/附件1：?動物細胞融合與單克隆抗體?課前預(yù)習(xí)提綱一、問答1．植物體細胞雜交包括哪些步驟？原生質(zhì)體融合前應(yīng)如何處理？促進融合的方法有哪些?融合的原理是什么？2．抗體由什么細胞產(chǎn)生？其化學(xué)本質(zhì)是什么？主要作用？與抗原作用的特點？主要分布在哪里？3．動物細胞工程常用技術(shù)有哪些？單克隆抗體制備過程中用到哪些？技術(shù)原理是什么？4．仔細閱讀書上單克隆抗體制備過程示意圖,答復(fù)以下問題①注射抗原的目的是什么？②誘導(dǎo)細胞融合的手段有哪些？③假設(shè)細胞兩兩融合,有幾種融合情況？④進行專一抗體檢測和篩選的目的是什么？⑤篩選最少要進行幾次？二、填空1、動物細胞融合的原理,誘導(dǎo)其融合的手段,最主要用途。2、雜交瘤細胞的特點、。3、單克隆抗體的優(yōu)點。4、單克隆抗體主要用途。三、請寫出預(yù)習(xí)中你自己不能解決的疑難問題〔2個以上〕附件2：?動物細胞融合與單克隆抗體?課后檢測題1．中科院上海植物生理生態(tài)研究所在“神舟四號〞飛船進入太空后為一對“新人〞——黃花煙草原生質(zhì)體和革新一號煙草原生質(zhì)體舉辦了特殊的“婚禮〞。將兩個“新人〞放入融合器中,當(dāng)充滿液體的融合器加上直流電場,兩個原本相互游離的細胞一下子貼到一起,開始了“竊竊私語〞。緊接著,在瞬間高壓脈沖的作用下,細胞膜被擊出了一個小孔,透過這微小的空間,兩股細胞質(zhì)展開了“心靈溝通〞。漸漸地,它們倆已是你中有我,我中有你,一個新生命就這樣誕生了。地面實驗結(jié)果顯示：用于融合的兩個“新人〞,一個開的是粉花〔標(biāo)記為“一號〞〕,一個開的是黃花〔標(biāo)記為“二號〞〕融合后的細胞再生植株開的是黃花,但形狀卻和一號相同〔稱“一號形狀〞,另一個稱“二號形狀〞〕。這種“太空煙草〞比普通煙草個子矮,株稈粗,煙葉多,是我國太空育種試驗的一項重大成果。據(jù)此答復(fù)以下問題：〔1〕由于細胞的密度不同,因此在地面上進行細胞融合非常困難。從理論上講,在太空中細胞更容易融合,可能的原因是。在顯微鏡下觀察,“新人〞的細胞膜融合在一起,使細胞呈圓球狀,這是因為膜具有特性?！凹毎槎Y〞中用到的誘導(dǎo)融合技術(shù)是。〔2〕兩種煙草原生質(zhì)體融合時,類型是要被淘汰的。類型是我們需要的,這樣的細胞經(jīng)組織培養(yǎng)后,再生的植株屬倍體。〔3〕植物體細胞融合技術(shù)與傳統(tǒng)的有性雜交相比,其優(yōu)點是?！?〕“太空煙草〞能穩(wěn)定遺傳嗎？為什么？2．以下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖?！?〕技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的根底?！?〕在圖中HAT培養(yǎng)上,未有融合的_________________和融合的_________________都會死亡,只有融合的雜種細胞才能生長。〔3〕單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最主要的優(yōu)點是_________?！?〕選出的雜交瘤細胞既具備骨髓瘤細胞的迅速特點,又具備淋巴細胞的_________特點,經(jīng)過選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞,還需進行______________和___________,經(jīng)屢次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。最后將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng),或小鼠腹腔內(nèi)增殖,從________________或________________中,就可以提取出大量的單克隆抗體了?！?〕淋巴細胞是由動物體中的細胞分化、發(fā)育而來。3．細胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑,但能不斷分裂增殖,將這兩種細胞在試管中混合,加聚乙二醇促融,獲得雜種細胞。請答復(fù)：〔1〕試管中除融合的雜種細胞外,還有種融合細胞?！?〕設(shè)計一方法〔不考慮機械方法〕,從培養(yǎng)液中別離出雜種細胞,并說原理。方法：。原理：細胞株人染色體編號細胞株人染色體編號12345678A株＋＋＋＋－－－－B株＋＋－－＋＋－－C株＋－＋－＋－＋－養(yǎng),獲得A、B、C三細胞株。各細胞株內(nèi)含有的人染色體如有表〔“+〞有,“—〞無〕測定各細胞株中人體所具有的五種酶的活性。結(jié)果是：①B株有a酶活性；②A、B、C株均有b酶活性：③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均無e酶活性。假設(shè)人基因的作用不受鼠基因影響,那么支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的、、、和號染色體上。答案1．〔1〕重力作用很弱一定的流動性電刺激誘導(dǎo)融合〔2〕自身融合黃花煙草——某新一號煙草多〔或四〕〔3〕克服了遠緣雜交不親和的障礙 〔4〕如果“太空煙草〞為純合子,無性繁殖和有性繁殖都能穩(wěn)定遺傳；如果為雜合子,無性繁殖能穩(wěn)定遺傳,有性繁殖會出現(xiàn)性狀別離。培養(yǎng)過程中也可能會發(fā)生基因突變。2.(1)動物細胞培養(yǎng)(2)親本細胞具有同種核的細胞(3)特異性強,靈敏度高,并可能大量制備(4)大量增殖分泌專一抗體克隆化培養(yǎng)抗體檢測細胞培養(yǎng)液小鼠腹水(5)骨髓造血干3．〔1〕2〔2〕培養(yǎng)液中參加氨基嘌呤,收集增殖的細胞參加氨基嘌呤后,使D合成途徑阻斷,僅有D合成途徑的骨髓瘤細胞及其彼此融合的細胞就不能增殖,但人淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜種細胞中可以利用淋巴細胞中的S途徑合成DNA而增殖〔3〕61278附件3：教學(xué)反思本節(jié)教學(xué)設(shè)計貫徹“用教材教,而不是教教材〞的思想,采用“情境-探究〞導(dǎo)學(xué),努力拓寬學(xué)生科技視野,引導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)現(xiàn)代生物技術(shù)。由“太空婚禮〞——植物原生質(zhì)體融合、動物細胞融合實驗創(chuàng)設(shè)情境,在復(fù)習(xí)植物體細胞雜交技術(shù)的同時,導(dǎo)出動物細胞融合技術(shù)及其應(yīng)用的學(xué)習(xí),以任務(wù)驅(qū)動讓學(xué)生主持太空航天動物科研工程“設(shè)計單克隆抗體制備方案〞,在真實情境、挑戰(zhàn)性的任務(wù)驅(qū)動下,激發(fā)學(xué)生探究性學(xué)習(xí)的熱情,借助單克隆抗體制備流程圖解讀,引導(dǎo)學(xué)生既關(guān)注宏觀步驟,又重視對一些重要方法細節(jié)的理解,抓住技術(shù)流程、方法和篩選主線,以問題導(dǎo)向,啟迪學(xué)生思維,幫助學(xué)生理解單克隆抗體制備原理與應(yīng)用,培養(yǎng)學(xué)生綜合運用知識能力,取得較好的教學(xué)效果?！扒榫场骄卡晫?dǎo)學(xué)課堂教學(xué)模式一、模式目標(biāo)以學(xué)生為主體,激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)熱情,使其處于愿學(xué)、樂學(xué)、會學(xué)的狀態(tài),教師成為學(xué)生學(xué)習(xí)的引導(dǎo)者、幫助者、促進者。二、模式流程主要包括“自主整理—情境導(dǎo)入—問題探究—解釋遷移—歸納整合—訓(xùn)練提升〞六個環(huán)節(jié)。1、準(zhǔn)備階段〔課前預(yù)習(xí)〕課前給學(xué)生自主預(yù)習(xí)提綱〔以問答或填充等形式〕,進行本節(jié)內(nèi)容學(xué)習(xí)預(yù)備知識和根底知識的整理?？梢缘竭_課前就調(diào)動其學(xué)習(xí)的積極性,同時節(jié)省課堂時間用于重點知識的討論與分析,提高課堂效率。讓學(xué)生寫出預(yù)習(xí)中發(fā)現(xiàn)的疑難問題〔2個以上〕,帶著問題進課堂。2、導(dǎo)學(xué)階段〔課堂完成〕〔1〕情境導(dǎo)入一個好的情境,是教學(xué)成功的一半。它能吸引學(xué)生的注意力,激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣,讓學(xué)生的思維處于活潑狀態(tài),為探究環(huán)節(jié)提供情感動力。情境創(chuàng)設(shè)最好具有真實性、外鄉(xiāng)性、時代感,要聯(lián)系學(xué)生生活實際,吸引學(xué)生眼球?！?〕問題探究情境起什么作用？問題情境,情境創(chuàng)設(shè)是為提出與學(xué)習(xí)內(nèi)容相關(guān)的問題,圍繞相關(guān)主線設(shè)計問題串〔如現(xiàn)代生物技術(shù)的過程或方法,科學(xué)探究思維過程等〕,在符合學(xué)生認知規(guī)律的情況下展開,要圍繞學(xué)生的最近開展區(qū)提問,讓他“跳一跳,夠得到〞,提出的問題要有針對性,是重點、關(guān)鍵點、學(xué)生學(xué)習(xí)的難點、疑點、興奮點,問題要具體、明確,任務(wù)性強。啟發(fā)學(xué)生通過看書、實驗、觀察、思考、查閱資料、討論、動手操作等活動進行探究性學(xué)習(xí)?！?〕解釋遷移學(xué)生探究性學(xué)習(xí)后,做出問題解答,教師評價或生生互評、自評。不要害怕學(xué)生暴露出來的錯誤,錯誤是好的教學(xué)資源。〔教學(xué)生學(xué)會、教學(xué)生學(xué)、教學(xué)生會學(xué)〕教師要有針對性地聚焦重點、突破難點、厘清疑點,對問題進行精要的解釋,以此糾正一局部學(xué)生模糊的知識,幫助學(xué)生形成正確概念。進行變式訓(xùn)練,促進知識遷移。〔3〕歸納整合對知識進行歸納、整理,使形成系統(tǒng)明晰的知識結(jié)構(gòu)。教師要努力總結(jié)揭示知識背后的規(guī)律、方法。3、應(yīng)用評價階段訓(xùn)練提升〔課堂或課后完成〕呈現(xiàn)表達本節(jié)內(nèi)容的典型練習(xí)題,最好是新情境下的信息題,以檢測學(xué)習(xí)效果〔是否真正理解和掌握〕,穩(wěn)固內(nèi)化新知識,形成運用知識解決實際問題的能力。以試卷、作業(yè)的形式檢查