柱色譜法液相色譜法（1）固定相：硅膠、氧化鋁、聚酰胺、大孔吸附樹脂和活性炭等。①硅膠（SiO2·xH2O）：硅醇基是硅膠的吸附活性中心，通過(guò)活化與脫活化可控制硅膠的活性。

吸附劑的吸附能力常用活性級(jí)數(shù)表示，吸附活性的強(qiáng)弱通常區(qū)分為I~V級(jí)。

硅膠的活性與其含水量有關(guān)，吸附劑含水量越大，活性級(jí)數(shù)越大，但活性越低，吸附能力越弱。②氧化鋁：由氫氧化鋁在400~500℃灼燒而成，吸附能力略高于硅膠。

氧化鋁的活性也與其含水量密切相關(guān)，含水量的增加可使活性降低，稱為脫活性。

氧化鋁分為酸性、堿性和中性3種，其中中性氧化鋁應(yīng)用廣泛。

柱色譜法1.液-固吸附柱色譜法硅膠含水量%氧化鋁含水量%活性級(jí)數(shù)活性00Ⅰ高53Ⅱ

156Ⅲ

2510Ⅳ

3815Ⅴ低硅膠和氧化鋁的活性與含水量的關(guān)系柱色譜法1.液-固吸附柱色譜法（2）流動(dòng)相：有機(jī)溶劑。

洗脫能力主要由有機(jī)溶劑的極性決定，極性較強(qiáng)的流動(dòng)相占據(jù)吸附中心的能力強(qiáng)，易將組分分子從吸附劑的活性中心上置換下來(lái)，洗脫能力強(qiáng)。

常用溶劑的極性由小到大的順序?yàn)槭兔眩辑h(huán)己烷＜四氯化碳＜苯＜甲苯＜乙醚＜三氯甲烷＜乙酸乙酯＜正丁醇＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水。（3）色譜條件的選擇：被測(cè)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)；吸附劑的選擇；流動(dòng)相的選擇。

一般原則：

分離極性較強(qiáng)的物質(zhì)，一般選用吸附活性小的吸附劑和極性較強(qiáng)的洗脫液；分離極性弱的物質(zhì)，一般選用吸附活性大的吸附劑和極性較弱的洗脫液。柱色譜法1.液-固吸附柱色譜法（1）固定相：由惰性載體和固定液組成。

載體在色譜中僅起到負(fù)載或者支撐固定液的作用。常用載體有硅膠、多孔硅藻土、纖維素等。

反相分配柱色譜常以液體石蠟等非極性或弱極性溶劑作固定液。

正相分配柱色譜常用強(qiáng)極性溶劑作固定液，如水、甲醇、甲酰胺、稀酸等。（2）流動(dòng)相：流動(dòng)相與固定相的極性差別很大，兩者不互溶。

正相分配柱色譜常用極性弱于固定相的醇類、石油醚類、酮類、酯類、鹵代烴及苯或其混合物。

反相分配柱色譜常用水、甲醇等極性溶劑。

柱色譜法2.液-液分配柱色譜法（1）固定相：陽(yáng)離子交換樹脂、陰離子交換樹脂。

交聯(lián)度：指離子交換樹脂中交聯(lián)劑的含量，通常以重量百分比表示。交聯(lián)度用于衡量離子交換樹脂的選擇性。

交換容量：指實(shí)驗(yàn)條件下，每克干樹脂真正參加交換的活性基團(tuán)數(shù)目。交換容量用于衡量離子交換樹脂的交換能力。（2）流動(dòng)相：以水為溶劑的緩沖溶液，可加入一些有機(jī)溶劑。柱色譜法3.離子交換柱色譜法4.分子排阻柱色譜法（1）固定相：多孔性凝膠，常用葡聚糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠。（2）流動(dòng)相：水溶性試樣常選擇水溶液為流動(dòng)相，而非水溶性試樣選擇四氫呋喃、三氯甲烷、甲苯等有機(jī)溶劑為流動(dòng)相。

（1）液-固吸附柱色譜法的應(yīng)用硅膠：可用于酸性和中性化合物的分離。氧化鋁：中性氧化鋁應(yīng)用最廣泛，可用于酸性、堿性、中性化合物的分離。聚酰胺：用于分離酚類、酸類、硝基類、醌類等化合物的分離。大孔樹脂：用于水溶性化合物的分離及純化。（2）液-液分配柱色譜法的應(yīng)用：適用于各類化合物的分離，特別是親水性物質(zhì)。（3）離子交換柱色譜法的應(yīng)用：去離子水的制備，中草藥成分的分離萃取，各種有機(jī)酸、氨基酸的分離制備，抗生素的純制，干擾離子的去除等。（4）分子排阻柱色譜法的應(yīng)用：大分子物質(zhì)的分離，廣泛用于天然藥物化學(xué)和生物化學(xué)的研究、水溶性高分子化合物如蛋白制劑等的分析。柱色譜法5.柱色譜法的應(yīng)用

柱色譜法可分為吸附柱色譜法、分配柱色譜法、離子交換柱色譜法、分子排阻色譜法。

吸附柱色譜法的固定相有硅膠、氧化鋁、聚酰胺、大孔樹脂等；流動(dòng)相根據(jù)與組分“相似相溶”的原則選擇。

分配柱色譜法的固定相由由載體和固定液組成，正相分配色譜法常以強(qiáng)極性溶劑作為固定液，反相分配色譜法常以弱極性或者非極性溶劑作為固定液。正相分配色譜法的流動(dòng)相常用極性小于固定液的醇類、石油醚類、酮類等，反相分配柱色譜的流動(dòng)相常用水、甲醇等極性溶劑。

離子交換柱色譜法的固定相為離子交換樹脂，流動(dòng)相為以水為溶劑的緩沖溶液。

分子