滁菊葉化學(xué)成分研究

菊花是科菊花的干燥花序。根據(jù)其所在地和加工方法，可分為“伯菊”、“楚菊”、“公菊”和“杭州菊”。具有散風(fēng)清熱、平肝明目、清熱解毒之功效,用于治療風(fēng)熱感冒、頭痛眩暈、目赤腫痛、眼目昏花、瘡癰腫毒等癥我國菊葉資源蘊(yùn)藏量豐富。采集菊花后,菊葉被大量廢棄。滁菊葉與其花成分相似,其中,滁菊葉中總黃酮含量明顯高于滁菊花1儀器、試藥與儀器XT-4A型顯微熔點測定儀(溫度計未校正,北京科儀電光儀器廠);Bruker-DPX-400型超導(dǎo)核磁共振儀(瑞士,TMS內(nèi)標(biāo));R-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士Bue6c7CHI公司);循環(huán)水真空泵SHB-Ⅲ(北京聯(lián)華高科儀器科技有限公司);ShimadazuLC-6AD制備型高效液相色譜儀(日本島津公司);柱色譜、薄層色譜用硅膠(青島海洋化工廠);所用試劑均為分析純。實驗用滁菊葉樣品于2012年10月采自安徽省滁州地區(qū),經(jīng)安徽科技學(xué)院劉漢珍副教授鑒定為菊科植物菊ChrysanthemummorifoliumRamat.的莖上葉。2gc-ms色譜條件選擇滁菊葉干燥粉末16kg,以20倍80%乙醇回流提取3次,每次2h,抽濾,合并濾液,減壓濃縮后依次以石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水飽和正丁醇各萃取(1∶1)3次,減壓回收溶劑,得到石油醚部位(230g)、氯仿部位(279g)、乙酸乙酯部位(810g)和正丁醇部位(518g)。石油醚部位經(jīng)硅膠柱層析分離,石油醚-丙酮溶劑系統(tǒng)梯度洗脫,得到4個部分Fr.1~4。Fr.4經(jīng)硅膠柱色譜,石油醚-丙酮溶劑系統(tǒng)洗脫,經(jīng)石油醚二氯甲烷反復(fù)純化得到化合物1(18mg)、3(32mg)。氯仿部位用MCI柱色譜除去色素后,經(jīng)硅膠柱色譜,石油醚-乙酸乙酯溶劑系統(tǒng)梯度洗脫得化合物10(27mg),再經(jīng)SephadexLH-20以氯仿-甲醇溶劑系統(tǒng)洗脫,得化合物6(15mg)、11(46mg)、12(31mg)。乙酸乙酯部位進(jìn)行硅膠柱色譜分離,氯仿-甲醇溶劑系統(tǒng)梯度洗脫,得到6個部分Fr.1~6。Fr.1經(jīng)硅膠柱色譜,氯仿-甲醇溶劑系統(tǒng)梯度洗脫,再經(jīng)重結(jié)晶得化合物2(21mg)、4(22mg)。Fr.2經(jīng)氯仿-甲醇溶劑系統(tǒng)梯度洗脫,反復(fù)SephadexLH-20柱色譜純化,得化合物5(20mg)、7(17mg)、13(60mg)、16(25mg)。Fr.3經(jīng)硅膠柱色譜,氯仿-甲醇溶劑系統(tǒng)梯度洗脫,反復(fù)SephadexLH-20柱色譜純化,得化合物14(7mg)、17(13mg)、18(27mg)、20(6mg)。Fr.4經(jīng)經(jīng)反相ODS,SephadexLH-20和RP-HPLC制備純化得到化合物8(12mg)、9(15mg)、15(15mg)、19(12mg)和21(9mg)。3化合物5的鑒定化合物1:白色粉末(甲醇),mp75~77℃?；衔?:白色針晶(氯仿),mp137~138℃。茴香醛-濃硫酸顯色呈陽性。化合物3:白色針晶(氯仿),mp174~176℃。化合物4:白色針晶(石油醚-乙酸乙酯),mp171~173℃。Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽性,Molish反應(yīng)呈陰性?；衔?:白色粉末。Liebermann-Burchard反應(yīng)、Molish反應(yīng)均呈陽性。TLC與胡蘿卜苷對照品Rf值及顏色一致,與胡蘿卜苷對照品混合熔點不下降,故鑒定化合物5為胡蘿卜苷(daucosterol)?；衔?:白色針晶(丙酮)?；衔?:白色針晶(甲醇),mp192~193℃?；衔?:白色針晶(甲醇),mp207~209℃。化合物9:黃色無定形粉末(甲醇)?；衔?0:黃色針晶(氯仿),mp197~198℃?；衔?1:淡黃色針晶(甲醇),mp259~261℃。鹽酸-鎂粉反應(yīng)呈陽性。EI-MSm/z:284,269,152,132?；衔?2:黃色粉末(甲醇),mp232~234℃?；衔?3:黃綠色粉末(氯仿-甲醇),mp309~311℃?；衔?4:黃色針晶(甲醇),mp244~246℃?；衔?5:黃色粉末(甲醇),mp328~330℃。鹽酸-鎂粉反應(yīng)呈陽性?；衔?6:淡黃色針晶(甲醇),mp347~349℃。化合物17:黃色粉末(甲醇),mp227~229℃。鹽酸-鎂粉反應(yīng)、Molish反應(yīng)均呈陽性。酸水解檢出葡萄糖。化合物18:黃色結(jié)晶(甲醇),mp225~227℃?；衔?9:淡黃色粉末(甲醇),mp256~258℃。鹽酸-鎂粉反應(yīng)、Molish反應(yīng)均呈陽性。酸水解檢出葡萄糖?；衔?0:黃色粉末(甲醇)。AlCl化合物21:淡黃色粉末(氯仿-甲醇),mp261~262℃。4化合物5類的抗氧化活性以清除DPPH·自由基能力考察化合物1~21的體外抗氧化活性,參照文獻(xiàn)由表1可知,化合物10、13~16的抗氧化活性較強(qiáng),超過Vc;這可