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金華市中醫(yī)院「微小殘留病」監(jiān)測(cè)技術(shù)選擇與解讀考核一、單選題(每題2分,共20題)1.在金華市中醫(yī)院進(jìn)行微小殘留病(MRD)監(jiān)測(cè)時(shí),首選的流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)方法是?A.三色熒光染色法B.四色熒光染色法C.五色熒光染色法D.六色熒光染色法2.對(duì)于急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)的MRD監(jiān)測(cè),金華市中醫(yī)院通常采用什么分子生物學(xué)技術(shù)作為流式細(xì)胞術(shù)的補(bǔ)充?A.RT-PCRB.qPCRC.FISHD.Sanger測(cè)序3.當(dāng)患者ALL治療后骨髓MRD檢測(cè)結(jié)果顯示0.01%,金華市中醫(yī)院會(huì)建議如何處理?A.立即強(qiáng)化化療B.繼續(xù)定期監(jiān)測(cè)C.考慮造血干細(xì)胞移植D.暫停治療觀察4.在MRD監(jiān)測(cè)中,流式細(xì)胞術(shù)的主要局限性是什么?A.無法檢測(cè)極低水平的殘留細(xì)胞B.操作復(fù)雜,耗時(shí)長(zhǎng)C.成本高,不適合常規(guī)檢測(cè)D.對(duì)儀器要求低5.金華市中醫(yī)院在MRD監(jiān)測(cè)中,對(duì)熒光素標(biāo)記物的選擇優(yōu)先考慮哪種?A.PE(藻紅蛋白)B.FITC(異硫氰酸熒光素)C.APC(藻藍(lán)蛋白)D.PerCP-Cy5.5(派羅丹-氰化物5.5)6.對(duì)于慢性粒細(xì)胞白血?。–ML)的MRD監(jiān)測(cè),金華市中醫(yī)院常用哪種分子標(biāo)志物?A.BCR-ABL1B.TCRγC.CK19D.CD347.當(dāng)MRD檢測(cè)結(jié)果為陰性時(shí),金華市中醫(yī)院會(huì)建議多久復(fù)查一次?A.1個(gè)月B.3個(gè)月C.6個(gè)月D.1年8.在MRD監(jiān)測(cè)中,以下哪種方法對(duì)樣本質(zhì)量要求最高?A.流式細(xì)胞術(shù)B.qPCRC.FISHD.細(xì)胞計(jì)數(shù)9.金華市中醫(yī)院在進(jìn)行MRD監(jiān)測(cè)時(shí),會(huì)特別關(guān)注哪種免疫表型異常?A.CD19+CD10+B.CD34+CD19-C.HLA-DR-D.CD33+CD117+10.對(duì)于MRD監(jiān)測(cè)的陽(yáng)性閾值,金華市中醫(yī)院通常設(shè)定為多少?A.0.01%B.0.1%C.1%D.10%二、多選題(每題3分,共10題)1.金華市中醫(yī)院在MRD監(jiān)測(cè)中,流式細(xì)胞術(shù)需要關(guān)注的免疫表型包括哪些?A.CD19+CD10+B.CD34+CD38+C.CD3+CD8+D.HLA-DR+CD45+2.MRD監(jiān)測(cè)的分子生物學(xué)方法有哪些?A.RT-PCRB.qPCRC.FISHD.Sanger測(cè)序3.金華市中醫(yī)院在MRD監(jiān)測(cè)中,以下哪些情況會(huì)建議進(jìn)行造血干細(xì)胞移植?A.MRD持續(xù)陽(yáng)性超過3個(gè)月B.MRD再次轉(zhuǎn)為陽(yáng)性C.骨髓細(xì)胞數(shù)恢復(fù)后MRD仍高D.化療無效,MRD下降緩慢4.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行MRD監(jiān)測(cè)時(shí),需要避免哪些干擾因素?A.樣本溶血B.免疫固定不良C.熒光淬滅D.樣本污染5.金華市中醫(yī)院在MRD監(jiān)測(cè)中,會(huì)考慮哪些臨床因素?A.治療方案B.患者年齡C.白血病類型D.治療前MRD水平6.MRD監(jiān)測(cè)的陽(yáng)性結(jié)果可能提示哪些問題?A.化療殘留B.耐藥突變C.復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)D.骨髓纖維化7.金華市中醫(yī)院在MRD監(jiān)測(cè)中,常用的熒光標(biāo)記抗體有哪些?A.CD19-PEB.CD10-FITCC.CD34-APCD.CD45-PerCP8.MRD監(jiān)測(cè)的陰性結(jié)果可能意味著什么?A.治療有效B.仍有殘留細(xì)胞但未檢測(cè)到C.樣本量不足D.檢測(cè)方法靈敏度不夠9.在MRD監(jiān)測(cè)中,以下哪些方法可以提高檢測(cè)靈敏度?A.提高熒光強(qiáng)度B.增加樣本量C.優(yōu)化引物設(shè)計(jì)D.使用多重PCR10.金華市中醫(yī)院在MRD監(jiān)測(cè)中,會(huì)特別關(guān)注哪些白血病類型?A.急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)B.慢性粒細(xì)胞白血?。–ML)C.急性髓系白血?。ˋML)D.霍奇金淋巴瘤三、判斷題(每題1分,共10題)1.MRD監(jiān)測(cè)的陽(yáng)性閾值在不同白血病類型中是相同的。(×)2.流式細(xì)胞術(shù)是MRD監(jiān)測(cè)的首選方法,無需其他技術(shù)補(bǔ)充。(×)3.MRD監(jiān)測(cè)可以完全替代臨床隨訪。(×)4.當(dāng)MRD檢測(cè)結(jié)果為0.1%時(shí),意味著患者有很高的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。(√)5.金華市中醫(yī)院在MRD監(jiān)測(cè)中,會(huì)根據(jù)患者情況調(diào)整檢測(cè)頻率。(√)6.MRD監(jiān)測(cè)的樣本必須新鮮,避免室溫放置超過2小時(shí)。(√)7.所有白血病患者的MRD監(jiān)測(cè)方法都相同。(×)8.MRD監(jiān)測(cè)的陰性結(jié)果可以完全排除復(fù)發(fā)可能。(×)9.金華市中醫(yī)院在MRD監(jiān)測(cè)中,會(huì)使用統(tǒng)一的熒光標(biāo)記方案。(×)10.MRD監(jiān)測(cè)的目的是評(píng)估治療效果,而非直接指導(dǎo)治療決策。(×)四、簡(jiǎn)答題(每題5分,共5題)1.簡(jiǎn)述金華市中醫(yī)院在MRD監(jiān)測(cè)中,流式細(xì)胞術(shù)的檢測(cè)流程。2.解釋MRD監(jiān)測(cè)的陽(yáng)性結(jié)果可能的原因。3.描述金華市中醫(yī)院如何根據(jù)MRD結(jié)果調(diào)整治療方案。4.說明MRD監(jiān)測(cè)的樣本保存要求。5.比較流式細(xì)胞術(shù)和qPCR在MRD監(jiān)測(cè)中的優(yōu)缺點(diǎn)。五、論述題(每題10分,共2題)1.結(jié)合金華市中醫(yī)院的實(shí)際情況,論述MRD監(jiān)測(cè)在白血病治療中的重要性。2.分析MRD監(jiān)測(cè)技術(shù)選擇的影響因素,并舉例說明金華市中醫(yī)院的選擇依據(jù)。答案與解析一、單選題1.B解析:金華市中醫(yī)院在MRD監(jiān)測(cè)中,四色熒光染色法最為常用,可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)免疫標(biāo)志物,提高靈敏度。2.B解析:qPCR靈敏度高,適用于檢測(cè)極低水平的MRD,常作為流式細(xì)胞術(shù)的補(bǔ)充。3.C解析:MRD持續(xù)陽(yáng)性或再次升高提示復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)高,需考慮造血干細(xì)胞移植。4.A解析:流式細(xì)胞術(shù)的靈敏度受限于檢測(cè)窗口期,難以檢測(cè)極低水平的殘留細(xì)胞。5.A解析:PE熒光強(qiáng)度高,適合MRD監(jiān)測(cè),金華市中醫(yī)院優(yōu)先選擇PE標(biāo)記的抗體。6.A解析:BCR-ABL1是CML的特異性標(biāo)志物,金華市中醫(yī)院常用其進(jìn)行MRD監(jiān)測(cè)。7.B解析:MRD陰性患者需定期復(fù)查,金華市中醫(yī)院建議3個(gè)月后復(fù)查。8.B解析:qPCR對(duì)樣本質(zhì)量要求高,需避免RNA降解或污染。9.C解析:HLA-DR-是ALL治療后的常見異常表型,金華市中醫(yī)院重點(diǎn)關(guān)注。10.A解析:金華市中醫(yī)院設(shè)定0.01%為陽(yáng)性閾值,符合國(guó)際指南。二、多選題1.A,B,C解析:金華市中醫(yī)院關(guān)注CD19+CD10+、CD34+CD38+、CD3+CD8+等免疫表型。2.A,B,C,D解析:MRD監(jiān)測(cè)可使用RT-PCR、qPCR、FISH、Sanger測(cè)序等方法。3.A,B,C解析:MRD持續(xù)陽(yáng)性、再次陽(yáng)性、下降緩慢等情況需考慮移植。4.A,B,C,D解析:樣本溶血、免疫固定不良、熒光淬滅、污染都會(huì)干擾檢測(cè)。5.A,B,C,D解析:金華市中醫(yī)院綜合治療方案、年齡、類型、治療前MRD等因素。6.A,B,C解析:陽(yáng)性結(jié)果提示化療殘留、耐藥突變、復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。7.A,B,C,D解析:金華市中醫(yī)院常用PE、FITC、APC、PerCP-Cy5.5標(biāo)記抗體。8.A,B,D解析:陰性結(jié)果可能提示治療有效、殘留細(xì)胞未檢測(cè)到或方法靈敏度不足。9.A,B,C,D解析:提高熒光強(qiáng)度、增加樣本量、優(yōu)化引物設(shè)計(jì)、使用多重PCR可提高靈敏度。10.A,B,C解析:金華市中醫(yī)院重點(diǎn)關(guān)注ALL、CML、AML等類型。三、判斷題1.×解析:不同白血病類型的陽(yáng)性閾值需個(gè)體化調(diào)整。2.×解析:流式細(xì)胞術(shù)需結(jié)合分子技術(shù)提高準(zhǔn)確性。3.×解析:MRD監(jiān)測(cè)需結(jié)合臨床綜合評(píng)估。4.√解析:0.1%的MRD提示復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)高。5.√解析:金華市中醫(yī)院根據(jù)患者情況調(diào)整檢測(cè)頻率。6.√解析:樣本需新鮮,避免RNA降解。7.×解析:不同類型需選擇不同方法。8.×解析:陰性結(jié)果不能完全排除復(fù)發(fā)可能。9.×解析:熒光標(biāo)記方案需根據(jù)患者情況調(diào)整。10.×解析:MRD監(jiān)測(cè)可指導(dǎo)治療調(diào)整。四、簡(jiǎn)答題1.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)流程-樣本采集:骨髓或外周血樣本,避免溶血。-免疫固定:使用多色熒光抗體標(biāo)記細(xì)胞。-激光激發(fā):通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光信號(hào)。-數(shù)據(jù)分析:設(shè)置gate,計(jì)算MRD比例。2.MRD陽(yáng)性結(jié)果可能的原因-化療殘留:部分細(xì)胞未完全清除。-耐藥突變:白血病細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性。-復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn):治療不徹底,可能復(fù)發(fā)。3.根據(jù)MRD結(jié)果調(diào)整治療方案-陽(yáng)性:強(qiáng)化化療或考慮移植。-陰性:繼續(xù)定期監(jiān)測(cè),減少化療強(qiáng)度。4.樣本保存要求-新鮮采集,避免室溫放置超過2小時(shí)。-使用RNA保護(hù)劑,避免降解。5.流式細(xì)胞術(shù)與qPCR的優(yōu)缺點(diǎn)-流式細(xì)胞術(shù):快速,適合大批量檢測(cè),但靈敏度有限。-qPCR:靈敏度高,但操作復(fù)雜,需RNA提取。五、論述題1.MRD監(jiān)測(cè)在白血病治療中的重要性-評(píng)估療效:MRD是預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)和療效的指標(biāo)。-指導(dǎo)治療:根據(jù)
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