1適用范圍本作業(yè)指導書規(guī)定了用過硫酸鉀（或硝酸-高氯酸）為氧化劑，將未經(jīng)過濾的水樣消解，用鉬酸銨分光光度法測定總磷的方法。總磷包括溶解的、顆粒的、有機的和無機的磷。適用于地表水、污水和工業(yè)廢水的測定。當樣品體積為25ml時，本方法的檢出限為0.01mg/L，測定下限為0.04mg/L，測定上限為0.6mg/L。2方法原理在中性條件下用過硫酸鉀（或硝酸-高氯酸）使試樣消解，將所含磷全部氧化為正磷酸鹽。在酸性介質(zhì)中，正磷酸鹽與鉬酸銨反應(yīng)，在銻鹽存在下生成磷鉬雜多酸后，立即被抗壞血酸還原，生成藍色的絡(luò)合物。注1：過硫酸鉀溶液在常溫下穩(wěn)定性好，具有方便和安全的特點，一般水樣建議使用過硫酸鉀消解樣3干擾和消除在酸性條件下，砷、鉻、硫等干擾測定。砷大于2mg/L干擾測定，用硫代硫酸鈉去除；硫化物大于2mg/L干擾測定，通氮氣去除；鉻大于50mg/L干擾測定，用亞硫酸鈉去除；亞硝酸鹽大于1mg/L有干擾，用氧化消解或加氨磺酸均可以除去；鐵濃度為20mg/L，使結(jié)果偏低5%；銅濃度達10mg/L不干擾；氟化物小于70mg/L也不干擾；水中大多數(shù)常見離子對顯色的影響可以忽略。4試劑和材料本標準所用試劑除另有說明外，均應(yīng)使用符合國家標準的分析純試劑，實驗用水均為蒸餾水、同等純度的水或市售純水（需檢驗確定滿足實驗室空白要求）。4.1硫酸：ρ（H2SO4）=1.84g/ml。4.2硫酸：1+1溶液。在不斷攪拌下，將100ml硫酸（4.1）慢慢加入到100ml水中。4.3硫酸：c（1/2H2SO4）≈1mol/L。將27ml硫酸（4.1）加入到973ml水中。4.4硝酸：ρ（HNO3）=1.4g/ml。4.5高氯酸：ρ（HClO4）=1.68g/ml，優(yōu)級純。4.6過硫酸鉀：50g/L溶液。將5g過硫酸鉀（K2S2O8）溶解于水，并稀釋至100ml。酸鉀溶液在溫度較低時，會有結(jié)晶析出，加熱溶解后4.7抗壞血酸：100g/L溶液。溶解10g抗壞血酸（C6H8O6）于水中，并稀釋至100ml。此溶液貯于棕色的試劑瓶中，在冷處可穩(wěn)定幾周。如出現(xiàn)變色或渾濁不可使用。注3：抗壞血酸溶液氧化發(fā)黃，主要是由于溶液中存在微量的銅造成，加入ED4.8鉬酸鹽溶液：溶解13g鉬酸銨[（NH4）6Mo7O24·4H2O]于100ml水中，溶解0.35g酒石酸銻鉀[KSbC4H4O7·1/2H2O]于100ml水中，在不斷攪拌下把鉬酸銨溶液徐徐加到300ml硫酸（4.2）中，加酒石酸銻鉀溶液并且混合均勻。此溶液貯存于棕色試劑瓶中，在冷處可保存二個月。4.9氫氧化鈉：c（NaOH）=1mol/L溶液。40g氫氧化鈉溶于水，并稀釋至1L。4.10氫氧化鈉：c（NaOH）=6mol/L溶液。240g氫氧化鈉溶于水，并稀釋至1L。4.11磷標準貯備溶液：稱取0.2197±0.001g磷酸二氫鉀（KH2PO4110℃干燥2h且于干燥器中放冷用水溶解后轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶中，加入大約800ml水、5ml硫酸（4.2）用水稀釋至標線并混勻。1.00ml此標準溶液含50.0μg磷。本溶液在玻璃瓶中可貯存至少六個月。也可直接購買市售有證磷標準溶液。4.12磷標準使用溶液：將10.0ml的磷標準貯備溶液（4.11）轉(zhuǎn)移至250ml容量瓶中，用水稀釋至標線并混勻。每毫升此標準溶液含2.0μg磷。使用當天配制。4.13濁度-色度補償液：混合兩個體積硫酸（4.2）和一個體積抗壞血酸溶液（4.7）。使用當天配制。4.14酚酞：10g/L溶液。0.5g酚酞溶于50ml95%乙醇中。5儀器和設(shè)備5.1常用的實驗室儀器和設(shè)備。5.2高壓蒸氣滅菌器或一般壓力鍋（1.1~1.4kg/cm2）。注4：使用時，應(yīng)定期檢定壓力表，并檢查橡膠密封圈密封情況，避免因漏氣而減壓。高壓蒸汽滅菌5.350ml具塞比色管。5.4分光光度計。注5：所有玻璃器皿推薦使用稀鹽酸或稀硝酸浸泡，也可用不含磷的洗滌劑清洗，然后用蒸餾水沖洗6樣品采集與保存參照HJ91.1-2019、HJ91.2-2022相關(guān)規(guī)定采集樣品。6.1采500ml水樣于玻璃瓶中，不加任何試劑于0~5℃保存，或加入1ml硫酸（4.1）調(diào)節(jié)樣品的pH值低于或等于1，樣品可保存24h。6.2采樣容器的洗滌：鉻酸洗液洗一次，自來水洗三次，蒸餾水洗一次。如果采集污水樣品可省去用蒸餾水、去離子水清洗的步驟。7樣品制備7.1過硫酸鉀消解取25.00ml仔細搖勻后的樣品于比色管（5.3）中，加入4ml過硫酸鉀（4.6），將比色管的蓋子蓋緊后，用小塊布和線繩將比色管塞扎緊或用其他方法固定，以防彈出。放在大燒杯中置于高壓蒸氣消毒器（5.2）中加熱待壓力達到1.1kg/cm2、相應(yīng)溫度為120℃時，開始計時，保持溫度在120~124℃之間30min后停止加熱，自然冷卻。待壓力表讀數(shù)降至零后，取出比色管冷卻至室溫，按住管塞將比色管顛倒混勻2~3次，用水稀釋至標線，待測。注7：樣品在消解前，特別是用硫酸保存水樣時，需用NaOH水樣至接近中性，再滴加NaOH溶液（4.9）細調(diào)至中性。注8：取水樣時應(yīng)仔細搖勻，以得到溶解部分和懸浮部分均具有代表性的試樣。如樣品中含磷濃度較注9：應(yīng)確保在消解過程中，比色管塞不會出現(xiàn)松動的情況。若比色管在消解過程中出現(xiàn)管口或管塞破裂，應(yīng)重新取樣分析。扎緊比色管塞可用7.2硝酸-高氯酸消解取25ml水樣于錐形瓶中，加數(shù)粒玻璃珠。加2ml硝酸（4.4）在電熱板上加熱濃縮至10ml。冷后加5ml硝酸（4.4），再加熱濃縮至10ml，放冷。加3ml高氯酸（4.5），加熱至高氯酸冒白煙，此時可在錐形瓶上加小漏斗或調(diào)節(jié)電熱板溫度，使消解液在錐形瓶內(nèi)壁保持回流狀態(tài)，直至剩下3~4ml，放冷。加水10ml，加1滴酚酞指示劑（4.14）。滴加氫氧化鈉溶液（4.9或4.10）至剛呈微紅色，再滴加硫酸溶液（4.3）使微紅剛好退去，充分混勻。移至具塞比色管中（5.3），用水稀釋至標線，待測。7.3消解后，若試樣有濁度干擾時，可采用中速定性濾紙或纖維濾膜將樣品過濾至另一個50ml比色管中，用水沖洗比色管及濾紙，一并移入比色管中，加水至標線，待測。所用濾紙和濾膜在過濾前應(yīng)用純水多次洗滌除磷，空白試樣進行同樣的過濾操作，空白吸光度應(yīng)控制在0.007以下。8分析步驟8.1校準曲線的繪制取7支比色管（5.3）分別加入0.00ml，0.50ml，1.00ml，3.00ml，5.00ml，l0.00ml，15.0ml磷標準使用溶液（4.12），加水至25ml。然后按測步驟（7.1或7.2）進行處理。分別向各比色管中加入1ml抗壞血酸溶液（4.7）混勻，30s后加2ml鉬酸鹽溶液（4.8）充分混勻。室溫下放置15min后，使用光程為30mm的比色皿，在700nm波長下，以水做參比，測定吸光度。以扣除空白試驗的吸光度為縱坐標，對應(yīng)的總磷(μg）的含量為橫坐標繪制校準曲線。8.2樣品測定將樣品制備后的待測試樣按照8.1步驟進行測定。），注14：樣品的吸光度不應(yīng)超過校準曲線濃8.3空白測定用25ml實驗用水代替樣品，按照8.1步驟進行測定。9結(jié)果計算和表示總磷含量以C（mg/L）表示，按下式計算：式中：m——試樣測得含磷量，μg；V——測定用試樣體積，ml。當測定結(jié)果＜10.0mg/L時，保留至小數(shù)點后兩位；當測定結(jié)果≥10.0mg/L時，保留三位有效數(shù)字。10質(zhì)量保證和質(zhì)量控制每批次(≤20個）樣品應(yīng)至少測定一個空白樣品，空白樣品測定值應(yīng)低于方法檢出限。超過檢出限時應(yīng)檢查實驗用水、試劑純度、器皿和高壓蒸汽滅菌器的污染狀況等。10.2校準曲線校準曲線的線性相關(guān)系數(shù)r應(yīng)≥0.999。校準曲線一般每季度繪制一次。每批樣品應(yīng)測定1個校準曲線中間點，其測定結(jié)果與校準曲線相應(yīng)點濃度的相對誤差應(yīng)在±10%以內(nèi)，否則應(yīng)重新繪制校準曲線。10.3精密度控制每批樣品應(yīng)至少測定10%的平行雙樣，樣品數(shù)量少于10個時，應(yīng)測定1個平行雙樣。樣品含量≤0.03mg/L時，平行雙樣測定結(jié)果的相對偏差應(yīng)≤25%；樣品含量＞0.03mg/L時，平行雙樣測定結(jié)果的相對偏差應(yīng)≤10%。10.4正確度控制每批樣品(≤20個）至少做一個有證標準樣品或加標回收測定，有證標準樣品的測定值應(yīng)在允許的范圍內(nèi)。樣品含量≤0.03mg/L時，加標回收率為70～130%；樣品含量＞0.03mg/L時，加標回收率為80～120%。品中待測物濃度在方法檢出限附近時，加標量應(yīng)控制在校準曲線的低濃度范圍。加標體積通常控制在樣品11注意事項11.1用硝酸-高氯酸消解水樣需要在通風櫥中進行，高氯酸和有機物的混合物經(jīng)加熱易發(fā)生危險，需將試樣先用硝酸消解，然后再加入硝酸-高氯酸進行消解，絕不可把消解的試樣蒸干。如消解后有殘渣時，用濾紙過濾于具塞刻度管中，并用水充分清洗錐形瓶及濾紙，一并移到具塞刻度管中。11.2室溫低于13℃時，可將比色管放置在20~30℃水浴中顯色