3貝類產(chǎn)品中9種除草劑殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法本文件規(guī)定了貝類產(chǎn)品及其制品中莠去津、敵稗、環(huán)嗪酮、撲草凈、二甲戊靈、丙草胺、毒草胺、喹禾靈、乙草胺液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS-MS）測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于貝類產(chǎn)品及其制品中莠去津、敵稗、環(huán)嗪酮、撲草凈、二甲戊靈、丙草胺、毒草胺、喹禾靈、乙草胺的測(cè)定，莠去津、撲草凈檢出限為0.5μg/kg，敵稗、環(huán)嗪酮、二甲戊靈、丙草胺、毒草胺、喹禾靈、乙草胺檢出限為1μg/kg。2原理樣品中殘留的莠去津、敵稗、環(huán)嗪酮、撲草凈、二甲戊靈、丙草胺、毒草胺、喹禾靈、乙草胺用乙腈提取，提取液經(jīng)分散固相萃取凈化，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀以選擇離子監(jiān)測(cè)（MRM）方式檢測(cè)，外標(biāo)法定量。3試劑或材料除特別注明外，本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑均為分析純?cè)噭?，水為超純水，符合GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。3.1莠去津、敵稗、環(huán)嗪酮、撲草凈、二甲戊靈、丙草胺、毒草胺、喹禾靈、乙草胺標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥95%。3.2乙腈：色譜純。3.3甲醇：色譜純。3.4甲酸：色譜純。3.5氯化鈉：分析純。3.6無水硫酸鎂：分析純。3.7乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠（PSA）：粒徑40-60μm。3.8微孔濾膜（有機(jī)相）：13mm×0.22μm，或者相當(dāng)者。3.9標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（100mg/L）：確至0.0001g)，置于100mL容量瓶中用甲醇或乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻即得。制成100mg/L的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，避光-18℃及以下條件保存，有效期為1年。3.10標(biāo)準(zhǔn)工作液（1.0mg/L）準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1mL置100mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得到1.0μg/mL標(biāo)準(zhǔn)工作液，避光-18℃及以下條件保存，有效期為6個(gè)月。4儀器設(shè)備4.1液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀。4.2電子天平。4.3離心機(jī)。4.4超聲振蕩器。4.5渦旋混合器。5試樣的制備取絞碎后的供試樣品，作為供試試料，置-18℃冷凍保存，備用。另取空白樣品，絞碎后置-18℃冷凍保存，作為空白試料備用。6試驗(yàn)步驟6.1提取準(zhǔn)確稱取5.00g（精確到0.01g）樣品于50mL離心管中，準(zhǔn)確加入5mL乙腈，超聲振蕩提取30min后，加入0.5g氯化鈉，3.0g無水硫酸鎂，0.1gPSA粉，在4000r/min下離心10min，上清液過0.22μm有機(jī)相濾膜，待上機(jī)檢測(cè)。6.2測(cè)定6.2.1液相色譜條件色譜柱：VC-C18，2.1*100mm，2.5μm或相當(dāng)者柱溫：30℃流速：0.2mL/min進(jìn)樣量：5μL運(yùn)行時(shí)間：12min流動(dòng)相：A：0.1%甲酸水，B，乙腈，流動(dòng)相梯度見表1。表1流動(dòng)相的梯度洗脫程序00506.2.2質(zhì)譜條件a)離子化模式：正離子模式（ESI+）。b)質(zhì)譜掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）。c)氣簾氣：35psi。d)霧化氣：55psi。e)輔助氣：55psi。f)電噴霧電壓：5500V。g)離子源溫度：550℃定性、定量離子及對(duì)應(yīng)的錐孔電壓和碰撞電壓見附錄A。6.3液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測(cè)定6.3.1定性測(cè)定試樣中目標(biāo)化合物色譜峰的保留時(shí)間與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)色譜峰的保留時(shí)間相比較，變化范圍應(yīng)在±2.5%之每種化合物的質(zhì)譜定性離子應(yīng)出現(xiàn)，至少應(yīng)包括一個(gè)母離子和兩個(gè)子離子，而且同一檢測(cè)批次，對(duì)同一化合物，樣品中目標(biāo)化合物的兩個(gè)子離子的相對(duì)豐度比與濃度相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)溶液相比，其允許偏差不超過表2規(guī)定的范圍。表2定性測(cè)定時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差>50>20~50>10~206.3.2定量測(cè)定根據(jù)樣液中各化合物濃度，選定峰面積相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液及樣液中各化合物響應(yīng)值應(yīng)在儀器檢測(cè)線性范圍內(nèi)。6.4檢出限莠去津、撲草凈檢出限為0.5μg/kg，敵稗、環(huán)嗪酮、二甲戊靈、丙草胺、毒草胺、乙草胺、喹禾靈檢出限為1μg/kg。7結(jié)果計(jì)算結(jié)果按式(1)計(jì)算：式中：X—試樣中各化合物含量，單位為微克每千克(μg/kgc—從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上得到的被測(cè)組分溶液濃度，單位為納克每毫升（ng/mLV—定容體積，單位為毫升（mLm—試樣溶液所代表試樣的質(zhì)量，單位為克（g）。8精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)值不得超過算術(shù)平均值的10％。