2025年大學(xué)《化學(xué)測量學(xué)與技術(shù)》專業(yè)題庫——高效液相色譜技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用考試時(shí)間：______分鐘總分：______分姓名：______一、選擇題（每題2分，共20分）1.在高效液相色譜法中，用于分離混合物中各組分的基礎(chǔ)是：A.液體流動(dòng)相的極性B.固定相表面的吸附能力C.檢測器對(duì)物質(zhì)的響應(yīng)D.泵的流量大小2.下列哪種檢測器適用于檢測對(duì)紫外光吸收很弱或無吸收的化合物，且需要將樣品衍生化后才能使用？A.紫外-可見檢測器(UV-Vis)B.示差折光檢測器(RID)C.熒光檢測器(FLD)D.蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)3.在HPLC中，表示色譜峰峰高最大處距離進(jìn)樣點(diǎn)時(shí)間的參數(shù)是：A.保留時(shí)間(RT)B.半峰寬(FWHM)C.調(diào)節(jié)時(shí)間(TT)D.出峰順序4.為了獲得良好的分離度，除了流動(dòng)相和固定相選擇外，以下哪個(gè)參數(shù)的選擇也至關(guān)重要？A.柱溫B.洗脫梯度C.進(jìn)樣量D.檢測波長5.根據(jù)ICH指導(dǎo)原則，進(jìn)行HPLC方法驗(yàn)證時(shí)，通常不需要進(jìn)行驗(yàn)證的項(xiàng)目是：A.精密度（重復(fù)性與中間精密度）B.線性C.檢測限(LOD)與定量限(LOQ)D.色譜柱的理論塔板數(shù)6.在藥物制劑的含量測定中，使用內(nèi)標(biāo)法的主要優(yōu)點(diǎn)是：A.靈敏度最高B.操作最簡單C.能消除進(jìn)樣量不準(zhǔn)確和溶劑影響D.不需要制作標(biāo)準(zhǔn)曲線7.以下哪種情況會(huì)導(dǎo)致HPLC出現(xiàn)峰拖尾？A.流動(dòng)相pH不合適導(dǎo)致藥物解離B.柱溫過高C.進(jìn)樣量過大D.檢測器響應(yīng)時(shí)間過長8.在進(jìn)行藥物中有關(guān)物質(zhì)檢查時(shí)，除了保留時(shí)間外，還需將待測峰的紫外光譜與什么進(jìn)行對(duì)照以確認(rèn)其身份？A.空白溶液色譜圖B.供試品溶液色譜圖C.對(duì)照品溶液色譜圖D.流動(dòng)相色譜圖9.采用梯度洗脫時(shí)，如果目標(biāo)組分在洗脫液中濃度過高，可能導(dǎo)致的問題主要是：A.峰形變寬B.分離度下降C.出峰時(shí)間提前D.基線不穩(wěn)定10.高效液相色譜法（HPLC）與常壓液相色譜法（LPLC）最主要的不同在于：A.檢測器類型B.固定相類型C.操作壓力D.流動(dòng)相種類二、填空題（每空1分，共15分）1.高效液相色譜法是利用混合物中各組分在______相和______相之間分配系數(shù)的差異進(jìn)行分離的液相色譜技術(shù)。2.進(jìn)行HPLC方法學(xué)考察時(shí)，評(píng)價(jià)色譜峰分離程度的指標(biāo)是______，其定義為兩個(gè)相鄰峰峰谷之間的距離與兩個(gè)峰峰高總和之比。3.系統(tǒng)適用性試驗(yàn)（SST）是確保HPLC分析系統(tǒng)符合要求進(jìn)行的系列檢查，其中對(duì)峰形的要求通常用______因子來衡量，其理想值為1。4.在藥物分析中，HPLC可用于測定藥物原料藥和制劑的______，檢查和控制藥物中的______以及研究藥物的______。5.為了獲得良好的分離效果，在選擇HPLC固定相時(shí)，通常需要考慮固定相的______和______。6.當(dāng)樣品溶液中存在干擾物質(zhì)時(shí)，為了提高選擇性，可以選擇使用______檢測器或?qū)⒏蓴_組分通過化學(xué)反應(yīng)轉(zhuǎn)化為具有特定檢測響應(yīng)的衍生物。三、簡答題（每題5分，共15分）1.簡述高效液相色譜法（HPLC）與氣相色譜法（GC）在基本分離原理上的主要區(qū)別。2.簡述進(jìn)行HPLC方法驗(yàn)證時(shí)，通常需要考察哪些項(xiàng)目，并簡述其目的。3.簡述在HPLC分析中，選擇流動(dòng)相時(shí)需要考慮哪些主要因素。四、論述題（10分）結(jié)合藥物分析的具體實(shí)例，論述選擇和優(yōu)化HPLC分析方法（包括流動(dòng)相、梯度程序等）時(shí)需要考慮的關(guān)鍵因素及其對(duì)分析結(jié)果的影響。試卷答案一、選擇題1.B2.D3.A4.B5.D6.C7.A8.C9.B10.C二、填空題1.固定，流動(dòng)2.分離度3.拖尾4.含量，有關(guān)物質(zhì)，穩(wěn)定性5.理化性質(zhì)，極性6.選擇性三、簡答題1.簡述高效液相色譜法（HPLC）與氣相色譜法（GC）在基本分離原理上的主要區(qū)別。解析思路：HPLC與GC都屬于色譜技術(shù)，都基于組分在兩相間分配系數(shù)不同進(jìn)行分離，但關(guān)鍵區(qū)別在于流動(dòng)相和固定相的狀態(tài)。HPLC流動(dòng)相為液體，固定相為固體色譜柱；GC流動(dòng)相為氣體，固定相為涂有固定液的色譜柱。由于物質(zhì)在固液相間的相互作用通常比在氣液相間的相互作用更強(qiáng)，且范圍更廣，因此HPLC通常具有更廣泛的分離能力，尤其適用于極性、分子量大、熱不穩(wěn)定化合物的分離。GC則更適合分離沸點(diǎn)較低、相對(duì)揮發(fā)度差異大的揮發(fā)性或半揮發(fā)性化合物。2.簡述進(jìn)行HPLC方法驗(yàn)證時(shí)，通常需要考察哪些項(xiàng)目，并簡述其目的。解析思路：方法驗(yàn)證的目的是證明HPLC方法適用于預(yù)定的分析目的，確保分析結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。通常需要考察的項(xiàng)目包括：精密度（重復(fù)性和中間精密度）、線性、范圍、準(zhǔn)確度（回收率）、檢測限（LOD）與定量限（LOQ）、耐用性。目的在于：精密度保證結(jié)果的重復(fù)性和再現(xiàn)性；線性保證在特定濃度范圍內(nèi)響應(yīng)與濃度成良好比例；范圍確認(rèn)方法適用于預(yù)期測定的濃度區(qū)間；準(zhǔn)確度反映測定結(jié)果與真實(shí)值的一致程度；LOD和LOQ確定方法的靈敏度；耐用性考察方法在微小變動(dòng)下（如不同人員、不同儀器、不同時(shí)間）仍能保持可靠性能的程度。3.簡述在HPLC分析中，選擇流動(dòng)相時(shí)需要考慮哪些主要因素。解析思路：流動(dòng)相的選擇對(duì)色譜分離效果至關(guān)重要。主要考慮因素包括：固定相的性質(zhì)（如類型、極性、鍵合相種類）是選擇流動(dòng)相的基礎(chǔ)；目標(biāo)分離物的性質(zhì)（如極性、酸堿性、分子大小、結(jié)構(gòu)）；分析方法要求（如分離度、分析時(shí)間、靈敏度）；色譜系統(tǒng)壓力限制；溶劑的純度（會(huì)影響峰形和系統(tǒng)穩(wěn)定性）。通常對(duì)于反相HPLC，會(huì)考慮流動(dòng)相的極性（水相比例），可能加入酸、堿或離子對(duì)試劑調(diào)節(jié)pH和離子強(qiáng)度；對(duì)于正相或其他模式，則需根據(jù)固定相和樣品性質(zhì)選擇合適的溶劑體系。四、論述題結(jié)合藥物分析的具體實(shí)例，論述選擇和優(yōu)化HPLC分析方法（包括流動(dòng)相、梯度程序等）時(shí)需要考慮的關(guān)鍵因素及其對(duì)分析結(jié)果的影響。解析思路：選擇和優(yōu)化HPLC分析方法是一個(gè)系統(tǒng)性的過程，涉及多個(gè)關(guān)鍵因素。1.樣品性質(zhì)：是選擇方法的基礎(chǔ)。例如，對(duì)于極性小、熱穩(wěn)定的化合物，常用反相C18柱，以水-甲醇或水-乙腈混合液為流動(dòng)相，可通過調(diào)整有機(jī)溶劑比例進(jìn)行分離。對(duì)于極性大、堿性化合物，可能需要酸性流動(dòng)相（如加入0.1%醋酸）防止降解并改善峰形。對(duì)于酸性化合物，可能需要堿性流動(dòng)相（如加入氨水）。2.分析目標(biāo)：決定了所需的分析時(shí)間和分離度。例如，含量測定要求準(zhǔn)確、快速，可能選用等度洗脫，優(yōu)化流動(dòng)相以獲得合適的保留時(shí)間和峰形。有關(guān)物質(zhì)檢查則需要高分離度，可能需要采用梯度洗脫，利用不同組分在洗脫液中的溶解度差異實(shí)現(xiàn)更好分離，但梯度可能導(dǎo)致分析時(shí)間延長和峰展寬。3.色譜柱選擇：不同的色譜柱（如不同長度、粒度、填料類型和尺寸）會(huì)影響分離效率和選擇性。通常從與樣品性質(zhì)匹配的柱子開始嘗試，逐步優(yōu)化。4.流動(dòng)相選擇與優(yōu)化：如前所述，流動(dòng)相的極性、pH、離子強(qiáng)度、添加劑（如離子對(duì)試劑、衍生化試劑）會(huì)顯著影響分離度、保留時(shí)間和選擇性。例如，在反相HPLC中，增加有機(jī)溶劑比例通常會(huì)使保留時(shí)間縮短，并可能改善峰形對(duì)稱性，但過高比例可能導(dǎo)致峰展寬。梯度洗脫的起始和結(jié)束溶劑、梯度斜率、等度時(shí)間的選擇對(duì)復(fù)雜樣品的分離至關(guān)重要。5.檢測器選擇：需與樣品的理化性質(zhì)匹配。紫外檢測器應(yīng)用廣泛，但需樣品有紫外吸收。蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）適用于無紫外吸收或吸收弱的樣品，但靈敏度相對(duì)較低。熒光檢測器適用于已衍生化或本身具熒光的樣品。6.系統(tǒng)適用性試驗(yàn)（SST）：方法確定后必須進(jìn)行SST，確保方法可靠。例如，檢查理論塔板數(shù)、拖尾因子、分離度是否滿足要求，確認(rèn)靈敏度（LOD、LOQ）是否足夠。實(shí)例：分析一個(gè)含有弱酸性活性成分、一個(gè)中性輔料和一個(gè)堿性內(nèi)標(biāo)的中成藥片劑?？赡苓x擇反相C18柱，以水-甲醇（或水-乙腈）為流動(dòng)相，進(jìn)行方法開發(fā)。初始可采用等度洗脫，觀察主峰保留時(shí)間和分離度。若分離度不足，可嘗試增加甲醇比例或