2025年檢驗(yàn)科生物安全培訓(xùn)試題(答案)一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共30分）1.根據(jù)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例（2024年修訂版）》，臨床實(shí)驗(yàn)室開展新冠病毒抗原檢測時(shí)，樣本處理應(yīng)在幾級生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL）中進(jìn)行？A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-4答案：B2.以下哪種操作不符合臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室（PCR實(shí)驗(yàn)室）生物安全要求？A.樣本處理區(qū)使用專用移液器，避免交叉污染B.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)與樣本制備區(qū)共用同一臺生物安全柜C.各功能區(qū)嚴(yán)格單向流程（試劑準(zhǔn)備→樣本制備→擴(kuò)增→產(chǎn)物分析）D.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用1000mg/L含氯消毒液對臺面進(jìn)行擦拭消毒答案：B3.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室銳器傷的預(yù)防措施，錯(cuò)誤的是？A.使用后立即將銳器放入防穿刺、防滲漏的專用容器B.為避免二次污染，禁止用手直接接觸使用過的針頭C.操作時(shí)可佩戴雙層手套（內(nèi)層丁腈手套，外層乳膠手套）D.重復(fù)使用的采血針需先浸泡消毒，再統(tǒng)一回收處理答案：D（注：銳器禁止重復(fù)使用，需直接放入利器盒）4.臨床實(shí)驗(yàn)室處理HBsAg陽性血清時(shí)，若發(fā)生5ml樣本潑濺至生物安全柜臺面，正確的應(yīng)急處理流程是？A.立即用吸水紙覆蓋，噴灑1000mg/L含氯消毒液，作用30分鐘后清理B.直接用紗布擦拭，再用75%乙醇消毒臺面C.先戴手套清理樣本，再用500mg/L含氯消毒液消毒D.啟動(dòng)生物安全柜紫外線消毒30分鐘，無需額外處理答案：A5.以下哪類實(shí)驗(yàn)室廢棄物需采用壓力蒸汽滅菌（121℃，30分鐘）后再按醫(yī)療廢物處理？A.未使用的一次性注射器外包裝B.新冠病毒核酸檢測陰性的咽拭子樣本管C.化學(xué)發(fā)光免疫分析儀使用后的一次性反應(yīng)杯D.被患者血液污染的實(shí)驗(yàn)記錄單答案：B6.關(guān)于二級生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）的設(shè)施要求，錯(cuò)誤的是？A.應(yīng)設(shè)獨(dú)立的送排風(fēng)系統(tǒng)，保證實(shí)驗(yàn)室相對于走廊負(fù)壓（-10Pa至-15Pa）B.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)配置洗眼器，位置與生物安全柜距離不超過3米C.地面材料需耐酸堿、防滑，墻面與地面交界處宜做圓弧處理D.可使用普通家用冰箱存放樣本，無需專用生物安全冰箱答案：D（注：BSL-2實(shí)驗(yàn)室需使用專用冰箱，具備溫度監(jiān)控和報(bào)警功能）7.實(shí)驗(yàn)室人員發(fā)生HIV陽性樣本職業(yè)暴露（皮膚被污染針頭刺傷），應(yīng)在多長時(shí)間內(nèi)啟動(dòng)暴露后預(yù)防（PEP）？A.2小時(shí)內(nèi)B.24小時(shí)內(nèi)C.48小時(shí)內(nèi)D.72小時(shí)內(nèi)答案：A8.以下哪種防護(hù)裝備的使用不符合BSL-2實(shí)驗(yàn)室要求？A.實(shí)驗(yàn)服袖口緊束，衣擺覆蓋至大腿中部B.佩戴一次性醫(yī)用外科口罩（非呼吸防護(hù)口罩）進(jìn)行樣本離心操作C.處理體液樣本時(shí)佩戴防沖擊護(hù)目鏡D.手套破損后立即更換，更換前用消毒液噴灑污染面答案：B（注：離心操作可能產(chǎn)生氣溶膠，需佩戴N95及以上呼吸防護(hù)口罩）9.臨床微生物實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)金黃色葡萄球菌（BSL-2病原體）時(shí)，正確的操作是？A.在生物安全柜外進(jìn)行平板劃線，避免柜門遮擋B.接種環(huán)使用后立即放入盛有75%乙醇的燒杯中浸泡C.開啟培養(yǎng)皿時(shí)，皿蓋倒置放置于臺面，避免下落污染D.培養(yǎng)完成后，直接將平板放入黃色醫(yī)療廢物袋密封答案：C10.實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險(xiǎn)評估的核心內(nèi)容不包括？A.病原微生物的危害程度分類B.實(shí)驗(yàn)操作可能產(chǎn)生的風(fēng)險(xiǎn)（如氣溶膠、銳器傷）C.實(shí)驗(yàn)室人員的學(xué)歷和職稱D.現(xiàn)有防護(hù)措施的有效性答案：C11.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室消毒效果監(jiān)測，正確的是？A.紫外線燈輻照強(qiáng)度每半年檢測1次，合格標(biāo)準(zhǔn)≥70μW/cm2（距離1米處）B.使用中的含氯消毒液無需監(jiān)測有效氯濃度，按配置時(shí)間更換即可C.生物安全柜的高效空氣過濾器（HEPA）每2年檢測1次，無需日常監(jiān)測D.實(shí)驗(yàn)室環(huán)境表面消毒效果監(jiān)測，采樣后需在48小時(shí)內(nèi)完成培養(yǎng)答案：A12.以下哪種情況不屬于實(shí)驗(yàn)室生物安全事件？A.運(yùn)送樣本的專用密封罐在電梯內(nèi)意外跌落，樣本未泄漏B.離心管破裂導(dǎo)致樣本氣溶膠擴(kuò)散至實(shí)驗(yàn)室環(huán)境C.實(shí)驗(yàn)人員未按要求佩戴手套，手部接觸HBV陽性血清D.醫(yī)療廢物暫存間未上鎖，無關(guān)人員進(jìn)入翻動(dòng)廢物袋答案：A（注：未發(fā)生實(shí)際或潛在暴露風(fēng)險(xiǎn)）13.臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室（PCR）的“污染控制”核心措施不包括？A.各區(qū)域使用專用實(shí)驗(yàn)服、移液器和消耗品B.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)使用帶濾芯的吸頭C.每日實(shí)驗(yàn)前對各區(qū)域進(jìn)行紫外線消毒30分鐘D.定期用DNA酶對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行噴霧消毒答案：D（注：DNA酶無法有效降解已擴(kuò)增的DNA片段，需采用含氯消毒液或?qū)Ｓ煤怂崆宄齽?4.實(shí)驗(yàn)室工作人員出現(xiàn)發(fā)熱伴咳嗽癥狀，懷疑為實(shí)驗(yàn)室感染，應(yīng)首先？A.自行服用抗生素，觀察3天B.立即向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告，并暫停工作C.繼續(xù)完成當(dāng)日實(shí)驗(yàn)任務(wù)后再就醫(yī)D.隱瞞病情，避免影響實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行答案：B15.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室廢棄物分類，錯(cuò)誤的是？A.廢棄的化學(xué)試劑（如甲醛固定液）屬于化學(xué)性廢物B.被患者痰液污染的一次性帽子屬于感染性廢物C.破碎的玻璃離心管屬于病理性廢物D.廢棄的免疫組化染色劑屬于化學(xué)性廢物答案：C（注：玻璃離心管屬于損傷性廢物）二、判斷題（每題1分，共10分，正確打“√”，錯(cuò)誤打“×”）1.實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊應(yīng)每年修訂1次，更新內(nèi)容需經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人審核后實(shí)施。（√）2.為提高效率，可將未滅活的新冠病毒樣本與普通生化樣本同批運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室。（×）3.生物安全柜使用時(shí)，前窗操作口高度應(yīng)保持在18-20cm，避免手臂頻繁進(jìn)出影響氣流。（√）4.實(shí)驗(yàn)室高壓蒸汽滅菌器需每周進(jìn)行生物監(jiān)測（使用嗜熱脂肪芽孢桿菌指示菌片），合格后方可使用。（√）5.處理結(jié)核分枝桿菌（BSL-3病原體）樣本時(shí)，可在BSL-2實(shí)驗(yàn)室中使用Ⅱ級A2型生物安全柜替代BSL-3實(shí)驗(yàn)室。（×）6.實(shí)驗(yàn)室人員培訓(xùn)記錄應(yīng)至少保存3年，包括培訓(xùn)內(nèi)容、考核結(jié)果和簽名。（√）7.為節(jié)約成本，可將使用后的一次性手套清洗、晾干后重復(fù)使用。（×）8.實(shí)驗(yàn)室發(fā)生火災(zāi)時(shí)，若生物安全柜內(nèi)有正在操作的感染性樣本，應(yīng)優(yōu)先關(guān)閉安全柜電源，再撤離。（×）9.實(shí)驗(yàn)室醫(yī)療廢物交接時(shí)，需填寫《醫(yī)療廢物交接登記本》，記錄廢物重量、種類、交接時(shí)間和雙方簽名，保存至少3年。（√）10.實(shí)驗(yàn)室冰箱內(nèi)樣本應(yīng)分類存放，標(biāo)識清晰，禁止存放個(gè)人物品，但可臨時(shí)存放實(shí)驗(yàn)用食品（如培養(yǎng)基分裝用的無菌水）。（×）三、簡答題（每題8分，共40分）1.簡述二級生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）中進(jìn)行血液樣本離心操作的生物安全要點(diǎn)。答案：（1）離心前檢查離心管有無裂紋，確保管蓋密封良好；（2）對稱放置離心管，重量差不超過0.1g，避免離心機(jī)失衡；（3）使用帶螺旋蓋的離心杯（或安全桶），離心杯需適配離心機(jī)轉(zhuǎn)頭；（4）離心操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行（若離心機(jī)未內(nèi)置安全罩）；（5）離心完成后，待離心機(jī)完全停止轉(zhuǎn)動(dòng)再打開艙門，靜置5分鐘待氣溶膠沉降；（6）若發(fā)生離心管破裂，立即關(guān)閉離心機(jī)，佩戴N95口罩、雙層手套，用1000mg/L含氯消毒液浸濕的紗布覆蓋離心艙，作用30分鐘后清理；（7）清理后的離心機(jī)艙壁用75%乙醇擦拭消毒，記錄事件及處理過程。2.列舉實(shí)驗(yàn)室感染的主要途徑，并各舉1例說明。答案：（1）呼吸道吸入：處理樣本時(shí)產(chǎn)生氣溶膠（如振蕩、離心），導(dǎo)致結(jié)核分枝桿菌吸入感染；（2）皮膚/黏膜接觸：未戴手套直接接觸HBV陽性血清，通過手部破損皮膚感染；（3）經(jīng)口攝入：實(shí)驗(yàn)室內(nèi)飲食，誤將污染的手接觸食物，導(dǎo)致腸道致病菌感染；（4）銳器傷：被污染的針頭刺傷，導(dǎo)致HIV病毒經(jīng)血液傳播；（5）眼結(jié)膜暴露：樣本潑濺至未防護(hù)的眼睛，導(dǎo)致CMV（巨細(xì)胞病毒）感染。3.簡述實(shí)驗(yàn)室生物安全柜（Ⅱ級A2型）的日常使用與維護(hù)要求。答案：（1）使用前：檢查安全柜電源、風(fēng)速報(bào)警裝置是否正常，開啟風(fēng)機(jī)預(yù)熱5分鐘，用75%乙醇擦拭操作區(qū)；（2）使用中：操作區(qū)物品擺放遵循“清潔區(qū)→污染區(qū)”單向原則，避免遮擋后部回風(fēng)格柵；手臂進(jìn)出時(shí)動(dòng)作緩慢，前窗操作口高度保持在18-20cm；（3）使用后：清理操作區(qū)廢物，用75%乙醇擦拭臺面，關(guān)閉風(fēng)機(jī)前運(yùn)行5分鐘排出內(nèi)部氣溶膠；（4）維護(hù)：每月檢查一次HEPA過濾器密封性，每6個(gè)月由專業(yè)機(jī)構(gòu)檢測風(fēng)速（平均面風(fēng)速≥0.5m/s）和氣流模式；每年更換HEPA過濾器（若檢測不合格或使用滿5年）；日常記錄使用時(shí)間和維護(hù)情況。4.實(shí)驗(yàn)室發(fā)生HIV陽性血液樣本大面積潑濺（約20ml）至地面時(shí)，應(yīng)如何進(jìn)行應(yīng)急處理？答案：（1）立即停止實(shí)驗(yàn)，疏散周圍無關(guān)人員，劃定污染區(qū)域；（2）佩戴個(gè)人防護(hù)裝備：N95口罩、護(hù)目鏡、雙層手套、防水圍裙、鞋套；（3）用吸水紙或紗布覆蓋污染區(qū)域，從外圍向中心噴灑2000mg/L含氯消毒液（作用30分鐘）；（4）使用專用清潔工具（如竹夾）將污染的吸水紙放入黃色醫(yī)療廢物袋，密封后高壓蒸汽滅菌；（5）用2000mg/L含氯消毒液再次擦拭地面，作用15分鐘后用清水擦拭干凈；（6）對污染區(qū)域周圍50cm范圍進(jìn)行環(huán)境采樣（如涂抹法），檢測殘留病原體；（7）記錄事件經(jīng)過、處理措施和參與人員，報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人及生物安全委員會(huì)；（8）參與處理的人員進(jìn)行暴露后評估，必要時(shí)啟動(dòng)PEP（暴露后預(yù)防）。5.簡述臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全培訓(xùn)的主要內(nèi)容（至少列出5項(xiàng)）。答案：（1）生物安全法規(guī)與標(biāo)準(zhǔn)：《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489）等；（2）病原微生物危害程度分類及風(fēng)險(xiǎn)評估方法；（3）實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范：樣本采集、運(yùn)輸、處理、廢棄物管理等；（4）個(gè)人防護(hù)裝備（PPE）的選擇與正確使用（如N95口罩佩戴氣密性測試、生物安全柜操作）；（5）實(shí)驗(yàn)室感染控制措施：消毒滅菌方法、環(huán)境監(jiān)測、職業(yè)暴露應(yīng)急處理；（6）生物安全事件報(bào)告流程與應(yīng)急預(yù)案；（7）實(shí)驗(yàn)室設(shè)施與設(shè)備的安全使用（如高壓蒸汽滅菌器、生物安全柜維護(hù)）；（8）醫(yī)療廢物分類、包裝與交接要求。四、案例分析題（20分）【案例】某三甲醫(yī)院檢驗(yàn)科生化組工作人員張某，在處理急診患者李某的血清樣本時(shí)，未佩戴護(hù)目鏡。操作過程中，因移液器用力過猛，血清濺入張某左眼。經(jīng)核實(shí)，患者李某乙肝五項(xiàng)顯示“大三陽”（HBsAg、HBeAg、抗-HBc陽性）。問題：1.請分析該事件中存在的生物安全違規(guī)行為（5分）。2.簡述張某應(yīng)采取的應(yīng)急處理措施（10分）。3.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)如何改進(jìn)管理以預(yù)防類似事件發(fā)生（5分）。答案：1.違規(guī)行為分析：（1）未按BSL-2實(shí)驗(yàn)室要求佩戴護(hù)目鏡（處理體液樣本需防護(hù)眼結(jié)膜）；（2）移液器操作不規(guī)范（用力過猛導(dǎo)致樣本濺出）；（3）可能未進(jìn)行崗前生物安全培訓(xùn)或培訓(xùn)效果未達(dá)標(biāo)；（4）實(shí)驗(yàn)室監(jiān)督缺失（未及時(shí)糾正不規(guī)范操作）；（5）未在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行可能產(chǎn)生噴濺的操作（若樣本量＞1ml）。2.應(yīng)急處理措施：（1）立即停止操作，用流動(dòng)清水沖洗眼睛15分鐘（翻轉(zhuǎn)眼瞼，確保徹底沖洗）；（2）沖洗后用0.5%碘伏或75%乙醇對眼周皮膚消毒（避免直接接觸眼內(nèi)）；（3）報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人，啟動(dòng)職業(yè)暴露登記程序；（4）采集患者李某的血液樣本，復(fù)核HBV感染狀態(tài)（必要時(shí)檢測HBVDNA載量）；（5）采集張某的血液樣本，檢測乙肝兩對半（抗-HBs、HBsAg、抗-HBc）和肝功能；（6）根據(jù)檢測結(jié)果啟動(dòng)暴露后預(yù)防：若張某抗-HBs滴度＜10mIU/ml，24小時(shí)內(nèi)注射乙肝免疫球蛋白（HBIG）200IU，并接種乙肝疫苗（0、1、6月方案）；（7）密切監(jiān)測張某的肝功能和HBV感染指標(biāo)（暴露后1、3、6個(gè)月復(fù)查）；（8）記錄事件全過程（時(shí)間、地點(diǎn)、暴露方式、處理措施），上報(bào)醫(yī)院感染管理科和生物安全委員會(huì)。3.改進(jìn)管理措施：（1）加