羥苯磺酸鈣膠囊對(duì)大白鼠腎皮質(zhì)勻漿中cda和mda的影響

托布霉是氨基糖苷類抗生素。在未經(jīng)aed批準(zhǔn)的氨基糖苷類抗生素中，它與慶大霉素和丁胺鈉胺一起使用。1材料和方法1.1硫酸妥布毒素注射液雄性SD大白鼠30只,普通級(jí),8周齡,體重210~230g。硫酸妥布霉素注射液(上海禾豐制藥有限公司)80mg,2mL;羥苯磺酸鈣膠囊(西安利君制藥有限責(zé)任公司)0.5g。1.2動(dòng)物組和動(dòng)物模型的構(gòu)建采用隨機(jī)數(shù)字表法將30只健康清潔雄性SD大鼠分為對(duì)照組、模型組、預(yù)防組(n=10)。對(duì)照組腹腔注射生理鹽水3mL·kg1.3腎組織病理學(xué)檢測(cè)各組動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)前取尿留樣,并在第7天注射和灌胃結(jié)束后,分別放入代謝籠中留24h取尿,測(cè)尿N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)水平,實(shí)驗(yàn)大鼠在第8天取尾靜脈血樣檢測(cè)SCr和BUN,然后麻醉處死大鼠,取右腎制成10%腎皮質(zhì)勻漿,測(cè)定超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA),取左腎固定在10%甲醛中,制成石蠟切片進(jìn)行光鏡檢查。指標(biāo)測(cè)定方法:尿NAG測(cè)定使用N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶檢測(cè)試劑盒(比色法);SCr測(cè)定使用血清肌酐測(cè)定試劑盒(酶終點(diǎn)法);BUN測(cè)定使用尿素氮測(cè)定試劑盒(酶法);SOD活性變化使用超氧化物歧化酶測(cè)定試劑盒(比色法);MDA測(cè)定使用丙二醛含量檢測(cè)試劑盒(比色法);腎組織形態(tài)學(xué)檢查,制成石蠟切片后,分別進(jìn)行HE、PAS染色,光學(xué)顯微鏡檢查。1.4統(tǒng)計(jì)方法應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料比較采用單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1各組大鼠尿nag、scr、bun、scr、bun水平比較模型組和預(yù)防組大鼠尿NAG、SCr、BUN水平顯著高于對(duì)照組,預(yù)防組大鼠尿NAG、SCr、BUN水平顯著低于模型組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。2.2兩組a、對(duì)照組的比較模型組和預(yù)防組大鼠腎皮質(zhì)勻漿中SOD水平顯著降于對(duì)照組,MDA水平顯著高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);預(yù)防組大鼠腎皮質(zhì)勻漿中SOD水平顯著高于模型組,MDA水平顯著低于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。2.3大鼠近曲小管上皮細(xì)胞崩解、突出、細(xì)胞缺失、炎性染對(duì)照組大鼠腎小管,光鏡下可見細(xì)胞膜部分完整,有典型的腎小管上皮細(xì)胞管腔側(cè)的刷狀緣結(jié)構(gòu),胞漿內(nèi)未見空泡樣變,線粒體形態(tài)正常無腫脹,細(xì)胞核核膜完整。模型組大鼠近曲小管上皮細(xì)胞崩解、脫落,并有廣泛的顆粒和空泡變性,細(xì)胞核破裂,近曲小管基底膜斷裂、間質(zhì)水腫,有少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。預(yù)防組大鼠近曲小管僅見到單個(gè)細(xì)胞壞死和輕微的退行性改變。3妥布毒素的誘導(dǎo)大鼠腎毒性妥布霉素是臨床上常用的氨基糖苷類抗生素之一,用于治療囊性纖維化患者的銅綠假單胞菌肺部感染妥布霉素也是一種親水性陽(yáng)離子抗生素,歸類于機(jī)體內(nèi)異生素的范疇。腎臟在維持機(jī)體平衡和內(nèi)在環(huán)境穩(wěn)定以及對(duì)許多親水性異生素和內(nèi)源性化合物的解毒中起主要作用。由于腎臟通過有機(jī)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白穿過腎小管上皮細(xì)胞管腔側(cè)細(xì)胞膜分泌離子藥物,并通過腎小管上皮細(xì)胞管腔側(cè)細(xì)胞膜將過濾后的毒素重吸收進(jìn)入管腔,因而腎臟與其他器官相比,會(huì)暴露于更大比例和更高濃度的藥物和毒素中,這也導(dǎo)致腎臟細(xì)胞受傷的風(fēng)險(xiǎn)更大,具體表現(xiàn)在近曲小管的損傷妥布霉素誘導(dǎo)腎毒性的機(jī)制并不明確。研究表明,妥布霉素會(huì)刺激大鼠腎臟產(chǎn)生ROS,造成機(jī)體處于氧化應(yīng)激升高狀態(tài)。ROS是最有效的活性氧化合物,能夠破壞腎臟功能并導(dǎo)致腎功能障礙。研究表明,氨基糖苷類抗生素刺激腎臟產(chǎn)生超氧陰離子和羥基自由基,這些超氧陰離子和羥自由基在皮質(zhì)小管的上皮細(xì)胞中累積并誘導(dǎo)細(xì)胞死亡,從而誘發(fā)腎毒性。ROS通常是作為正常細(xì)胞功能的一部分產(chǎn)生的,機(jī)體自身產(chǎn)生的自由基會(huì)被機(jī)體的抗氧化系統(tǒng)主動(dòng)清除,在正常情況下,機(jī)體的氧化應(yīng)激處于平衡狀態(tài),當(dāng)ROS產(chǎn)生增加或體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)減弱時(shí),ROS會(huì)誘導(dǎo)組織損傷已在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中證明本研究通過分析羥苯磺酸鈣對(duì)妥布霉素誘導(dǎo)大鼠腎毒性的生化指標(biāo)、氧化應(yīng)激等相關(guān)因素的影響,探討羥苯磺酸鈣對(duì)妥布霉素誘導(dǎo)大鼠腎毒性的預(yù)防作用。妥布霉素誘導(dǎo)大鼠腎毒性以近曲腎小管上皮細(xì)胞損傷最為顯著,模型組大鼠光鏡下觀察顯示近曲小管上皮細(xì)胞崩解、脫落,空泡變性,細(xì)胞核破裂也說明了這一點(diǎn)。模型組大鼠血清中MDA的表達(dá)水平升高,SOD表達(dá)降低說明氧化應(yīng)激可能參與了腎損傷的發(fā)生和發(fā)展;預(yù)防組MDA表達(dá)水平低于模型組,SOD高于模型組,表明羥苯磺酸鈣對(duì)妥布霉素誘導(dǎo)大鼠腎毒性具有預(yù)防作用,可能機(jī)制為羥苯磺酸鈣通過強(qiáng)抗氧化作用,增強(qiáng)了SOD的表達(dá),并減少