11月分子生物學(xué)題庫一、單選題（共70題，每題1分，共70分）1.題目：PCR反應(yīng)體系的描述錯(cuò)誤的是A、模板B、緩沖液C、一條引物D、dNTPE、DNA聚合酶2.題目：對(duì)于相同大小的核酸片段，最快的轉(zhuǎn)移方法是A、向下虹吸轉(zhuǎn)移B、毛細(xì)管電泳C、電轉(zhuǎn)移D、虹吸轉(zhuǎn)移E、真空轉(zhuǎn)移3.題目：下列不屬于單基因遺傳病產(chǎn)前診斷常用方法的是A、WesternblotB、PCR-SSCPC、多重PCRD、巢式PCRE、全基因組擴(kuò)增4.題目：目前的DNA自動(dòng)化測序技術(shù)可以一次性讀取的序列長度約A、500bpB、1000bpC、2000bpD、100bpE、50bp5.題目：組織DNA提取中，苯酚-氯仿抽提離心分三層，DNA位于A、上下層均有B、中間層C、中間層和下層D、上層E、下層6.題目：下列屬于抑癌基因的是()A、mycB、RbC、c-erb-2D、sisE、ras7.題目：以mRNA為模板合成cDNA的酶是A、TaqDNA聚合酶B、DNA酶C、逆轉(zhuǎn)錄酶D、RNA酶E、限制性內(nèi)切酶8.題目：GeneXpert全自動(dòng)結(jié)核桿菌檢測技術(shù)現(xiàn)可進(jìn)行哪種藥物的耐藥檢測A、異煙肼B、吡嗪酰胺C、乙胺丁醇D、鏈霉素E、利福平9.題目：PCR反應(yīng)體系不包括A、合適的緩沖液體系B、cDNA探針C、耐熱的TaqDNA聚合酶D、4種dNTPE、模板DNA10.題目：DNA雙螺旋之間氫鍵斷裂，雙螺旋解開，DNA分子成為單鏈，這一過程稱A、探針B、復(fù)性C、雜交D、復(fù)雜性E、變性11.題目：第二代測序技術(shù)一般不用到A、雙脫氧鏈終止法B、文庫接頭C、高通量的并行PCRD、高性能計(jì)算機(jī)對(duì)測序數(shù)據(jù)進(jìn)行拼接和分析E、高通量的并行測序反應(yīng)12.題目：PCR-ASO描述錯(cuò)誤的是A、需嚴(yán)格控制雜交條件B、需正常和異常兩種探針C、檢測點(diǎn)突變的技術(shù)D、需要寡核苷酸探針E、PCR產(chǎn)物必須電泳分離13.題目：以下為熒光染料技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，不正確的是A、熒光信號(hào)量與PCR反應(yīng)產(chǎn)物量成正比，可以實(shí)時(shí)監(jiān)測B、適合任何一個(gè)反應(yīng)體系C、特異性高D、熒光信號(hào)的檢測在每一次循環(huán)延伸后，簡單方便E、不需要進(jìn)行凝膠分離等二次處理PCR產(chǎn)物，避免污染14.題目：指導(dǎo)合成蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因大多數(shù)為：A、中度重復(fù)序列B、散在核原件C、單拷貝序列D、高度重復(fù)序列E、回文序列15.題目：表達(dá)譜芯片主要用于分析()A、目標(biāo)序列富集B、差異基因表達(dá)C、蛋白質(zhì)之間作用D、SNPE、單個(gè)堿基缺失16.題目：連接酶鏈反應(yīng)正確的是A、引物在模板上的位置不能緊密相連B、不需預(yù)知靶DNA的序列C、不能用來檢測DNA點(diǎn)突變D、屬于靶序列擴(kuò)增E、DNA連接酶代替DNA聚合酶17.題目：下列有關(guān)遺傳病的敘述中正確的是A、遺傳病一定是先天性疾病B、遺傳病只能診斷不能治療C、先天性疾病都是遺傳病D、遺傳病都是由基因突變引起的E、遺傳病是指由遺傳物質(zhì)改變而引起的疾病18.題目：人類基因組的堿基數(shù)目為A、2.9×10bp6B、4.0×10bp6C、4.0×10bp8D、3.0×10bp9E、4.0×10bp919.題目：目前確認(rèn)與人類腫瘤發(fā)生有關(guān)的RNA病毒是A、EB病毒B、人類皰疹病毒-8C、乙型肝炎病毒D、人乳頭狀瘤病毒E、丙型肝炎病毒20.題目：當(dāng)標(biāo)本核酸量非常低難以擴(kuò)增時(shí)，可采用的PCR技術(shù)是A、原位PCRB、巢式PCRC、熒光PCRD、轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)擴(kuò)增E、逆轉(zhuǎn)錄PCR21.題目：作為芯片固相載體的材料描述正確的是A、主要有玻片、硅片等實(shí)性材料B、這些載體材料不需要處理，其表面存在活性基團(tuán)(如羥基或者氨基)C、可以直接固定已經(jīng)合成的寡核苷酸探針D、不使用硝酸纖維素膜、尼龍膜及聚丙烯膜等膜性材料E、不需要對(duì)介質(zhì)表面進(jìn)行化學(xué)預(yù)處理--活化22.題目：以下不是APC基因失活方式的是A、無義突變B、移位C、缺失D、錯(cuò)位拼接E、插入23.題目：點(diǎn)突變引起的血友病A的分子診斷方法不包括A、長距離PCRB、PCR-RFLPC、PCR-VNTRD、PCR-STRE、PCR-SSCP24.題目：決定PCR反應(yīng)特異性和PCR長度的物質(zhì)是()A、dNTPB、模板C、引物D、DMSOE、Mg2+25.題目：探針基因芯片技術(shù)的本質(zhì)就是A、聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)B、酶切技術(shù)C、蛋白質(zhì)分子雜交技術(shù)D、基因重組技術(shù)E、核酸分子雜交技術(shù)26.題目：首個(gè)被證實(shí)和克隆的乳腺癌易感基因是A、BRCA2B、BRCA1C、ATMD、p53E、c-erbB-2/HER227.題目：組織DNA提取中，EDTA的作用是A、去除蛋白質(zhì)B、抑制DNaseC、沉淀DNAD、抑制RNaseE、減少液體表面張力28.題目：人類基因組的組織特點(diǎn)描述不正確的是A、大部分為非編碼序列B、基因組中各個(gè)基因的大小和內(nèi)部組織的差異不大C、基因組含重復(fù)序列D、功能相關(guān)的基因常散在分布于不同的染色體上E、每個(gè)結(jié)構(gòu)基因都有單獨(dú)的調(diào)控序列29.題目：原核生物基因組中沒有()A、外顯子B、插入序列C、轉(zhuǎn)錄因子D、操縱子E、內(nèi)含子30.題目：TaqMan探針技術(shù)要求擴(kuò)增片段應(yīng)在A、300~350bpB、250~300bpC、150~200bpD、50~150bpE、200~250bp31.題目：HBVDNA中最小的一個(gè)開放閱讀框是A、S基因區(qū)B、C基因區(qū)C、前S基因區(qū)D、P基因區(qū)E、X基因區(qū)32.題目：定點(diǎn)誘發(fā)突變可以通過以下哪個(gè)過程獲得：A、PCRB、LCRC、RT-PCRD、SSCPE、ASO33.題目：一個(gè)完整的生物芯片配套軟件不包括A、統(tǒng)計(jì)分析軟件B、數(shù)據(jù)提取軟件C、畫圖軟件D、生物芯片掃描儀的硬件控制軟件E、生物芯片的圖像處理軟件34.題目：稀有堿基主要存在于A、線粒體DNAB、核DNAC、轉(zhuǎn)運(yùn)RNAD、核糖體RNAE、信使RNA35.題目：母親血漿中的胎兒DNAA、可用于檢測胎兒從母親遺傳而來的線粒體DNA突變B、確定胎兒是否從母親遺傳了X連鎖的基因突變C、血友病A的產(chǎn)前診斷D、確定RhD陽性孕婦所懷胎兒的RhD情況E、占母親血漿總DNA的50%以上36.題目：EB作為核酸電泳指示劑的原理是()A、EB是核酸轉(zhuǎn)性染料B、EB特異性結(jié)合核酸分子C、EB是一種可視物質(zhì)D、EB插入核酸分子之間并在紫外下產(chǎn)生熒光E、EB在紫外下發(fā)射熒光37.題目：單基因遺傳病分子診斷的主要應(yīng)用是A、攜帶者診斷B、攜帶者篩查C、癥狀前診斷D、產(chǎn)前診斷E、耐藥基因檢測38.題目：下列方法中能同時(shí)檢測幾種瘧原蟲混合感染的是A、PCR-RFLPB、多重PCRC、普通PCRD、競爭PCRE、巢式PCR39.題目：質(zhì)粒的主要成分是A、氨基酸衍生物B、脂類C、多糖D、蛋白質(zhì)E、DNA分子40.題目：線粒體病分子生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)志物不包括A、線粒體單體型B、點(diǎn)突變位點(diǎn)C、SNP位點(diǎn)D、重復(fù)序列E、缺失或插入片段41.題目：下列關(guān)于細(xì)菌感染性疾病的分子生物學(xué)檢驗(yàn)說法錯(cuò)誤的是A、可以檢測不能或不易培養(yǎng)、生長緩慢的病原菌B、可以對(duì)細(xì)菌進(jìn)行基因分型C、可以實(shí)現(xiàn)對(duì)感染細(xì)菌的廣譜快速檢測D、其檢驗(yàn)技術(shù)都是PCR及其衍生技術(shù)E、可以檢測病原菌耐藥基因42.題目：發(fā)出臨床檢驗(yàn)報(bào)告前應(yīng)進(jìn)行結(jié)果審核，審核內(nèi)容不包括A、室內(nèi)質(zhì)控是否在控B、檢驗(yàn)報(bào)告是否正確C、檢驗(yàn)結(jié)果與臨床診斷是否相符D、室間質(zhì)量評(píng)價(jià)是否合格E、臨床醫(yī)生申請(qǐng)的檢驗(yàn)項(xiàng)目是否已全部檢驗(yàn)43.題目：單細(xì)胞基因擴(kuò)增一般采用下列何種技術(shù)增加檢測的敏感性和特異性A、多重PCRB、巢式PCRC、等位基因特異性PCRD、PCR-SSCPE、PCR-RFLP44.題目：轉(zhuǎn)錄依賴擴(kuò)增系統(tǒng)的描述錯(cuò)誤的是A、以RNA為模板B、再由DNA轉(zhuǎn)錄生成大量RNA拷貝C、首先由靶RNA合成DNA拷貝D、產(chǎn)物為DNAE、為等溫?cái)U(kuò)增45.題目：HBV耐藥性的檢測在臨床上主要是針對(duì)A、HBVDNA聚合酶S基因的檢測B、HBVDNA聚合酶P基因的檢測C、HBVDNA聚合酶前C基因的檢測D、HBVDNA聚合酶C基因的檢測E、HBVDNA聚合酶X基因的檢測46.題目：可作為分子遺傳標(biāo)記的是A、RFLPB、高表達(dá)蛋白C、HLAD、染色體E、單拷貝序列47.題目：第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)可以預(yù)測晚期轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者是否能從靶向治療藥物西妥昔單抗中獲益的生物標(biāo)志物是A、EGFR基因B、K-rasC、TTF-1D、bcl-2基因E、CEA48.題目：不適宜于直接作為第一代測序技術(shù)測序的DNA模板()A、克隆于質(zhì)粒載體的DNA片段B、雙鏈DNA片段和PCR產(chǎn)物C、提取的染色質(zhì)DNAD、單鏈DNA片段E、克隆于真核載體的DNA片段49.題目：基因診斷間接方法不包括A、PCR-RFLPB、基于SNP的單倍型分析C、基于STR的微衛(wèi)星分析D、RFLP連鎖分析E、Southernblot50.題目：操縱子結(jié)構(gòu)不存在于：A、大腸桿菌基因組中B、病毒基因組中C、細(xì)菌基因組中D、真核生物基因組中E、原核生物基因組中51.題目：乳腺癌分子生物學(xué)檢測的意義不包括A、反映腫瘤的生物學(xué)行為B、篩選適合內(nèi)分泌、化療及靶向治療的患者C、篩選易感人群D、預(yù)測早期乳腺癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)E、幫助減輕化療的不良反應(yīng)52.題目：Northern印跡雜交可以用于A、用于基因定位分析B、用于陽性菌落的篩選C、不僅可以檢測DNA樣品中是否存在某一特定的基因，而且還可以獲得基因片段的大小及酶切位點(diǎn)分布的信息D、檢測靶分子是RNAE、快速確定是否存在目的基因53.題目：眾多腫瘤中遺傳因素最突出的一種腫瘤是A、結(jié)直腸癌B、乳腺癌C、肺癌D、前列腺癌E、肝癌54.題目：線粒體基因組編碼幾種rRNAA、2種B、3種C、22種D、18種E、20種55.題目：第二代測序技術(shù)最主要技術(shù)特征是A、直接進(jìn)行個(gè)體基因組測序和SNP研究B、高通量和并行PCR測序C、直接分析SNPD、對(duì)單分子DNA進(jìn)行非PCR的測序E、針對(duì)SNP進(jìn)行非PCR的測序56.題目：HIV最易發(fā)生變異的部位是A、內(nèi)膜蛋白B、刺突蛋白C、包膜蛋白D、逆轉(zhuǎn)錄酶E、核衣殼蛋白57.題目：一般來說核酸雜交的溫度低于其Tm值多少度A、30~40℃B、15~25℃C、5~10℃D、10~15℃E、40~50℃58.題目：限制性長度多態(tài)性是由于以下哪項(xiàng)所致A、堿基變化發(fā)生在外顯子B、堿基變化發(fā)生在酶切位點(diǎn)上C、堿基變化發(fā)生在微衛(wèi)星序列上D、堿基變化發(fā)生在內(nèi)含子E、堿基變化發(fā)生在增強(qiáng)子上59.題目：大多數(shù)質(zhì)粒在自然狀態(tài)下是()A、線性雙鏈DNAB、環(huán)狀雙鏈DNAC、環(huán)狀單鏈DNAD、線性單鏈RNAE、線性單鏈DNA60.題目：用于肺炎支原體DNA檢測的痰液標(biāo)本應(yīng)懸浮于A、酒精B、1mol/LNaOHC、1mol/LHCLD、生理鹽水E、變性劑61.題目：若要采用Southern或Northern印跡方法分析某特定基因及其表達(dá)產(chǎn)物，需要A、收集組織或細(xì)胞樣品，然后從中提取總DNA或RNAB、利用PCR技術(shù)直接從標(biāo)本中擴(kuò)增出待分析的片段C、收集培養(yǎng)細(xì)胞的上清液D、收集組織或細(xì)胞樣品，然后從中提取蛋白質(zhì)E、制備固定在支持物上的組織或細(xì)胞62.題目：關(guān)于真菌，以下描述正確的是A、淺部真菌感染對(duì)治療有頑固性，對(duì)機(jī)體的影響相對(duì)較小B、病原性真菌根據(jù)其入侵組織部位深淺的不同分為淺部真菌和內(nèi)部真菌C、真菌種類繁多，其中大多數(shù)對(duì)人類有害D、真菌感染對(duì)人體的危害不大E、近年真菌病的發(fā)病率有明顯下降趨勢63.題目：絕大多數(shù)β-地中海貧血系由位于第11號(hào)染色體上的β-珠蛋白基因中的基因突變所致，下列方法中不能用于分子生物學(xué)檢驗(yàn)的技術(shù)是A、PCR-RDBB、基因芯片C、多重PCRD、PCR-ASOE、MOEA-PCR64.題目：第一代DNA測序技術(shù)的核心技術(shù)是A、熒光標(biāo)記技術(shù)B、PCR技術(shù)C、Maxam和Gilbert的化學(xué)降解法D、DNA自動(dòng)分析技術(shù)E、Sanger的雙脫氧鏈終止法65.題目：下列說法錯(cuò)誤的是A、用于PCR檢測的樣本可用肝素作為抗凝劑B、外周血單個(gè)核細(xì)胞可從抗凝全血制備C、用于RNA檢測的樣本短期可保存在-20℃D、如使用血清標(biāo)本進(jìn)行檢測應(yīng)盡快分離血清E、用于核酸提取的痰液標(biāo)本應(yīng)加入1mol/LNaOH初步處理66.題目：一般來說，設(shè)計(jì)的寡核苷酸探針的長度為：A、17~50bpB、2~10bpC、60~100bpD、100~200bpE、200~300bp67.題目：用于病毒基因突變檢測的技術(shù)是A、cDNA表達(dá)芯片技術(shù)B、PCR-RFLP技術(shù)C、原位雜交技術(shù)D、PCR微衛(wèi)星檢測技術(shù)E、熒光定量PCR技術(shù)68.題目：在pH為下述何種范圍時(shí)，Tm值變化不明顯A、pH為5~6B、pH為3~5C、pH為8~11D、pH為5~9E、pH為4~569.題目：在Southern印跡中常用的核酸變性劑是A、甲醛B、碳酸鈉C、乙醛D、鹽酸E、氫氧化鈉70.題目：基因診斷與其他診斷比較，最主要的特點(diǎn)在于()A、診斷周期短B、取材方便C、診斷費(fèi)用低D、針對(duì)基因結(jié)構(gòu)E、針對(duì)病變細(xì)胞答案與解析一、單選題答案1.參考答案：C說明：PCR反應(yīng)體系中需要模板、兩條引物、dNTP、DNA聚合酶、緩沖液等。引物需要兩條，分別與模板鏈的兩端互補(bǔ)結(jié)合，引導(dǎo)DNA合成，而不是一條引物，所以選項(xiàng)B描述錯(cuò)誤。2.參考答案：E3.參考答案：A說明：Westernblot是蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)，用于檢測蛋白質(zhì)，并非單基因遺傳病產(chǎn)前診斷常用的針對(duì)基因的檢測方法。巢式PCR、全基因組擴(kuò)增、多重PCR、PCR-SSCP都可用于單基因遺傳病產(chǎn)前診斷中對(duì)基因的分析檢測。4.參考答案：B5.參考答案：D說明：在組織DNA提取中，苯酚-氯仿抽提離心后分三層，上層為水相，含有DNA等；中間層為蛋白質(zhì)沉淀；下層為有機(jī)相。所以DNA位于上層。6.參考答案：B說明：抑癌基因是一類抑制細(xì)胞過度生長、增殖從而遏制腫瘤形成的基因。Rb基因是最早發(fā)現(xiàn)的抑癌基因之一，它對(duì)細(xì)胞周期的G1期具有重要調(diào)控作用，可抑制細(xì)胞增殖。而ras、myc、c-erb-2、sis等屬于原癌基因，它們?cè)谡Ｇ闆r下參與細(xì)胞的生長、分化等生理過程，但在某些異常情況下可能會(huì)發(fā)生突變而導(dǎo)致細(xì)胞癌變。7.參考答案：C說明：逆轉(zhuǎn)錄酶是以mRNA為模板合成cDNA的關(guān)鍵酶。它能夠催化以RNA為模板合成DNA的反應(yīng)，從而將mRNA逆轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的DNA（cDNA）。DNA酶作用是降解DNA；TaqDNA聚合酶用于PCR反應(yīng)中擴(kuò)增DNA；限制性內(nèi)切酶主要用于切割DNA特定序列；RNA酶用于降解RNA。8.參考答案：E說明：GeneXpert全自動(dòng)結(jié)核桿菌檢測技術(shù)現(xiàn)可進(jìn)行利福平耐藥檢測。它通過對(duì)結(jié)核桿菌特定基因的檢測來判斷是否存在利福平耐藥情況。9.參考答案：B說明：PCR反應(yīng)體系包括耐熱的TaqDNA聚合酶、4種dNTP、合適的緩沖液體系、模板DNA等，不包括cDNA探針。10.參考答案：E說明：DNA變性是指在某些理化因素作用下，DNA雙螺旋的互補(bǔ)堿基對(duì)之間的氫鍵斷裂，使DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)松散，成為單鏈的現(xiàn)象。復(fù)性是指變性的DNA在適當(dāng)條件下，兩條互補(bǔ)鏈可重新配對(duì)，恢復(fù)天然的雙螺旋構(gòu)象。復(fù)雜性不是DNA的這種結(jié)構(gòu)變化過程。雜交是指不同來源的核酸分子相互結(jié)合的過程。探針是用于檢測特定核酸序列的一段核酸。所以DNA雙螺旋之間氫鍵斷裂，雙螺旋解開成為單鏈的過程是變性，答案選A。11.參考答案：A說明：第二代測序技術(shù)一般采用文庫接頭構(gòu)建文庫，通過高通量的并行PCR擴(kuò)增文庫，再進(jìn)行高通量的并行測序反應(yīng)，最后利用高性能計(jì)算機(jī)對(duì)測序數(shù)據(jù)進(jìn)行拼接和分析。而雙脫氧鏈終止法是第一代測序技術(shù)Sanger測序法所使用的方法，不是第二代測序技術(shù)用到的。12.參考答案：E說明：PCR-ASO技術(shù)中，PCR產(chǎn)物不一定必須電泳分離，也可通過斑點(diǎn)雜交等其他方式進(jìn)行檢測。該技術(shù)需要寡核苷酸探針，是檢測點(diǎn)突變的技術(shù)，需要正常和異常兩種探針，并且需嚴(yán)格控制雜交條件。13.參考答案：C14.參考答案：C說明：單拷貝序列是指在基因組中只出現(xiàn)一次或很少幾次的DNA序列，結(jié)構(gòu)基因大多數(shù)為單拷貝序列，指導(dǎo)合成蛋白質(zhì)。中度重復(fù)序列、高度重復(fù)序列一般不編碼蛋白質(zhì)。回文序列是一種特殊的DNA序列結(jié)構(gòu)，與指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成無關(guān)。散在核原件也不是主要指導(dǎo)合成蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因類型。15.參考答案：B說明：表達(dá)譜芯片是將大量基因探針分子固定于支持物上后與標(biāo)記的樣品分子進(jìn)行雜交，通過檢測每個(gè)探針分子的雜交信號(hào)強(qiáng)度進(jìn)而獲取樣品分子的數(shù)量和序列信息，主要用于分析基因的表達(dá)水平，從而找出差異表達(dá)的基因。SNP分析一般用專門的SNP芯片；單個(gè)堿基缺失檢測有特定的技術(shù)方法；目標(biāo)序列富集也有其他相應(yīng)技術(shù)；蛋白質(zhì)之間作用分析常用的是蛋白質(zhì)芯片等技術(shù)，而非表達(dá)譜芯片。16.參考答案：E說明：連接酶鏈反應(yīng)（LCR）中是DNA連接酶代替了DNA聚合酶進(jìn)行反應(yīng)。它主要用于檢測已知序列的點(diǎn)突變等，需要預(yù)知靶DNA序列，引物在模板上緊密相連，屬于信號(hào)擴(kuò)增而非靶序列擴(kuò)增。17.參考答案：E說明：遺傳病是指由遺傳物質(zhì)改變而引起的疾病，C正確；遺傳病不一定是先天性疾病，如一些隱性遺傳病出生時(shí)可能不表現(xiàn)癥狀，A錯(cuò)誤；先天性疾病不一定都是遺傳病，如母親在孕期受病毒感染，導(dǎo)致胎兒患先天性心臟病，B錯(cuò)誤；遺傳病是由遺傳物質(zhì)改變引起的，包括基因突變、染色體變異等，D錯(cuò)誤；遺傳病可以通過產(chǎn)前診斷、遺傳咨詢等手段進(jìn)行診斷，也可以通過藥物治療、手術(shù)治療等方式進(jìn)行治療，E錯(cuò)誤。18.參考答案：D19.參考答案：E20.參考答案：B說明：巢式PCR是一種變異的聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)，使用兩對(duì)（而非一對(duì)）PCR引物擴(kuò)增完整的片段。第一對(duì)PCR引物擴(kuò)增片段和普通PCR相似。第二對(duì)引物稱為巢式引物（因?yàn)樗麄冊(cè)诘谝淮蜳CR產(chǎn)物的內(nèi)部）結(jié)合在第一次PCR產(chǎn)物內(nèi)部，使得第二次PCR擴(kuò)增片段短于第一次擴(kuò)增。巢式PCR的好處在于，如果第一次擴(kuò)增產(chǎn)生了錯(cuò)誤片段，則第二次能在錯(cuò)誤片段上進(jìn)行引物配對(duì)并擴(kuò)增的概率極低，因此提高了擴(kuò)增的特異性。當(dāng)標(biāo)本核酸量非常低難以擴(kuò)增時(shí)，巢式PCR通過兩輪擴(kuò)增提高了擴(kuò)增的靈敏度和特異性，能夠檢測到低豐度的核酸，故可采用巢式PCR技術(shù)。21.參考答案：A說明：芯片固相載體主要有玻片、硅片等實(shí)性材料，選項(xiàng)A正確；硝酸纖維素膜、尼龍膜及聚丙烯膜等膜性材料也可作為芯片固相載體，選項(xiàng)B錯(cuò)誤；這些載體材料通常需要進(jìn)行處理，使其表面存在活性基團(tuán)（如羥基或者氨基），選項(xiàng)C錯(cuò)誤；不能直接固定已經(jīng)合成的寡核苷酸探針，需要對(duì)載體進(jìn)行處理后才能固定，選項(xiàng)D錯(cuò)誤；需要對(duì)介質(zhì)表面進(jìn)行化學(xué)預(yù)處理--活化，選項(xiàng)E錯(cuò)誤。22.參考答案：B23.參考答案：A24.參考答案：C說明：引物是決定PCR反應(yīng)特異性和產(chǎn)物長度的關(guān)鍵物質(zhì)。引物與模板特異性結(jié)合，決定了擴(kuò)增的起始位點(diǎn)和擴(kuò)增片段的長度。模板是提供擴(kuò)增的原始DNA信息；dNTP是合成新DNA的原料；Mg2+影響TaqDNA聚合酶的活性等；DMSO主要起變性劑等作用，它們均不決定PCR反應(yīng)的特異性和產(chǎn)物長度。25.參考答案：E說明：探針基因芯片技術(shù)是基于核酸分子雜交原理，通過固定在芯片上的探針與樣品核酸進(jìn)行雜交來檢測特定核酸序列，其本質(zhì)就是核酸分子雜交技術(shù)。蛋白質(zhì)分子雜交技術(shù)主要涉及蛋白質(zhì)之間的相互作用檢測等，與探針基因芯片技術(shù)本質(zhì)不同；聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)是用于擴(kuò)增核酸片段；基因重組技術(shù)是對(duì)基因進(jìn)行重新組合操作；酶切技術(shù)是用酶切割核酸等，均與探針基因芯片技術(shù)本質(zhì)不相符。26.參考答案：B說明：BRCA1是首個(gè)被證實(shí)和克隆的乳腺癌易感基因。BRCA2是另一個(gè)重要的乳腺癌易感基因，但不是首個(gè)被證實(shí)和克隆的。c-erbB-2/HER2是一種原癌基因，與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，但不是乳腺癌易感基因。ATM是一種與DNA損傷修復(fù)相關(guān)的基因，與乳腺癌的發(fā)生也有一定關(guān)系，但不是首個(gè)被證實(shí)和克隆的乳腺癌易感基因。p53是一種重要的抑癌基因，與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，但不是乳腺癌易感基因。27.參考答案：B說明：EDTA是一種金屬離子螯合劑，能螯合金屬離子，從而抑制DNase的活性，防止DNA被降解。沉淀DNA一般用乙醇等；減少液體表面張力常用表面活性劑等；抑制RNase常用焦碳酸二乙酯等；去除蛋白質(zhì)常用蛋白酶K等及氯仿抽提等方法。28.參考答案：B說明：人類基因組中各個(gè)基因的大小和內(nèi)部組織差異很大，有的基因很小，有的基因則非常大，內(nèi)部結(jié)構(gòu)也十分復(fù)雜。A選項(xiàng)，功能相關(guān)的基因常散在分布于不同的染色體上，這是人類基因組的特點(diǎn)之一；B選項(xiàng)，基因組含重復(fù)序列；D選項(xiàng)，每個(gè)結(jié)構(gòu)基因都有單獨(dú)的調(diào)控序列；E選項(xiàng)，大部分為非編碼序列也都是人類基因組的特點(diǎn)。29.參考答案：E說明：原核生物基因組中沒有內(nèi)含子。原核生物的基因是連續(xù)的，沒有被內(nèi)含子間隔開，轉(zhuǎn)錄后直接翻譯。外顯子是真核生物基因中編碼蛋白質(zhì)的序列，原核生物雖沒有內(nèi)含子但有類似外顯子功能的編碼序列；轉(zhuǎn)錄因子在原核生物基因表達(dá)調(diào)控中也存在；插入序列是原核生物基因組中常見的可移動(dòng)元件；操縱子是原核生物基因表達(dá)調(diào)控的一種重要結(jié)構(gòu)。30.參考答案：D說明：TaqMan探針技術(shù)要求擴(kuò)增片段應(yīng)在>50～150bp，這樣的片段長度能較好地滿足該技術(shù)對(duì)于擴(kuò)增效率、特異性等方面的要求，有利于準(zhǔn)確檢測目標(biāo)核酸序列。31.參考答案：E說明：HBVDNA中的X基因區(qū)是最小的開放閱讀框，該基因區(qū)編碼的X蛋白可反式激活一些細(xì)胞內(nèi)的基因及HBV自身的某些基因，與肝癌的發(fā)生發(fā)展可能有關(guān)。32.參考答案：A說明：定點(diǎn)誘發(fā)突變是在已知DNA序列中取代、插入或缺失特定的核苷酸，從而改變目的基因的特定氨基酸序列，以研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系。PCR技術(shù)可用于定點(diǎn)誘發(fā)突變，通過設(shè)計(jì)帶有突變位點(diǎn)的引物，經(jīng)過PCR擴(kuò)增引入突變。LCR主要用于擴(kuò)增已知序列，不能用于定點(diǎn)誘發(fā)突變；RT-PCR用于從RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA再進(jìn)行擴(kuò)增；SSCP用于檢測DNA片段中是否存在突變，但不是用于獲得定點(diǎn)突變；ASO是等位基因特異性寡核苷酸雜交，用于檢測已知突變，而非獲得定點(diǎn)突變。33.參考答案：C說明：一個(gè)完整的生物芯片配套軟件通常包括生物芯片掃描儀的硬件控制軟件、生物芯片的圖像處理軟件、數(shù)據(jù)提取軟件、統(tǒng)計(jì)分析軟件等，畫圖軟件一般不屬于生物芯片配套軟件的范疇。34.參考答案：C說明：稀有堿基是指除A、G、C、U外的其他堿基，轉(zhuǎn)運(yùn)RNA（tRNA）中含有較多的稀有堿基，可形成局部雙鏈和各種莖環(huán)結(jié)構(gòu)，有利于其識(shí)別密碼子和攜帶氨基酸。核糖體RNA（rRNA）主要參與構(gòu)成核糖體，信使RNA（mRNA）是蛋白質(zhì)合成的模板，核DNA和線粒體DNA主要是遺傳信息的載體，它們一般不含有大量稀有堿基。35.參考答案：D說明：母親血漿中的胎兒DNA可用于確定RhD陽性孕婦所懷胎兒的RhD情況等，C選項(xiàng)正確。母親血漿中胎兒DNA占母親血漿總DNA比例一般較低，A選項(xiàng)錯(cuò)誤；線粒體DNA突變檢測主要針對(duì)線粒體本身特點(diǎn)，不是通過母親血漿中胎兒DNA的常規(guī)用途，B選項(xiàng)錯(cuò)誤；確定胎兒是否從母親遺傳X連鎖基因突變不是其主要用途，D選項(xiàng)錯(cuò)誤；血友病A是X連鎖隱性遺傳病，其產(chǎn)前診斷不是母親血漿中胎兒DNA的主要檢測內(nèi)容，E選項(xiàng)錯(cuò)誤。母親血漿中胎兒DNA主要用于一些胎兒特定基因或遺傳特征的檢測，以輔助診斷和了解胎兒情況，RhD情況檢測是常見應(yīng)用之一。36.參考答案：D說明：EB作為核酸電泳指示劑的原理是其能夠插入核酸分子的堿基對(duì)之間，在紫外光的激發(fā)下產(chǎn)生熒光，從而可以指示核酸的位置和遷移情況。選項(xiàng)A說EB是可視物質(zhì)不準(zhǔn)確；選項(xiàng)B說EB是核酸轉(zhuǎn)性染料錯(cuò)誤；選項(xiàng)C說特異性結(jié)合不準(zhǔn)確；選項(xiàng)D只說在紫外下發(fā)射熒光不完整，關(guān)鍵是插入核酸分子間才產(chǎn)生可指示核酸電泳位置的熒光。37.參考答案：D38.參考答案：B說明：多重PCR是在同一反應(yīng)體系中加入多對(duì)引物，可同時(shí)擴(kuò)增出多種瘧原蟲的特定基因片段，從而能檢測幾種瘧原蟲的混合感染。競爭PCR主要用于定量分析；巢式PCR是提高PCR靈敏度的一種方法；普通PCR一般只能擴(kuò)增單一目的片段；PCR-RFLP主要用于對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行酶切分析以鑒定等，均不能同時(shí)檢測幾種瘧原蟲混合感染。39.參考答案：E說明：質(zhì)粒是一種雙鏈閉環(huán)的DNA分子，其主要成分是DNA。40.參考答案：D41.參考答案：D說明：分子生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)有多種，不都是PCR及其衍生技術(shù)，如基因測序技術(shù)等也廣泛應(yīng)用于細(xì)菌感染性疾病的分子生物學(xué)檢驗(yàn)。選項(xiàng)A，分子生物學(xué)檢驗(yàn)可檢測不能或不易培養(yǎng)、生長緩慢的病原菌；選項(xiàng)B，能實(shí)現(xiàn)對(duì)感染細(xì)菌的廣譜快速檢測；選項(xiàng)C，可以對(duì)細(xì)菌進(jìn)行基因分型；選項(xiàng)D，可以檢測病原菌耐藥基因。42.參考答案：D說明：審核內(nèi)容主要是關(guān)于檢驗(yàn)報(bào)告本身的準(zhǔn)確性、完整性以及與臨床的關(guān)聯(lián)性等，室間質(zhì)量評(píng)價(jià)是否合格主要是用于評(píng)估實(shí)驗(yàn)室整體檢測水平和質(zhì)量控制能力，并非在發(fā)出臨床檢驗(yàn)報(bào)告前對(duì)單個(gè)報(bào)告進(jìn)行審核的內(nèi)容。臨床醫(yī)生申請(qǐng)的檢驗(yàn)項(xiàng)目是否全部檢驗(yàn)關(guān)乎報(bào)告完整性；室內(nèi)質(zhì)控是否在控影響結(jié)果可靠性；檢驗(yàn)報(bào)告是否正確以及檢驗(yàn)結(jié)果與臨床診斷是否相符都是審核的重要方面。43.參考答案：B說明：巢式PCR通過兩輪PCR反應(yīng)，先用一對(duì)引物擴(kuò)增出包含目的基因的大片段，再用位于該片斷內(nèi)部的另一對(duì)引物進(jìn)行第二輪擴(kuò)增，能大大增加目的基因的拷貝數(shù)，從而增加檢測的敏感性和特異性，常用于單細(xì)胞基因擴(kuò)增等提高檢測靈敏度的情況。多重PCR是在同一反應(yīng)體系中加入多對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增多個(gè)不同的靶基因片段；PCR-RFLP主要用于基因分型；等位基因特異性PCR用于檢測特定等位基因；PCR-SSCP用于檢測基因片段的單鏈構(gòu)象多態(tài)性，這些技術(shù)通常不是用于單細(xì)胞基因擴(kuò)增增加檢測敏感性和特異性的主要方法。44.參考答案：D說明：轉(zhuǎn)錄依賴擴(kuò)增系統(tǒng)是以RNA為模板，首先由靶RNA合成DNA拷貝，再由DNA轉(zhuǎn)錄生成大量RNA拷貝，整個(gè)過程在等溫條件下進(jìn)行，產(chǎn)物為RNA，而不是DNA，所以選項(xiàng)D描述錯(cuò)誤。45.參考答案：B說明：HBV耐藥性檢測主要是針對(duì)HBVDNA聚合酶P基因進(jìn)行檢測。P基因編碼DNA聚合酶，其突變與HBV耐藥密切相關(guān)。通過檢測P基因的突變情況，能夠了解病毒對(duì)各種抗病毒藥物的耐藥性，從而指導(dǎo)臨床合理用藥，調(diào)整治療方案。46.參考答案：A說明：RFLP（限制性片段長度多態(tài)性）是第一代分子遺傳標(biāo)記，可用于遺傳分析、基因定位等研究，常被作為分子遺傳標(biāo)記。HLA是人類白細(xì)胞抗原系統(tǒng)；單拷貝序列不是常用的分子遺傳標(biāo)記類型；高表達(dá)蛋白不屬于分子遺傳標(biāo)記范疇；染色體是遺傳物質(zhì)的載體，不是分子遺傳標(biāo)記本身。47.參考答案：B說明：K-ras基因是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)可以預(yù)測晚期轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者是否能從靶向治療藥物西妥昔單抗中獲益的生物標(biāo)志物。西妥昔單抗是一種針對(duì)表皮生長因子受體（EGFR）的單克隆抗體，而K-ras基因狀態(tài)與EGFR靶向治療療效密切相關(guān)。當(dāng)K-ras基因野生型時(shí)，患者可能從西妥昔單抗治療中獲益；若K-ras基因發(fā)生突變，則使用西妥昔單抗可能無效。48.參考答案：C說明：第一代測序技術(shù)需要將DNA模板進(jìn)行處理，使其適合測序反應(yīng)。雙鏈DNA片段、PCR產(chǎn)物、單鏈DNA片段、克隆于質(zhì)粒載體或真核載體的DNA片段等都可以經(jīng)過適當(dāng)處理后作為模板進(jìn)行測序。而提取的染色質(zhì)DNA通常含有大量的蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)，且結(jié)構(gòu)復(fù)雜，不適合直接作為第一代測序技術(shù)的模板，需要進(jìn)一步純化和處理以去除雜質(zhì)并將其轉(zhuǎn)化為適合測序的形式。49.參考答案：E說明：分割Southernblot主要用于檢測DNA片段的大小、數(shù)量等，不是基因診斷間接方法。基因診斷間接方法是通過檢測與致病基因連鎖的遺傳標(biāo)記來推斷個(gè)體是否攜帶致病基因，如基于SNP的單倍型分析、基于STR的微衛(wèi)星分析、PCR-RFLP、RFLP連鎖分析等。50.參考答案：D51.參考答案：E說明：乳腺癌分子生物學(xué)檢測對(duì)于篩選易感人群、反映腫瘤生物學(xué)行為、預(yù)測早期乳腺癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)以及篩選適合內(nèi)分泌、化療及靶向治療的患者均有重要意義。然而，它并不能直接幫助減輕化療的不良反應(yīng)。52.參考答案：D說明：Northern印跡雜交是一種將RNA從瓊脂糖凝膠中轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上的方法，主要用于檢測靶分子是RNA，所以答案選C。選項(xiàng)A描述的一般是核酸分子雜交等技術(shù)可實(shí)現(xiàn)的功能；選項(xiàng)B檢測DNA樣品相關(guān)情況是Southern印跡雜交的特點(diǎn)；選項(xiàng)D基因定位分析有多種方法，不是Northern印跡雜交的主要用途；選項(xiàng)E陽性菌落篩選一般用藍(lán)白斑篩選等方法，均不符合Northern印跡雜交。53.參考答案：A54.參考答案：A說明：線粒體基因組編碼2種rRNA，分別是12SrRNA和16SrRNA。55.參考答案：B說明：第二代測序技術(shù)的主要特點(diǎn)是高通量和并行PCR測序，能夠同時(shí)對(duì)大量的DNA分子進(jìn)行測序，大大提高了測序效率，相比第一代測序技術(shù)有了質(zhì)的飛躍。選項(xiàng)A單分子DNA非PCR測序不是第二代測序技術(shù)主要特征；選項(xiàng)B針對(duì)SNP進(jìn)行非PCR測序不準(zhǔn)確；選項(xiàng)D直接分析SNP不是其最主要技術(shù)特征；選項(xiàng)E直接進(jìn)行個(gè)體基因組測序和SNP研究表述不準(zhǔn)確，第二代測序技術(shù)主要是高通量并行測序，個(gè)體基因組測序