(19)國家知識產權局(10)授權公告號CN119385914B(65)同一申請的已公布的文獻號(73)專利權人三亞中心醫(yī)院(海南省第三人民醫(yī)院、三亞中心醫(yī)院醫(yī)療集團總地址572000海南省三亞市天涯區(qū)解放路1154號專利權人廣東省中醫(yī)院海南醫(yī)院(72)發(fā)明人林稱心潘能毅李光智林如意(74)專利代理機構海南萬博知識產權代理事務所(普通合伙)46013專利代理師張耀婷A61K9/00(2006.01)A61K36/481(2006.01)A61K47/24(2006.01)A61P3/10(2006.01)A61P17/02(2006.01)A61K31/045(2006.01)(56)對比文件期),27-29.液外敷治療糖尿病足部潰瘍的臨床應用研究”.《中國保健營養(yǎng)》.2013,第3卷摘要及2.2及正文最后1段.審查員吳沖(54)發(fā)明名稱一種具有促進外敷藥物透皮吸收的制備方法及其外敷藥物組合物和應用本發(fā)明提供一種具有促進外敷藥物透皮吸收的制備方法及其外敷藥物組合物和應用，該組還包括燕麥β-葡聚糖、月桂氮卓酮等。黃芪采用特定蜜炙工藝，雞屎藤提取物經超臨界CO?萃取。制備時，先對部分藥材提取濃縮得浸膏，其余藥材研粉加入浸膏混合，再將燕麥β-葡聚糖與卵磷脂制成納米乳液滴加入混合物，經梯度升溫加入月桂氮卓酮并攪拌，最后加珍珠粉制成外敷劑用，有效促進藥物吸收利用，該藥物組合物具有潰瘍愈合、控制感染、緩解疼痛和改善神經功能等功效，適用于外敷治療糖尿病足。21.一種具有促進外敷藥物透皮吸收的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：目篩，加入6-8體積倍量的60-80%乙醇超聲功率為300-500W,超聲時間為30-40分鐘，合并提取液，減壓濃縮至相對密度為1.05-1.15的浸膏；分別研成細粉，過80-100目篩，得到細粉加入到上述浸膏中，加熱至40-50℃,采用高剪切分散，高剪切分散機的轉速為2000-3000rpm,處理時間為5-10min,使其充分混合均勻，得到混合物；S3、將燕麥β-葡聚糖、卵磷脂溶解在1-3體積倍的去離子水中，攪拌通過高壓微射流乳化，高壓微射流乳化的壓力為100-200MPa,溫度20-40℃,流量控制在10-30L/h,微通道直徑為50-200μm,循環(huán)次數(shù)為3-6次，得到乳液滴再加入到上述混合物中，攪拌均勻后，梯度升溫加入月桂氮卓酮，繼續(xù)攪拌10-15分鐘，最后加入珍所述梯度升溫分三步加入月桂氮卓酮，第一階段：先將藥物混合物的溫度30-35℃,加入1/3的月桂氮卓酮，攪拌均勻，第二階段：溫度升高到40-45℃,加入剩余月桂氮卓酮的一終藥物混合物；S4、將上述最終藥物混合物制成外敷劑型；所述外敷劑型的藥物組合物包括以下重量份原料：地骨皮12-18份、川牛膝10-13份、黃冰片1-3份、燕麥β-葡聚糖5-12份、月桂氮卓酮3-6份、卵磷脂2-5份和珍珠粉的粒徑為20-50nm;所述黃芪采用蜜炙黃芪，是將黃芪與100-118℃的煉蜜按照10:1-2屎藤提取物采用超臨界CO?萃取法獲得，萃取壓力為20-30MPa,萃取溫度為40-50℃,CO?流量為15-25kg/h,萃取時間為2-4小時，分離過濾，得到雞屎藤提取物。2.如權利要求1所述的一種具有促進外敷藥物透皮吸收的制備方法，其特征在于：所述外敷劑型的藥物組合物包括以下重量份原料：地骨皮15份、川牛膝12份、黃芪25份、丹參18份和珍珠粉3份。3.根據(jù)權利要求1或2所述的制備方法制得的外敷劑型在制備治療糖尿病足藥物中的應用。3一種具有促進外敷藥物透皮吸收的制備方法及其外敷藥物組合物和應用技術領域[0001]本發(fā)明涉及藥物制備技術領域，特別涉及一種具有促進外敷藥物透皮吸收的制備方法及其外敷藥物組合物和應用。背景技術[0002]糖尿病足是糖尿病常見且嚴重的慢性并發(fā)癥之一，主要因糖尿病患者長期處于高血糖狀態(tài)，致使神經病變、血管病變以及局部感染等多種因素相互作用而引發(fā)。糖尿病神經病變可導致足部感覺減退或喪失，使患者難以察覺足部的損傷；血管病變則造成足部血液在上述病理基礎上極易迅速蔓延且難以控制，嚴重時可導致壞疽，甚至面臨截肢的風險，給患者的身心健康帶來極大痛苦，同時也給家庭和社會造成沉重的經濟負擔。[0003]目前，針對糖尿病足的治療方法多種多樣。在藥物治療方面，西藥多采用抗生素控制感染、改善微循環(huán)藥物促進血液循環(huán)以及神經營養(yǎng)藥物修復神經損傷等，但長期使用抗生素易引發(fā)耐藥菌產生，且這些藥物往往只能針對單一病理環(huán)節(jié)進行干預，難以從整體上綜合改善糖尿病足的復雜病情。例如，某些抗生素雖然能夠在一定程度上抑制細菌生長，但對于已經受損的神經和血管組織修復作用有限。[0004]中醫(yī)在糖尿病足治療中也有諸多應用，如中藥內服以調節(jié)機體氣血陰陽，但對于局部病變的直接作用相對較弱；中藥外洗或熏蒸雖能在一定程度上改善局部癥狀，但藥物有效成分的滲透吸收效率較低，難以深入病變組織發(fā)揮持久現(xiàn)有的糖尿病足外敷藥物在配方組成上不夠全面，可能僅側重于活血化瘀或清熱解毒某一方面，缺乏對糖尿病足多病因、多病理機制的綜合考量，導致治療效果不盡如人意，難以滿足臨床治療糖尿病足的迫切需求。因此，研發(fā)一種更為高效、全面且安全的糖尿病足治療藥物組合物具有極其重要的現(xiàn)實意義。發(fā)明內容[0005]鑒于此，本發(fā)明提出一種具有促進外敷藥物透皮吸收的制備方法及其外敷藥物組[0006]本發(fā)明的技術方案是這樣實現(xiàn)的：一種具有促進外敷藥物透皮吸收的制備方法，包括以下步驟：40-60目篩，加入6-8體積倍量的60-80%乙醇溶液，浸泡1-2小時后，采用超聲輔助提取1-3次，每次超聲功率為300-500W,超聲時間為30-40分鐘，合并提取液，減壓濃縮至相對密度為1.05-1.15的浸膏。冰片分別研成細粉，過80-100目篩，得到細粉加入到上述浸膏中，加熱至40-50℃,采用高剪4[0009]S3、將燕麥β-葡聚糖、卵磷脂溶解在1-3體積倍的去離子水中，攪拌形成均勻的分散液，通過高壓微射流乳化，得到乳液滴再加入到上述混合物中，攪拌均勻后，梯度升溫加[0010]所述S3的梯度升溫分三步加入月桂氮卓酮，第一階段：先將藥物混合物的溫度30-35℃,加入1/3的月桂氮卓酮，攪拌均勻，此時較低的溫度可以使月桂氮卓酮緩慢地與其他成分相互作用，初步改善藥物混合物的透皮性能，在這個溫度范圍內，月桂氮卓酮能夠更好地滲透到藥物分子之間，進一步增強其促進藥物透皮吸收的作用。第二階段：溫度升高到40-45℃,加入剩余月桂氮卓酮的一半，繼續(xù)攪拌；在這個溫度范圍內，月桂氮卓酮能夠更好地滲透到藥物分子之間，進一步增強其促進藥物透皮吸收的作用；第三階段：將溫度升高到50-55℃,加入最后的月桂氮卓酮，充分攪拌；通過這種梯度升溫添加的方式，可以使月桂氮卓酮更均勻地分布在藥物組合物中，并且充分發(fā)揮其透皮促進劑的功能，提高藥物對糖尿病足病變部位的滲透能力。[0011]S4、將上述最終藥物混合物制成外敷劑型。[0012]進一步的，所述S2的高剪切分散機的轉速為2000-3000rpm,處理時間為5-10min。[0013]進一步的，所述S3的高壓微射流乳化的壓力為100-200MPa,溫度20-40℃,流量控制在10-30L/h,微通道直徑為50-200μm,循環(huán)次數(shù)為3-6次。[0014]進一步的，所述外敷劑型的藥物組合物，包括藤提取物1-3份、冰片1-3份、燕麥β-葡聚糖5-12份、月桂氮卓酮3-6粉1-4份，所述珍珠粉的粒徑為20-50nm。[0015]進一步的，所述外敷劑型的藥物組合物，包括以下重量份原料：地骨皮15份、川牛[0016]進一步的，所述黃芪采用蜜炙黃芪，是將黃芪與100-118℃的煉蜜按照10:1-2的重[0017]進一步的，所述雞屎藤提取物采用超臨界CO?萃取法獲得，萃取壓力為20-30MPa,萃取溫度為40-50℃,CO?流量為15-25kg/h,萃取時間為2-4小時，分離過濾，得到雞屎藤提取物。[0018]進一步的，所述的制備方法制得的外敷劑型在制備治療糖尿病足藥物中的應用。[0020]本發(fā)明方劑的配伍遵循君臣佐使的原則，以達到協(xié)同增效、平衡藥性并精準針對改善足部血液循環(huán)，消除瘀血阻滯，且其止血生肌之功可有效控制創(chuàng)面出血，促進新肉生參活血化瘀、涼血消癰并引藥至病所，可引諸藥直達病所，為臣藥中的關鍵，乳香與沒藥活血行氣止痛、消腫生肌，輔助君藥強化化瘀消腫止痛之效。佐藥地骨皮清熱涼血、金銀花二CN119385914B說明書5藥可清除局部熱毒，預防和控制感染擴散，同時可制約君藥中溫燥之性，使全方溫而不燥，無傷陰之弊，共為佐藥以清解熱毒，薜荔與膽木清熱利濕解毒改善局部環(huán)境，冰片開竅醒神、清熱止痛、防腐生肌且促透皮吸收，雞屎藤提取物佐助改善癥狀，共同助力君臣藥發(fā)揮作用。使藥燕麥β-葡聚糖、月桂氮卓酮、卵磷脂促進藥物透皮，珍珠粉收斂生肌并調和諸藥，益智仁與降香黃檀佐助君臣藥且調和藥性，全方諸藥合用，共施補氣活血、清熱除濕、解毒消腫、生肌止痛之功，多靶點針對糖尿病足病因病機，促進愈合與癥狀緩解。具體實施方式[0021]為了更好理解本發(fā)明技術內容，下面提供具體實施例，對本發(fā)明做進一步的說明。[0022]本發(fā)明實施例所用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。[0023]本發(fā)明實施例所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。[0024]以下依據(jù)《中國藥典[0025]介紹主要原料藥的基本情況：[0026]地骨皮：性味歸經：味甘，性寒；歸肺、肝、腎經。功能主治：涼血除蒸，清肺降火。[0027]川牛膝：性味歸經：性平；味甘、微苦；歸肝經、腎經。功能主治：活血通經，祛風除濕，利尿通淋。[0028]丹參：性味歸經：味苦，性微寒；歸心經、肝經、脾經、肺經。功能主治：活血化瘀，疏肝解郁，調節(jié)脾胃，潤肺止咳。[0029]金銀花：性味歸經：味甘，性寒。歸肺、心、胃經。功能主治：清熱解毒，疏散風熱。[0030]膽木：性味歸經：味苦，性寒；歸肝、膽經。功能主治：清熱解毒，祛痰止咳，止痛，消[0031]黃芪：性味歸經：味甘，性溫；歸脾、肺經。功能主治：補氣固表，利尿托毒，排膿，斂瘡生肌。用于氣虛乏力、食少便溏、中氣下陷、久瀉脫肛、便血崩漏、表虛自汗、氣虛水腫等癥[0032]乳香：性味歸經：味辛、苦，性溫；歸心、肝、脾經。功能主治：活血行氣止痛，消腫生肌。用于心腹諸痛、筋脈拘攣、跌打損傷、瘡瘍腫痛等癥狀。[0033]沒藥：性味歸經：味辛、苦，性平；歸心經、肝經、脾經。功能主治：散瘀定痛，消腫生[0034]血竭：性味歸經：味甘、咸，性平；歸心、肝經。功能主治：活血定痛，化瘀止血，生肌斂瘡。[0035]龍血樹：甘、涼。歸肺、脾、腎經。功能主治：具有活血散瘀、定痛止血、斂瘡生肌的功[0036]薜荔：性味歸經：味甘、酸，性平；歸腎、胃、大腸經。功能主治：祛風除解毒消腫。[0037]益智仁：性味歸經：味辛，性溫；歸脾、腎經。功能主治：溫脾止瀉攝唾，暖腎固精縮[0038]降香黃檀：性味歸經：味辛，性溫；歸肝、脾經。功能主治：化瘀止血，理氣止痛。6實施例1磷脂2份和珍珠粉1份。[0042]所述黃芪采用蜜炙黃芪，是將黃芪與100℃的煉蜜按照10:1的重量比混合均勻，悶[0043]所述雞屎藤提取物采用超臨界CO?萃取法獲得，萃取壓力為20MPa,萃取溫度為40℃,CO?流量為15kg/h,萃取時間為2小時，分離過濾，得到雞實施例2[0045]所述黃芪采用蜜炙黃芪，是將黃芪與118℃的煉蜜按照10:2的重量比混合均勻，悶[0046]所述雞屎藤提取物采用超臨界CO?萃取法獲得，萃取壓力為30MPa,萃取溫度為50℃,CO?流量為25kg/h,萃取時間為4小實施例3卵磷脂4份和珍珠粉3份。[0048]所述黃芪采用蜜炙黃芪，是將黃芪與115℃的煉蜜按照10:2的重量比混合均勻，悶[0049]所述雞屎藤提取物采用超臨界CO?萃取法獲得，萃取壓力為25MPa,萃取溫度為45℃,CO?流量為20kg/h,萃取時間為3小[0050]上述實施例1-3采用以下制備方法：目篩，加入7倍量的70%乙醇溶液，浸泡2小時后，采用超聲輔助提取2次，每次超聲功率為400W,超聲時間為35分鐘，合并提取液，減壓濃縮至相對密度為1.1的浸膏；冰片分別研成細粉，過90目篩，得到細粉加入到上述浸膏中，加熱至45℃,采用高剪切分散，高剪切分散機的轉速為2500rpm,處理時間為8min,使其充分混合均勻；壓微射流乳化，高壓微射流乳化的壓力為150MPa,溫度30℃,流量控制在20L/h,微通道直徑為100μm,循環(huán)次數(shù)為5次，使溶液形成納米級的乳液滴，加入到上述混合物中，攪拌均勻后，梯度升溫加入月桂氮卓酮，第一階段：先將藥物混合物的溫度35℃,加入1/3的月桂氮卓酮，7攪拌均勻，第二階段：溫度升高到42℃,加入剩余月桂氮卓酮的一半，繼續(xù)攪拌；第三階段：將溫度升高到55℃,加入剩余的月桂氮卓酮，繼續(xù)攪拌15分鐘，最后加入珍珠粉，再攪拌10分鐘；[0054]S4、將上述最終混合物制成外敷劑型。[0055]對比例1[0056]本對比例與實施例3的區(qū)別在于，一種外敷藥物組合物，包括以下重量份原料：地骨皮15份、川牛膝12份、黃芪25份、丹參18份、金銀花12份、乳香8份、沒藥8份、血竭15份、龍血樹樹脂2份、薜荔1份、膽木1份、益智仁5份、降香黃檀1份、雞屎藤提取物1份、冰片2份、燕麥β-葡聚糖8份、月桂氮卓酮5份、卵磷脂4份和珍珠粉3份。[0057]對比例2[0058]本對比例與實施例3的區(qū)別在于，所述制備方法S3步驟中未進行高壓微射流乳化；具體是將燕麥β-葡聚糖、卵磷脂溶解在2體積倍的去離子水中，攪拌形成均勻的分散液。[0059]對比例3[0060]本對比例與實施例3的區(qū)別在于，所述制備方法S3步驟中直接將月桂氮卓酮加入到混合物中，具體是將燕麥β-葡聚糖、卵磷脂溶解在去離子水中，攪拌形成均勻的分散液，通過高壓微射流乳化，高壓微射流乳化的壓力為150MPa,溫度30℃,流量控制在20L/h,微通道直徑為100μm,循環(huán)次數(shù)為5次，使溶液形成納米級的乳液滴，加入到上述混合物中，攪拌均勻后，加入月桂氮卓酮，繼續(xù)攪拌15分鐘，最后加入珍珠粉，攪拌10分鐘。[0061]試驗例1-藥物吸收實驗[0063]1.藥物組合物：按照實施例1-3和對比例1-3制得的藥物組合物。[0064]2.實驗動物：選擇雄性Wistar大鼠，體重200-250g。[0066]1.動物準備：實驗動物在實驗前適應性飼養(yǎng)1周，自由飲水和攝食。在實驗時，用適宜的麻醉劑(戊巴比妥鈉)對動物進行麻醉，然后在動物背部剃毛，暴露出約3cm×3cm的皮膚區(qū)域。[0067]2.藥物敷用：將3mg/cm2的藥物組合物均勻涂抹在動物背部皮膚暴露區(qū)域，然后用透氣性良好的敷料覆蓋，防止藥物脫落和污染。[0068]3.取樣時間點設定：在敷藥后的1小時、4小時、8小時、12小時、24小時等時間點，分別取敷藥部位及周邊一定范圍(距離敷藥中心1cm半徑范圍內)的皮膚組織。[0069]4.皮膚組織處理與藥物提?。簩⑷∠碌钠つw組織用生理鹽水沖洗干凈，去除表面殘留藥物，然后用組織勻漿器將皮膚組織勻漿化。加入5mL甲醇-水(7:3,v/v)混合溶液，在振蕩器上振蕩提取30分鐘，然后以10000rpm離心10分鐘，取上清液作為待測樣品。[0070]5.藥物含量測定：采用HPLC方法測定皮膚組織提取液中藥物組合物的主要有效成分含量。[0071]6.實驗結果[0072]表1:藥物吸收試驗結果8實施例1實施例2實施例3對比例1在上述表格中，可以看到實施例組在藥物吸收的指標上表現(xiàn)均優(yōu)于對比例，表明本發(fā)明的藥物組合物的配方或制備工藝等因素使得藥物具有更好的釋放和吸收特性，更有利于在糖尿病足治療中發(fā)揮作用。實施例3的藥物組合物在皮膚組織中的藥物吸收效果最[0075]實施例3和對比例1比較，說明藥物在特定的配比下能達到更佳的吸收效果，與對比例2比較，通過高壓微射流乳化增加燕麥β-葡聚糖和卵磷脂與其他藥物成分的接觸面積，提高它們的分散性和穩(wěn)定性，同時納米級別的顆粒更容易穿透皮膚屏障，增強藥物的透皮吸收效果，更好地與地骨皮、丹參等其他具有抗菌、抗炎、促進傷口愈合的成分一起發(fā)揮綜合治療作用，提高對糖尿病足的整體治療效果。[0076]與對比例3比較，梯度升溫加入月桂氮卓酮可以有效提高藥物組合物的透皮吸收效率，使藥物成分能夠更多、更快地穿透皮膚角質層，到達糖尿病足病變部位發(fā)揮治療作[0077]試驗例2-有效性驗證[0079]1.納入標準[0080]年齡在30-75歲之間，確診為2型糖尿病且符合Wagner分級1-3級的糖尿病足患者。足部存在明確的潰瘍、感染或神經病變癥狀，且潰瘍面積在1-10cm2之間。近2周內未接受過其他糖尿病足相關的局部或全身治療(除常規(guī)降糖治療外)?；颊咦栽负炇鹬橥鈺?，能夠配合完成整個實驗過程及隨訪。[0081]2.排除標準[0082]合并有嚴重的心、肝、腎功能不全或其他嚴重系統(tǒng)性疾病，可能影響實驗結果或無法耐受實驗藥物者。[0083]足部潰瘍存在惡性病變或嚴重骨髓炎者。[0084]對實驗藥物或其輔料過敏者。[0085]妊娠期或哺乳期婦女。[0086]精神疾病患者或無法正常溝通交流者。9[0087]通過志愿者招募，共納入符合條件的患者108例，采用隨機數(shù)字表法將患者分為觀察組和對照組，每組各54例。兩組患者在年齡、性別、糖尿病病程、血糖控制水平(HbA1c)、足部病變嚴重程度(Wagner分級、潰瘍面積、深度等)等基線資料方面進行均衡性檢驗，確保無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。[0089]1.觀察組[0090]給予本發(fā)明實施例3外敷藥物治療，將藥物均勻涂抹于糖尿病足病變部位，每日換藥2次。在治療期間，密切觀察患者局部癥狀變化，并定期進行相關檢查。同時，記錄患者的用藥依從性及可能出現(xiàn)的不良反應。[0091]2.對照組[0092]給予莫匹羅星軟膏治療，同樣按照標準用法用量進行操作，換藥頻率為每日2次。觀察指標與觀察組一致，同樣關注患者的用藥情況及不良反應。[0094]1.潰瘍愈合判定標準[0095]完全愈合：潰瘍面完全被上皮組織覆蓋，皮膚色澤接近正常，質地柔軟，無滲出物，患者無疼痛等不適癥狀。[0096]顯效：潰瘍面積縮小≥70%,創(chuàng)面變淺，有新鮮肉芽組織生長，滲出物明顯減少，疼痛顯著減輕。[0097]有效：潰瘍面積縮小30%-69%,創(chuàng)面有一定程度的改善，肉芽組織部分生長，滲出物有所減少，疼痛有所緩解。[0098]無效：潰瘍面積縮小<30%,或者潰瘍面無明顯變化甚至擴大，創(chuàng)面仍有較多滲出，疼痛無明顯改善或加重。[0099]2.感染控制判定標準[0100]治愈：潰瘍表面分泌物細菌培養(yǎng)結果連續(xù)兩次陰性，局部炎癥癥狀(紅腫、熱痛)完全消失，炎癥評分降至0分。[0101]顯效：細菌培養(yǎng)陽性率較治療前降低≥70%,炎癥癥狀明顯減輕，炎癥評分降低≥2[0102]有效：細菌培養(yǎng)陽性率較治療前降低30%-69%,炎癥癥狀有所減輕，炎癥評分降低1[0103]無效：細菌培養(yǎng)陽性率降低<30%,炎癥癥狀無明顯改善甚至加重，炎癥評分無變化或升高。[0104]3.疼痛緩解判定標準[0105]完全緩解：患者足部疼痛完全消失，VAS評分降至0分，且在后續(xù)觀察期間無疼痛復[0106]顯效：VAS評分較