【免疫學實驗】流式CBA多因子檢測詳解CBA原理詳細介紹CytometricBeadArray（CBA），即細胞因子微球檢測技術(shù)。是一種基于流式細胞檢測系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測方法，它能夠同時對單個樣品中的多個指標進行檢測。BD公司利用流式細胞儀可對熒光信號進行級數(shù)放大的特性，將受檢的可溶性因子附著于一些具有近似細胞直徑的微粒上，即可對受檢樣品中的各種可溶性因子進行檢測。CBA的基本原理近似于ELISA的檢測，即利用微小、分散的顆粒捕獲液體待測物，并利用流式細胞儀檢測類似“三明治”的顆?！郎y物復合體所散發(fā)的熒光，從而測定待測物的數(shù)量。詳細原理介紹每個CBA微球大小一致，具有特定的熒光強度，包被有適用于特定分析（如其它抗體或者可溶性蛋白）的特異性捕獲抗體（CaptureAntibody），提供了類似ELISA孔板的捕獲表面。當微球和待測樣品溶液混合后，微球上的特異性抗體就與樣品（血清、血漿或者細胞培養(yǎng)液）中相應的抗原或蛋白結(jié)合，然后加入熒光標記的檢測抗體，就會形成“三明治”夾心復合物。最后通過流式細胞儀對特異性目的蛋白進行檢測。CBA的每種微球攜帶有不同強度的紅色熒光，在流式細胞儀的FL3通道通過檢測微球熒光強度的差異對目的蛋白定性；檢測抗體帶有PE熒光素標記，在流式細胞儀的FL2通道檢測，通過檢測抗體的PE熒光強度定量目的蛋白。CBA技術(shù)特點CBA具有FCM的寬范圍熒光檢測特點，對樣本需求量更少，檢測更快速、更準確。下面我們介紹一下CBA主要的技術(shù)特點:1、輕松實現(xiàn)多重檢測。最多可同時對一個樣本中的75個目的蛋白進行精確定量。2、樣本需要量小。僅需要50μL溶液就可進行一次檢測。3、更高的靈敏度。分析靈敏度高達2.8pg/mL。4、更高的靈敏度、更寬的檢測范圍和更好的重復性。CBA技術(shù)使蛋白定量的分析靈敏度高達pg/ml級別,檢測范圍達0-5000pg/ml，所有分析只需一組標準曲線。根據(jù)抗體的熒光強度對目的蛋白定量，排除了ELISA反應中酶聯(lián)放大產(chǎn)生的假陽性。5、檢測對象的靈活組合—BDCBAFlexSet。CBAkit是同時檢測試劑盒配好的6個指標，形式比較固定。為滿足不同客戶的實際需要和研究興趣，BD于2005年初推出了CBAFlexset。它改變了CBAkit的固定形式，成為自由組合、靈活搭配的“自助餐”。您可以根據(jù)需要組合不同的捕獲微球來檢測多個指標，最多能同時檢測75個指標。除了擁有CBAkit的優(yōu)勢外，F(xiàn)lexSet還配有獨立的軟件分析系統(tǒng)（CBAFlexSetAnalysisSoftware），并且可以在BDFACSArrayBioanalyzer上，直接用96孔和384孔板進行操作。CBAFlexset賦予研究者更靈活、更自由，更大的選擇空間，而且進一步豐富了CBA產(chǎn)品線。種類涉及免疫、細胞信號傳導、細胞凋亡等許多領域的蛋白定量分析。6、操作簡單，省時省力。CBA技術(shù)采用芯片式集成測定，所有檢測只需一組標準曲線，就可計算出每種待測蛋白濃度；操作簡單，整個流程只需要3.5小時，對待測樣本可做實時分析，縮短檢測了時間，提高了檢測效率。7、強大的軟件分析系統(tǒng)。BDCBA軟件具有強大的數(shù)據(jù)處理能力，直接將目標蛋白的檢測結(jié)果換算成標準濃度；除了為用戶提供待測物的計數(shù)結(jié)果外，還能提供可視輪廓或信號圖形以幫助用戶獲得更多的信息。有用于Macintosh和Microsoft系統(tǒng)兩種版本供您選擇。和傳統(tǒng)的液相蛋白定量技術(shù)相比，CBA技術(shù)是一種“多元”和“同步”的檢測技術(shù)。革新的CBA技術(shù)與傳統(tǒng)的蛋白定量相比有下列優(yōu)點：CBA檢測對象血清、血漿、眼淚、房水、唾液、體腔灌洗液、細胞培養(yǎng)液上清、細胞裂解物等。CBA應用領域?炎癥因子的水平的分析?腫瘤研究及腫瘤疾病的輔助診斷、療效和預后監(jiān)測?凋亡相關(guān)蛋白分析?系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）和新生兒膿血癥等免疫疾病的監(jiān)控?干細胞研究和干細胞治療監(jiān)測?免疫學研究和免疫疾病的輔助診斷和監(jiān)控?感染疾病的研究及輔助診斷和療效評價?免疫功能監(jiān)測?藥效評價，藥物