第四節(jié)生物堿的提取分離一、總生物堿的提?。憾?、生物堿的分離：一、總生物堿的提?。嚎偵飰A的提取方法主要有：1、溶劑法：2、離子交換樹脂法：3、沉淀法：1、溶劑提取法：水或酸水溶劑提取法：低極性有機(jī)溶劑提取法：高極性有機(jī)溶劑提取法：原理：生物堿在植物細(xì)胞中多以鹽的形式存在，生物堿鹽多易溶于水,而難溶于有機(jī)溶劑。常用酸：H2SO4、HCl、醋酸、酒石酸、檸檬酸(0.5~1%）等。（1）水或酸水溶劑提取——以生物堿鹽的形式提出常用提取方法：滲漉法，煎煮法優(yōu)點：－安全，經(jīng)濟(jì)，適合于工業(yè)生產(chǎn)缺點：－溶解范圍大，選擇性小，水溶性雜質(zhì)較多(糖，蛋白，皂甙，鞣質(zhì)，無機(jī)鹽，水溶性色素)，影響進(jìn)一步分離，且水溶液不容易濃縮。一般常結(jié)合離子交換法。一般操作流程：(2)低極性有機(jī)溶劑提取

——以游離生物堿的形式提出原理：游離堿多易溶于有機(jī)溶劑，而難溶于水。一般操作：通常先用濃氨水,石灰水,Na2CO3水溶液潤濕并研磨生藥或用石灰，氧化鎂等固體堿與生藥拌勻，使生物堿游離，再用低極性有機(jī)溶劑滲漉或加熱抽提(汽油，石油醚，苯，乙醚，氯仿，二氯乙烯等)

堿的使用視生物堿堿度而定，但如存在酸性生物堿則不能使用NaOH，KOH等強(qiáng)堿。優(yōu)點：提出液色淺，雜質(zhì)少，純化容易。脂溶性雜質(zhì)脫脂：——對于含有脂溶性雜質(zhì)，可先用汽油，石油醚，CCl4提一次（脫脂）。——或用下列方法進(jìn)行初步純化：（3）高極性有機(jī)溶劑提取

——以生物堿和生物堿鹽的形式提出無論游離、成鹽生物堿，均易溶于甲醇或乙醇中。提取時可加入少量酸使之成鹽。優(yōu)點：可避免親水性的多糖、蛋白質(zhì)、無機(jī)鹽溶入。缺點：使樹脂、葉綠素等脂溶性成分增加。2、離子交換樹脂法：原理：——將酸水提取液通過強(qiáng)酸型（多為磺酸型）陽離子交換樹脂柱，使生物堿鹽陽離子交換在樹脂上，而其它雜質(zhì)則隨溶液流出。然后用堿液或濃氨水堿化（使生物堿從樹脂上游離出來）后，再用有機(jī)溶劑進(jìn)行洗脫，回收有機(jī)溶劑得總生物堿。原理反應(yīng)式：3、沉淀法：基本原理：——利用生物堿在酸性條件下，與一些沉淀試劑形成難溶性復(fù)鹽而從水溶液中分離出來。常用的沉淀試劑：不同極性溶劑：雷氏氨鹽：三硝基間苯二酚：苦味酸：碘化物：沉淀方法主要包括：溶劑沉淀法：鹽析法：雷氏銨鹽沉淀法：（1）溶劑沉淀法：原理：利用生物堿（游離或成鹽）難溶于水而產(chǎn)生沉淀。過程：一般情況下在酸水提取液中加堿（如NaCO3等）進(jìn)行堿化，則水不溶或難溶性生物堿即沉淀析出，可與水溶性生物堿及雜質(zhì)分離。（2）鹽析法：原理：將生物堿水提取液加入飽和鹽水，則生物堿或其鹽類以沉淀形式析出，這一過程稱為鹽析。例如：酸水液＋飽和鹽水沉淀析出粗制掌葉防己堿堿在黃虅的1％硫酸水溶液中（1）加堿，堿化至pH＝9（2）加NaCl使達(dá)飽和狀態(tài)，放置慮液例如：（3）雷氏銨鹽沉淀法：原理：季銨類生物堿極易溶于水，除用離子交換樹脂法外，用堿化或鹽析的方法，一般不易得到沉淀。又由于它在有機(jī)溶劑中的溶解度不大，亦不便應(yīng)用溶劑法提純。因此，常用雷氏銨鹽為沉淀試劑純化。原理反應(yīng)式：（1）B＋＋NH4[Cr（NH3）2（SCN）4]

B[Cr（NH3）2（SCN）4]（2）2B[Cr（NH3）2（SCN）4]＋Ag2SO4B2SO4＋2Ag[Cr（NH3）2（SCN）4]（3）B2SO4＋BaCl2BaSO4＋2BCl一般操作：（1）（2）（3）二、生物堿的分離:

分離程序一般有：生物堿的系統(tǒng)分離：特定生物堿的分離：1、生物堿的系統(tǒng)分離：（1）系統(tǒng)分離生物堿的程序：

總堿類別或部位單體生物堿

類別:按堿性強(qiáng)弱或酚性、非酚性組分的生物堿類別。部位：主要指最初色譜中洗脫的極性不同的生物堿。系統(tǒng)分離：具有基礎(chǔ)研究的性質(zhì)2、特定生物堿的分離：側(cè)重于生產(chǎn)實用，具有應(yīng)用開發(fā)價值。初步純化將各部分總生物堿再進(jìn)行系統(tǒng)分離得到單一成分的生物堿三、各類生物堿的分離實例：

生物堿的結(jié)構(gòu)差異大，對酸，堿等的溶解性有所差異。按溶解度及堿性可把生物堿進(jìn)行簡單的分類。1、生物堿的簡單分類(按堿度和溶解度)(1).弱堿性或近中性生物堿。(包括弱堿性叔胺生物堿、酰胺堿、部分N-氧化物)

a.

酚性弱堿性生物堿(1a)

b.

非酚性弱堿性生物堿(1b)(2).一般叔胺堿

a.

酚性叔胺堿(2a) b.

非酚性叔胺堿(2b)(3).水溶性生物堿（季胺堿，酸性生物堿，部分N-氧化物）

3a3b3c對酸、堿和有機(jī)溶劑的溶解性能游離生物堿H2OCHCl3稀酸稀氨水NaOH

或NaHCO3酚性弱堿性（1a）-+

-+非酚性弱堿性（1b）-+

-

-酚性叔胺堿（2a）-

+

+

-+非酚性叔胺堿(2b)-

+

+

- -水溶性生物堿(3)

+-+

++2、各類生物堿的分離方法(非酚性弱堿性生物堿)(酚性弱堿性生物堿)酚性叔胺堿非酚性叔胺堿N-氧化物*非酚性叔胺堿酚性叔胺堿季胺堿，酸性生物堿四、單一生物堿的分離，純化：

通過上述分離，在成分比較簡單的情況下，通過重結(jié)晶即能得到單體的結(jié)晶，但在成分復(fù)雜的情況下，仍有可能是混合物，必須繼續(xù)分離。常用以下幾種方法：1.利用生物堿的堿性差異進(jìn)行分離

同一類生物堿結(jié)構(gòu)相似，但堿性仍有差異。利用不同堿性的生物堿與酸結(jié)合成鹽的穩(wěn)定性差異而達(dá)到分離的目的。將生物堿溶于酸水中，用堿調(diào)節(jié)pH值，每調(diào)一次，用CHCl3等有機(jī)溶劑萃取，則堿性較弱的生物堿將先游離析出轉(zhuǎn)入有機(jī)溶劑中，而與堿性較強(qiáng)的生物堿分離（弱堿先提出）?？倝A（1）酸水溶解，并用弱堿調(diào)pH（2）用氯仿萃取氯仿層（弱堿）酸水層（強(qiáng)堿）將生物堿溶于CHCl3或乙醚等有機(jī)溶劑中，用不足以中和總堿的適量不同pH值（由高到低）的酸性緩沖液萃取，則強(qiáng)堿先成鹽而優(yōu)先轉(zhuǎn)入酸水層，而與堿性較弱的生物堿分離（強(qiáng)堿先提出）?？倝A（1）溶于氯仿中（2）用弱酸萃取氯仿層（弱堿）弱酸水層（強(qiáng)堿）應(yīng)用緩沖紙層析來選擇pH梯度萃取條件：生物堿的緩沖紙層析堿性弱強(qiáng)千金藤中非酚性生物堿的分離千金藤中酚性生物堿的分離2.利用生物堿的極性差異進(jìn)行分離利用相似相溶的特性，以極性遞增的溶劑相繼從堿性水溶液中分離不同的生物堿。有機(jī)溶劑對親脂性的游離生物堿的溶解性能按下列順序增加，可依次進(jìn)行提取。己烷＜石油醚＜乙醚＜苯＜乙酸乙酯＜甲醇＜氯仿或用柱色譜法：如用氧化鋁柱或硅膠柱生物堿分子極性強(qiáng)弱規(guī)律：相似結(jié)構(gòu)分子中: 雙鍵增加

極性增強(qiáng)含O官能團(tuán)增加

極性增強(qiáng)酰胺>羧酸>醇>醛>酮>醚伯醇>仲醇>叔醇e-鍵(OH)>a-鍵蛇足草生物堿(弱堿性部分)3.利用生物堿鹽的溶解度差異進(jìn)行分離

利用某些生物堿（鹽）不溶或難溶于一般