中藥對視神經(jīng)損傷第1頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月項目簡介實驗背景目前的治療手段實驗目的研究內容和擬解決的問題實驗步驟實驗結果預測實驗意義本實驗創(chuàng)新之處第2頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗背景自1982年已有報道視神經(jīng)切斷的再生實驗，將青蛙的視神經(jīng)切斷，3個月內，視神經(jīng)再生，視力恢復。以及1985年Aguago動物實驗和1987年Vidal等動物實驗均證實視神經(jīng)具有再生功能。可是由于視神經(jīng)損傷的病理過程復雜，再生過程受到諸多因素的影響。近10年已從起解剖、生理、生物化學等方面進行研究，并已經(jīng)得到一些明確的結論。有實驗表明，復明中藥可能通過其擴張血管增血流動功能，促進組織的新陳代謝，從而改善是神經(jīng)組織的內環(huán)境，加強神經(jīng)細胞的合成，促進視神經(jīng)的再生。第3頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月通過測定某些藥物對視神經(jīng)損傷修復的作用，篩選出來的具有促進作用的藥物。并且通過這個實驗有助于了解中藥的作用機制，為中藥的臨床應用提供現(xiàn)代理論依據(jù)。第4頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月視神經(jīng)損傷修復的重要性視神經(jīng)損傷導致：1、視力下降甚至是失明2、直接光反射消失、間接光反射正?，F(xiàn)象3、雙眼的視力受損和視野缺損癥狀所以，視神經(jīng)損傷有效的治療就顯得急需和迫切。第5頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月目前主要治療手段早期藥物治療：脫水劑、糖皮質激素、血管擴張劑、鈣離子通道阻滯劑以及維生素C、E、B等藥物，以及維生素B1、ATP以及輔酶A，地巴唑、菸酸、維生素E、復方丹參、維腦路通等等。第6頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗目的探究并測定哪些中藥單體對視神經(jīng)損傷具有修復作用，以及篩選出對視神經(jīng)節(jié)細胞再生最具促進作用的新藥。為正處在視神經(jīng)損傷造成的視力下降，甚至喪失視力的患者帶來福音。第7頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月研究內容和擬解決的問題研究內容：1、用視神經(jīng)橫斷傷法將老鼠的視神經(jīng)自視交叉前任一部位切斷，以至所有視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞（RGC）軸突完全斷離。2、分別給各組老鼠注射幾種不同的中藥，分3—5期進行觀察記錄各組老鼠的視神經(jīng)節(jié)細胞的再生情況，以及視力恢復情況。擬解決的問題1、明確視交叉的解剖位置，為斷離視神經(jīng)節(jié)細胞軸突，制備動物模型提供解剖學依據(jù)。2、熟悉各種直接或間接檢測老鼠視力情況的科學方法。第8頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月1、動物分組1、選取條件相似的小鼠設為對照組及實驗組1、2、3

指標組視神經(jīng)纖維積光密度視神經(jīng)髓鞘積光密度視神經(jīng)膠質細胞對照組實驗組1實驗組2實驗組3第9頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月2、視神經(jīng)損傷鼠模型的建立

視神經(jīng)橫斷傷法建立視神經(jīng)損傷動物模型概念：此法是將視神經(jīng)沿眶上切跡切斷，使視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞（RGC）和中樞神經(jīng)系統(tǒng)完全斷離。優(yōu)點：各實驗動物致傷量一致，觀察再生時不會受殘留未受損的軸突影響，并且試驗具有可重復性，各組間可進行對照，期間，藥物可進行平行篩選。第10頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月視神經(jīng)損傷鼠模型的建立結扎剪斷上直肌：于結膜穹窿部9~3點鐘位剪開結膜，向上分離暴露上直肌，用5-縫線結扎上直肌肌止端，剪斷上直肌。暴露視神經(jīng)：用眼臉拉鉤牽拉上臉，向框外和下方牽拉上直肌殘端的縫線，同時用斜視鉤伸向球后，向框外球下方輕拉眼球，以暴露視神經(jīng)。橫斷視神經(jīng)：用手術剪將暴露出的視神經(jīng)剪斷術后處理：縫合結膜，同時注射慶大霉1千U，涂金霉素眼膏。術前準備：術眼結膜囊沖洗，手術部位剃毛消毒鋪巾。第11頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月

3、注入各種中藥

實驗組在角膜緣后睫狀體部位用性注射器向眼球內垂直刺入，注入中藥，同時前房水放出等量的房水，以保證眼球內壓不變，對照組不做處理注入放回籠中。分別于3、7、14天，取實驗鼠1、2、3組的小鼠的視網(wǎng)膜作免疫熒光，以及取出視神經(jīng)，送至病理科檢查，染色檢查以下指標：視神經(jīng)纖維積光密度、視神經(jīng)髓鞘積光密度、視神經(jīng)膠質細胞。第12頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月4、記錄在案，并進行整理、統(tǒng)計、分析各指標的檢測結果分別比較視神經(jīng)纖維積光密度、視神經(jīng)髓鞘積光密度、視神經(jīng)膠質細胞三項指標。視神經(jīng)損傷后應有視神經(jīng)纖維減少、視神經(jīng)纖維脫髓鞘和神經(jīng)膠質細胞增生等病理改變。通過比較三項指標可以確認哪種中藥對視神經(jīng)的再生影響最大。第13頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月5．年度研究計劃和預期進展2011年11月—2011年1月：查文獻、資料，預實驗。2012年2月—2012年4月：1、制備動物模型2、使用免疫熒光法檢測三種中藥3、分析數(shù)據(jù)并記錄在案2012年5月—2012年6月：1、制備動物模型2、使用F-VEP檢測三種中藥3、分析數(shù)據(jù)并記錄在案2012年7月—2012年8月1、制備動物模型2、使用病理形態(tài)學檢查三種中藥3、分析數(shù)據(jù)并記錄在案2012年9月—2012年11月：補充整理資料，撰寫論文，提交總結報告，請專家組驗收。（上述安排可根據(jù)實際情況適當調整和總體安排）第14頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗結果預測

某些中藥對視神經(jīng)損傷修復有促進作用；某些藥物對視神經(jīng)損傷修復有抑制作用;某些藥物對視神經(jīng)損傷修復沒有作用。第15頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月預期研究成果與提交成果方式（1）為視神經(jīng)損傷后的再生提供科學的藥物治療。（2）爭取在省級以上期刊發(fā)表論文（3）向學院提交總結報告，請專家鑒定驗收（4）參加相關的學術交流會，推廣成果；為臨床上更好地推廣該藥物提供依據(jù)。第16頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月實驗意義通過測定某些藥物對視神經(jīng)損傷修復的影響，篩選出最有效的中藥，并為臨床治療視神經(jīng)損傷拓寬道路。這個實驗有助于了解中藥的作用機制，為中藥的臨床應用提供現(xiàn)代理論基礎，還給視神經(jīng)患者一個光明的未來。第17頁，課件共20頁，創(chuàng)作于2023年2月本實驗創(chuàng)新之處區(qū)別于其他實驗者給予神經(jīng)營養(yǎng)因子、周圍神經(jīng)移植、靶組織共培養(yǎng)、移植純化的PNS髓鞘細胞、運用膠質細胞抑制劑和上調RGCbcl22表達等已試用于增強軸突損傷RGC的存活的方法，本實驗通過使用新的中藥單體改變RGC生存的微環(huán)境，并篩選出具有促進視神經(jīng)再生功能的中藥，