南昌市中醫(yī)院酶聯(lián)免疫技術(shù)專項(xiàng)考核一、單選題（每題2分，共20題）1.在南昌市中醫(yī)院進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）時(shí)，最常用的酶是？A.過(guò)氧化物酶（HRP）B.腺苷酸脫氨酶（ADA）C.超氧化物歧化酶（SOD）D.脫氧核糖核酸酶（DNase）答案：A解析：過(guò)氧化物酶（HRP）是ELISA中最常用的標(biāo)記酶，因其穩(wěn)定性高、活性強(qiáng)且易于檢測(cè)。2.南昌地區(qū)夏季高溫高濕，ELISA實(shí)驗(yàn)中保存酶標(biāo)板的最適宜溫度是？A.37℃保存，室溫檢測(cè)B.4℃保存，室溫檢測(cè)C.-20℃保存，室溫檢測(cè)D.4℃保存，37℃檢測(cè)答案：D解析：南昌夏季高溫，酶標(biāo)板需4℃保存以抑制酶活性，檢測(cè)時(shí)需37℃溫育以增強(qiáng)反應(yīng)速率。3.南昌市中醫(yī)院使用的ELISA試劑盒若需檢測(cè)IgG，其固相載體最可能包被的是？A.抗IgG抗體B.抗IgM抗體C.IgG純化蛋白D.IgE純化蛋白答案：A解析：ELISA檢測(cè)IgG時(shí)，固相載體需包被抗IgG抗體，以捕獲樣本中的IgG。4.南昌某患者血清樣本進(jìn)行ELISA檢測(cè)時(shí)，若出現(xiàn)高背景值，可能的原因是？A.樣本中的高蛋白干擾B.抗體效價(jià)過(guò)低C.酶標(biāo)板未封閉完全D.試劑過(guò)期答案：C解析：未封閉的酶標(biāo)板表面會(huì)吸附非特異性物質(zhì)，導(dǎo)致高背景值。5.南昌市中醫(yī)院使用的洗板機(jī)，建議每次洗滌后用吸水紙吸干酶標(biāo)板，目的是？A.防止交叉污染B.增強(qiáng)顯色效果C.節(jié)省洗滌液D.加快反應(yīng)速率答案：A解析：吸干殘留液體可避免洗滌液交叉污染，影響結(jié)果準(zhǔn)確性。6.南昌地區(qū)冬季低溫（0℃以下），運(yùn)輸ELISA試劑盒時(shí)需采取的措施是？A.常溫運(yùn)輸B.置于保溫袋中運(yùn)輸C.直接冷凍運(yùn)輸D.使用干冰運(yùn)輸答案：B解析：低溫下需保溫運(yùn)輸，避免試劑盒冷凍破壞。7.南昌市中醫(yī)院檢測(cè)乙肝表面抗原（HBsAg），若樣本呈弱陽(yáng)性，應(yīng)如何處理？A.直接上報(bào)陽(yáng)性結(jié)果B.復(fù)測(cè)樣本C.聯(lián)系患者重抽樣本D.忽略結(jié)果答案：B解析：弱陽(yáng)性結(jié)果需復(fù)測(cè)確認(rèn)，排除假陽(yáng)性。8.ELISA實(shí)驗(yàn)中，辣根過(guò)氧化物酶（HRP）的底物TMB顯色后，最適宜的讀板時(shí)間是？A.10分鐘內(nèi)B.30分鐘內(nèi)C.60分鐘內(nèi)D.90分鐘內(nèi)答案：B解析：TMB顯色需在30分鐘內(nèi)讀板，避免過(guò)長(zhǎng)時(shí)間導(dǎo)致顏色褪色。9.南昌市中醫(yī)院若需檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物（如CEA），其ELISA檢測(cè)的線性范圍通常設(shè)定為？A.0-100ng/mLB.0-1000ng/mLC.0-10000ng/mLD.0-100000ng/mL答案：C解析：腫瘤標(biāo)志物濃度較高，線性范圍需覆蓋0-10000ng/mL。10.南昌某患者樣本ELISA檢測(cè)時(shí)，若出現(xiàn)異常結(jié)果（如遠(yuǎn)超或低于預(yù)期），首要排查的是？A.試劑是否過(guò)期B.樣本是否溶血C.酶標(biāo)板是否破損D.儀器是否校準(zhǔn)答案：A解析：過(guò)期試劑會(huì)導(dǎo)致結(jié)果偏差，需優(yōu)先排查。二、多選題（每題3分，共10題）11.南昌市中醫(yī)院進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)，以下哪些操作需嚴(yán)格無(wú)菌？A.樣本稀釋B.加樣過(guò)程C.洗板步驟D.試劑配制答案：ABD解析：樣本稀釋、加樣和試劑配制需無(wú)菌操作，洗板主要需避免污染。12.ELISA實(shí)驗(yàn)中，以下哪些屬于非特異性吸附的來(lái)源？A.酶標(biāo)板未封閉B.試劑pH值不當(dāng)C.樣本中高濃度IgGD.儀器未校準(zhǔn)答案：ABC解析：非特異性吸附主要由表面未封閉、pH值和樣本成分引起。13.南昌地區(qū)夏季使用ELISA試劑盒時(shí)，以下哪些措施可提高實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性？A.使用4℃保存的試劑B.快速完成實(shí)驗(yàn)流程C.將樣本置于冰上保存D.使用預(yù)溫的酶標(biāo)板答案：ABCD解析：高溫環(huán)境下需全程控制溫度以減少干擾。14.ELISA實(shí)驗(yàn)中，以下哪些屬于干擾因素？A.樣本中高濃度溶血素B.試劑中未除盡的牛血清白蛋白（BSA）C.儀器光源不穩(wěn)定D.重復(fù)加樣誤差答案：ABC解析：溶血素、BSA和光源不穩(wěn)定均為干擾因素，重復(fù)加樣誤差屬于操作問(wèn)題。15.南昌市中醫(yī)院檢測(cè)自身抗體時(shí)，以下哪些指標(biāo)可能升高？A.類風(fēng)濕因子（RF）B.抗雙鏈DNA抗體（抗dsDNA）C.抗核抗體（ANA）D.C反應(yīng)蛋白（CRP）答案：ABC解析：RF、抗dsDNA和ANA與自身免疫病相關(guān)，CRP為非特異性指標(biāo)。16.ELISA實(shí)驗(yàn)中，以下哪些屬于質(zhì)量控制措施？A.使用空白對(duì)照B.使用標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)C.定期檢測(cè)酶標(biāo)板平整度D.復(fù)測(cè)異常樣本答案：ABCD解析：全程質(zhì)控需覆蓋試劑、樣本和操作各環(huán)節(jié)。17.南昌某醫(yī)院若需檢測(cè)病原體抗體，以下哪些方法可提高靈敏度？A.使用生物素-親和素系統(tǒng)B.延長(zhǎng)孵育時(shí)間C.增加抗體濃度D.使用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)答案：AD解析：生物素-親和素系統(tǒng)和化學(xué)發(fā)光可顯著提高靈敏度。18.ELISA實(shí)驗(yàn)中，以下哪些屬于陰性對(duì)照的作用？A.排除假陽(yáng)性B.評(píng)估背景值C.驗(yàn)證試劑有效性D.檢測(cè)樣本干擾答案：AB解析：陰性對(duì)照主要用于排除假陽(yáng)性和評(píng)估背景值。19.南昌地區(qū)冬季使用ELISA時(shí)，以下哪些操作需特別注意？A.預(yù)溫樣本和試劑B.使用保溫箱孵育C.避免試劑結(jié)冰D.快速完成洗滌步驟答案：ABCD解析：低溫環(huán)境下需全程保溫以減少誤差。20.ELISA實(shí)驗(yàn)中，以下哪些屬于結(jié)果判讀的依據(jù)？A.標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率B.樣本OD值與閾值對(duì)比C.陰陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)D.重復(fù)實(shí)驗(yàn)一致性答案：ABCD解析：判讀需綜合曲線、閾值、標(biāo)準(zhǔn)及重復(fù)性。三、判斷題（每題2分，共10題）21.南昌市中醫(yī)院若發(fā)現(xiàn)ELISA試劑盒有效期縮短，可使用溫水加速溶解（×）答案：×解析：溫水加速溶解可能破壞試劑盒成分，需按說(shuō)明書操作。22.ELISA實(shí)驗(yàn)中，樣本中高濃度脂血會(huì)干擾結(jié)果判讀（√）答案：√解析：脂血可能附著酶標(biāo)板，導(dǎo)致高背景值。23.南昌地區(qū)夏季使用ELISA時(shí)，可省略樣本冷凍步驟（×）答案：×解析：高溫下樣本需冷凍保存以避免降解。24.ELISA實(shí)驗(yàn)中，空白孔OD值越高越好（×）答案：×解析：空白孔OD值應(yīng)盡量低，避免背景干擾。25.南昌某患者樣本ELISA檢測(cè)時(shí)，若出現(xiàn)重復(fù)性差，需優(yōu)先檢查加樣誤差（√）答案：√解析：重復(fù)性差常由加樣不準(zhǔn)導(dǎo)致。26.ELISA實(shí)驗(yàn)中，酶標(biāo)板需使用專用洗滌液（√）答案：√解析：專用洗滌液可保證清洗效果。27.南昌地區(qū)冬季使用ELISA時(shí)，試劑需在室溫下平衡30分鐘（×）答案：×解析：冬季試劑需在37℃平衡。28.ELISA實(shí)驗(yàn)中，樣本保存不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致結(jié)果假陰性（√）答案：√解析：保存不當(dāng)可能破壞抗體活性。29.南昌某醫(yī)院若需檢測(cè)病毒抗原，ELISA線性范圍需覆蓋0-1000ng/mL（×）答案：×解析：病毒抗原濃度低，線性范圍需更窄（如0-100ng/mL）。30.ELISA實(shí)驗(yàn)中，所有樣本均需進(jìn)行復(fù)測(cè)（×）答案：×解析：僅異?；蚺R界值樣本需復(fù)測(cè)。四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共5題）31.簡(jiǎn)述南昌市中醫(yī)院夏季使用ELISA試劑盒時(shí)，如何避免高溫干擾？答案：-試劑需4℃保存，運(yùn)輸使用保溫袋；-樣本和試劑需在37℃平衡；-實(shí)驗(yàn)全程避免陽(yáng)光直射；-洗板和孵育使用預(yù)溫設(shè)備。32.南昌某患者樣本ELISA檢測(cè)時(shí)，若出現(xiàn)高背景值，可能的原因及解決方法？答案：-原因：酶標(biāo)板未封閉、洗滌不充分、樣本干擾；-解決：加強(qiáng)封閉、優(yōu)化洗滌條件、使用空白對(duì)照排除干擾。33.簡(jiǎn)述ELISA實(shí)驗(yàn)中，標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制的基本要求。答案：-標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度需覆蓋臨床范圍；-每個(gè)濃度需設(shè)復(fù)孔；-線性回歸R2值應(yīng)>0.98；-陰陽(yáng)性判斷閾值需明確。34.南昌地區(qū)冬季使用ELISA時(shí)，如何確保樣本質(zhì)量？答案：-樣本采集后立即冷藏保存；-避免反復(fù)凍融；-試劑需在37℃平衡后再使用；-實(shí)驗(yàn)環(huán)境需預(yù)熱至室溫。35.簡(jiǎn)述ELISA實(shí)驗(yàn)中，生物素-親和素系統(tǒng)的作用及優(yōu)勢(shì)。答案：-作用：利用親和素的高親和力放大信號(hào)；-優(yōu)勢(shì)：靈敏度高、特異性強(qiáng)，適用于低濃度檢測(cè)。五、論述題（每題10分，共2題）36.結(jié)合南昌市中醫(yī)院實(shí)際情況，論述如何優(yōu)化ELISA實(shí)驗(yàn)流程以提高結(jié)果準(zhǔn)確性。答案：-試劑管理：南昌夏季高溫，需嚴(yán)格執(zhí)行4℃保存和運(yùn)輸規(guī)范；-操作標(biāo)準(zhǔn)化：制定標(biāo)準(zhǔn)操作SOP，減少人為誤差；-環(huán)境控制：使用恒溫孵育箱和預(yù)溫酶標(biāo)板；-質(zhì)控體系：定期使用質(zhì)控品，監(jiān)測(cè)儀器和試劑性能；-異常處理：建立異常樣本復(fù)