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13生物科學(xué)制作者:楊金標(biāo)&趙訸甲&陳姍姍&黃芳&黃溫馨&劉亞楠實驗結(jié)果
(第
一 組)實驗九 糖原的提取及鑒定的實驗結(jié)果注意事項實驗用小動物在實驗前必須飽食,因為在空腹時肝糖原易分解而是其含量減少。肝臟離體后,肝糖原會迅速分解,所以再殺死動物后,所得肝臟必須迅速用三氯醋酸溶液處理。一、實驗?zāi)康牧私獠⒄莆胀僖旱矸勖富盍Φ臏y定方法二、實驗原理唾液淀粉酶能催化水解淀粉,生成分子較小的糊精和麥芽糖。本實驗利用碘的呈色反應(yīng)來測定唾液淀粉酶水解淀粉作用的速度,從而測定唾液淀粉酶活力的大小。三、實驗儀器和試劑1.儀器(1)多孔白瓷板
(2)50mL三角瓶(3)恒溫水浴鍋(6)100mL容量瓶(4)燒杯(7)漏斗(5)500mL容量瓶(8)吸管2.試劑(1)原碘液:稱取碘11g、碘化鉀22g,加少量蒸餾水完全溶解后,定容至500mL,于棕色瓶中保存。(2)稀碘液:吸取原碘液2mL,加碘化鉀20g,用蒸餾水溶解,定容至500mL,于棕色瓶保存。(3)標(biāo)準(zhǔn)“終點色”溶液①準(zhǔn)確稱取氯化鈷40.2439g、重鉻酸鉀0.4878g,加蒸餾水溶解并定容至500mL。②準(zhǔn)確稱取鉻黑T
40mg,加蒸餾水溶解并定容至100mL。取①液80mL與②液10mL混合,即為終點色。冰箱保存。四、操作步驟(1)將“標(biāo)準(zhǔn)色”溶液滴于白瓷板的左上角空穴內(nèi),作為比較終點色的標(biāo)準(zhǔn)。(2)在50mL的三角瓶中,加入2%可溶性淀粉溶液20mL,加緩沖液5mL在37℃水浴中平衡約10min,加入0.5mL稀釋唾液,立即記錄時間,充分搖勻。定時用滴管取出反應(yīng)液約0.25mL,滴于預(yù)先充滿此稀碘液(約0.75mL)的調(diào)色板空穴內(nèi),當(dāng)空穴顏色由紫色變?yōu)樽丶t色,與標(biāo)準(zhǔn)色相同時,即為反應(yīng)終點,記錄時間T(min)。五、計算1mL
唾液淀粉酶于
37℃
、
pH 6.8的條件下,
1h
液化可溶性淀粉的克數(shù),稱為唾液淀粉酶的活力單位。酶活力單位=(60/T×20×2%×n)/0.5n——唾液淀粉酶稀釋倍數(shù)
60——1h(60min)0.5——吸取待測唾液淀粉酶的量(mL)2%——淀粉濃度20—
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