章免疫學(xué)技術(shù)概論

一、名詞解釋

免疫學(xué)技術(shù)：是利用免疫反應(yīng)的特異性原理，建立的各種檢測與分析技術(shù)，以及

建立這些技術(shù)的各種制備主意。

免疫血清學(xué)技術(shù)/血清學(xué)反應(yīng)：抗原與相應(yīng)抗體在體內(nèi)和體外均能發(fā)生特異性結(jié)

合反應(yīng)，因抗體主要來自血清，因此在體外舉行的抗原抗體反應(yīng)稱為血清學(xué)反應(yīng)

或免疫血清學(xué)技術(shù)。

抗體親和力(affinity)：指抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)與相應(yīng)的抗原決定簇之間的結(jié)合

強(qiáng)度，它是抗原抗體間固有的結(jié)合力。

抗體親合力(avidity)：指一個(gè)抗體分子與阿囹抗原表位之間結(jié)合的強(qiáng)度，與抗

體結(jié)合價(jià)直接相關(guān)。親合力表現(xiàn)為多價(jià)優(yōu)勢。

帶現(xiàn)象：因反應(yīng)體系中抗原過多或抗體過多而浮上抑制可見反應(yīng)的現(xiàn)象.

格子學(xué)說：大多數(shù)抗體為二價(jià)，大多數(shù)抗原為多價(jià)，惟獨(dú)兩者比例適當(dāng)初，才干

形成彼此銜接的大復(fù)合物，而抗原過多或抗體過多時(shí)，形成的單個(gè)復(fù)合物不能被

肉眼所見。

細(xì)胞免疫技術(shù)：與細(xì)胞免疫有關(guān)的各種檢測技術(shù)，包括對免疫細(xì)胞，細(xì)胞因子的

檢測及功能分析。

免疫制備技術(shù)：制備與免疫檢測有關(guān)制劑的技術(shù)，包括抗原制備、抗體純化、抗

體標(biāo)記等技術(shù)。

反應(yīng)的特異性：以“金標(biāo)準(zhǔn)”為參照，用該實(shí)驗(yàn)檢查非患畜時(shí)浮上陰性的可能性。

反應(yīng)的敏感性：以“金標(biāo)準(zhǔn)”為參照，指用該實(shí)驗(yàn)檢查患畜時(shí)浮上陽性的可能性。

二、簡答題

L免疫學(xué)技術(shù)包括哪三大技術(shù)？舉例說明各有哪些類型？

(1)免疫血清學(xué)技術(shù)：

①凝集實(shí)驗(yàn)：直接凝集、間接凝集

②沉淀實(shí)驗(yàn)：絮狀沉淀、瓊擴(kuò)

③補(bǔ)體參加的實(shí)驗(yàn)：補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)

④中和實(shí)驗(yàn)：病毒中和實(shí)驗(yàn)

朽木易折，金石可鏤。

⑤標(biāo)記抗體技術(shù)：免疫熒光抗體技術(shù)、免疫酶標(biāo)記技術(shù)

⑥血清學(xué)新技術(shù)：免疫傳感器技術(shù)、免疫核酸探針技術(shù)

（2）細(xì)胞免疫技術(shù)：

①淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類：E玫瑰花環(huán)實(shí)驗(yàn)

②淋巴細(xì)胞功能測定：淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)

③免疫細(xì)胞因子檢測：白細(xì)胞介素測定、干擾素測定

④體內(nèi)細(xì)胞免疫實(shí)驗(yàn)：皮膚實(shí)驗(yàn)

（細(xì)胞免疫技術(shù)的特點(diǎn)：主意復(fù)雜、依賴于先進(jìn)的檢測儀器、逐漸與血清學(xué)技術(shù)

融為一體）

（3）免疫制備技術(shù)：

①抗原制備：徹低抗原、人工抗原的制備

②抗體制備：單、多克隆抗體的制備

③淋巴細(xì)胞制備：淋巴細(xì)胞分離技術(shù)

④抗體和細(xì)胞因子純化：層析技術(shù)

⑤抗體標(biāo)記或致敏：酶標(biāo)記、熒光素標(biāo)記抗體技術(shù)

2.免疫血清學(xué)反應(yīng)的原理、特點(diǎn)、影響因素、優(yōu)勢有哪些？

（一,）基本原理

（1）抗原抗體的結(jié)合力：靜電引力、范德華力、氫鍵、疏水作用

（2）抗原抗體的親和力與親合力

（3）親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體

（二）反應(yīng)特點(diǎn)

（1）特異性與交錯(cuò)性：

抗原與抗體結(jié)合具有高度特異性，若兩種天然抗原之間含有部分相同抗原表位時(shí)

則發(fā)生交錯(cuò)反應(yīng)

（2）可逆性:

抗原與抗體的結(jié)合僅是分子表面的結(jié)合，為可逆反應(yīng)

（3）最適比例性：

抗原抗體結(jié)合浮上可見反應(yīng)具有一定的量比關(guān)系，惟獨(dú)當(dāng)兩者分子比例合適時(shí),

才發(fā)生最強(qiáng)的結(jié)合反應(yīng)（帶現(xiàn)象，格子學(xué)說）

（4）反應(yīng)的階段性：

特異性結(jié)合階段一一反應(yīng)快，無可見反應(yīng)

可見階段一一反應(yīng)慢，表現(xiàn)為凝集，沉淀，補(bǔ)體結(jié)合等反應(yīng)，受多種因素影響

（三）影響因素

（1）抗原抗體本身的性質(zhì)，活性和濃度

（2）環(huán)境條件

電解質(zhì)：普通用生理鹽水做為稀釋液

酸堿度：最適pH為pH6-8

溫度：37℃是抗原抗體反應(yīng)最適溫度

（四）優(yōu)勢

（1）檢樣量少，預(yù)處理容易

（2）檢測主意多，擇優(yōu)選用

（3）主意容易迅速，易推廣

（4）特異性強(qiáng)，敏感性高

（5）可用于抗原抗體的定性、定量、定位

3.免疫學(xué)主意的評估與挑選？

（1）評估指標(biāo)：以“金標(biāo)準(zhǔn)”為參照

特異性：指用該實(shí)驗(yàn)檢查非患畜時(shí)浮上陰性結(jié)果的可能性

特異性二真陰性/（真陰性+假陽性）XI00%

敏感性：指用該實(shí)驗(yàn)檢查某病畜時(shí)浮上陽性結(jié)果的可能性

敏感性二真陽性/（真陽性+假陰性）XI00%

（2）主意的挑選：按照檢測的不同要求挑選敏感、特異、迅速、簡便、經(jīng)濟(jì)、

實(shí)用的主意

4.免疫技術(shù)可應(yīng)用于哪些領(lǐng)域？發(fā)展趨勢如何？

（1）應(yīng)用領(lǐng)域：

動(dòng)物疫病診斷、微生物鑒定、生物制品研究（疫苗）、疫病致病機(jī)理研究等

朽木易折，金