一次性使用衛(wèi)生用品的微生物檢測(cè)方法解讀

食品實(shí)驗(yàn)室服務(wù)

微生物指標(biāo)一PART一次性使用衛(wèi)生用品的微生物指標(biāo)

覆生物指標(biāo)

產(chǎn)品腫類(lèi)初始污染管“維曲附落總數(shù)真前謨能總數(shù)

大肪康群致病性化膿第八

cfu/g'fu/g或cfu/ml.:fu/jj或cfu/ml.

i套或指管、紙巾、濕巾'帽子、內(nèi)

C200?不得檢出不得檢出<100

博、電話腴

抗晶（或抑液體產(chǎn)品<200不得檢出不限衿出C1O0

衛(wèi)生虎巾<20不禪檢出不得檢出不得拉出

口罩

件通級(jí)<200不掰檢出不蹲檢出<100

濟(jì)鼻級(jí)<10000*20不掰檢出不御椅出不得檢出

婦女經(jīng)期11生用品

普通級(jí)《200不物檢出不得檢出<100

消?級(jí)CIO000<20不得檢出不得檢出不幅依出

尿布等措泄物_E生用品

科通級(jí)<200不得檢出不得檢出<100

消叁級(jí)<10000<20不得檢出不得檢出不得檢出

避孕套<20」凈檢組_不得檢出不得檢出

1

|）如初始污染葡超過(guò)表內(nèi)畋值?應(yīng)相應(yīng)提高殺滅指數(shù)?使達(dá)到本標(biāo)虛規(guī)定的細(xì)薄與真甫理值.

A-W*.tM./I.flhA.AMA*4??＞4＜-＞W(wǎng)M4194

衛(wèi)生濕巾除必須達(dá)到表1中的微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)外，對(duì)大腸桿菌和金

黃色葡萄球菌的殺滅率須為90%,如需標(biāo)明對(duì)真菌的作用，還須對(duì)白

色念珠菌的殺滅率＜90%、其殺菌作用在室溫下至少須保持1年。

抗菌（或抑菌）產(chǎn)品除必須達(dá)到表1中的同類(lèi)同級(jí)產(chǎn)品微生物學(xué)

標(biāo)準(zhǔn)外，對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌率須＜50%（溶出性）

或＞26%（非溶出性）,如需標(biāo)明對(duì)真菌的作用.還須白色念珠菌的

抑菌率＜50%（溶出性）或＞26%（非溶出性），其抑菌作用在室溫

下至少須保持1年。

二PART生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生指標(biāo)

裝配與包裝車(chē)間空氣中細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)＜

2500CFU/m3o

工作臺(tái)表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)＜2

20CFU/cme

工人手表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)＜300CFU/只手,并不得檢出致病菌。

生產(chǎn)環(huán)境采樣與測(cè)試方法一PART空氣采樣與測(cè)試方法

1、樣品采集

室內(nèi)面積不超過(guò)30m2,在對(duì)角線上設(shè)里、中、外三點(diǎn)，里、外

點(diǎn)位置距墻1m。

室內(nèi)面積超過(guò)30m3設(shè)東、西、南、北、中5點(diǎn)，周?chē)?點(diǎn)距墻

lme

采樣時(shí)，將含營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的平板（直徑9cm）置采樣點(diǎn)（約桌

面高度）,打開(kāi)平皿蓋，使平板在空氣中暴露5min.

2、細(xì)菌培養(yǎng)

在采樣前將準(zhǔn)備好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基置35℃±2（培養(yǎng)24h,取

出檢查有無(wú)污染，將污染培養(yǎng)基剔除.

將已采集的培養(yǎng)基在6h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室,于35℃±2。（：培養(yǎng)48h觀

察結(jié)果，計(jì)數(shù)平板上細(xì)菌菌落數(shù)。

3、菌落計(jì)算

yl--空氣中細(xì)菌菌落總數(shù)，CFU/m3

A--平板上平均細(xì)菌菌落數(shù)；

S1--平板面積，cm2;

一暴露時(shí)間,

tmino

二PART工作臺(tái)表面與工人手表面采樣與測(cè)試方法

1、樣品采集

工作臺(tái)：將經(jīng)滅菌的內(nèi)徑為5cm*5cm的滅菌規(guī)格板放在被檢物

體表面，用一浸有滅菌生理鹽水的棉簽在其內(nèi)涂抹10次，然后剪去手

接觸部分棉棒，將棺簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢。

工人手：被檢人五指并攏，用一浸漫生理鹽水的棉簽在右手指曲

面，從指尖到指端來(lái)回涂擦10次.然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽

放人含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢。

2、細(xì)菌菌落總數(shù)檢測(cè)

將已采集的樣品在6h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室，每支采樣管充分混勻后取1mL

樣液，放人滅菌平皿內(nèi)，傾注營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每個(gè)樣品平行接種兩

塊平皿，置35℃士2℃培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)平板上細(xì)菌菌落數(shù)。

計(jì)算公式：

A

”=亍義10

y2--工作臺(tái)表面細(xì)菌菌落總數(shù)，CFU/m3

A一平板上平均細(xì)菌菌落數(shù);

S2--采樣面積,cnV；

y3―工人手表面細(xì)菌菌落總數(shù)，CFU/只手。

產(chǎn)品的微生物檢測(cè)方法一PART產(chǎn)品采集與樣品處理

于同一批號(hào)的三個(gè)運(yùn)輸包裝中至少抽取12個(gè)最小銷(xiāo)售包裝樣品，

1/4樣品用于檢測(cè)，1/4樣品用于留樣。另1/2樣品（可就地封存）必

要時(shí)用干復(fù)檢。抽樣的最小銷(xiāo)售包裝不應(yīng)有破裂，檢驗(yàn)前不得啟開(kāi)。

在100級(jí)凈化條件下用無(wú)菌方法打開(kāi)用千檢測(cè)的至少3個(gè)包裝，

從每個(gè)包裝中取樣，準(zhǔn)確稱(chēng)取10g±1g樣品。剪碎后加人到200mL

滅菌生理鹽水中，充分混勻，得到一個(gè)生理鹽水樣液。液體產(chǎn)品用原

液直接做樣液。

如被檢樣品含有大量吸水樹(shù)脂材料而導(dǎo)致不能吸出足夠樣液時(shí)，

稀釋液量可按每次50mL遞增.直至能吸出足夠測(cè)試用樣液。在計(jì)算

細(xì)菌菌落總數(shù)與真菌菌落總數(shù)時(shí)相應(yīng)調(diào)整稀釋度。

二PART細(xì)菌菌落總數(shù)與初始污染菌檢測(cè)方法

本方法適用于產(chǎn)品初始污染菌與細(xì)菌菌落總數(shù)（以下統(tǒng)稱(chēng)為細(xì)菌

菌落總數(shù)）檢測(cè)。

1、操作步驟

待上述生理鹽水樣液自然沉降后取上清液作菌落計(jì)數(shù)。共接種5

個(gè)平皿,每個(gè)平皿中加入1mL樣液.然后用冷卻至45℃左右的熔化的

營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15~20mL倒入每個(gè)平皿內(nèi)混合均勻。待瓊脂凝固后

翻轉(zhuǎn)平皿35℃±2?！杜囵B(yǎng)48h后,計(jì)算平板上的菌落數(shù)。

2、菌落總數(shù)計(jì)算

X1--細(xì)菌菌落總數(shù)CFU/g或CFU/mL

A-營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上的細(xì)菌菌落總數(shù);

K--稀釋度。

取可疑菌落涂片作革蘭氏染色.鏡檢為革蘭氏陰性菌者應(yīng)進(jìn)行下

歹I」試驗(yàn)：

氧化酶試驗(yàn)、綠膿菌素試驗(yàn)、硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)、明膠液化試

驗(yàn)、42P生長(zhǎng)試驗(yàn)

綠膿菌素試驗(yàn)：取2~3個(gè)可疑菌落，分別接種在綠膿菌素測(cè)定用

培養(yǎng)基斜面,35℃士2℃培養(yǎng)24h,加入三氯甲燒3~5mL,充分振蕩使

培養(yǎng)物中可能存在的綠膿菌素溶解，待三氯甲燒呈藍(lán)色時(shí)，用吸管移

到另一試管中并加入lmol/L的鹽酸1mL,振蕩后靜置片刻。如上層

出現(xiàn)粉紅色或紫紅色即為陽(yáng)性，表示有綠膿菌素存在。

2、結(jié)果報(bào)告

氧化酶及綠膿桿菌試驗(yàn)均為陽(yáng)性者，即可報(bào)告被檢樣品中檢出綠

膿桿菌。

如綠膿菌素試驗(yàn)陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)氣和42。（：生長(zhǎng)試

驗(yàn)三者皆為陽(yáng)性時(shí)，仍可報(bào)告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。

五PART金黃色葡萄球菌檢測(cè)方法

1、操作步驟

取樣液5mL.加入到50mLscDLP培養(yǎng)液中，充分混勻，置35℃

士2℃培養(yǎng)24h0

自上述增菌液中取1~2接種環(huán)，劃線接種在血瓊脂培養(yǎng)基上，置

35℃±2乙培養(yǎng)24~48h在血瓊脂平板上該菌落呈金黃色.大而突起,

圓形，不透明，表面光滑，周?chē)腥苎Α?/p>

挑取典型菌落1涂片作革蘭氏染色鏡檢，金黃色葡萄球菌為革蘭

氏陽(yáng)性球菌，排列成葡萄狀，無(wú)芽胞與莢膜。鏡檢符合上述情況，應(yīng)

進(jìn)行下列試驗(yàn)：

甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)：取上述菌落接種甘露醇培養(yǎng)液,置35℃±2℃

培養(yǎng)24h,發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸者為陽(yáng)性。

血漿凝固酶試驗(yàn)：玻片法：取清潔干燥載玻片，一端滴加一滴生

理鹽水，另一端滴加一滴兔血漿.挑取菌洛分別與生理鹽水和血漿混

合，5min如血漿內(nèi)出現(xiàn)團(tuán)塊或顆粒狀凝塊，而鹽水滴仍呈均勻混濁無(wú)

凝固則為陽(yáng)性，如兩者均無(wú)凝固則為陰性。凡鹽水滴與血漿滴均有凝

固現(xiàn)象，再進(jìn)行試管凝固酶試驗(yàn)；

試管法：吸取1:4新鮮血漿0.5mL,放滅菌小試管中，加人等量

待檢菌24h肉湯培養(yǎng)物0.5mL。混勻,放35℃±2（溫箱或水浴

中.每半小時(shí)觀察一次.24h之內(nèi)呈現(xiàn)凝塊即為陽(yáng)性。同時(shí)以已知血

漿凝固酶陽(yáng)性和陰性菌株肉湯培養(yǎng)物各0.5mL作為陽(yáng)性與陰性對(duì)照。

2、結(jié)果報(bào)告

凡在瓊脂平板上有可疑菌落生長(zhǎng)，鏡檢為革蘭氏陽(yáng)性葡萄球菌，

并能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，血漿凝固酶試驗(yàn)陽(yáng)性者，可報(bào)告被檢樣品檢出

金黃色葡萄球菌。

六PART溶血性鏈球菌檢測(cè)方法

1、操作步驟

取樣液5mL加入到50mL葡萄糖肉湯，35℃±2℃培養(yǎng)24ho

將培養(yǎng)物劃線接種血瓊脂平板，35℃±2。（：培養(yǎng)24h觀察菌落特

征。溶血性鏈球菌在血平板上為灰白色，半透明或不透明，針尖狀突

起，表面光滑，邊緣整齊，周?chē)袩o(wú)色透明溶血圈。

挑取典型菌落作涂片革蘭氏染色鏡檢，應(yīng)為革蘭氏陽(yáng)性，呈鏈狀

排列的球菌.鏡檢符合上述情況，應(yīng)進(jìn)行下列試驗(yàn)：

鏈激酶試驗(yàn)：吸取草酸鉀血漿0.2rnL（0.01g草酸鉀加5mL兔血漿

混勻，經(jīng)離心沉淀.吸取上清液），加人0,8mL滅菌生理鹽水，混勻

后再加入待檢菌24h肉湯培養(yǎng)物0.5mL和0.25%氯化鈣0.25mL,混

勻放35℃±2℃水浴中，2min觀察一次（一般lOmin內(nèi)可凝固），

待血漿凝固后繼續(xù)觀察并記錄溶化時(shí)間。如2h內(nèi)不溶化，繼續(xù)放置

24h觀察，如凝塊全部溶化為陽(yáng)性，24h仍不溶化為陰性。

桿菌膚敏感試驗(yàn)：將被檢菌菌液涂布血平板上，用滅菌攝子取每

片含0.04單位桿菌膚的紙片放在平板表面上，同時(shí)以已知陽(yáng)性菌株作

對(duì)照，在35℃±2℃下放置18?24h,有抑菌帶者為陽(yáng)性。

2、結(jié)果報(bào)告

鏡檢革蘭氏陽(yáng)性鏈狀排列球菌，血平板上呈現(xiàn)溶血圈鏈激酶和桿

菌肽試驗(yàn)陽(yáng)性.可報(bào)告被檢樣品檢出溶血性鏈球菌。

七PART真菌菌落總數(shù)檢測(cè)方法

1、操作步驟

待上述生理鹽水樣液自然沉降后取上清液作真菌計(jì)數(shù)。共接種5

個(gè)平皿，每個(gè)平皿中加入1mL樣