第41講動(dòng)物細(xì)胞工程1．（2023·全國(guó)）克隆猴“中中”和“華華”登上學(xué)術(shù)期刊《細(xì)胞》封面，表明我國(guó)的克隆技術(shù)再次走在世界前列?！爸兄小焙汀叭A華”的誕生成功證明了（）A．動(dòng)物細(xì)胞的全能性 B．動(dòng)物細(xì)胞的再生能力C．動(dòng)物細(xì)胞核的全能性 D．動(dòng)物細(xì)胞的分化能力【答案】C【分析】全能性是指?jìng)€(gè)體某個(gè)器官或組織已經(jīng)分化的細(xì)胞在適宜的條件下再生成完整個(gè)體（或分化為各種細(xì)胞）的潛力。全能性原因：已分化的細(xì)胞都含有該物種所特有的全套的遺傳信息，都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部基因?！驹斀狻扛叨确只膭?dòng)物細(xì)胞，從整個(gè)細(xì)胞來說，它的全能性受到限制，但它的細(xì)胞核仍保持著全能性，因?yàn)榧?xì)胞核內(nèi)含有保持物種遺傳性狀所需要的全套遺傳物質(zhì)?！爸兄小焙汀叭A華”就是用乳腺細(xì)胞的細(xì)胞核與去核卵細(xì)胞重組形成的一個(gè)細(xì)胞發(fā)育而成的，這證明動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。故選C。2．（2023秋·湖北·高三荊州中學(xué)校聯(lián)考階段練習(xí)）小鼠作為一種與人類基因組序列相似度較高的哺乳動(dòng)物，常用于人類某些疾病的研究。小鼠胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)過程如圖所示，下列敘述錯(cuò)誤的是（

）

A．胚胎干細(xì)胞具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型細(xì)胞的潛能B．體外培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞需提供的氣體環(huán)境是95%的CO2和5%的空氣C．圖中胚胎干細(xì)胞分化后的組織移入小鼠替代病變器官屬于治療性克隆D．圖中重組細(xì)胞重編程、分裂、分化最終產(chǎn)生的小鼠與患病鼠性狀相似【答案】B【分析】胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。特點(diǎn)：具有胚胎細(xì)胞的特性，體積較小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物任何一種組織細(xì)胞。另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細(xì)胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行某些遺傳改造?！驹斀狻緼、胚胎干細(xì)胞有全能性，具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型細(xì)胞的潛能，A正確；B、體外培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞需提供的氣體環(huán)境是95%的空氣和5%的CO2，B錯(cuò)誤；C、圖中胚胎干細(xì)胞分化后的組織移入小鼠替代病變器官屬于治療性克隆，C正確；D、圖中重組細(xì)胞重編程、分裂、分化最終產(chǎn)生的小鼠與患病鼠性狀相似，因?yàn)榧?xì)胞核來自患病鼠，D正確。故選B。3．（2023秋·遼寧·高三校聯(lián)考開學(xué)考試）精準(zhǔn)爆破腫瘤細(xì)胞的“生物導(dǎo)彈”——ADC（抗體偶聯(lián)藥物）能對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行選擇性殺傷，該物質(zhì)由抗體（導(dǎo)彈體）、藥物（核彈頭）和接頭三部分組成，ADC的作用機(jī)制如圖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A．ADC的制備過程運(yùn)用了細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù)B．獲得制備ADC中足夠數(shù)量的抗體需經(jīng)過多次篩選C．ADC能精準(zhǔn)地識(shí)別腫瘤細(xì)胞，進(jìn)入癌細(xì)胞需要消耗ATPD．癌細(xì)胞的凋亡是由于溶酶體中水解酶的水解作用【答案】D【分析】單克隆抗體的制備過程：（1）制備產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取?！驹斀狻緼、ADC是抗體與藥物的偶聯(lián)物，其制備過程運(yùn)用了細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù)，A正確；B、制備ADC中的抗體為單克隆抗體，至少涉及兩次篩選，第一次是利用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行初步篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次是利用克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)的方法篩選出既能大量增殖，又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，獲得制備ADC中足夠數(shù)量的抗體需經(jīng)過多次篩選，B正確；C、ADC能精準(zhǔn)地識(shí)別腫瘤細(xì)胞，進(jìn)入癌細(xì)胞為胞吞，需要消耗ATP，C正確；D、結(jié)合圖示可知，癌細(xì)胞的凋亡是由于溶酶體中水解酶將藥物與抗體水解，釋放藥物，藥物將癌細(xì)胞裂解，D錯(cuò)誤。故選D。4．（2023秋·江西·高三校聯(lián)考階段練習(xí)）下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，正確的是（

）A．動(dòng)物細(xì)胞融合可以直接用PEG處理，植物細(xì)胞不能直接用PEG處理B．細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)可提高單個(gè)細(xì)胞初生代謝物的含量C．莖尖組織培養(yǎng)得到的脫毒苗可以抵抗病毒侵染D．動(dòng)植物組織經(jīng)胰蛋白酶處理成為單個(gè)細(xì)胞后才能進(jìn)行培養(yǎng)【答案】A【分析】1、植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性，屬于無性生殖。2、動(dòng)物細(xì)胞融合不同于植物細(xì)胞融合的方法是滅活的病毒?！驹斀狻緼、植物體細(xì)胞雜交過程中，需先用酶解法去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體后，才可以用PEG處理，進(jìn)行原生質(zhì)體的融合，所以動(dòng)物細(xì)胞融合可以直接用PEG處理，植物細(xì)胞融合不能直接用PEG處理，A正確；B、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)無法提高單個(gè)細(xì)胞初生代謝物的含量，但可以通過培養(yǎng)得到更多細(xì)胞從而提高初生代謝物的總量，B錯(cuò)誤；C、脫毒苗病毒含量少，甚至沒有病毒，但不一定能抵抗病毒，C錯(cuò)誤；D、動(dòng)物組織經(jīng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理成為單個(gè)細(xì)胞后才能進(jìn)行培養(yǎng)，植物組織培養(yǎng)時(shí)不需要用胰蛋白酶處理，D錯(cuò)誤。故選A。5．（2023春·全國(guó)·高二課堂例題）Ca2+水平升高可直接或通過激活重構(gòu)胚使處于MII期的卵母細(xì)胞恢復(fù)分裂周期。由于持續(xù)高水平的成熟促進(jìn)因子（MPF，一種蛋白激酶）存在，MII期的卵母細(xì)胞不能進(jìn)入末期。下列相關(guān)分析錯(cuò)誤的是（

）A．自然受精過程中，精子入卵可能促進(jìn)了卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中Ca2+水平升高B．在核移植過程中，通過電融合法可使供體細(xì)胞與去核卵母細(xì)胞融合形成重構(gòu)胚C．Ca2+載體法可激活重構(gòu)胚是因?yàn)檩d體促進(jìn)了Ca2+從膜外向膜內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)D．蛋白酶合成抑制劑可通過抑制MPF的合成使重構(gòu)胚保持休眠【答案】D【分析】將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞，通過電刺激使兩細(xì)胞融合，供體細(xì)胞進(jìn)入受體卵母細(xì)胞內(nèi)構(gòu)建重組胚胎，通過物理或化學(xué)方法（如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等）激活受體細(xì)胞?！驹斀狻緼、由題可知，能使鈣離子水平升高的機(jī)制都可以激活重構(gòu)胚，而重構(gòu)胚是促進(jìn)卵母細(xì)胞分裂的，精子的進(jìn)入也是促進(jìn)卵母細(xì)胞分裂的，故精子的進(jìn)入促進(jìn)鈣離子內(nèi)流，提高細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中鈣離子水平；A正確；B、因?yàn)轶w細(xì)胞直接注入進(jìn)去后細(xì)胞質(zhì)并沒有與卵母細(xì)胞融合，而是被質(zhì)膜分割開來，并不能使體細(xì)胞核表現(xiàn)出全能性，所以需要電刺激使其質(zhì)膜融合，B正確；C、精子的進(jìn)入卵母細(xì)胞可促進(jìn)其分裂，而精子的進(jìn)入促進(jìn)鈣離子內(nèi)流，提高了卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中鈣離子水平；題干信息鈣離子水平升高可直接或通過激活重構(gòu)胚使處于MII期的卵母細(xì)胞恢復(fù)分裂周期；故Ca2+載體法可激活重構(gòu)胚是因?yàn)檩d體促進(jìn)了Ca2+從膜外向膜內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)；C正確；D、由題意可知，持續(xù)高水平的成熟促進(jìn)因子（MPF）存在，導(dǎo)致MII期的卵母細(xì)胞不能進(jìn)入末期，因此蛋白酶合成抑制劑可通過抑制MPF的合成使重構(gòu)胚激活，D錯(cuò)誤。故選D。6．（2023春·全國(guó)·高二課堂例題）細(xì)胞工程中，選擇合適的生物材料是成功的關(guān)鍵。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．選擇植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理可獲得有用的突變體B．選擇去核的卵母細(xì)胞作為核受體進(jìn)行核移植可提高克隆動(dòng)物的成功率C．選擇高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)有利于獲得大量的細(xì)胞D．選擇一定大小的植物莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗【答案】C【分析】1、動(dòng)物細(xì)胞核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為克隆個(gè)體。2、選用去核卵（母）細(xì)胞的原因：卵（母）細(xì)胞大，容易操作；卵（母）細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)豐富；含有促使細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)。3、植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斀狻緼、愈傷組織細(xì)胞處于分生狀態(tài)，易受外界環(huán)境因素影響，因此選擇植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理，再進(jìn)行人工選擇，可獲得優(yōu)質(zhì)的突變體，A正確；B、卵細(xì)胞中含有促進(jìn)全能性表達(dá)的物質(zhì)，因此擇去核的卵細(xì)胞作為核受體進(jìn)行核移植可提高克隆動(dòng)物的成功率，B正確；C、高度分化的細(xì)胞已經(jīng)失去分裂能力，因此選擇高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)不利于獲得大量細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、莖尖等分生區(qū)組織幾乎不含病毒，因此選擇一定大小的植物莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗，D正確。故選C。7．（2023春·全國(guó)·高二課堂例題）絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤細(xì)胞分泌的一種糖蛋白。研究人員利用HCG免疫健康小鼠，制備了用于早孕診斷的HCG單克隆抗體。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．早孕診斷的原理是單克隆抗體與HCG特異性結(jié)合B．與一般的血清抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備C．制備單克隆抗體的過程中有兩次篩選，第二次篩選的目的是為了獲得雜交瘤細(xì)胞D．單抗制備過程中主要運(yùn)用的細(xì)胞工程技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合【答案】C【分析】單克隆抗體的制備過程是：首先利用已免疫的B淋巴細(xì)胞和小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，再通過特定的選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細(xì)胞，然后再通過細(xì)胞培養(yǎng)用專一抗體檢測(cè)篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。該雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，因此利用符合要求的雜交瘤細(xì)胞再進(jìn)行體外培養(yǎng)或體內(nèi)培養(yǎng)獲得單克隆抗體?！驹斀狻緼、單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高，可以與HCG特異性結(jié)合，依據(jù)該原理，可用作早孕診斷，A正確；B、一般的血清抗體針對(duì)性不強(qiáng)，與一般的血清抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備，B正確；C、對(duì)雜交細(xì)胞一般要進(jìn)行兩次篩選，第一次篩選是用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選的方法為專一抗體檢測(cè)陽性和克隆化培養(yǎng)，最終獲得的雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖，C錯(cuò)誤；D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的用途是制備單克隆抗體，D正確。故選C。8．（2023春·廣西·高二校聯(lián)考階段練習(xí)）人肌紅蛋白(Myo)是早期診斷急性心肌梗塞的生化標(biāo)志物之一。為制備抗Myo的單克隆抗體，科研人員通過細(xì)胞工程技術(shù)獲得雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，獲取上清液進(jìn)行抗體陽性檢測(cè)，檢測(cè)原理如圖所示。以下說法錯(cuò)誤的是（

）

A．將能表達(dá)Myo基因的細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，用于制備抗Myo的單克隆抗體B．單克隆抗體的制備解決了血清抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差的問題C．抗體檢測(cè)過程中，將人肌紅蛋白作為抗原固定D．根據(jù)是否顯色來判斷是否有抗Myo的單克隆抗體產(chǎn)生【答案】A【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。【詳解】A、已免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合制備單克隆抗體，表達(dá)Myo基因的細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，不能制備抗Myo的單克隆抗體，A錯(cuò)誤；B、單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)勢(shì)在于特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備，B正確；C、而抗原和抗體的結(jié)合具有特異性，故利用人肌紅蛋白作為抗原固定來檢測(cè)抗體，C正確；D、酶標(biāo)抗體可與待檢測(cè)抗體結(jié)合，且攜帶的酶可與相應(yīng)底物反應(yīng)顯色，因此根據(jù)是否顯色來判斷是否有抗Myo的單克隆抗體產(chǎn)生，D正確。故選A。9．（2023·全國(guó)·校聯(lián)考一模）已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基蝶呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但其一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但其能不斷分裂增殖。如圖是科研人員為制備抗新冠病毒單克隆抗體而設(shè)計(jì)的流程圖。下列敘述正確的是（）

A．圖中過程①獲得的淋巴細(xì)胞都能產(chǎn)生抗新冠病毒的抗體B．過程③使用的HAT培養(yǎng)基中要有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等，通常還需加入血清等天然成分；除此之外，還必須加入動(dòng)物激素C．可分別從④的各個(gè)小室中提取抗體，與新冠病毒混合，出現(xiàn)陰性反應(yīng)的小室中的細(xì)胞就是所需的雜交瘤細(xì)胞D．制備的單克隆抗體可以用于新冠病毒的檢測(cè)，利用了抗原抗體特異性結(jié)合的原理【答案】D【分析】在制備單克隆抗體時(shí)，首先要給小鼠注射相應(yīng)抗原，產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，然后將漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)過選擇培養(yǎng)基兩次篩選，最后獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。在單克隆抗體的制備過程中，使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合等動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)?！驹斀狻緼、圖中過程①獲得的淋巴細(xì)胞不都能產(chǎn)生抗新冠病毒的抗體，A錯(cuò)誤；B、過程③使用的HAT培養(yǎng)基中要有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等，通常還需加入血清等天然成分；該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，還需要加入氨基蝶呤以抑制骨髓瘤細(xì)胞的D途徑，使培養(yǎng)基中只有雜交瘤細(xì)胞能增殖，B錯(cuò)誤；C、④過程是篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，可分別從各個(gè)小室中提取抗體，與新冠病毒混合，出現(xiàn)抗原抗體雜交帶（陽性）的小室中的細(xì)胞就是所需的雜交瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、抗體能與引起它產(chǎn)生的抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)，制備的單克隆抗體可以用于新冠病毒的檢測(cè)，就是利用了抗原抗體能發(fā)生特異性結(jié)合的原理，D正確。故選D。10．（2023秋·北京·高三北京二中校考階段練習(xí)）科研工作者利用禽流感病毒蛋白制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)禽流感病毒，經(jīng)分離純化獲得抗原蛋白B．多次注射適宜濃度的抗原免疫小鼠，以獲得更多的漿細(xì)胞C．將單個(gè)雜交瘤細(xì)胞接種到小鼠腹腔培養(yǎng)可獲得多種單克隆抗體D．為達(dá)到預(yù)防禽流感的目的，需向未患病家禽注射所得抗體【答案】B【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斀狻緼、禽流感病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，不能獨(dú)立代謝，因此不能用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)禽流感病毒，A錯(cuò)誤；B、由于二次免疫會(huì)產(chǎn)生更多的記憶細(xì)胞和抗體，因此多次注射適宜濃度的抗原免疫小鼠，可以獲得更多的記憶細(xì)胞形成的漿細(xì)胞，再由漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，最后由雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生大量的單一抗體，屬于單克隆抗體，B正確；C、一個(gè)雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，因此將單個(gè)雜交瘤細(xì)胞接種到小鼠腹腔培養(yǎng)只能獲得一種單克隆抗體，C錯(cuò)誤；D、為達(dá)到預(yù)防禽流感的目的，需向未患病家禽注射相應(yīng)的抗原制成的疫苗，使其產(chǎn)生主動(dòng)免疫，而注射抗體屬于被動(dòng)免疫，常用于免疫治療，D錯(cuò)誤。故選B。11．（2023春·全國(guó)·高二課堂例題）將Oct3/4、Sox2、c-Myc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞后，置于培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。2~3周后，細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)出與ES細(xì)胞類似的形態(tài)和活躍分裂能力，這樣的細(xì)胞稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．從獲取途徑看，iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞B．體細(xì)胞轉(zhuǎn)化成的iPS細(xì)胞用于自身疾病的治療，有低免疫排斥的優(yōu)點(diǎn)C．欲驗(yàn)證iPS細(xì)胞的產(chǎn)生是由于外源基因的作用，應(yīng)設(shè)置不轉(zhuǎn)入外源基因的對(duì)照組D．欲比較上述4種基因誘導(dǎo)iPS細(xì)胞時(shí)作用的大小，應(yīng)設(shè)置分別轉(zhuǎn)入1種基因的四個(gè)實(shí)驗(yàn)組和同時(shí)轉(zhuǎn)入4種基因的對(duì)照組【答案】D【分析】胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造?！驹斀狻緼、由于iPS細(xì)胞具有活躍的分裂能力，故iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞，A正確；B、體細(xì)胞轉(zhuǎn)化成的iPS細(xì)胞用于自身疾病的治療，為自身細(xì)胞，因此有低免疫排斥的優(yōu)點(diǎn)，B正確；C、欲驗(yàn)證iPS細(xì)胞的產(chǎn)生是由于外源基因的作用，自變量為是否含有外源基因，應(yīng)設(shè)置不轉(zhuǎn)入外源基因的對(duì)照組，C正確；D、欲比較上述4種基因誘導(dǎo)iPS細(xì)胞時(shí)作用的大小，應(yīng)設(shè)置分別轉(zhuǎn)入1種基因的四個(gè)實(shí)驗(yàn)組和不轉(zhuǎn)入4種基因的對(duì)照組，D錯(cuò)誤。故選D。12．（2023春·全國(guó)·高二課堂例題）下圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是（）

A．步驟①操作不需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行B．步驟②用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離C．步驟③到④常用胰蛋白酶處理D．步驟④培養(yǎng)中，細(xì)胞之間相互接觸能促進(jìn)細(xì)胞的分裂【答案】C【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)?！驹斀狻緼、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要無菌操作，故步驟①的操作需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動(dòng)物組織，分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，B錯(cuò)誤；C、傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，再分瓶培養(yǎng)，故步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理，C正確；D、步驟④為傳代培養(yǎng)過程，在該過程中，貼壁細(xì)胞會(huì)發(fā)生接觸抑制細(xì)胞分裂的現(xiàn)象，D錯(cuò)誤。故選C。13．（2023·遼寧·統(tǒng)考高考真題）大量懸浮培養(yǎng)產(chǎn)流感病毒的單克隆細(xì)胞，可用于流感疫苗的生產(chǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．懸浮培養(yǎng)單克隆細(xì)胞可有效避免接觸抑制B．用于培養(yǎng)單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)基通常需加血清C．當(dāng)病毒達(dá)到一定數(shù)量時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的增殖D．培養(yǎng)基pH不會(huì)影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量【答案】D【分析】培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞使用合成培養(yǎng)基時(shí)需要加入血清等一些天然成分，必須保證環(huán)境是無菌、無毒的，培養(yǎng)液還需要定期更換。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。細(xì)胞貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上稱為細(xì)胞貼壁，貼壁細(xì)胞在生長(zhǎng)增殖時(shí)會(huì)發(fā)生接觸抑制的現(xiàn)象?！驹斀狻緼、懸浮培養(yǎng)單克隆細(xì)胞，可以保證足夠的氣體交換，通過振蕩或轉(zhuǎn)動(dòng)裝置使細(xì)胞始終處于分散懸浮于培養(yǎng)液內(nèi)，可有效避免接觸抑制，A正確；B、由于細(xì)胞的生長(zhǎng)是比較復(fù)雜的過程，血清中含有一些必須的因子，用于培養(yǎng)單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)基通常需加血清，B正確；C、病毒借助于細(xì)胞進(jìn)行繁殖，利用了活細(xì)胞的物質(zhì)、能量、酶等，當(dāng)病毒達(dá)到一定數(shù)量時(shí)細(xì)胞的生命活動(dòng)受到影響，會(huì)影響細(xì)胞的增殖，C正確；D、細(xì)胞的正常生命活動(dòng)需要適宜的pH，培養(yǎng)基pH會(huì)影響細(xì)胞代謝，進(jìn)而影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量，D錯(cuò)誤。故選D。14．（2023秋·福建龍巖·高三上杭一中?？茧A段練習(xí)）Graves?。℅D）可導(dǎo)致甲狀腺功能亢進(jìn)。研究發(fā)現(xiàn)，GD患者甲狀腺細(xì)胞表面表達(dá)大量細(xì)胞間黏附分子1（ICAM-1），導(dǎo)致甲狀腺腫大。科研人員通過制備單克隆抗體，對(duì)治療GD進(jìn)行了嘗試。(1)用ICAM-1作為抗原間隔多次免疫若干只小鼠，幾周后取這些免疫小鼠的血清，分別加入多孔培養(yǎng)板的不同孔中，多孔培養(yǎng)板中需加入以檢測(cè)這些小鼠產(chǎn)生的抗體。依據(jù)反應(yīng)結(jié)果，選出抗原—抗體反應(yīng)最（填“強(qiáng)”或“弱”）的培養(yǎng)孔所對(duì)應(yīng)的小鼠M。(2)取小鼠M的脾臟細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，與實(shí)驗(yàn)用骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有能力的細(xì)胞。核酸合成有兩個(gè)途徑，物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑（如圖）。正常細(xì)胞內(nèi)含有補(bǔ)救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶，制備單克隆抗體時(shí)選用的骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶?？捎眉尤際、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”篩選出特定的雜交瘤細(xì)胞。融合前將部分培養(yǎng)細(xì)胞置于含HAT的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時(shí)間后培養(yǎng)基中（填“有”或“無”）骨髓瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，說明培養(yǎng)基符合實(shí)驗(yàn)要求。雜交瘤細(xì)胞可以在HAT培養(yǎng)基上大量增殖的原因是。(3)將獲得的上述細(xì)胞在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，用ICAM-1檢測(cè)，從中選擇的雜交瘤細(xì)胞，將其植入小鼠腹腔中進(jìn)行克隆培養(yǎng)，一段時(shí)間后從小鼠腹水中提取實(shí)驗(yàn)用抗體?！敬鸢浮?1)ICAM-1強(qiáng)(2)無限增殖無雜交瘤細(xì)胞可以進(jìn)行補(bǔ)救合成途徑(3)大量產(chǎn)生抗ICAM-1抗體【分析】單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞，利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合。單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選，利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞；第二次篩選，利用克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞?！驹斀狻浚?）抗原和抗體結(jié)合具有特異性，多孔培養(yǎng)板中需加入ICAM-1以檢測(cè)小鼠是否產(chǎn)生抗ICAM-1的抗體。依據(jù)反應(yīng)結(jié)果，選出抗原-抗體反應(yīng)最強(qiáng)的培養(yǎng)孔所對(duì)應(yīng)的小鼠M。（2）B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后具備了骨髓瘤細(xì)胞無限增殖的特點(diǎn)，因此用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有無限增殖能力的細(xì)胞。制備單克隆抗體時(shí)選用的骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶，無法進(jìn)行補(bǔ)救合成途徑，且物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，故在HAT培養(yǎng)基中無骨髓瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。雜交瘤細(xì)胞含有補(bǔ)救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶，可以進(jìn)行補(bǔ)救合成途徑，可以在HAT培養(yǎng)基上大量繁殖。（3）根據(jù)抗原和抗體結(jié)合的特異性，用ICAM-1檢測(cè)，從中選擇大量產(chǎn)生抗ICAM-1抗體的雜交瘤細(xì)胞，植入小鼠腹腔中克隆培養(yǎng)，一段時(shí)間后從小鼠腹水中提取實(shí)驗(yàn)用抗體。15．（2023春·江蘇鹽城·高二校聯(lián)考期中）下圖為科研工作者利用小鼠制備H7N9禽流感病毒單克隆抗體的過程。請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問題:(1)圖中X細(xì)胞一般指，與植物體細(xì)胞雜交相比，誘導(dǎo)X細(xì)胞和Y細(xì)胞融合還可采用。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常要在培養(yǎng)液中添加一定量的，以防培養(yǎng)過程中的污染；還需要放入二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，CO2的主要作用是。貼滿瓶壁的細(xì)胞需要重新用酶處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)過程通常被稱為。(2)單克隆抗體的制備過程需要經(jīng)過多次篩選，首先用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選出，還需再次篩選，最終獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞，選出符合要求的細(xì)胞后，可在體外條件下或注射到進(jìn)行增殖培養(yǎng)。(3)利用上述技術(shù)生產(chǎn)的單克隆抗體可制作成診斷盒，用于準(zhǔn)確、快速診斷H7N9禽流感病毒的感染者，這種診斷運(yùn)用了技術(shù)，這體現(xiàn)了單克隆抗體、的特性?！敬鸢浮?1)骨髓瘤細(xì)胞滅活的病毒抗生素維持培養(yǎng)液的pH膠原蛋白酶或胰蛋白酶?jìng)鞔囵B(yǎng)(2)雜交瘤細(xì)胞小鼠腹腔(3)抗原－抗體雜交特異性強(qiáng)靈敏度高【分析】分析題圖：采用基因工程技術(shù)將H7N9病毒的抗原基因?qū)胧荏w細(xì)胞，并使之表達(dá)；B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖，而骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體，因此采用細(xì)胞融合技術(shù)將兩者融合形成雜交瘤細(xì)胞，既可產(chǎn)生抗體，也能無限增殖，所以圖中X細(xì)胞表示骨髓瘤細(xì)胞，Y細(xì)胞表示B淋巴細(xì)胞?！驹斀狻浚?）X細(xì)胞具有無限增殖的能力，一般選擇骨髓瘤細(xì)胞。誘導(dǎo)X細(xì)胞和Y細(xì)胞融合可采用化學(xué)試劑聚乙二醇（PEG）、輔助離心震動(dòng)電刺激等物理方法，還可用滅活的病毒誘導(dǎo)其融合，即與植物體細(xì)胞雜交相比，讓動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法是滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，防止細(xì)菌污染；還需要放入二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH；貼滿瓶壁的細(xì)胞需要膠原蛋白酶或胰蛋白酶處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)過程通常被稱為傳代培養(yǎng)。（2）單克隆抗體的制備過程需要經(jīng)過多次篩選，首先用特定的選擇性培養(yǎng)基（HAT培養(yǎng)基）篩選出雜交瘤細(xì)胞，該培養(yǎng)基上B細(xì)胞和B細(xì)胞融合細(xì)胞、瘤細(xì)胞和瘤細(xì)胞融合細(xì)胞不能生長(zhǎng)。還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測(cè)（使用特定的抗原決定簇進(jìn)行檢測(cè)），最終獲得足夠數(shù)量的能分泌所需（特異性/專一性）抗體的細(xì)胞，選出符合要求的細(xì)胞后，可在體外條件下培養(yǎng)或注射到小鼠的腹腔內(nèi)進(jìn)行增殖培養(yǎng)。（3）單克隆抗體能與抗原特異性結(jié)合，利用上述技術(shù)生產(chǎn)的單克隆抗體可制作成診斷盒，用于準(zhǔn)確、快速診斷H7N9禽流感病毒的感染者，這種診斷運(yùn)用了抗原—抗體雜交技術(shù)，這體現(xiàn)了單克隆抗體理化性質(zhì)單一、與抗原結(jié)合的特異性強(qiáng)、靈敏度高的特性。1．（2023·遼寧·統(tǒng)考高考真題）大量懸浮培養(yǎng)產(chǎn)流感病毒的單克隆細(xì)胞，可用于流感疫苗的生產(chǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．懸浮培養(yǎng)單克隆細(xì)胞可有效避免接觸抑制B．用于培養(yǎng)單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)基通常需加血清C．當(dāng)病毒達(dá)到一定數(shù)量時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的增殖D．培養(yǎng)基pH不會(huì)影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量【答案】D【分析】培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞使用合成培養(yǎng)基時(shí)需要加入血清等一些天然成分，必須保證環(huán)境是無菌、無毒的，培養(yǎng)液還需要定期更換。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。細(xì)胞貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上稱為細(xì)胞貼壁，貼壁細(xì)胞在生長(zhǎng)增殖時(shí)會(huì)發(fā)生接觸抑制的現(xiàn)象。【詳解】A、懸浮培養(yǎng)單克隆細(xì)胞，可以保證足夠的氣體交換，通過振蕩或轉(zhuǎn)動(dòng)裝置使細(xì)胞始終處于分散懸浮于培養(yǎng)液內(nèi)，可有效避免接觸抑制，A正確；B、由于細(xì)胞的生長(zhǎng)是比較復(fù)雜的過程，血清中含有一些必須的因子，用于培養(yǎng)單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)基通常需加血清，B正確；C、病毒借助于細(xì)胞進(jìn)行繁殖，利用了活細(xì)胞的物質(zhì)、能量、酶等，當(dāng)病毒達(dá)到一定數(shù)量時(shí)細(xì)胞的生命活動(dòng)受到影響，會(huì)影響細(xì)胞的增殖，C正確；D、細(xì)胞的正常生命活動(dòng)需要適宜的pH，培養(yǎng)基pH會(huì)影響細(xì)胞代謝，進(jìn)而影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量，D錯(cuò)誤。故選D。2．（2022·山東·高考真題）如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡(jiǎn)稱雙抗。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合B．利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞C．篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原D．同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞【答案】D【分析】單克隆抗體的制備過程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斀狻緼、根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合的原理推測(cè)，雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合，A正確；B、根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結(jié)合的特性，利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞，從而使藥物發(fā)揮相應(yīng)的作用，B正確；C、在兩種不同的抗原刺激下，B細(xì)胞增殖、分化產(chǎn)生不同的漿細(xì)胞分泌形成兩種抗體，因此，篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原來進(jìn)行抗原-抗體檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)雙抗的篩選，C正確；D、同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化形成不同的漿細(xì)胞，而不是分化成產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞，D錯(cuò)誤。故選D。3．（2021·江蘇·高考真題）下列關(guān)于哺乳動(dòng)物胚胎工程和細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是（

）A．細(xì)胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常需要添加血清等物質(zhì)B．早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動(dòng)物體內(nèi)發(fā)育成個(gè)體C．猴的核移植細(xì)胞通過胚胎工程已成功地培育出了克隆猴D．將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞【答案】D【分析】1、胚胎移植的生理基礎(chǔ)（1）供體與受體相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境；（2）胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能；（3）子宮不對(duì)外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能；（4）胚胎遺傳性狀不受受體任何影響。2、漿細(xì)胞能夠分泌抗體，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤細(xì)胞具有無限增殖的能力，因此利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，利用該細(xì)胞制備單克隆抗體?！驹斀狻緼、細(xì)胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常需添加血清等物質(zhì)，A正確；B、早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動(dòng)物體內(nèi)發(fā)育成個(gè)體，B正確；C、我國(guó)利用核移植技術(shù)成功培養(yǎng)出克隆猴“中中”和“華華”，C正確；D、將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不都是雜交瘤細(xì)胞，還有B細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞等，D錯(cuò)誤。故選D。4．（2021·浙江·統(tǒng)考高考真題）將蝌蚪腸細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的蛙卵中，形成重建的“合子”。有些“合子”發(fā)育成正常的蝌蚪，而單獨(dú)培養(yǎng)腸細(xì)胞卻不能發(fā)育成蝌蚪。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．腸細(xì)胞不能表達(dá)全能性是受某些物質(zhì)的限制B．“合子”第一次分裂后形成的細(xì)胞已失去全能性C．“合子”發(fā)育成正常蝌蚪的過程中伴隨著細(xì)胞分化D．細(xì)胞核具有全能性是由于其含有該物種的全套基因【答案】B【分析】細(xì)胞的全能性是指細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后,仍具有產(chǎn)生完整有機(jī)體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能和特性，植物的體細(xì)胞具有全能性，動(dòng)物的體細(xì)胞不表現(xiàn)出全能性，但細(xì)胞核具有全能性。【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞經(jīng)過多次分裂后，細(xì)胞質(zhì)的成分已經(jīng)發(fā)生改變，原本能激發(fā)細(xì)胞全能性的物質(zhì)已經(jīng)消失，故腸細(xì)胞不能表達(dá)全能性是受到了細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的限制，A正確；B、“合子”第一次分裂、第二次分裂后形成的細(xì)胞仍具有全能性，B錯(cuò)誤；C、“合子”發(fā)育成正常蝌蚪個(gè)體的過程中，需要通過細(xì)胞分裂增加細(xì)胞的數(shù)量，通過細(xì)胞分化增加細(xì)胞的種類，C正確；D、雖然細(xì)胞經(jīng)過多次分裂失去了激發(fā)全能性的物質(zhì)，但細(xì)胞核仍含有該物種的全套基因，故動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性，D正確。故選B?！军c(diǎn)睛】5．（2023·海南·高考真題）某團(tuán)隊(duì)通過多代細(xì)胞培養(yǎng)，將小鼠胚胎干細(xì)胞的Y染色體去除，獲得XO胚胎干細(xì)胞，再經(jīng)過一系列處理，使之轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）A．營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)充足時(shí)，傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞不會(huì)發(fā)生接觸抑制B．獲得XO胚胎干細(xì)胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異C．XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過程發(fā)生了細(xì)胞分化D．若某瀕危哺乳動(dòng)物僅存雄性個(gè)體，可用該法獲得有功能的卵母細(xì)胞用于繁育【答案】A【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：（1）充足的營(yíng)養(yǎng)供給—微量元素、無機(jī)鹽、糖類、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、血清等。（2）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。（3）無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。（4）氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2．O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH?！驹斀狻緼、營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)充足時(shí)，傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞也會(huì)發(fā)生接觸抑制，A錯(cuò)誤；B、XO胚胎干細(xì)胞中丟失了Y染色體，因而該細(xì)胞的獲得過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異，B正確；C、XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過程發(fā)生了細(xì)胞分化，即細(xì)胞的功能發(fā)生了特化，因而發(fā)生了細(xì)胞分化，C正確；D、若某瀕危哺乳動(dòng)物僅存雄性個(gè)體，可用該法，即獲得有功能的卵母細(xì)胞，進(jìn)而用于繁育，實(shí)現(xiàn)瀕危物種的保護(hù)，D正確。故選A。6．（2022·福建·統(tǒng)考高考真題）我國(guó)科研人員在航天器微重力環(huán)境下對(duì)多能干細(xì)胞的分化進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)與正常重力相比，多能干細(xì)胞在微重力環(huán)境下加速分化為功能健全的心肌細(xì)胞。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．微重力環(huán)境下多能干細(xì)胞和心肌細(xì)胞具有相同的細(xì)胞周期B．微重力環(huán)境下進(jìn)行人體細(xì)胞的體外培養(yǎng)需定期更換培養(yǎng)液C．多能干細(xì)胞在分化過程中蛋白質(zhì)種類和數(shù)量發(fā)生了改變D．該研究有助于了解微重力對(duì)細(xì)胞生命活動(dòng)的影響【答案】A【分析】1、干細(xì)胞的概念：動(dòng)物和人體內(nèi)保留著少量具有分裂和分化能力的細(xì)胞。2、細(xì)胞分化是指在個(gè)體發(fā)育中，由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)?！驹斀狻緼、連續(xù)分裂的細(xì)胞才有細(xì)胞周期，心肌細(xì)胞已經(jīng)高度分化，不能再分裂，沒有細(xì)胞周期，A錯(cuò)誤；B、進(jìn)行細(xì)胞的體外培養(yǎng)需定期更換培養(yǎng)液，避免代謝廢物對(duì)細(xì)胞的毒害作用，B正確；C、分化過程的本質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，故多能干細(xì)胞在分化過程中蛋白質(zhì)種類和數(shù)量發(fā)生了改變，C正確；D、由題意可知，多能干細(xì)胞在微重力環(huán)境下能加速分化，所以該研究有助于了解微重力對(duì)細(xì)胞生命活動(dòng)的影響，D正確。故選A。7．（2022·遼寧·統(tǒng)考高考真題）二甲基亞砜（DMSO）易與水分子結(jié)合，常用作細(xì)胞凍存的滲透性保護(hù)劑。干細(xì)胞凍存復(fù)蘇后指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果見下表。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）凍存劑指標(biāo)

合成培養(yǎng)基+DMSO合成培養(yǎng)基+DMSO+血清G1期細(xì)胞數(shù)百分比（%）65.7879.85活細(xì)胞數(shù)百分比（%）15.2941.33注：細(xì)胞分裂間期分為G1期、S期（DNA復(fù)制期）和G2期A．凍存復(fù)蘇后的干細(xì)胞可以用于治療人類某些疾病B．G1期細(xì)胞數(shù)百分比上升，導(dǎo)致更多干細(xì)胞直接進(jìn)入分裂期C．血清中的天然成分影響G1期，增加干細(xì)胞復(fù)蘇后的活細(xì)胞數(shù)百分比D．DMSO的作用是使干細(xì)胞中自由水轉(zhuǎn)化為結(jié)合水【答案】B【分析】細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞礬作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。【詳解】A、凍存復(fù)蘇后的干細(xì)胞可以經(jīng)誘導(dǎo)分裂分化形成多種組織器官，用于治療人類某些疾病，A正確；B、G1期細(xì)胞數(shù)百分比上升，說明細(xì)胞進(jìn)入分裂間期，但不會(huì)導(dǎo)致干細(xì)胞直接進(jìn)入分裂期，還需經(jīng)過S和G2期，B錯(cuò)誤；C、分析表格可知，血清中的天然成分影響G1期（該期細(xì)胞數(shù)百分比增大），能增加干細(xì)胞復(fù)蘇后的活細(xì)胞數(shù)百分比，C正確；D、二甲基亞砜（DMSO）易與水分子結(jié)合，可以使干細(xì)胞中自由水轉(zhuǎn)化為結(jié)合水，D正確。故選B。8．（2022·江蘇·統(tǒng)考高考真題）航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細(xì)胞跳動(dòng)的視頻。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具和試劑都要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B．培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時(shí)候既需要氧氣也需要二氧化碳C．心肌細(xì)胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂不斷增殖D．心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的神經(jīng)沖動(dòng)的支配下跳動(dòng)【答案】B【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)?！驹斀狻緼、培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，但是試劑并不都需要滅菌，如動(dòng)物血清不能進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，否則會(huì)使其中的成分失活，A錯(cuò)誤；B、培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時(shí)候既需要氧氣（有助于進(jìn)行有氧呼吸）也需要二氧化碳（有助于維持培養(yǎng)液的pH），B正確；C、在體外培養(yǎng)條件下，細(xì)胞會(huì)因接觸抑制、細(xì)胞密度過大、代謝廢物積累、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗而停止分裂，C錯(cuò)誤；D、心肌細(xì)胞節(jié)律性收縮，受植物性神經(jīng)的支配，是不隨意的，在神經(jīng)細(xì)胞釋放的神經(jīng)遞質(zhì)的支配下跳動(dòng)，D錯(cuò)誤。故選B。9．（2022·湖北·統(tǒng)考高考真題）某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長(zhǎng)緩慢，其原因不可能的是（）A．實(shí)驗(yàn)材料取自小鼠胚胎的腦組織 B．為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封C．血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基 D．所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性【答案】A【分析】小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，需要在無菌無毒和培養(yǎng)液提供類似內(nèi)環(huán)境的條件下進(jìn)行?！驹斀狻緼、小鼠胚胎腦組織中含有豐富的原代神經(jīng)元，細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，不會(huì)造成生長(zhǎng)緩慢，A符合題意；B、培養(yǎng)瓶瓶口密封會(huì)使培養(yǎng)液中缺氧，影響細(xì)胞有氧呼吸，造成供能不足，可能使細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，B不符合題意；C、血清經(jīng)過高溫處理后，其中活性成分變性，失去原有功能，細(xì)胞生存環(huán)境嚴(yán)重惡化，可能使細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，C不符合題意；D、小鼠內(nèi)環(huán)境為弱堿性，所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性，使細(xì)胞生存環(huán)境惡劣，可能造成細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，D不符合題意。故選A。10．（2022·江蘇·統(tǒng)考高考真題）下圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行基因定位的過程，在人-鼠雜種細(xì)胞中人的染色體會(huì)以隨機(jī)方式丟失，通過分析基因產(chǎn)物進(jìn)行基因定位?，F(xiàn)檢測(cè)細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有（

）A．加入滅活仙臺(tái)病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合B．細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細(xì)胞C．芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色上D．胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上【答案】ACD【分析】分析題干信息：Ⅰ保留X、11號(hào)染色體，Ⅱ保留2、11號(hào)染色體，具有芳烴羥化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17號(hào)染色體具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，所以支配芳烴羥化酶合成的基因位于2號(hào)染色體上，支配胸苷激酶合成的基因位于17號(hào)染色體上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X號(hào)染色體上；支配乳酸脫氫酶合成的基因位于11號(hào)染色體上?！驹斀狻緼、動(dòng)物細(xì)胞融合過程中，可以利用滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇作誘導(dǎo)劑促進(jìn)細(xì)胞融合，A正確；B、細(xì)胞Ⅲ中保留了人的X、11、17號(hào)染色體，故不會(huì)是鼠-鼠融合細(xì)胞，B錯(cuò)誤；CD、根據(jù)分析可知，芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色上，胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，CD正確。故選ACD。11．（2023·湖南·統(tǒng)考高考真題）某些植物根際促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用?；卮鹣铝袉栴}：(1)若從植物根際土壤中篩選分解淀粉的固氮細(xì)菌，培養(yǎng)基的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括水和。(2)現(xiàn)從植物根際土壤中篩選出一株解淀粉芽孢桿菌H，其產(chǎn)生的抗菌肽抑菌效果見表。據(jù)表推測(cè)該抗菌肽對(duì)的抑制效果較好，若要確定其有抑菌效果的最低濃度，需在μg·mL-1濃度區(qū)間進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。測(cè)試菌抗菌肽濃度/（μg?mL-1）55.2027.6013.806.903.451.730.86金黃色葡萄球菌-----++枯草芽孢桿菌-----++禾谷鐮孢菌-++++++假絲酵母-++++++注：“+”表示長(zhǎng)菌，“-”表示未長(zhǎng)菌。(3)研究人員利用解淀粉芽孢桿菌H的淀粉酶編碼基因M構(gòu)建高效表達(dá)質(zhì)粒載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌成功構(gòu)建基因工程菌A。在利用A菌株發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶M過程中，傳代多次后，生產(chǎn)條件未變，但某子代菌株不再產(chǎn)生淀粉酶M。分析可能的原因是（答出兩點(diǎn)即可）。(4)研究人員通過肺上皮干細(xì)胞誘導(dǎo)生成肺類器官，可自組裝或與成熟細(xì)胞組裝成肺類裝配體，如圖所示。肺類裝配體培養(yǎng)需要滿足適宜的營(yíng)養(yǎng)、溫度、滲透壓、pH以及（答出兩點(diǎn)）等基本條件。肺類裝配體形成過程中是否運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)（填“是”或“否”）。

(5)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）是一種耐藥菌，嚴(yán)重危害人類健康。科研人員擬用MRSA感染肺類裝配體建立感染模型，來探究解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽是否對(duì)MRSA引起的肺炎有治療潛力。以下實(shí)驗(yàn)材料中必備的是。①金黃色葡萄球菌感染的肺類裝配體

②MRSA感染的肺類裝配體

③解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽

④生理鹽水

⑤青霉素（抗金黃色葡萄球菌的藥物）

⑥萬古霉素（抗MRSA的藥物）【答案】(1)無機(jī)鹽、淀粉(2)金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌1.73~3.45(3)淀粉酶編碼基因M發(fā)生突變；重組質(zhì)粒在大腸桿菌分裂過程中丟失(4)無菌、無毒環(huán)境，含95%空氣和5%CO2的氣體環(huán)境否(5)②③④⑥【分析】動(dòng)物培養(yǎng)的條件：1、營(yíng)養(yǎng)：在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，通常需要加入血清等一些天然成分。2、無菌、無毒的環(huán)境：對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作:定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。3、適宜溫度、pH和滲透壓：哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多為(36.5±0.5)℃；pH多為7.2~7.4；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)還需要考慮滲透壓。4、氣體環(huán)境：O2：細(xì)胞代謝所必需的；CO2：維持培養(yǎng)液pH?！驹斀狻浚?）由題意可知，根際促生菌具有固氮作用，可利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈矗虼擞糜诤Y選根際促生菌的培養(yǎng)基的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括水、無機(jī)鹽和淀粉。（2）由題表可知，在抗菌肽濃度為3.45-55.20μg·mL-1范圍內(nèi)，金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌均不能生長(zhǎng)，表明該抗菌肽對(duì)它們的抑菌效果較好；因?yàn)榭咕牡臐舛葹?.73μg·mL-1時(shí)，它們均能生長(zhǎng)，所以要確定抗菌肽抑菌效果的最低濃度，應(yīng)在1.73~3.45μg·mL-1的濃度區(qū)間進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。（3）在利用A菌株發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶M過程中，傳代多次后，生產(chǎn)條件未變，但某子代菌株不再產(chǎn)生淀粉酶M，可能的原因是淀粉酶編碼基因M發(fā)生突變；或者是重組質(zhì)粒在大腸桿菌分裂過程中丟失。（4）肺類裝配體培養(yǎng)需要滿足適宜的營(yíng)養(yǎng)、溫度、滲透壓、pH以及無菌、無毒環(huán)境，含95%空氣和5%CO2的氣體環(huán)境等基本條件；由圖示可知，肺類裝配體形成的過程中沒有運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，只涉及了細(xì)胞的分裂和分化等內(nèi)容。（5）科研人員擬用MRSA感染肺類裝配體建立感染模型，來探究解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽是否對(duì)MRSA引起的肺炎有治療潛力，必備實(shí)驗(yàn)材料為：②MRSA感染的肺類裝配體、③解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽、④生理鹽水（設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)使用）、⑥萬古霉素（抗MRSA的藥物，比較解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽的療效），故選②③④⑥。12．（2022·浙江·統(tǒng)考高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）紅曲霉合成的紅曲色素是可食用的天然色素，具有防腐、降脂等功能。研究者進(jìn)行了紅曲色素的提取及紅色素的含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)，流程如下：(1)取紅曲霉菌種斜面，加適量洗下菌苔，制成菌懸液并培養(yǎng)，解除休眠獲得菌種。經(jīng)液體發(fā)酵，收集紅曲霉菌絲體，紅曲霉菌絲體與70%乙醇溶液混合，經(jīng)浸提、，獲得的上清液即為紅曲色素提取液。為進(jìn)一步提高紅曲色素得率，可將紅曲霉細(xì)胞進(jìn)行處理。(2)紅曲色素包括紅色素、黃色素和橙黃色素等，紅色素在390nm、420nm和505nm波長(zhǎng)處均有較大吸收峰。用光電比色法測(cè)定紅曲色素提取液甲的紅色素含量時(shí)，通常選用505nm波長(zhǎng)測(cè)定的原因是。測(cè)定時(shí)需用作空白對(duì)照。(3)生產(chǎn)上提取紅曲色素后的殘?jiān)?，?jīng)處理后作為飼料添加劑或有機(jī)肥，這屬于廢棄物的無害化和處理。（二）我國(guó)在新冠疫情方面取得了顯著的成效，但全球疫情形勢(shì)仍然非常嚴(yán)峻、尤其是病毒出現(xiàn)了新變異株——德爾塔、奧密克戎，更是威脅著全人類的生命健康。(4)新冠病毒核酸定性檢測(cè)原理是：以新冠病毒的單鏈RNA為模板，利用酶合成DNA，經(jīng)PCR擴(kuò)增，然后在擴(kuò)增產(chǎn)物中加入特異的，如果檢測(cè)到特異的雜交分子則核酸檢測(cè)為陽性。(5)接種疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。腺病毒疫苗的制備技術(shù)要點(diǎn)是：將腺病毒的復(fù)制基因敲除；以新冠病毒的基因?yàn)槟０搴铣傻腄NA插入腺病毒基因組，構(gòu)建重組腺病毒。重組腺病毒在人體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生新冠病毒抗原，從而引發(fā)特異性免疫反應(yīng)。在此過程中，腺病毒的作用是作為基因工程中目的基因的。將腺病毒復(fù)制基因敲除的目的是。(6)單克隆抗體有望用于治療新冠肺炎。單克隆抗體的制備原理是：取免疫陽性小鼠的細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合培養(yǎng)，使其融合，最后篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。與植物組織培養(yǎng)相比，雜交瘤細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)需要特殊的成分，如胰島素和。【答案】(1)無菌水活化離心破碎(2)其它色素對(duì)該波長(zhǎng)光的吸收相對(duì)較少，干擾相對(duì)較小70%乙醇溶液(3)滅菌資源化(4)逆轉(zhuǎn)錄核酸探針(5)抗原載體使腺病毒失去復(fù)制能力(6)脾動(dòng)物血清【分析】1、無菌操作包括滅菌和消毒兩種方式。消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；滅菌的方法有干熱滅菌、灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌。2、微生物接種：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，常用來統(tǒng)計(jì)樣品活菌數(shù)目的方法是稀釋涂布平板法。3、平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面?！驹斀狻浚?）防止污染，洗菌苔可加適量的無菌水，制成菌懸液并培養(yǎng)，解除休眠獲得活化菌種。紅曲霉菌絲體與70%乙醇溶液混合，經(jīng)浸提、離心，獲得的上清液即為紅曲色素提取液。為進(jìn)一步提高紅曲色素得率，可將紅曲霉細(xì)胞進(jìn)行破碎處理，使細(xì)胞內(nèi)的紅曲色素釋放出來。（2）用光電比色法測(cè)定紅曲色素提取液甲的紅色素含量時(shí)，通常選用505nm波長(zhǎng)測(cè)定的原因是其它色素對(duì)該波長(zhǎng)光的吸收相對(duì)較少，干擾相對(duì)較小。由于提取紅曲色素是用的70%乙醇溶液，故測(cè)定時(shí)需用70%乙醇溶液作空白對(duì)照。（3）生產(chǎn)上提取紅曲色素后的殘?jiān)?jīng)滅菌處理殘?jiān)?，作為飼料添加劑或有機(jī)肥，這屬于廢棄物的無害化和資源化處理。（4）RNA做模板合成DNA，利用逆轉(zhuǎn)錄酶；PCR擴(kuò)增，然后在擴(kuò)增產(chǎn)物中加入特異的核酸探針，檢測(cè)新冠病毒核酸。如果檢測(cè)到特異的雜交分子則核酸檢測(cè)為陽性。（5）腺病毒疫苗的制備技術(shù)要點(diǎn)是：將腺病毒的復(fù)制基因敲除；以新冠病毒的抗原基因?yàn)槟０搴铣傻腄NA插入腺病毒基因組，構(gòu)建重組腺病毒。重組腺病毒在人體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生新冠病毒抗原，從而引發(fā)特異性免疫反應(yīng)。在此過程中，腺病毒的作用是作為基因工程中目的基因的載體。將腺病毒復(fù)制基因敲除的目的是使腺病毒失去復(fù)制能力。（6）單克隆抗體的制備原理是：取免疫陽性小鼠的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合培養(yǎng)，使其融合，最后篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。與植物組織培養(yǎng)相比，雜交瘤細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)需要特殊的成分，如胰島素和動(dòng)物血清?！军c(diǎn)睛】本題考查微生物的分離與培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分、無菌技術(shù)、微生物分離的過程，能正確理解圖形和表格中隱含的知識(shí)和結(jié)論。13．（2022·福建·統(tǒng)考高考真題）美西螈具有很強(qiáng)的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬細(xì)胞在斷肢再生的早期起重要作用。為研究巨噬細(xì)胞的作用機(jī)制，科研人員制備了抗巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志蛋白CD14的單克隆抗體，具體方法如下?；卮鹣铝袉栴}：（一）基因工程抗原的制備(1)根據(jù)美西螈CD14基因的核苷酸序列，合成引物，利用PCR擴(kuò)增CD14片段。已知DNA聚合酶催化引物的3’—OH與加入的脫氧核苷酸的5’—P形成磷酸二酯鍵，則新合成鏈的延伸方向是（填“5’→3’”或“3’→5’”）。

(2)載體和CD14片段的酶切位點(diǎn)及相應(yīng)的酶切抗性基因序列如圖1所示。用XhoI和Sal1分別酶切CD14和載體后連接，CD14接入載體時(shí)會(huì)形成正向連接和反向連接的兩種重組DNA．可進(jìn)一步用這兩種限制酶對(duì)CD14的連接方向進(jìn)行鑒定，理由是。培養(yǎng)能表達(dá)CD14蛋白的大腸桿菌，分離純化目的蛋白。（二）抗CD14單克隆抗體的制備流程如圖2所示：

(3)步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射和。(4)步驟②所用的SP2/0細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn)是。(5)吸?、壑械纳锨逡旱舰艿呐囵B(yǎng)孔中，根據(jù)抗原—抗體雜交原理，需加入①進(jìn)行專一抗體檢測(cè)，檢測(cè)過程發(fā)現(xiàn)有些雜交瘤細(xì)胞不能分泌抗CD14抗體，原因是②。(6)步驟⑥從中提取到大量的抗CD14抗體，用于檢測(cè)巨噬細(xì)胞?！敬鸢浮?1)5'→3'(2)正向連接的重組DNA有這兩種酶切位點(diǎn)（限制酶的識(shí)別序列）；而反向連接的重組DNA會(huì)形成新的序列，沒有這兩種酶的酶切位點(diǎn)（沒有限制酶的識(shí)別序列）(3)CD14蛋白/CD14抗原分泌抗CD14抗體的雜交瘤細(xì)胞(4)能在體外無限增殖(5)CD14蛋白參與形成雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類多，有的不能分泌抗CD14抗體(6)小鼠腹水【分析】1、PCR原理：在解旋酶作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。【詳解】（1）PCR擴(kuò)增時(shí)，DNA聚合酶催化引物的3'-OH與加入的脫氧核苷酸的5'-P形成磷