一體外培養(yǎng)細(xì)胞的生長增殖過程原代培養(yǎng)期:從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到第次傳代培養(yǎng)這個(gè)階段,一般持續(xù)1-4周。這個(gè)階段細(xì)胞比較活躍,有細(xì)胞分裂,但不旺盛。傳代期:從原代培養(yǎng)的細(xì)胞的一經(jīng)傳代后便稱細(xì)胞系。細(xì)胞增殖旺盛,當(dāng)傳代10-50次后,細(xì)胞增殖緩慢,以致完全停止衰退期:細(xì)胞增殖緩慢或不增殖。細(xì)胞輪廓增強(qiáng),最后衰退凋亡。1.原代培養(yǎng)(PrimaryCulture)期:也稱初代培養(yǎng),即從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到第一次傳代階段,般持續(xù)1-4周。此期細(xì)胞呈活躍的移動(dòng),可見細(xì)胞分裂,但不旺盛。初代培養(yǎng)細(xì)胞與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上相似性大。細(xì)胞群是異質(zhì)的(Heterogeneous),也即各細(xì)胞的遺傳性狀互不相同,細(xì)胞相互依存性強(qiáng)。如把這種細(xì)胞群稀釋分散成單細(xì)胞,在軟瓊脂培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞克隆形成率(CloningEfficiency)很低,即細(xì)胞獨(dú)立生存性差?？寺⌒纬陕始醇?xì)胞群被稀釋分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),形成細(xì)胞小群(克隆)的百分?jǐn)?shù)。初代培養(yǎng)細(xì)胞多呈二倍體核型;由于原代培養(yǎng)細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞性狀相似性大,是檢測藥物很好的實(shí)驗(yàn)對象2.傳代期初代培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)傳代后便改稱做細(xì)胞系(CellLine)。在全生命期中此期的持續(xù)時(shí)間最長。在培養(yǎng)條件較好情況下,細(xì)胞增殖旺盛,并能維持二倍體核型,呈二倍體核型的細(xì)胞稱二倍體細(xì)胞系(DiploidCellLine)。為保持二倍體細(xì)胞性質(zhì),細(xì)胞應(yīng)在初代培養(yǎng)期或傳代后早期凍存。當(dāng)前世界上常用細(xì)胞均在不出十代內(nèi)凍存。如不凍存,則需反復(fù)傳代以維持細(xì)胞的適宜密度,以利于生存。但這樣就有可能導(dǎo)致細(xì)胞失掉二倍體性質(zhì)或發(fā)生轉(zhuǎn)化。一般情況下當(dāng)傳代10~50次左右,細(xì)胞增殖逐漸緩慢,以至完全停正,細(xì)胞進(jìn)入第三期。本初代培養(yǎng)(連續(xù)細(xì)胞系傳代期1214周3,袁退期:此期細(xì)胞仍然生存,但增殖很慢或不增殖;細(xì)胞形態(tài)輪廓增強(qiáng),最后衰退凋亡。在細(xì)胞生命期階段,少數(shù)情況下,在以上三期任何一點(diǎn)(多發(fā)生在傳代末或衰退期),由于某種因素的影響,細(xì)胞可能發(fā)生自發(fā)轉(zhuǎn)化(SpontaneousTransformation)。轉(zhuǎn)化的標(biāo)志之一是細(xì)胞可能獲得永生性(Immortality)或惡性性(Malignancy)。細(xì)胞永生性也稱不死性,即細(xì)胞獲持久性增殖能力,這樣的細(xì)胞群體稱無限細(xì)胞系(InfiniteCellLine),也稱連續(xù)細(xì)胞系(ontinuouscellline)。無限細(xì)胞系的形成主要發(fā)生在第二期末,或第三期初階段。細(xì)胞獲不死性后,核型大多變成異倍體」He