微生物檢測50道核心填空題（含答案+解析）1.微生物檢測的核心目標(biāo)是檢測樣品中是否存在特定的________或其________。2.無菌操作的核心原則是防止________微生物污染樣品或環(huán)境。3.微生物實(shí)驗(yàn)室根據(jù)生物安全等級分為________級（BSL-1到BSL-4）。4.高壓蒸汽滅菌的常用條件是________℃下維持________分鐘。5.干熱滅菌法主要用于________和________的滅菌。6.采集具有代表性的樣品時(shí)，需遵循________和________原則。7.冷凍樣品應(yīng)在________℃以下保存和運(yùn)輸，以抑制微生物生長。8.水樣微生物檢測（如總大腸菌群）通常采集________ml。9.對固體樣品進(jìn)行均質(zhì)化處理時(shí)，常使用________或________。10.制備樣品稀釋液時(shí)，最常用的稀釋液是________或________。11.培養(yǎng)基按照物理狀態(tài)可分為________培養(yǎng)基、________培養(yǎng)基和________培養(yǎng)基。12.用于分離培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基中，常加入________作為凝固劑。13.________培養(yǎng)基（如營養(yǎng)瓊脂）允許大多數(shù)微生物生長。14.________培養(yǎng)基（如SS瓊脂）抑制某些微生物生長，促進(jìn)目標(biāo)微生物生長。15.________培養(yǎng)基（如EMB瓊脂）能通過顏色變化或產(chǎn)生特定產(chǎn)物來區(qū)分不同微生物。16.倒平板時(shí)，培養(yǎng)基溫度應(yīng)冷卻至約________℃左右，以免燙死微生物或產(chǎn)生過多冷凝水。17.傾注平板法主要用于________樣品的活菌計(jì)數(shù)。18.涂布平板法適用于________樣品或________樣品的活菌計(jì)數(shù)。19.劃線分離法的主要目的是獲得________菌落。20.在EMB培養(yǎng)基上，典型的大腸桿菌菌落常呈現(xiàn)________色，帶有________光澤。21.革蘭氏染色是區(qū)分細(xì)菌________性的經(jīng)典方法。22.革蘭氏染色步驟依次是：結(jié)晶紫初染→________媒染→________脫色→________復(fù)染。23.革蘭氏陽性菌最終呈現(xiàn)________色，革蘭氏陰性菌最終呈現(xiàn)________色。24.抗酸染色（如Ziehl-Neelsen法）主要用于檢測________屬細(xì)菌。25.芽孢染色中，常用的復(fù)染劑是________。26.莢膜染色通常采用________染色法，背景著色而莢膜不著色。27.細(xì)菌的________試驗(yàn)用于檢測細(xì)菌是否產(chǎn)生細(xì)胞色素C氧化酶。28.

IMViC試驗(yàn)是用于鑒定________菌群的重要生化試驗(yàn)組合，包括________、________、________和________試驗(yàn)。29.吲哚試驗(yàn)中，加入________試劑后呈現(xiàn)紅色環(huán)為陽性，表明細(xì)菌能分解色氨酸產(chǎn)生吲哚。30.甲基紅試驗(yàn)中，培養(yǎng)基pH≤________時(shí)加入甲基紅指示劑呈紅色，為陽性。31.

V-P試驗(yàn)中，加入________和________試劑，出現(xiàn)紅色為陽性。32.檸檬酸鹽利用試驗(yàn)中，能利用檸檬酸鹽的細(xì)菌會使培養(yǎng)基中的________指示劑由綠色變?yōu)開_______色。33.糖發(fā)酵試驗(yàn)中，產(chǎn)酸通常使培養(yǎng)基中的________指示劑變黃，產(chǎn)氣則可在倒置的________中觀察到氣泡。34.硫化氫試驗(yàn)陽性，可在含有________或________的培養(yǎng)基中觀察到黑色沉淀。35.尿素酶試驗(yàn)陽性，培養(yǎng)基（含________指示劑）由黃色變?yōu)開_______色。36.凝固酶試驗(yàn)是鑒別________的重要試驗(yàn)，陽性表明該菌可能具有致病性。37.用于厭氧菌培養(yǎng)的常用設(shè)備是________罐或________培養(yǎng)箱。38.細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中生長可表現(xiàn)為________、________、________或形成菌膜等。39.觀察真菌菌落形態(tài)時(shí)，常注意其________、________、________和________等特征。40.PCR技術(shù)的基本原理是________擴(kuò)增。41.PCR反應(yīng)體系包含模板DNA、________、________、________和緩沖液。42.設(shè)計(jì)PCR引物的基本原則之一是引物的________值相近，通常為________℃左右。43.實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)可以同時(shí)實(shí)現(xiàn)________和________。44.凝膠電泳中，________染色常用于觀察DNA條帶。45.ELISA的中文全稱是________。46.在直接ELISA中，酶標(biāo)記在________上。47.膠體金免疫層析技術(shù)常用于________檢測，結(jié)果通常在________分鐘內(nèi)判讀。48.

微生物限度檢查是檢測非無菌藥品中________微生物和________微生物的總量。49.無菌檢查法用于證明藥品或醫(yī)療器械是否________。50.在微生物檢測結(jié)果報(bào)告中，若未檢出目標(biāo)菌，應(yīng)報(bào)告為________或________（根據(jù)方法要求）。答案與解析微生物；代謝產(chǎn)物/毒素

(解析：檢測對象包括微生物本身或其產(chǎn)生的有害物質(zhì)。)外源/外來

(解析：無菌操作的核心是防止環(huán)境或其他來源的微生物污染實(shí)驗(yàn)材料。)四

(解析：生物安全實(shí)驗(yàn)室分為4個等級，處理不同危險(xiǎn)程度的微生物。)121；15-20

(解析：這是最常用、最有效的濕熱滅菌條件。)玻璃器皿；金屬器械/油性物質(zhì)/粉末

(解析：干熱適用于不宜用高壓蒸汽滅菌且耐高溫的物品。)隨機(jī)；適量

(解析：確保樣品能代表整體，并滿足檢測需要。)-18/-20

(解析：冷凍溫度能有效抑制絕大多數(shù)微生物繁殖。)100/250/500

(解析：常見取樣量，具體標(biāo)準(zhǔn)可能不同。100ml是很多水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)中的常用量。)均質(zhì)器/勻漿器；無菌研缽和研棒

(解析：使樣品均勻分散，便于微生物釋放和計(jì)數(shù)。)無菌生理鹽水；磷酸鹽緩沖液(PBS)/蛋白胨鹽水

(解析：維持滲透壓，減少對微生物的損傷。生理鹽水最常用。)液體；固體；半固體

(解析：根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇不同狀態(tài)的培養(yǎng)基。)瓊脂

(解析：瓊脂是理想的培養(yǎng)基凝固劑，常溫凝固，不被大多數(shù)微生物分解。)基礎(chǔ)/營養(yǎng)

(解析：提供基本營養(yǎng)，無選擇性。)選擇性

(解析：添加抑制劑抑制非目標(biāo)菌，利于目標(biāo)菌生長。)鑒別/指示

(解析：通過指示劑或特定反應(yīng)區(qū)分不同微生物的代謝特性。)45-50

(解析：溫度過高會殺死微生物或使瓊脂無法凝固，過低則易凝固無法倒板。)液體/可溶性

(解析：樣品可直接或稀釋后與熔化的瓊脂混合。)含菌量低；對熱敏感

(解析：樣品涂布在已凝固的培養(yǎng)基表面，避免熱瓊脂的損傷。)單個/純

(解析：通過劃線稀釋，最終得到由單個細(xì)胞繁殖形成的菌落。)紫黑/深紫；金屬/綠色

(解析：大腸桿菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，使伊紅美藍(lán)結(jié)合，呈現(xiàn)特征性金屬光澤。)陰陽

(解析：基于細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)差異的染色分類法。)碘液；酒精/乙醇/丙酮；番紅/沙黃/稀釋復(fù)紅

(解析：標(biāo)準(zhǔn)革蘭染色四步法及常用試劑。)紫；紅/粉紅

(解析：革蘭陽性菌保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物呈紫色；革蘭陰性菌被脫色后吸收復(fù)染劑呈紅色。)分枝桿菌(Mycobacterium)

(解析：如結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌具有抗酸特性。)番紅/沙黃

(解析：復(fù)染使菌體呈現(xiàn)紅色，與綠色的芽孢形成對比。)負(fù)

(解析：染色背景和菌體，而透明的莢膜不著色，在深色背景下呈現(xiàn)透明暈圈。)氧化酶

(解析：檢測細(xì)胞色素C氧化酶的存在，是區(qū)分細(xì)菌的一個重要指標(biāo)，如奈瑟菌屬、假單胞菌屬通常陽性。)腸桿菌；吲哚(Indole)；甲基紅(MethylRed)；V-P(Voges-Proskauer)；檸檬酸鹽(Citrate)

(解析：IMViC是這四項(xiàng)試驗(yàn)的首字母縮寫，用于區(qū)分大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌等腸道菌。)柯凡克(Kovac's)

(解析：柯凡克試劑(對二甲氨基苯甲醛)與吲哚反應(yīng)生成紅色化合物。)4.4

(解析：甲基紅在pH4.4以下顯紅色，4.4以上顯黃色，陽性表明產(chǎn)強(qiáng)酸能力強(qiáng)。)α-萘酚；氫氧化鉀/KOH

(解析：V-P試劑由α-萘酚乙醇溶液和40%KOH組成，與乙酰甲基甲醇反應(yīng)呈紅色。)溴麝香草酚藍(lán)；深藍(lán)/普魯士藍(lán)

(解析：細(xì)菌利用檸檬酸鹽生成堿性產(chǎn)物，使指示劑由綠變藍(lán)。)溴甲酚紫/溴麝香草酚藍(lán)/酚紅；杜漢小管/Durhamtube

(解析：指示劑在酸性條件下變色；杜漢小管倒置于試管中收集氣體。)硫酸亞鐵；硫代硫酸鈉/醋酸鉛

(解析：細(xì)菌產(chǎn)生H?S，與鐵離子或鉛離子結(jié)合生成黑色FeS或PbS沉淀。)酚紅；粉紅/紫紅

(解析：尿素酶分解尿素產(chǎn)氨，使培養(yǎng)基變堿，酚紅由黃變紅。)金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)

(解析：凝固酶能使血漿凝固，是金黃色葡萄球菌的重要毒力因子和鑒定指標(biāo)。)厭氧；厭氧

(解析：提供無氧環(huán)境以培養(yǎng)專性或兼性厭氧菌。)均勻渾濁；沉淀；菌膜/菌環(huán)

(解析：不同生長特性反映細(xì)菌對氧的需求、運(yùn)動性等。)大??；形狀；顏色；質(zhì)地(絨毛狀/粉末狀等)

(解析：真菌菌落形態(tài)是重要的初步鑒定依據(jù)。)體外DNA/核酸

(解析：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是在體外通過溫度循環(huán)特異性擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。)引物；dNTPs(脫氧核糖核苷三磷酸)；DNA聚合酶(Taq酶)

(解析：PCR反應(yīng)必需的五大組分。)Tm(解鏈溫度)；55-65

(解析：引物Tm值相近且合適，是保證擴(kuò)增特異性和效率的關(guān)鍵。常用引物Tm在55-65℃之間。)擴(kuò)增；定量

(解析：qPCR通過熒光信號實(shí)時(shí)監(jiān)測擴(kuò)增過程，實(shí)現(xiàn)精確定量起始模板量。)溴化乙錠(EB)/GelRed/SYBRGreen

(解析：這些染料能嵌入DNA雙鏈，在紫外光下發(fā)出熒光。EB有毒性，后兩者更安全。)酶聯(lián)免疫吸附測定

(解析：Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay的縮