生物醫(yī)藥蛋白定量分析師崗位考試試卷及答案單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.以下哪種方法常用于蛋白定量？（）A.比色法B.電泳法C.層析法2.Bradford法測(cè)定蛋白含量主要利用蛋白質(zhì)與（）的結(jié)合。A.考馬斯亮藍(lán)B.雙縮脲試劑C.茚三酮3.紫外分光光度法測(cè)定蛋白常用波長(zhǎng)是（）A.260nmB.280nmC.340nm4.以下哪種是微量蛋白定量的方法？（）A.Lowry法B.BCA法C.凱氏定氮法5.蛋白定量時(shí)，樣本的（）會(huì)影響結(jié)果準(zhǔn)確性。A.顏色B.體積C.溫度6.BCA法的優(yōu)點(diǎn)不包括（）A.靈敏度高B.受干擾物質(zhì)少C.線性范圍窄7.進(jìn)行蛋白定量前，樣本需要（）處理。A.稀釋B.濃縮C.離心8.考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白，其顏色變化是（）A.藍(lán)色變紅色B.紅色變藍(lán)色C.無(wú)色變藍(lán)色9.對(duì)于含有核酸的蛋白樣本定量，常采用（）校正。A.經(jīng)驗(yàn)值B.公式計(jì)算C.空白對(duì)照10.蛋白定量標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制，一般采用（）坐標(biāo)紙。A.直角B.對(duì)數(shù)C.半對(duì)數(shù)多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.常用的蛋白定量方法有（）A.雙縮脲法B.Lowry法C.Bradford法D.BCA法2.影響蛋白定量準(zhǔn)確性的因素有（）A.樣本雜質(zhì)B.儀器精度C.操作誤差D.試劑質(zhì)量3.以下關(guān)于Bradford法說(shuō)法正確的是（）A.操作簡(jiǎn)單B.反應(yīng)快速C.靈敏度高D.受去污劑影響大4.紫外分光光度法測(cè)定蛋白的優(yōu)點(diǎn)有（）A.快速B.不消耗樣本C.靈敏度高D.不需要試劑5.蛋白定量標(biāo)準(zhǔn)品選擇要求（）A.純度高B.穩(wěn)定性好C.與樣本蛋白性質(zhì)相似D.價(jià)格便宜6.雙縮脲法的特點(diǎn)包括（）A.特異性強(qiáng)B.操作簡(jiǎn)便C.靈敏度低D.線性范圍寬7.Lowry法的缺點(diǎn)有（）A.操作復(fù)雜B.反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)C.靈敏度低D.受干擾物質(zhì)多8.進(jìn)行蛋白定量實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要用到的儀器有（）A.分光光度計(jì)B.移液器C.離心機(jī)D.天平9.BCA法測(cè)定蛋白含量時(shí)，試劑包括（）A.A液B.B液C.標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液D.顯色劑10.蛋白定量過(guò)程中，常見(jiàn)的誤差來(lái)源有（）A.樣本不均勻B.加樣不準(zhǔn)確C.溫度波動(dòng)D.儀器未校準(zhǔn)判斷題（每題2分，共10題）1.所有蛋白定量方法都需要標(biāo)準(zhǔn)曲線。（）2.紫外分光光度法只能用于純蛋白定量。（）3.Bradford法對(duì)不同蛋白的響應(yīng)基本相同。（）4.雙縮脲法適合微量蛋白定量。（）5.蛋白定量時(shí)，樣本濃度越高越好。（）6.BCA法不受還原劑影響。（）7.標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍越寬越好。（）8.用分光光度計(jì)測(cè)定時(shí)，不需要預(yù)熱。（）9.不同蛋白定量方法可以相互替代。（）10.蛋白定量實(shí)驗(yàn)中，移液器使用不規(guī)范會(huì)導(dǎo)致誤差。（）簡(jiǎn)答題（每題5分，共4題）1.簡(jiǎn)述Bradford法蛋白定量原理?？捡R斯亮藍(lán)G-250在酸性溶液中與蛋白質(zhì)結(jié)合，導(dǎo)致顏色由紅色變?yōu)樗{(lán)色，在一定蛋白質(zhì)濃度范圍內(nèi)，吸光度與蛋白質(zhì)濃度成正比，通過(guò)測(cè)定吸光度來(lái)定量蛋白。2.紫外分光光度法測(cè)定蛋白有哪些局限性？受核酸等雜質(zhì)干擾大，對(duì)不純樣本定量不準(zhǔn)確；不同蛋白中酪氨酸、色氨酸含量不同，對(duì)光吸收有差異，影響結(jié)果準(zhǔn)確性；靈敏度相對(duì)較低，不適用于微量蛋白定量。3.為什么蛋白定量需要做標(biāo)準(zhǔn)曲線？標(biāo)準(zhǔn)曲線可建立蛋白濃度與測(cè)量信號(hào)（如吸光度）之間的定量關(guān)系，通過(guò)測(cè)量未知樣本的信號(hào)，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線就能準(zhǔn)確計(jì)算出樣本中的蛋白濃度，保證定量準(zhǔn)確性。4.簡(jiǎn)述BCA法的操作步驟要點(diǎn)。先將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品按要求稀釋，準(zhǔn)備好A液與B液按比例混合的工作液，分別向樣本和標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入工作液，混勻后在合適溫度下孵育一定時(shí)間，用分光光度計(jì)測(cè)定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算蛋白含量。討論題（每題5分，共4題）1.在實(shí)際工作中，如何選擇合適的蛋白定量方法？需綜合多方面因素。如樣本特點(diǎn)，純度高的樣本可用紫外分光光度法；微量樣本可選靈敏度高的BCA法等。還要考慮實(shí)驗(yàn)要求，對(duì)準(zhǔn)確性要求極高時(shí)，需選受干擾小的方法。操作簡(jiǎn)便性也很關(guān)鍵，緊急實(shí)驗(yàn)可選操作簡(jiǎn)單快速的Bradford法。成本因素也要考慮，試劑價(jià)格、儀器使用成本等。2.蛋白定量過(guò)程中，如何控制誤差？從樣本處理、儀器操作、試劑使用等多方面控制。樣本要均勻，處理過(guò)程避免損失和污染；準(zhǔn)確使用移液器等儀器，定期校準(zhǔn)；嚴(yán)格按要求配置和使用試劑，注意保存條件；規(guī)范操作流程，多次測(cè)量取平均值，減少偶然誤差。3.對(duì)于含有多種雜質(zhì)的復(fù)雜蛋白樣本，如何進(jìn)行準(zhǔn)確的蛋白定量？可先對(duì)樣本進(jìn)行預(yù)處理，如離心、過(guò)濾等去除大顆粒雜質(zhì)，還可通過(guò)透析、層析等方法去除小分子雜質(zhì)和干擾物質(zhì)。選擇受雜質(zhì)干擾小的定量方法，如BCA法。必要時(shí)采用多種方法相互驗(yàn)證，提高結(jié)果準(zhǔn)確性。4.談?wù)劦鞍锥吭谏镝t(yī)藥研究中的重要性。在生物醫(yī)藥研究中，蛋白定量為很多實(shí)驗(yàn)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。比如在藥物研發(fā)中，準(zhǔn)確測(cè)定蛋白含量可了解藥物對(duì)蛋白表達(dá)的影響；在疾病診斷研究中，蛋白定量有助于確定疾病標(biāo)志物的含量變化輔助診斷；在蛋白純化過(guò)程中，可監(jiān)測(cè)蛋白的回收率和純度，保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行和結(jié)果可靠性。答案單項(xiàng)選擇題1.A2.A3.B4.B5.A6