五倍子植物染發(fā)劑毒理學(xué)安全性試驗(yàn)研究

染色染料是一種具有改變頭發(fā)顏色的日常美發(fā)形象，人們非常了解和使用。一方面,由于工作和精神壓力增加,生活節(jié)奏加快,致使白發(fā)的出現(xiàn)正趨向于年輕化本五倍子植物染發(fā)劑是由廣州某生物科技有限公司自主研發(fā)而成,含五倍子植物提取物。此產(chǎn)品不添加苯胺類和雙氧水等有害化學(xué)成分,已獲得發(fā)明專利“一種不含對苯二胺、雙氧水的不過敏植物染發(fā)劑”(專利號:201110347744.7)1材料和方法1.11組成成分及質(zhì)量分?jǐn)?shù)五倍子植物染發(fā)劑,由廣州某生物科技有限公司提供。本染發(fā)劑由A劑和B劑組成,按質(zhì)量百分?jǐn)?shù)100%計(jì),A劑的組成成分及質(zhì)量分?jǐn)?shù):DL-半胱氨酸鹽酸鹽5%～15%、愛瑪膏7%～12%、乙醇胺3%～7%、沒食子酸丙酯1%～2%、五倍子提取物5%～15%、油醇醚-52%～5%、尿素5%～8%,余量為水;B劑的組成成分及質(zhì)量分?jǐn)?shù):愛瑪膏7%～12%、硫酸亞鐵2%～6%、油醇醚-52%～5%、異抗壞血酸0.2%～0.5%,余量為水2實(shí)驗(yàn)動物的產(chǎn)生普通級成年新西蘭種白色家兔和英國種白化豚鼠,由上海生旺實(shí)驗(yàn)動物養(yǎng)殖有限公司提供,實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)許可證號:SCXK(滬)2012-0007。實(shí)驗(yàn)動物飼養(yǎng)室溫度19～26℃,相對濕度40%～70%,實(shí)驗(yàn)動物使用許可證號:SYXK(滬)2013-0008。蘇州雙獅實(shí)驗(yàn)動物飼料科技服務(wù)有限公司提供家兔、豚鼠飼料,合格證號:蘇飼審(2009)05032。3實(shí)驗(yàn)用生物學(xué)特性鑒定分子質(zhì)量試驗(yàn)菌株TA97、TA98、TA100、TA102,由美國分子毒理有限公司提供,產(chǎn)品質(zhì)量保證書批號分別為:4584D、4599D、4600D、4604D,經(jīng)生物學(xué)特性鑒定符合實(shí)驗(yàn)要求。代謝活化系統(tǒng):S4細(xì)胞中國地鼠肺(CHL)細(xì)胞株。1.21眼刺激性試驗(yàn)選用新西蘭種白色家兔3只,將動物左側(cè)眼瞼輕輕分開,將原樣受試物0.1g涂入結(jié)膜囊中,上、下眼瞼被動閉合1s,滴眼4s后用流速較快、足量但又不會引起動物眼睛損傷的純水沖洗30s,右側(cè)眼睛不作處理作為自身對照。手持裂隙燈和熒光素鈉(24h后),在滴眼后1,24,72h以及4,7d同時對眼睛進(jìn)行檢查,如果72h未出現(xiàn)眼睛刺激癥狀,即可終止觀察。如果7d內(nèi)仍有眼刺激反應(yīng),觀察可直至21d。按食品藥品監(jiān)督管理局頒布的《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》(2015年版)有關(guān)規(guī)定對眼損害進(jìn)行評分,對刺激強(qiáng)度進(jìn)行分級。2受試物及陽性測定將英國種白化豚鼠分成三組,受試物對照組10只,受試物實(shí)驗(yàn)組和陽性實(shí)驗(yàn)組每組20只,體重221～292g。實(shí)驗(yàn)前24h將豚鼠背部左側(cè)面積約6cm3預(yù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組用無菌蒸餾水將原樣配制成不同質(zhì)量濃度的受試物供試液。根據(jù)溶解度最高劑量設(shè)計(jì)原則和受試物毒性進(jìn)行預(yù)試驗(yàn),共設(shè)5.0,2.5,1.2,0.6mg/皿4個劑量組,另設(shè)立空白對照、溶劑對照和陽性對照組。在加入S4外瘤細(xì)胞象體試驗(yàn)用1640培養(yǎng)液將原樣配制成1000,1500,3000,5000μg/mL四個梯度,均無沉淀產(chǎn)生。根據(jù)預(yù)試驗(yàn),加S2結(jié)果與分析2.1家兔視網(wǎng)膜形態(tài)觀察急性眼刺激性試驗(yàn)結(jié)果見表3。在實(shí)驗(yàn)后1～72h內(nèi),3只新西蘭種家兔左側(cè)處理部分眼睛和右側(cè)自身對照眼睛相比,未見明顯差異。家兔角膜無潰瘍形成,虹膜正常,結(jié)膜血管正常;受試物對家兔眼刺激性積分均值角膜、虹膜和結(jié)膜均為0,屬無刺激性。2.2皮膚紅外熱反應(yīng)對大鼠皮膚保護(hù)的作用受試物對豚鼠皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果見表4。局部封閉涂皮實(shí)驗(yàn)中,用原樣依次進(jìn)行誘導(dǎo)、激發(fā)。激發(fā)接觸24h、48h內(nèi),受試物實(shí)驗(yàn)組和對照組豚鼠沒有1個出現(xiàn)任何過敏反應(yīng),皮膚紅斑、水腫反應(yīng)總分大于或等于2的動物數(shù)更為0例,致敏率為0%。同樣實(shí)驗(yàn)條件下陽性對照組豚鼠出現(xiàn)了皮膚紅斑和水腫反應(yīng),激發(fā)接觸24h、48h內(nèi)反應(yīng)強(qiáng)度總分為2的動物數(shù)都達(dá)到了9只,反應(yīng)強(qiáng)度總分為3的動物數(shù)分別為4只、3只,其致敏率分別為65%、60%。受試物被判定為未見皮膚變態(tài)反應(yīng)。2.3阿德爾對標(biāo)準(zhǔn)測試菌株TA97、TA98、TA100、