ICS65.120

CCSB46DB50

重慶市地方標(biāo)準(zhǔn)

DB50/T1147—2021

豬用液態(tài)發(fā)酵飼料生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

2021—11—01發(fā)布2022—02—01實(shí)施

重慶市市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

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前??言

本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。

本文件由重慶市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委員會(huì)提出并歸口。

本文件起草單位：重慶市畜牧科學(xué)院、生物飼料開發(fā)國(guó)家工程研究中心。

本文件主要起草人員：劉志云、鐘曉霞、官小鳳、周曉容、楊飛云、姚焰礎(chǔ)、黃健、黃金秀、王琪、

劉世杰、鄧雪娟。

I

DB50/T1147—2021

豬用液態(tài)發(fā)酵飼料生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了豬用液態(tài)發(fā)酵飼料生產(chǎn)中涉及的原料選擇、生產(chǎn)環(huán)境、主要設(shè)備、工藝流程、存儲(chǔ)和

使用等要求。

本文件適用于豬用液態(tài)發(fā)酵飼料的生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB3095環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

GB/T10468水果和蔬菜產(chǎn)品pH值的測(cè)定方法

GB13078飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

NY/T1444微生物飼料添加劑技術(shù)通則

NY/T5027無公害食品畜禽飲用水水質(zhì)

《飼料原料目錄》（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第459號(hào)）

《飼料添加劑品種目錄（2013）》（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第459號(hào)）

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

液態(tài)發(fā)酵飼料fermentedliquidfeed

使用《飼料添加劑品種目錄（2013）》允許使用的微生物菌種，通過發(fā)酵工程技術(shù)對(duì)符合《飼料原

料目錄》的飼料原料進(jìn)行發(fā)酵所得到的總水分不低于70%的飼料。

4原料選擇

4.1飼料原料

發(fā)酵所用的飼料原料應(yīng)符合《飼料原料目錄》和GB13078的規(guī)定。主要包括玉米、大麥、豆粕、麥

麩等為代表的大宗飼料原料；以土豆皮、豆渣、柑橘渣、酒糟等為代表的地源性飼料原料。

4.2添加劑

宜選用抑制雜菌增殖，促進(jìn)發(fā)酵菌快速生長(zhǎng)的添加劑。

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4.3發(fā)酵菌種

應(yīng)符合《飼料添加劑品種目錄（2013）》和NY/T1444的規(guī)定。發(fā)酵菌種宜選用乳酸菌，其有效活

菌數(shù)不低于108CFU/g。

5生產(chǎn)環(huán)境

5.1空氣

發(fā)酵車間的空氣應(yīng)符合GB3095中4.2的規(guī)定。

5.2水

應(yīng)符合NY/T5027的規(guī)定。

5.3車間

包含但不限于：

1）相對(duì)隔離的發(fā)酵菌種培養(yǎng)室；

2）飼料原料庫(kù)；

3）液態(tài)發(fā)酵設(shè)備間；

4）檢驗(yàn)室

6主要設(shè)備

包含但不限于：

1）粉碎設(shè)備；

2）攪拌混合設(shè)備；

3）液體發(fā)酵設(shè)備；

4）消毒或滅菌設(shè)備；

5）菌種培養(yǎng)設(shè)備

7工藝流程

7.1操作流程

見圖1。

菌液制備接種

原料預(yù)處理配料發(fā)酵發(fā)酵終點(diǎn)判斷存儲(chǔ)和使用

水分調(diào)節(jié)

圖1工藝流程圖

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7.2飼料原料預(yù)處理

玉米、大麥、豆粕、麥麩等大宗飼料原料宜進(jìn)行400μm~1500μm的粉碎。

土豆皮、豆渣、柑橘渣、酒糟等地源性飼料原料根據(jù)原料特性進(jìn)行篩分、粉碎、酶解或加熱等預(yù)處

理，使之處于易發(fā)酵狀態(tài)。

7.3配料

按照飼料配方需求，先將預(yù)處理后的飼料原料投入發(fā)酵容器中，再投入添加劑混合均勻。

7.4發(fā)酵

7.4.1發(fā)酵菌液制備

商用干粉狀發(fā)酵劑宜活化后使用；非商用發(fā)酵劑宜活化、擴(kuò)繁后使用。

7.4.2接種

將制備好的發(fā)酵菌液或菌粉與發(fā)酵原料混合均勻，置于發(fā)酵容器中密封，混合后活菌數(shù)宜≥

105CFU/mL。

7.4.3水分調(diào)節(jié)

根據(jù)原料特性調(diào)節(jié)加水量，混合后總含水量宜高于70%。

7.4.4發(fā)酵溫度

一般物料溫度控制在15℃～40℃。

7.4.5發(fā)酵時(shí)間

發(fā)酵時(shí)間一般為24h～72h。

7.4.6發(fā)酵方式

兼性厭氧或厭氧液態(tài)發(fā)酵。

7.4.7發(fā)酵終點(diǎn)判斷

發(fā)酵終點(diǎn)的判定宜同時(shí)滿足下列條件：

1）外觀色澤一致；

2）發(fā)酵酸香味，無異味；

3）pH在3.7～4.5之間，檢測(cè)方法按照GB/T10468規(guī)定執(zhí)行；

4）乳酸菌活菌數(shù)≥1×107CFU/mL，檢測(cè)方法按照附錄A的規(guī)定執(zhí)行。

8存儲(chǔ)和使用

制備好的液態(tài)發(fā)酵飼料，密封存儲(chǔ)。使用前應(yīng)注意調(diào)制，確保營(yíng)養(yǎng)均衡，然后進(jìn)入飼喂端。

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附錄A

（規(guī)范性）

乳酸菌計(jì)數(shù)

A.1設(shè)備和材料

除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：

1)恒溫培養(yǎng)箱：36℃±1℃；

2)冰箱：2℃~5℃；

3)均質(zhì)器及無菌均質(zhì)袋、均質(zhì)杯或滅菌乳缽；

4)天平：感量0.01g；

5)無菌試管：18mm×180mm、15mm×100mm；

6)無菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸頭；

7)無菌錐形瓶：500mL、250mL。

A.2試劑

所用試劑包含但不限于：

1)氯化鈉：分析純；

2)磷酸氫二鉀（七水）：分析純；

3)醋酸鈉（三水）：分析純；

4)檸檬酸三銨：分析純；

5)硫酸鎂（七水）：分析純；

6)硫酸錳（四水：分析純；

7)瓊脂粉；

8)牛肉粉；

9)酵母粉；

10)葡萄糖；

11)吐溫80。

A.3溶液及培養(yǎng)基的制備

A.3.1生理鹽水的制備

稱取氯化鈉9g加入到1000mL蒸餾水中，加熱溶解，分裝后121℃高壓滅菌15min~20min。

A.3.2MRS培養(yǎng)基的制備

A.3.2.1稱取蛋白胨10.0g、牛肉粉5.0g、酵母粉4.0g、葡萄糖20.0g、吐溫801.0mL、磷酸氫二鉀2.0g、

醋酸鈉5.0g、檸檬酸三銨2.0g、硫酸鎂0.2g、硫酸錳0.05g、瓊脂粉15.0g。

A.3.2.2將上述成分加入到1000mL蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)節(jié)pH至6.2±0.2，分裝后121℃高壓滅

菌15min~20min。

A.4操作步驟

4

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A.4.1樣品勻液的制備

液態(tài)發(fā)酵飼料樣品應(yīng)先將其充分混勻后，以無菌吸管吸取樣品25mL放入裝有225mL生理鹽水的

無菌錐形瓶（瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠）中，充分振搖，制成1﹕10的樣品勻液。

A.4.2稀釋

A.4.2.1用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1﹕10樣品勻液1mL，沿管壁緩慢注于裝有9mL生理鹽水

的無菌試管中（注意吸管尖端不要觸及稀釋液），振搖試管或換用1支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻，

制成1﹕100的樣品勻液。

A.4.2.2另取1mL無菌吸管或微量移液器吸頭，按上述操作順序，做10倍遞增樣品勻液，每遞增稀釋

一次，即換用1次1mL滅菌吸管或吸頭。

A.4.3乳酸菌計(jì)數(shù)

根據(jù)待檢樣品活菌總數(shù)的估計(jì)，選擇2個(gè)~3個(gè)連續(xù)的適宜稀釋度，每個(gè)稀釋度吸取1mL樣品勻液

于滅菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。稀釋液移入平皿后，將冷卻至48℃的MRS瓊脂培養(yǎng)基傾注入

平皿15mL，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使混合均勻。36℃±1℃厭氧培養(yǎng)72h±2h。從樣品稀釋到平板傾注要求在15min

內(nèi)完成。

A.4.4菌落計(jì)數(shù)

A.4.4.1菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位（colony-formingunits，CFU）表示。每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩

個(gè)平板的平均數(shù)?？捎萌庋塾^察，必要時(shí)用放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器，記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。

A.4.4.2選取菌落數(shù)在30CFU~300CFU之間、無蔓延菌落生長(zhǎng)的平板計(jì)數(shù)菌落總數(shù)。低于30CFU的平

板記錄具體菌落數(shù)，大于300CFU的可記錄為多不可計(jì)。每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。

A.4.4.3其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋

度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以

2，代表一個(gè)平板菌落數(shù)。

A.4.4.4當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長(zhǎng)時(shí)，則將每條單鏈作為一個(gè)菌落計(jì)數(shù)。

A.5結(jié)果表述

A.5.1若只有一個(gè)稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值，再將平均

值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每克或每毫升中菌落總數(shù)結(jié)果。

A.5.2若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí)，按下列公式計(jì)算：

式中：

——樣品中菌落數(shù)；

——平板（含適宜范圍菌落數(shù)的平板）菌落數(shù)之和；

——