植物葉綠素含量測(cè)定----無(wú)水乙醇提取法摘要：本文是主要是用無(wú)水乙醇提取法提取葉綠素以及用比色法測(cè)定葉綠素的含量實(shí)驗(yàn)的綜述。關(guān)鍵詞：葉綠素的提取、含量測(cè)定、無(wú)水乙醇、比色法前言：高等植物光合作用過(guò)程中利用的光能是通過(guò)葉綠體色素(光合色素)吸收的。葉綠體色素由葉綠素a、葉綠素b、胡蘿卜素和葉黃素組成。葉綠體色素的提取、分離和測(cè)定是研究它們的特性以及在光合中作用的第一步。葉片葉綠素含量與光合作用密切相關(guān)，是反眏葉片生理狀態(tài)的重要指標(biāo)。在植物光合生理、發(fā)育生理和抗性生理研究中經(jīng)常需要測(cè)定葉綠素含量。葉綠素含量也是指導(dǎo)作物栽培生產(chǎn)和選育作物品種的重要指標(biāo)。正文：一、原理葉綠素不溶于水，溶于有機(jī)溶劑，可用多種有機(jī)溶劑，如丙酮、乙醇或二甲基亞砜等研磨提取或浸泡提取。葉綠色素在特定提取溶液中對(duì)特定波長(zhǎng)的光有最大吸收，用分光光度計(jì)測(cè)定在該波長(zhǎng)下葉綠素溶液的吸光度(也稱為光密度)，再根據(jù)葉綠素在該波長(zhǎng)下的吸收系數(shù)即可計(jì)算葉綠素含量。利用分光光計(jì)測(cè)定葉綠素含量的依據(jù)是Lambert-Beer定律，即當(dāng)一束單色光通過(guò)溶液時(shí)，溶液的吸光度與溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比。其數(shù)學(xué)表達(dá)式為：A=K*b*c（式中：A為吸光度；K為吸光系數(shù)；b為溶液的厚度；c為溶液濃度）；葉綠素a、b的丙酮溶液在可見(jiàn)光范圍內(nèi)的最大吸收峰分別位于663、645nm處。葉綠素a和b在663nm處的吸光系數(shù)（當(dāng)溶液厚度為1cm，葉綠素濃度為g?L-1時(shí)的吸光度）分別為82.04和9.27；在645nm處的吸光系數(shù)分別為16.75和45.60。根據(jù)Lambert-Beer定律,葉綠素溶液在663nm和645nm處的吸光度（A663和A645）與溶液中葉綠素a、b和總濃度（a+b）（Ca、Cb、Ca十b，單位為g?L-1），的關(guān)系可分別用下列方程式表示：A663=82.04Ca+9.27Cb（1）A645=16.76Ca+45.60Cb（2）解方程（1）和（2）得：Ca=12.7A663—2.59A645(3)Cb=22.9A645—4.67A663(4)Ca十b＝20.3A645—8.04A663(5)二、實(shí)驗(yàn)的材料、儀器、藥品1．材料：植物綠色葉片。2．儀器：分光光度計(jì)、比色皿、天平、研缽、濾紙、漏斗、滴管、剪刀、50ml容量瓶。三、實(shí)驗(yàn)步驟1．葉綠素的提?。河孟匆?/p>