、原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)、原核生物基因結(jié)構(gòu)一非編碼區(qū)→1←——編碼區(qū)—1←非編碼區(qū),啟動(dòng)子廣1ATGTGCACGTAGTTA鐵止ATACACGTGCATCAAT.I.編碼區(qū)上游編碼蛋白質(zhì)編碼區(qū)下游調(diào)控遺傳信息的表達(dá)(調(diào)控程序)(1)編碼區(qū)和非編碼區(qū)能編碼蛋白質(zhì)的區(qū)段叫做編碼區(qū);不能編碼蛋白質(zhì)的區(qū)段叫做非編碼區(qū),在非編碼區(qū)上有調(diào)控遺傳信息表達(dá)的核苷酸序列、原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)1非編碼區(qū)→1編碼區(qū)非編碼區(qū)啟動(dòng)子cce【止子RNA聚合酵)AUGUGCACGUAGUUA(2)啟動(dòng)子、RNA聚合酶、終止子啟動(dòng)子:位于基因首端一段能與RNA聚合酶結(jié)合并能起始mRNA合成的序列。沒有啟動(dòng)子,基因就不能轉(zhuǎn)錄。RNA聚合酶能夠識(shí)別啟動(dòng)子上的結(jié)合位點(diǎn)并與其結(jié)合的一種蛋白質(zhì)終止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片斷它能阻礙RNA聚合酶的移動(dòng),并使其從DNA模板鏈上脫離下來,使轉(zhuǎn)錄終止。非編碼區(qū)→122、真核生物的基因結(jié)構(gòu)一非編碼區(qū)→1編碼區(qū)←非編碼區(qū)編碼蛋白質(zhì)啟動(dòng)子終止子外顯子內(nèi)含子(能編碼蛋白質(zhì))(不能編碼蛋白質(zhì))(1)外顯子和內(nèi)含子外顯子能編碼蛋白質(zhì),內(nèi)含子不能編碼蛋白質(zhì)。(2)非編碼區(qū)和非編碼序列非編碼序列包括非編碼區(qū)和編碼區(qū)的內(nèi)含子2、真核生物的基因結(jié)構(gòu)3非編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼廢編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游啟動(dòng)子終止子與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)真核細(xì)基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)編碼區(qū)啟動(dòng)子終止子轉(zhuǎn)錄nRNA前體外顯子加工↓成熟mRNA內(nèi)含子翻譯肽0▲◆。◆①相同點(diǎn):都是由能夠編碼蛋白質(zhì)的編碼區(qū)和具有調(diào)控作用的非編碼區(qū)構(gòu)成。②不同點(diǎn):原核細(xì)胞基因的編碼區(qū)是連續(xù)的;真核細(xì)胞的編碼區(qū)是間隔的,不連續(xù)的。非編碼區(qū)4二、基因工程的基本操作程序閱讀教材P8-12,回答下列相關(guān)問題:1、基因工程的基本操作流程圖:生物材料專錄限制窖包扦第二非植物組織培養(yǎng)等二、基因工程的基本操作程序5(一)目的基因的獲取生物材料→分離DNA6NA片段基因組文庫①從基因文庫分離MRNA→cDNA、cDNA文庫中獲?、诶肞cR技術(shù)擴(kuò)增③化學(xué)方法人工合成1、從基因文庫中直接獲取:(1)基因文庫的概念:見P(2)基因文庫的分類:(按外源DNA片段的來源分類)基因組DNA文庫:含有一種生物的全部基因部分基因文庫:只包含了一種生物的部分基因,如:cDNA文庫(3)建立基因文庫的目的在未知基因序列的情況下,便于尋找并獲得所需的大量的目的基因。(4)基因文庫的構(gòu)建方法:〔①直接分離法基因組文庫②反轉(zhuǎn)錄法-cDNA(一)目的基因的獲取6基因文庫的構(gòu)建方法之一:①直接分離法鳥槍法原核生物的基因組文庫用喝制切成多村斷提取某種生物的全部DNA用適當(dāng)?shù)南拗泼盖卸ù笮〉腄MA片段將DNA片與載體連接導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存基因組文庫馨基因文庫的構(gòu)建方法之一:7基因文庫的構(gòu)建方法之二:反轉(zhuǎn)錄法:一主要是真核生物的cDNA原核細(xì)胞的基因:真核細(xì)胞的基因在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)轉(zhuǎn)在細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄mRNA在細(xì)胞質(zhì)中將mRNA分離并加入反轉(zhuǎn)錄酶DNA單鏈合成第二條DNA鏈CDNA基因文庫的構(gòu)建方法之二:8基因文庫的構(gòu)建方法基因組文庫:一般針對原核生物的基因,因?yàn)榛蛏俨糠只蛭膸?一般針對真核生物的基因,如cDNA文庫文庫類型cDNA文庫基因組文庫文庫大小基因中啟動(dòng)子基因中內(nèi)含子小無無大有有基因多少某種生物的部分基因某種生物的全部基因物種之間的基可以部分基因可以因交流說明基因文庫的組建過程就包含基因工程的基本操作步驟。從基因文庫中獲取目的基因的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便,缺點(diǎn)是工作量大,具有一定的盲目性.基因文庫的構(gòu)建方法9基因組AJ含目的基DNAl的基因I提取構(gòu)建文庫」篩選國因的菌株分離母菌cDNA|CJ含目的基mRNAHcDNA提取構(gòu)建文庫」篩選因的菌株分離目的基因Ⅲ限制酶切割分離MRM錄DNA片段→基因組文庫}①從基因文庫生物材料→分離DN→cDNA、cDNA文庫中獲取②利用PcR技術(shù)擴(kuò)增③化學(xué)方法人工合成基因組AJ含目的基10原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)課件11原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)課件12原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)課件13原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)課件14原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)課件15原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)課件16原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)課件17原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)課件18原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)課件19原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)課件20原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)課件21原核生物與真核生物的基因