生物制品制造工藝第1頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月第五章生物制品制造工藝生物工程教研室劉靜霆

第2頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月§1生物制品的基本概念§2疫苗和菌苗§3DNA重組藥物§4基因治療與基因藥物第3頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月§1生物制品的基本概念一、定義及概述二、分類三、質(zhì)量要求第4頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月§1生物制品的基本概念一、定義及概述生物制品（biologicalproduct）是應(yīng)用普通的或以基因工程、細胞工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程等生物技術(shù)獲得的微生物、細胞及各種動物和人源的組織和液體等生物材料制備，用于人類疾病預(yù)防、治療和診斷的藥品。第5頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月

減毒活疫苗滅活疫苗

牛痘苗乙型腦膜炎疫苗

流感活疫苗流感疫苗

麻疹活疫苗Q熱疫苗

腮腺炎活疫苗脊髓灰質(zhì)炎疫苗

水痘活疫苗乙型肝炎疫苗

風疹活疫苗

斑疹傷寒疫苗

脊椎灰質(zhì)炎疫苗

亞單位疫苗基因工程疫苗

流感亞單位疫苗乙肝疫苗

腺病毒亞單位疫苗第6頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月二、分類1、疫苗(Vaccine)

一切通過注射或黏膜途徑接種，可以誘導(dǎo)機體產(chǎn)生針對特定致病原的特異性抗體或細胞免疫，從而使機體獲得保護或消滅該致病原的生物制品統(tǒng)稱為疫苗，包括蛋白質(zhì)、多糖、核酸活載體，感染因子等。第7頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月2、抗毒素及免疫血清(AntitoxinandAntisera)由特定抗原免疫動物所得由血漿或血清制成；稱抗毒素或免疫血清。如破傷風抗毒素、抗狂犬病血清等，用于治療或被動免疫預(yù)防。第8頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月3、血液制品(BloodProducts)由健康人的血漿或特異免疫人血漿分離、提純或由重組DNA技術(shù)制成的血漿蛋白組分或血細胞組分制品；如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子(天然或重組的)、紅細胞濃縮物等,用于診斷、治療或被動免疫預(yù)防。第9頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月4、細胞因子(Cytokines)及重組DNA產(chǎn)品(RecombinantDNAProducts)

由健康人血細胞增殖、分離、提純或重組DNA技術(shù)制成的多肽類或蛋白質(zhì)類制劑,如干擾素(IFN)、白細胞介素(IL)、集落刺激因子(CSF)、紅細胞生成素(EPO)等，用于治療。第10頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月5、診斷制品(DiagnosticReagents)

（1）體外診斷制品:由特定抗原、抗體或有關(guān)生物物質(zhì)制成的免疫診斷試劑或診斷試劑盒,如：HBsAg酶聯(lián)免疫診斷試劑盒（2）體內(nèi)診斷制品:由變態(tài)反應(yīng)原或有關(guān)抗原材料制成的免疫診斷試劑第11頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月6、其他制品由有關(guān)生物材料或特定方法制成,不屬于上述5類的其他生物制劑,用于治療或預(yù)防疾病。第12頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月三、生物制品質(zhì)量要求WHO要求各國生產(chǎn)的制品必須有專門檢定機構(gòu)負責成品的質(zhì)量檢定，檢定部門要有熟練的高級技術(shù)人員，精良的設(shè)備條件，以保證檢定工作的質(zhì)量。未經(jīng)專門檢定部門正式發(fā)給檢定合格證的制品，不準出品使用。質(zhì)量好的生物制品必備條件：安全和有效安全性檢定檢定效力檢定第13頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月

毒性試驗；

防腐性試驗；安全性檢定熱原質(zhì)試驗；

安全試驗；

有關(guān)安全性的特殊試驗

濃度測定（含菌數(shù)或純化抗原量）

活菌率、或病毒滴度測定效力檢定動物保護率試驗

免疫抗體滴度測定

穩(wěn)定性試驗第14頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月§2

疫苗和菌苗一、概述二、疫苗、菌苗的種類和發(fā)展三、病毒類疫苗的一般制造方法四、細菌類疫苗及類毒素的一般制備方法五、疫苗（菌苗）類生物制品的質(zhì)量檢定六、生物制品檢定標準七、重要生物制品

第15頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月§2

疫苗和菌苗一、概述第16頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月EdwardJennerDiscoveryofsmallpoxvaccine第17頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月EdwardJenner

Amongpatientsawaitingsmallpoxvaccination第18頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月第19頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月1885(Pasteur)19341920s1955Moderneraofthevaccine炭疽桿菌減毒疫苗狂犬疫苗白喉破傷風百日咳脊髓灰質(zhì)炎疫苗1960s1990s腮腺炎、麻疹和風疹疫苗乙肝疫苗水痘疫苗第20頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月二、疫苗、菌苗的種類和發(fā)展1、常規(guī)疫苗：活疫苗：用人工定向變異方法或從自然界篩選出的毒力高度減弱或基本無毒的活的微生物制成的預(yù)防制劑死疫苗：收獲經(jīng)增殖的標準微生物株，用物理或化學方法將其殺死或滅活制成的預(yù)防制劑第21頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月死疫苗與活疫苗的比較死疫苗活疫苗接種方式多為注射（皮下）多模擬自然感染途徑接種劑量較大多數(shù)只需一次副作用反應(yīng)較小反應(yīng)較大免疫效果較差，維持數(shù)月至1年較好，維持3~5年，甚至更長疫苗保存較易易失效，需凍干低溫保存第22頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月2、亞單位疫苗：設(shè)法去除病原體中對激發(fā)保護性免疫無用的甚至有害的成分，保留有效的免疫成分所制成的疫苗合成肽疫苗：用化學方法合成能夠誘發(fā)機體產(chǎn)生免疫保護的多肽制成的疫苗。二、疫苗、菌苗的種類和發(fā)展第23頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月3、基因工程疫苗

利用重組DNA技術(shù)克隆并表達保護性抗原基因，利用表達的抗原產(chǎn)物，或重組體本身制成的疫苗。1）基因工程亞單位疫苗

將基因工程表達的蛋白抗原純化后制成的疫苗，安全性高，但免疫效果一般較差。2）載體疫苗（vectorvaccine）指利用微生物載體，將保護性抗原基因重組到微生物中，使用這種能表達保護性抗原基因的重組微生物制成的疫苗（多為活疫苗）第24頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月3）核酸疫苗（DNA疫苗，基因疫苗）

指使用能夠表達抗原的基因本身即核酸制成的疫苗。4）基因缺失活疫苗就是使用通過分子生物學技術(shù)去除與毒力有關(guān)基因獲得的缺失突變毒株制成的疫苗5）蛋白質(zhì)工程疫苗

將抗原基因加以改造，以達到增強產(chǎn)物的免疫原性，擴大反應(yīng)譜，去除有害作用或副反應(yīng)的一類疫苗第25頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月核酸疫苗所采用的抗原基因及其研究進展表第26頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月三、病毒類疫苗的一般制造方法（一）毒種的選擇和減毒

要求：有抗原性；有典型形態(tài)和感染特定組織的特性；易培養(yǎng)繁殖；不產(chǎn)生毒素；穩(wěn)定，無恢復(fù)致病力現(xiàn)象；未被污染第27頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）病毒的培養(yǎng)和繁殖(CultureandReplicationofViruses)

1、動物培養(yǎng)(Animals)

2、雞胚培養(yǎng)(Embryonatedeggs）

3、組織培養(yǎng)(Organandtissueculture）Organculture Embryoculture

4、細胞培養(yǎng)

Cellculture:原代細胞(primaryculturecell)傳代細胞 二倍體細胞第28頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月如甲肝的病原體是甲型肝炎病毒（hepatitisAvirus,HAV）國外使用細胞培養(yǎng)來源的病毒材料研制了純化的滅活甲肝疫苗，如史克必成的賀福立適（Havrix）和默沙東的維康特（Vaqta）。第29頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）疫苗的滅活有的用甲醛，有的用酚溶液（四）疫苗的純化（五）凍干第30頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月四、細菌類疫苗及類毒素的一般制備方法細菌類疫苗（一）菌種的選擇（二）培養(yǎng)基（三）培養(yǎng)條件（四）殺菌（五）稀釋、分裝和凍干如卡介苗第31頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月ModificationofToxintoToxoidToxinchemicalmodificationToxoidantigenicdeterminantstoxinmoiety致病性細菌所產(chǎn)生的特異性毒性物質(zhì)――細菌毒素，經(jīng)甲醛處理及加溫處理以除去毒性而保留免疫原性，稱為類毒素

第32頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月吸附精制白喉類毒素的制造1.菌種及培養(yǎng)基2.培養(yǎng)：溫度、pH糖量、通氣量、補料和生長因子、培養(yǎng)時間3.脫毒：溫度、pH甲醛含量

第33頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月五、生物制品的質(zhì)量檢定（一）理化性質(zhì)檢定1.物理性狀的檢查2.蛋白質(zhì)含量測定3.純度檢查及鑒別試驗4.分子量或分子大小測定5.防腐劑含量測定第34頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）安全試驗

三個方面：一是菌毒種或主要原材料的檢查二是半成品的檢查三是成品檢查四個內(nèi)容：1.外源性污染的檢查

2.殺菌、滅活和脫毒情況的檢查3.殘余毒力和毒性物質(zhì)的檢查4.過敏性物質(zhì)的檢查第35頁，課件共37頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）效力試驗1.免疫力試驗2.