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文檔簡介
血常規(guī)檢驗標準操作程序(1)標本用EDTA-K20.2ul抗凝靜脈血1ml,門診病人在CD-1700儀器上做三分類測定,住院病人在COULTER
HMX儀器上做五分類測定。(2)試劑及儀器COULTERHMX五分類血球分析儀及配套試劑,質(zhì)控用COULTER4CPLUS全血質(zhì)控品,COULTER
HMX五分類血分析儀及配套試劑,質(zhì)控用COULTER5C
全血質(zhì)控品。(血液細胞自動化分析儀介紹)(3)操作
1)門診:
a)收到血常規(guī)標本后,查看核對檢驗項目,立即編號,放混勻器上混勻3分鐘。
b)如有血型立即用玻片法和試管法測定血型,輸入電腦。
c)血標本在ABBOTCD-1700上檢測,結(jié)果入庫。
d)對于中間細胞比較多的應當手工涂片染色分類,對于血小板等圖形不好或結(jié)果異常較大的應手工復查。
e)結(jié)果核對后,在半小時內(nèi)報告。2)病房:
a)采集血常規(guī)標本后,立即編號,試管加蓋后放于專用試管架上放入HMX上自動混勻,
b)如有血型用玻片法和試管法測定血型,輸入電腦。
c)血標本在COULTERHMX上機檢測,結(jié)果入庫。
d)對于分類圖形不好的結(jié)果應當手工涂片染色分類,對于血小板等結(jié)果圖形不好或結(jié)果異常較大的應手工復查。(復查條件)結(jié)果核對后,簽發(fā)報告單。如果急診則電話報告,有血型的話,通知病房來拿報告單。(血液項目)(4)項目代號中文名單位WBC白細胞計數(shù)×109/LLY%(LY)淋巴細胞分類%MO%單核細胞分類%NE%(GR)中性粒細胞分類%LY#淋巴細胞計數(shù)×109/LMO#單核細胞計數(shù)×109/LNE#中性粒細胞計數(shù)×109/LRBC紅細胞計數(shù)×1012/LHGB血紅蛋白g/LHCT紅細胞壓積MCV平均紅細胞體積flMCH平均紅細胞血紅蛋白含量pgMCHC平均紅細胞血紅蛋白濃度g/LRDW紅細胞分布寬度PLT血小板計數(shù)×109/LMPV平均血小板體積flPCT血小板比積%PDW血小板分布寬度EO%嗜酸性細胞分類%BO%嗜堿性細胞分類%EO#嗜酸性細胞計數(shù)×109/LBO#嗜堿性細胞計數(shù)×109/L(5)特殊規(guī)定在檢驗血常規(guī)時,科室所有工作人員及同志如發(fā)現(xiàn)以下樣本結(jié)果過高或過低,務必做登記,復查和及時報告,以備查詢。
1.血紅蛋白低于100g/L.
2.白細胞低于3000/ul.
3.血小板低于8萬/ul.
4.發(fā)現(xiàn)白細胞分類異常圖形時.
5.發(fā)現(xiàn)其中一項過高時,或是臨床指定要鏡檢時.(6)臨床意義(6.1)WBC計數(shù)
參考范圍
4-10×
109/L
1、增加
(l)生理性:初生兒、妊娠末期、分娩期、經(jīng)期、飯后、劇烈運動后、冷水浴后及極度恐懼與疼痛等。
(2)病理性:大部分化膿性細菌所引起的炎癥、尿毒癥、嚴重燒傷、傳染性單核細胞增多癥、傳染性淋巴細胞增多癥、急性出血、組織損傷、手術創(chuàng)傷后、白血病等。
2.減少
病毒感染、傷寒、副傷寒、黑熱病、瘧疾、再生障礙性貧血、極度嚴重感染、X線及鐳照射、腫瘤化療后、非白血性白血病等。(6.2)白細胞分類計數(shù)參考范圍LY:18.7%~47%LY#:(1.0—3.3)×109/LMO:3.5%-7.9%MO#:(0.2—0.7)×109/LGR:46.0%一76.5%GR#:(1.8—6.4)×109/L1.增多(l)中性粒細胞:急性化膿感染、粒細胞白血病、急性出血、溶血、手術后、尿毒癥、酸中毒、急性汞中毒、急性鉛中毒等。(2)嗜酸性粒細胞:變態(tài)反應、寄生蟲病、某些皮膚病、某些血液病、手術后、燒傷等。(3)嗜堿性粒細胞:慢性粒細胞白血病、何杰金病、癌轉(zhuǎn)移、鉛及鉍中毒等。(4)淋巴細胞:百日咳、傳染性單核細胞增多癥、慢性淋巴細胞白血病、麻疹、腮腺炎、結(jié)核、傳染性肝炎等。(5)單核細胞:結(jié)核、傷寒、亞急性感染性心內(nèi)膜炎、瘧疾、黑熱病、單核細胞白血病、急性傳染病的恢復期等。2.減少(l)中性粒細胞:傷寒、副傷寒、瘧疾、流感、化學藥物中毒、X線和鐳照射、抗癌藥物化療、極度嚴重感染、再障、粒細胞缺乏等。(2)嗜酸性粒細胞:傷寒、副傷寒以及應用腎上腺皮質(zhì)激素后。(3)淋巴細胞:多見于傳染病急性期、放射病、細胞免疫缺陷等。(6.3)常見的異常白細胞形態(tài)的變化在外周血象中,除了各類白血病幼稚細胞外,通常能見到一些細胞形態(tài)上的異常變化。(6.3.1)中性粒細胞1.核象變化:反映中性粒細胞的成熟程度。正常血象中有少量桿狀核細胞出現(xiàn),它與分葉核細胞之間的比值約占1:13。(1)核左移:是指桿狀核細胞增多,常見于感染。如晚幼粒、中幼粒等細胞增多為核象極度左移,多見于類白血病反應或白血病。①伴白細胞總數(shù)增高的核左移:稱再生性左移,常見于急性化膿性感染,如大葉性肺炎等。②白細胞總數(shù)不增加或減低的核左移:稱退行性左移,常見于嚴重感染、機體抵抗力低下時,如傷寒、伴感染中毒性休克的敗血癥等。(2)核右移:是指不僅分葉核粒細胞增多,且分葉過多,常見4葉、5葉(正常時多分3葉),這是造血功能衰退或造血物質(zhì)缺乏的表現(xiàn)。常見于營養(yǎng)性巨幼細胞性貧血和使用抗代謝藥物后。此外,在疾病進行期突然出現(xiàn)核象右移,表示預后不良。2.毒性變化:嚴重感染、惡性腫瘤、各種重金屬或藥物中毒、大面積燒傷等癥時,中性粒細胞可出現(xiàn)形態(tài)變異。(l)細胞大小不均:為骨髓內(nèi)幼稚粒細胞發(fā)生不規(guī)則的分裂增殖所致。(2)毒性顆粒:胞漿中部分或全部顆粒變粗,著色深,顆粒的分布及大小不等??赡転橹行灶w粒成熟過程中發(fā)生變性所致。(3)空泡:可在胞漿或核中出現(xiàn),常為多個,被認為是細胞脂肪變性后未能著色所致。(4)Dohle體:腦漿內(nèi)出現(xiàn)嗜堿性點、線、梨形或云霧狀物質(zhì),可能為核漿發(fā)育不平衡所致,為細胞嚴重毒性變的表現(xiàn)。(5)核棘突:胞核有各種形態(tài)的芽狀突出,臨床意義尚不明確,可能與中毒、癌轉(zhuǎn)移、嚴重放射損傷等有關。
3.退行性變:表現(xiàn)為胞體腫大,結(jié)構模糊,邊緣不清。胞核可呈固縮、腫脹、破碎、溶解等變化,退行變可以是細胞衰老死亡的表現(xiàn)。(6.3.2)淋巴細胞淋巴細胞形態(tài)變異在多種疾病如各種病毒感染、傳染性單核細胞增多癥最為常見。此外,瘧疾、過敏性疾病、淋巴結(jié)炎等亦可見,統(tǒng)稱為異形淋巴細胞。傳染性單核細胞增多癥患者血液中常可出現(xiàn)3種異形淋巴細胞,即空泡型、不規(guī)則型和幼稚型。(6.4)血紅蛋白[參考值]
男:120~160g/L
女:110~150g/L(6.5)紅細胞分布寬度RDW為反映紅細胞體積異質(zhì)性的參數(shù),常以所測得紅細胞體積大小的變異系數(shù)(CV%)來表示。它比血涂片上紅細胞形態(tài)大小不均的觀察更為客觀、準確。
RDW增大時有臨床意義。(l)用于缺鐵性貧血(IDA)的診斷與療效觀察:
缺鐵性貧血時
RDW增大,尤其是MCV尚處于參考值范圍時(缺鐵性貧血時MCV應下降)RDW增大更是早期缺鐵的指征;MCV減小時,RDW增大更為顯著,當給予鐵劑治療有效時,
RDW將比給藥前更大,以后逐漸降至正常水平。產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因,主要是因補鐵后產(chǎn)生網(wǎng)織紅細胞,及正常紅細胞生成并釋放入血與給藥前的小紅細胞并存,故
RDW先增大,隨著正常紅細胞的增多和小紅細胞的減少,
RDW便逐漸降至參考范圍。(2)用于小細胞低色素性貧血的鑒別診斷:
IDA和輕型地中海性貧血時,MCV均可減小。但IDA時
RDW增大,而輕型地中海性貧血時
RDW正常。(3)用于貧血的分類(Bessman分類法):
MCV只能反映紅細胞平均體積的大小,不能代表紅細胞體積大小的異質(zhì)性,對紅細胞體積大小的評價,過去靠血涂片上紅細胞形態(tài)的觀察,這種觀察常受血涂片制作以及觀察者的主觀因素的影響較大,而且不能定量,RDW能較好地反映紅細胞體積的異質(zhì)性,把
MCV和
RDW結(jié)合用于對貧血的分類將更為完善(表
l—l—2)。表
l-1-2BessmanMCV/RDW貧血分類類別MCVRDW正
?!辫F性貧血↓↑巨幼細胞性貧血↑↑溶血性貧血↑↑鐵粒幼細胞貧血→↑再生障礙性貧血→→單純小細胞性貧血↓→注:→無變化;↑增大;↓減少(6.6)平均血小板體積MPV的臨床意義要結(jié)合
PLT變化才有價值。(1)鑒別血小板減少的原因:①當骨髓造血功能損傷致血小板減少時,
MPV減少;②當血小板在周圍血液中破壞增多時,導致血小板減少,
MPV增大;③血小板分布異常致血小板減少時,MPV正常。(2)MPV增大可作為骨髓造血功能恢復的較早期指征:骨髓造血功能衰竭時,MPV與
PLT同時持續(xù)下降;造血功能抑制越嚴重,功能恢復時,MPV增大常先于
PI。T升高。
MPV越??;當造血(3)其他方面應用:①
MPV增大:見于骨髓纖維化、原發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)、血栓性疾病及血栓前狀態(tài)、脾切除、慢粒、巨大血小板綜合征、鐮刀細胞性貧血等。②
MPV減?。阂娪谄⒖骸⒒熀?、再障、巨幼細胞性貧血等。(6.7).血小板比積(plateletcrit,PCT)參考范圍男
0.108%
-0.272%女
0.114%一0.282%PCT與
PLT和
MPV正相關,所以PLT、MPV的增減均可使
PCT發(fā)生變化。增高:見于骨髓纖維化、脾切除、慢粒等。減低:見于再障、化療后、血小板減少癥等。(6.8)血小板體積分布寬度(plateletvolumedistributionwidth,PDW)參考范圍0.155-0.181(15.5%-18.1%)(以血小板體積變異系數(shù)
CV%表示)PDW是反映血小板體積大小的異質(zhì)性參數(shù)。增大:急非淋化療后、巨幼細胞性貧血、慢粒、脾切除、巨大血小板綜合征、血栓性疾病等。
(6.9)血細胞體積分布直方圖的應用(l)紅細胞體積分布直方圖:將
MCV和RDW配合直方圖分析,可直接觀察紅細胞體積的分布情況。①只現(xiàn)一個峰:見于正常人、缺鐵性貧血(峰左移)、巨幼細胞性貧血(峰右移)。②可出現(xiàn)兩個峰:缺鐵性貧血給予鐵劑治療有效時,可出現(xiàn)一個小紅細胞峰和另一個幼紅細胞(或網(wǎng)織紅細胞)峰。巨幼(紅)細胞性貧血給予葉酸、維生素
Bl2治療有效時亦可見兩個峰。(2)白細胞體積分布直方圖:靜脈血比毛細血管白細胞數(shù)量略低。中檔的血細胞分析儀一般為三分群,它是根據(jù)加入溶血劑后,白細胞膜通透性改變而發(fā)生皺縮,不同類型的白細胞皺縮后體積有明顯差別,每個皺縮白細胞通過血細胞分析儀的微孔時產(chǎn)生的脈沖信號經(jīng)放大、甄別后,微機處理數(shù)據(jù)得到其體積分布直方圖。淋巴細胞群為35—90fI大小中間細胞群為90一160fl大小粒細胞群為160—450fI大小三群細胞的百分比與白細胞數(shù)量的乘積為其絕對數(shù)正常人白細胞體積分布直方圖,可見兩個明顯分離的峰,左峰為小細胞群(淋巴細胞),右峰為大細胞群(粒細胞),兩峰之間為中間細胞群的分布。急性白血病時,由于異常的原始、幼稚細胞增多,可見中間細胞明顯增高,這時直方圖上見一個峰,峰值常在90一160fl之間。這時必須推片染色鏡檢。(3)血小板體積分布直方圖:正常人血小板體積主要分布在2—20fl之間,21—30fI之間有少量大血小板,一般儀器以30fI為最大的分析指標。血小板體積增大時,直方圖會出現(xiàn)明顯拖尾現(xiàn)象。有小紅細胞或紅細胞碎片干擾時,直方圖尾部會抬高。(6.10)三種紅細胞參數(shù)平均值的計算1、原理根據(jù)紅細胞、血紅蛋白濃度和紅細胞比積,計算紅細胞平均容量、紅細胞平均血紅蛋白量、紅細胞平均血紅蛋白濃度,用作貧血的形態(tài)學分類。2、計算方法(1)平均紅細胞體積(meancorpuscularvolume,
MCV):是指每個紅細胞的平均體積,以飛升(fI)為單位。(2)平均紅細胞血紅蛋白含量(meanCorpuscularhemoglobin,MCH):是指每個紅細胞內(nèi)所含血紅蛋白的平均量,以皮克(pg)為單位。(3)平均紅細胞血紅蛋白濃度(meanCorpuscularhemoglobinconcentration,MCHC):是指平均每
L紅細胞中所含血紅蛋白濃度(g/L)。3、臨床意義正常人和各型貧血時紅細胞平均參考值表平均值MCH(pg)MCV(fl)MCHC(g/L)正常27-3182-95320-360大細胞性貧血↑↑-正常細胞性貧血---單純小細胞性貧血↓↓-小細胞低色素性貧血↓↓↓注:-
正常;↑增大;↓減少(6.11)紅細胞參數(shù)1、紅細胞(redbloodceII,RBC)男
(4.0-5.5)×1012/L女
(3.5-5.0)×1012/L2、血紅蛋白(hemoglobin,HGB)男
120一160g/L女
l10-150g/L3、紅細胞比積(hematocrit,HCT)男
0.40—0.50(40%一50%)女
0.35—0.45(35%一45%)尿常規(guī)標準操作程序(1)尿液標本處理[收集]1.應留取新鮮尿,以清晨第一次尿為宜,較濃縮,條件恒定,便于對照。急診患者可隨時留取。2.使用清潔有蓋容器(一次性容器為好)。3.容器上應貼上檢驗條碼。4.尿標本應避免經(jīng)血、白帶、精液、糞便等混入。此外,還應注意避免煙灰、糖紙等異物混入。5.標本留取后,應及時送驗,以免細菌繁殖、細胞溶解等。6.尿膽原等化學物質(zhì)可因光分解或氧化而減弱。[防腐與保存]1.冷藏:防腐劑隨檢驗目的而定,一般放4℃冰箱可保存6h。2.甲醛:用于管形、細胞的防腐,按400g兒甲醛0.5ml/100ml尿加入。由于甲醛具有還原性,不適于尿糖等化學成分檢查。3.甲苯(或二甲苯):用于尿糖、尿蛋白的防腐,按甲苯0.5ml/100m1尿加入。4.麝香草酚:用于檢查尿中化學成分及細菌的防腐劑,每100ml加入<0.18。[標本處理]收到門診標本后,核對檢驗項目后,倒入普通長試管內(nèi)。液面距管中約1cm收到病房標本后,核對檢驗項目后,倒入普通長試管內(nèi)約10ml。液面距管中約1cm,放于UF-100專用試管架上。[檢驗后處理]標本檢驗后,必須經(jīng)過消毒處理后才能排放入下水道內(nèi)。所用盛尿容器及試管等須經(jīng)30~50g兒漂白粉澄清液或10g/L次氯酸鈉液中浸泡2h,也可用5g/L過氧乙酸浸泡30~60min,再用清水沖洗干凈。(2)常規(guī)檢查(一)尿量隨氣候、出汗量、飲水量等不同而異,一般健康成人約為1.0—1.5L/24h,即1m1/(h/kg體重);小兒按k8體重計算尿量較成人多3—4倍。(二)顏色根據(jù)尿的顏色進行報告:淡黃色、深黃色、褐黃色、紅色、乳白色、深紅如濃茶、紅茶色、乳白色(三)透明度分為透明、微渾、渾濁、明顯渾濁、乳糜狀等。(3)生化檢查[儀器及試劑]儀器盈東URISCAN試劑盈東尿十一聯(lián)試紙[操作]把試紙條全部浸沒于尿液中約3~5秒后,取出放于盈東URISCAN的試紙條架上測定。(4)尿沉渣檢查1)非染色尿沉渣鏡檢(門診)1.取刻度離心管,倒入混合后的新鮮尿液10ml,1500r/min離心5min。2.待離心停止后,取出離心管,棄去上層清液,留下0.2m1沉渣,輕搖離心管,使尿沉渣有形成分充分混勻。3.取尿沉渣0.02m1,滴在載玻片上,用18mm×18mm的蓋玻片覆蓋。4、結(jié)果判斷尿沉渣鏡檢觀察,用10×10鏡頭,觀察其中有形成分的全貌及管型。用10×40鏡頭觀察鑒定細胞成分和計算數(shù)量,應觀察10個視野所見最低和最高值,記錄結(jié)果。管型用低倍鏡鑒定,但計數(shù)數(shù)量應低倍鏡觀察20個視野,算出一個視野的平均值,記錄結(jié)果。2)UF-100尿沉渣分析(病房)在尿生化檢查完成后,立即把試管架放于UF-100的進架儀上,進行尿沉渣分析。如果結(jié)果發(fā)現(xiàn)以下情況者應手工鏡檢。(鏡檢條件)3)特殊規(guī)定在檢驗尿常規(guī)時,所有工作人員及進修實習同志,如發(fā)現(xiàn)以下情況者,當用顯微鏡進行復檢,登記備查.1.未用
UF-100尿沉渣分析時所有樣本必須做鏡檢.2.尿常規(guī)如發(fā)現(xiàn)尿干化學和尿沉渣結(jié)果發(fā)生偏差.3.尿UF-100正常,但尿蛋白為陽性或尿NIT為陽性時.4.尿干化學和尿UF-100均正常,但病人是腎科或泌尿科時.5.其他臨床指定必須鏡檢的.(5)臨床意義1)顏色正常尿液因含尿色素可呈淡黃色,尿液濃縮時,顏色可呈深黃色,并受某些食物及藥物的影響。病理性尿色可呈褐黃色、紅色、乳白色等,均應報告。尿色深紅如濃茶樣見于膽紅素尿;紅茶色見于血尿、血紅蛋白尿;乳白色可能為乳糜尿、膿尿。2)尿量增多見于:1.生理性:飲水過多,飲濃茶、咖啡及酒精類或精神緊張等。2.病理性:常見于糖尿病、尿崩癥、慢性腎炎及神經(jīng)性多尿等。減少見于:1.生理性:飲水少、出汗多等。2.病理性:常見于休克、脫水、嚴重燒傷、急慢性腎炎、心功能不全、肝硬化腹水等。流行性出血熱少尿期、尿毒癥、急慢性腎功能衰竭等。3)非染色尿沉渣鏡檢(1).尿內(nèi)白細胞增加,表示泌尿系統(tǒng)有化膿性炎癥。紅細胞增加,常見于腎小球腎炎、泌尿系結(jié)石、結(jié)核或惡性腫瘤。(2).透明管型可偶見于正常人清晨濃縮尿中;當有輕度或暫時性腎或循環(huán)功能改變時,尿內(nèi)可有少量透明管型;在腎實質(zhì)性病變?nèi)缒I小球腎炎時,可見較多的顆粒管型。(3).紅細胞管型的出現(xiàn)常見于急性腎小球腎炎等。顆粒管型的出現(xiàn),提示腎單位有淤滯的現(xiàn)象。脂肪管型的出現(xiàn),見于慢性腎炎腎病型及類脂性腎病。(4).在慢性腎功能不全時,尿內(nèi)出現(xiàn)腎衰竭管型,提示預后不良。(5).蠟樣管型的出現(xiàn)提示腎臟有長期而嚴重的病變,見于慢性腎小球腎炎的晚期和腎淀粉樣變時。打破常規(guī)標準操作程序(1)標本采集1.采集糞便標本的方法因檢查目的不同而有差別,如一般檢驗留取新鮮指頭大小(約5g)即可,放入干燥、清潔、無吸水性的有蓋容器內(nèi)送檢,標本容器最好用內(nèi)層涂蠟的硬紙盒,便于檢查后焚毀。血吸蟲毛蝴孵化則留全量新鮮便(不少于30g)。細菌檢查的糞便標本應收集于滅菌封口的容器內(nèi),勿混入消毒劑及其他化學藥品。2.檢查蟯蟲卵需要用軟玻璃紙拭子,在清晨排便前由肛門四周拭取標本,也可用棉拭子拭取,但均須立即鏡檢。3.檢查阿米巴滋養(yǎng)體,應于排便后立即檢查。冬季需采取保溫措施,迅速送檢。4.不應該采取尿壺或便盆中的糞便標本。若標本中混入尿液,可使柔弱的原蟲致死。用白明膠膜法檢查糞便中的胰蛋白酶活性時,可因尿液中存在溶解白明膠的物質(zhì)而導致其檢查結(jié)果錯誤的增高。糞便標本中也不可混入植物、泥土、污水等,因腐生性原蟲、真菌孢子、植物種子、花粉易混淆實驗結(jié)果。5.盛糞便標本的容器必須有蓋,有明顯標記。糞便標本應選擇其中膿血黏液等病理成分,若無病理成分,可多部位取材。采取標本后,應在一小時內(nèi)完成檢查,否則可因9H及消化酶等影響,而使糞便中細胞成分破壞分解。6.檢查膽石、胰石、寄生蟲體及蟲卵計數(shù),應收集24h糞便送驗。7.隱血試驗,應囑患者收集標本前3日禁食動物性食物。連續(xù)檢查3天,并選取外表及內(nèi)層糞便。收集標本后須迅速進行檢查,以免因長時間放置使隱血反應的敏感度降低。8.糞膽原定量檢查應收集二天的糞便,混合稱量,從其中取出約20g送驗。查膽汁成分的糞便標本不應在室溫中長時間放置,以免陽性率降低。9.脂肪定量檢查時,應先食定量脂肪食,每天進食脂肪50—1508,連續(xù)6天。從第三天起,收集72h糞便,也可定時口服色素(剛果紅),作為留取糞便的指示劑,將收集的糞便混合稱量,從中取出608左右送檢。簡易法為在正常膳食情況下,收集24h的全部糞便,混合稱量,從其中取出約60g送檢,測脂肪含量。10.細菌檢驗用標本應全部用無菌操作收集。(2)常規(guī)檢驗1)顏色可根據(jù)觀察所見報告,如黃色、褐色、土灰色、綠色、紅色、柏油樣等。正常糞便因糞膽素而呈棕黃色,但可因飲食、藥物或病理原因影響而改變糞便顏色。灰白色見于鋇餐后、服硅酸鋁、阻塞性黃疸、膽汁減少或缺乏。綠色見于食用含葉綠素的蔬菜后及含葉綠素時。紅色見于下消化道出血、食用西紅柿、西瓜等。柏油樣便見于上消化道出血等。醬色常見于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等
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