box-behnken設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法優(yōu)化槲皮素納米混懸劑工藝及體外累積釋放度評(píng)價(jià)

黃酮類化合物（quercetin，q）具有抗癌、抗癌、高血壓、抗抑郁、鎮(zhèn)靜催眠等作用。但由于槲皮素親水性差、吸收差、口服生物利用度低,限制了其臨床應(yīng)用納米混懸劑(nanosuspension,NS)是采用少量表面活性劑作為穩(wěn)定劑的“純藥物”粒子所構(gòu)成的一種亞微米膠體分散體系本研究參考文獻(xiàn)方法1儀器、試劑與藥品集熱式恒溫加熱磁力攪拌器(DF101S,北京恒豐長(zhǎng)偉科技有限公司);粒度/Zeta電位測(cè)定儀(ZetasizerNanoZS,英國馬爾文儀器有限公司);智能溶出試驗(yàn)儀(ZRS-8G,天津市天大天發(fā)科技有限公司);紫外分光光度計(jì)(UV-2401PC,日本島津公司)。槲皮素原料藥(批號(hào)CY160517,陜西慈緣生物技術(shù)有限公司);槲皮素對(duì)照品(批號(hào)100081-201610,中國食品藥品檢定研究院);泊洛沙姆188(P188,批號(hào)WPCH530B,北京風(fēng)禮精求商貿(mào)有限責(zé)任公司);無水乙醇(批號(hào)20160820,北京化工廠)。2方法和結(jié)果2.1磁力攪拌法采用微型化介質(zhì)研磨法制備QT-NS,稱取8.0mgP188于10mL的西林瓶中,加入4.0mL蒸餾水和磁力攪拌子,適當(dāng)攪拌,混勻,加入QT40.0mg和粒徑為0.4~0.6mm氧化鋯珠子(3.5,4.0,4.5mL),通過調(diào)節(jié)磁力攪拌的轉(zhuǎn)速(500,700,900r·min2.2粒徑和多分散度指數(shù)取適量QT-NS,加蒸餾水稀釋,采用粒度/Zeta電位測(cè)定儀測(cè)定QT-NS的粒徑(PS)和多分散度指數(shù)(PDI),重復(fù)3次。2.3qt-ns的穩(wěn)定系數(shù)的測(cè)量取適量QT-NS于2.0mLEP管中,轉(zhuǎn)速1500r·min2.4qt-ts工藝參數(shù)的優(yōu)化2.4.1bonzer效應(yīng)的表面方法為qt-nit本研究選擇P188作為穩(wěn)定劑,單因素試驗(yàn)(控制ZrO2.4.2模型調(diào)整實(shí)驗(yàn)結(jié)果用Design-Expert8.0.6軟件進(jìn)行二項(xiàng)式方程擬合,并將各因素對(duì)Y2.4.3優(yōu)化和預(yù)測(cè)工藝參數(shù)根據(jù)回歸方程,繪制以PS,PDI,SI對(duì)自變量的三維效應(yīng)面圖,結(jié)果見圖1。由圖1A可知,QT-NS的PS受ZrO2.4.4工藝驗(yàn)證采用Design-Expert8.0.6實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)軟件,按Y2.5qt-ns的sem分析取最優(yōu)的QT-NS適量,蒸餾水稀釋后,滴于錫箔紙上,常溫條件下放置,揮干,制備QT-NS的SEM樣品,于SEM下觀察其形態(tài)并拍攝照片,結(jié)果見圖2。由圖2可知,QT原料藥大小不均勻,呈較大的棒狀和顆粒狀;而QT的納米粒呈大小均勻的不規(guī)則棒狀,粒徑在200nm左右。2.6zeta電位測(cè)定室溫下,取QT-NS適量,雙蒸水稀釋后,測(cè)定其Zeta電位,平行3次。測(cè)得Zeta電位為(-23.90±9.39)mV,結(jié)果見圖3。2.7qt值測(cè)定的建立2.7.1對(duì)照溶液和陰性溶液的制備精密稱取QT對(duì)照品9.95mg,22%乙醇配制成39.80mg·L2.7.2測(cè)量波長(zhǎng)的選擇取適量QT對(duì)照品儲(chǔ)備液,稀釋為3.98mg·L2.7.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別配制濃度為1.99,3.98,5.97,7.96,9.95mg·L2.8qt-ns的制備方法參照《中國藥典》2015年版第四部附錄釋放度測(cè)定方法:分別取QT-NS、物理混合物混懸液、QT原料藥混懸液各0.5mL,以22%乙醇為釋放介質(zhì),控制轉(zhuǎn)速為50r·min3累積釋放度測(cè)定文獻(xiàn)報(bào)道從體外累積釋放度可知,QT原料藥和物理混合物最大體外累積釋放度只有35%左右,而制備成NS后,QT的體外累積釋放度在30min時(shí)就能達(dá)到65%以上,可見QT-NS體外累積釋放度明顯優(yōu)于QT原料藥和物理混合物。分析原因可能是:NS使藥物的粒徑減小,表面積增大,藥物的滲透性增強(qiáng),