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2025年上學(xué)期高三生物單克隆抗體制備試題一、選擇題(每題6分,共60分)下列有關(guān)制備單克隆抗體的敘述中,錯(cuò)誤的是()A.采用的細(xì)胞工程技術(shù)包括細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合B.兩次篩選的目的分別是篩選出雜交瘤細(xì)胞和篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞C.要先用胃蛋白酶處理得到單個(gè)細(xì)胞,然后用誘導(dǎo)劑處理得到雜交瘤細(xì)胞D.運(yùn)用的生物學(xué)原理包括細(xì)胞分裂和細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性免疫熒光技術(shù)是利用抗原和抗體特異性結(jié)合與熒光標(biāo)記技術(shù)相結(jié)合來(lái)研究特異性蛋白抗原在細(xì)胞內(nèi)分布的方法。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.該技術(shù)可用于觀察特定蛋白質(zhì)的分布和動(dòng)態(tài)變化B.該技術(shù)中涉及的抗體可由單克隆抗體技術(shù)制備獲得C.該技術(shù)中抗體的作用與ADC藥物中抗體的作用一致D.該技術(shù)快速、靈敏,但分辨能力有限,特異性不強(qiáng)下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述,正確的是()A.培養(yǎng)人的漿細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體B.將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞需用胃蛋白酶處理C.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理不同D.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞制備單克隆抗體所采用的細(xì)胞工程技術(shù)包括()①細(xì)胞培養(yǎng)②細(xì)胞融合③胚胎移植④細(xì)胞核移植A.①②B.①③C.②③D.③④某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí),列表比較了動(dòng)植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容,下列說(shuō)法不正確的是()比較項(xiàng)目植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)融合、單克隆抗體的制備特殊處理機(jī)械法去除細(xì)胞壁胰蛋白酶處理,制成細(xì)胞懸液融合方法物理方法、化學(xué)方法物理方法、化學(xué)方法、生物方法典型應(yīng)用人工種子、雜種植株單克隆抗體的制備培養(yǎng)液區(qū)別生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素影響愈傷組織的生長(zhǎng)和分化動(dòng)物血清不可缺少A.1處錯(cuò)誤B.2處錯(cuò)誤C.3處錯(cuò)誤D.4處錯(cuò)誤下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述,正確的是()A.生物導(dǎo)彈是用癌細(xì)胞的單克隆抗體殺死癌細(xì)胞B.乳腺細(xì)胞比乳腺癌細(xì)胞更容易進(jìn)行離體培養(yǎng)C.細(xì)胞核移植主要在同種動(dòng)物、同種組織的細(xì)胞之間進(jìn)行D.滅活病毒可使細(xì)胞相互凝聚并讓細(xì)胞膜上的分子重新排布如圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖(假設(shè)a、b分別為不同類型細(xì)胞),下列說(shuō)法不正確的是()A.若a、b分別對(duì)應(yīng)骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞,則d能產(chǎn)生單克隆抗體是b的遺傳物質(zhì)選擇性表達(dá)的結(jié)果B.若d形成有性雜交后代,則a和b融合形成d的過(guò)程叫受精作用C.若d形成無(wú)性雜種植株,則采用了細(xì)胞工程中的核移植技術(shù)D.若d形成無(wú)性雜種植株,由于雜種細(xì)胞具有雙親葉綠體,則可能培育出比有性雜交品種光合作用性能更好的植株腫瘤壞死因子α(TNF-α)是一種細(xì)胞因子,高濃度時(shí)可以引發(fā)疾病。研究者利用細(xì)胞工程技術(shù)制備了TNF-α的單克隆抗體,用于治療由TNF-α引發(fā)的疾病。下列敘述正確的是()A.從免疫小鼠的血液中可直接獲得骨髓瘤細(xì)胞B.細(xì)胞融合后產(chǎn)生的細(xì)胞群含未融合細(xì)胞、同種核及異種核融合細(xì)胞C.需用特定培養(yǎng)基篩選得到大量的雜交瘤細(xì)胞D.需在體外或小鼠腹腔進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)將細(xì)胞毒素類藥物與單克隆抗體結(jié)合形成抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC),可實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.體外培養(yǎng)單個(gè)B淋巴細(xì)胞可持續(xù)大量獲得單克隆抗體B.ADC通過(guò)胞吞作用進(jìn)入腫瘤細(xì)胞內(nèi)C.ADC在溶酶體中被裂解后釋放出藥物D.選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞利用了單克隆抗體特異性強(qiáng)的特點(diǎn)CTLA-4和PD-1均是T細(xì)胞表面的受體分子,與特定分子結(jié)合后能抑制T細(xì)胞活性甚至使T細(xì)胞凋亡,從而使機(jī)體腫瘤細(xì)胞免受T細(xì)胞攻擊。抗CTLA-4或抗PD-1的單克隆抗體有較好的抗腫瘤效果。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.雙雜交瘤細(xì)胞可同時(shí)分泌抗CTLA-4和PD-1的雙特異性抗體B.雜交瘤細(xì)胞的篩選需經(jīng)特定選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)和抗體檢測(cè)C.雙特異性抗體與T細(xì)胞結(jié)合后可解除其對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制D.雙特異性抗體療效優(yōu)于單一抗體的原因是降低了藥物使用劑量二、非選擇題(共40分)(12分)非洲豬瘟病毒是一種雙鏈DNA病毒,基因A編碼該病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白A,其在病毒侵入宿主細(xì)胞和誘導(dǎo)機(jī)體免疫應(yīng)答過(guò)程中發(fā)揮重要作用?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)制備特定抗原時(shí),需獲取基因A并構(gòu)建重組質(zhì)粒。重組質(zhì)粒的必備元件包括目的基因、限制酶切割位點(diǎn)、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子和________等;為確定基因A已連接到質(zhì)粒中且插入方向正確,應(yīng)選用圖中的一對(duì)引物________對(duì)待測(cè)質(zhì)粒進(jìn)行PCR擴(kuò)增,預(yù)期擴(kuò)增產(chǎn)物的片段大小為_(kāi)_______bp。(2)將DNA測(cè)序正確的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌構(gòu)建重組菌,誘導(dǎo)蛋白A合成后,收集發(fā)酵液離心發(fā)現(xiàn)上清液中無(wú)蛋白A,可能的原因是________(答出兩點(diǎn)即可)。(3)用蛋白A對(duì)小鼠進(jìn)行免疫后,將免疫小鼠B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,誘導(dǎo)融合的常用方法有________(答出一種即可)。選擇培養(yǎng)時(shí),對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和________,多次篩選獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。(14分)為降低乳腺癌化療藥物的副作用,科研人員嘗試在單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)上,構(gòu)建抗體藥物偶聯(lián)物(ADC)來(lái)對(duì)乳腺癌患者進(jìn)行治療,過(guò)程如圖所示。(1)本實(shí)驗(yàn)中,小鼠注射的特定抗原應(yīng)取自人的乳腺癌細(xì)胞,該處理的目的是________。(2)已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞在體外融合時(shí)需要誘導(dǎo),與誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合方法不同的是,圖中還可以用________誘導(dǎo)融合。(3)抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞可在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng),體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的氣體環(huán)境是________,其中CO?的主要作用是________。(4)單克隆抗體的制備過(guò)程中需要進(jìn)行兩次篩選:步驟②用________進(jìn)行第一次篩選,篩選出來(lái)的細(xì)胞具有________的特點(diǎn);第二次篩選的方法是________,得到產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。(5)ADC在患者體內(nèi)的作用機(jī)制如圖所示:①ADC能降低乳腺癌治療藥物的副作用,是因?yàn)開(kāi)_______;②ADC進(jìn)入乳腺癌細(xì)胞后,細(xì)胞中的溶酶體可將其水解,釋放出的藥物最終作用于________,可導(dǎo)致癌細(xì)胞凋亡。(14分)研究表明,骨質(zhì)疏松癥可由骨硬化蛋白引起。目前科學(xué)家通過(guò)細(xì)胞工程技術(shù)制備出抗骨硬化蛋白單克隆抗體,該抗體通過(guò)與骨硬化蛋白特異性結(jié)合而間接促進(jìn)骨形成、抑制骨吸收,在骨質(zhì)疏松的治療中有重大意義。如圖為制備抗骨硬化蛋白單克隆抗體的部分流程圖,據(jù)圖回答問(wèn)題:(1)圖中抗原X是指________,通常從小鼠的________中采集B淋巴細(xì)胞。(2)在制備抗骨硬化蛋白單克隆抗體的過(guò)程中,要用選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞。將篩選得到的雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)到96孔培養(yǎng)板中培養(yǎng),吸取有克隆生長(zhǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)孔中的________(填“上清液”或“沉淀細(xì)胞”),應(yīng)用________技術(shù)進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)。抗體陽(yáng)性檢驗(yàn)的目的是篩選出________的雜交瘤細(xì)胞。(3)將單克隆抗體注入體內(nèi)后可以追蹤抗原X并與之結(jié)合,而絕不攻擊正常細(xì)胞,這充分體現(xiàn)了單克隆抗體________的特點(diǎn)。(4)雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原的常用方法,其原理如圖
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