死亡。未經(jīng)治療者死亡率高達50%~75%第48頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月3、免疫性牢固的終身免疫以體液免疫為主，出現(xiàn)保護性抗腸毒素抗體、抗菌抗體。O139與O1之間無交叉免疫：Ｏ抗原基因由rfb區(qū)域編碼，O139弧菌O抗原基因大部分缺失，使O-1菌苗對O139弧菌不起作用。第49頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月三、微生物學(xué)檢查霍亂為烈性傳染病，傳播速度極快。對首例病例要及時診斷，封鎖疫區(qū)，上報疫情。一般根據(jù)病情診斷，必要時將可疑物密封保存于堿性蛋白胨水，送上級檢疫部門。直接鏡檢-動力、染色分離培養(yǎng)-堿性培養(yǎng)基快速診斷-免疫熒光血清學(xué)鑒定檢查步驟第50頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月第51頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月＊O1群霍亂弧菌死菌苗肌肉注射＊目前疫苗的研制轉(zhuǎn)向口服疫苗、基因工程減毒活疫苗＊治療：補液、抗菌防治原則第52頁，課件共57頁，創(chuàng)作于2023年2月

嘉興市秀城區(qū)某餐廳因承辦婚宴發(fā)生一起食物中毒事件。