2025BS指南：用于治療患者和收集細(xì)胞治療產(chǎn)品的單采術(shù)精準(zhǔn)采集，安全治療目錄第一章第二章第三章指南概述單采術(shù)技術(shù)基礎(chǔ)細(xì)胞產(chǎn)品收集規(guī)范目錄第四章第五章第六章患者治療應(yīng)用安全與質(zhì)量控制實施與維護指南概述1.目的與適用范圍本指南旨在為醫(yī)療機構(gòu)提供標(biāo)準(zhǔn)化的單采術(shù)操作流程，確保治療性單采和細(xì)胞治療產(chǎn)品采集的安全性和有效性，減少操作風(fēng)險。規(guī)范單采術(shù)操作詳細(xì)列出適用于單采術(shù)的疾病范圍，包括血液系統(tǒng)疾?。ㄈ绨籽?、淋巴瘤）、自身免疫性疾?。ㄈ缰匕Y肌無力）以及細(xì)胞治療產(chǎn)品的采集需求（如CAR-T細(xì)胞療法）。明確適應(yīng)癥強調(diào)多學(xué)科團隊（如血液科、輸血科、護理團隊）在單采術(shù)中的協(xié)作，確保從患者評估到術(shù)后管理的全程規(guī)范化?？鐚W(xué)科協(xié)作患者安全優(yōu)先要求嚴(yán)格評估患者適應(yīng)癥與禁忌癥（如嚴(yán)重心血管疾病、低血小板血癥），并優(yōu)化抗凝劑使用方案以減少不良反應(yīng)（如枸櫞酸鹽毒性）。更新設(shè)備參數(shù)（如離心速度、全血處理量）和采集目標(biāo)（如CD34+細(xì)胞最低閾值），確保細(xì)胞產(chǎn)品的質(zhì)量和一致性。新增環(huán)境消毒和操作者防護要求，包括使用無菌耗材、定期監(jiān)測細(xì)菌污染，以降低感染風(fēng)險。引入電子化記錄系統(tǒng)，強制要求完整記錄采集過程（如血流速、不良反應(yīng)事件），便于質(zhì)量審核和后續(xù)治療參考。技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化感染控制強化數(shù)據(jù)記錄與追溯核心原則與更新治療性單采患者針對需快速清除病理成分（如異常免疫球蛋白、惡性細(xì)胞）的急性或慢性病患者，尤其適用于血漿置換或紅細(xì)胞去除術(shù)的緊急情況。細(xì)胞治療供體健康供體或患者自體細(xì)胞的采集（如造血干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞），需符合體格檢查、實驗室篩查（如HIV/HBV檢測）等準(zhǔn)入標(biāo)準(zhǔn)。特殊人群考量兒童或老年患者需調(diào)整采集參數(shù)（如血流速、循環(huán)量），并加強術(shù)中監(jiān)護（如血壓、血氧監(jiān)測）以應(yīng)對生理差異。適用人群與場景單采術(shù)技術(shù)基礎(chǔ)2.分離技術(shù)原理單采術(shù)基于血液成分密度差異，通過離心力將全血分離為血漿、紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板等不同組分，實現(xiàn)特定成分的靶向采集或去除。體外循環(huán)安全系統(tǒng)配備壓力傳感器、氣泡檢測器和容量平衡裝置，確保體外循環(huán)血量不超過總血容量的15%（成人通常維持200-300mL）?？鼓齽┻x擇常用ACD-A（枸櫞酸葡萄糖）抗凝，鈣離子螯合抑制凝血，需同步監(jiān)測離子鈣水平預(yù)防低鈣血癥，肝素僅用于特定禁忌情況。自動化設(shè)備核心現(xiàn)代單采設(shè)備采用計算機控制離心系統(tǒng)、光學(xué)檢測模塊和閉環(huán)抗凝管理，如TerumoBCTSpectraOptia可編程實現(xiàn)紅細(xì)胞/血漿/干細(xì)胞的高精度分離。原理與設(shè)備簡介包括患者血管通路評估（優(yōu)先選擇16G以上外周靜脈或中心導(dǎo)管）、血常規(guī)/凝血功能檢測、簽署知情同意書及預(yù)防性補鈣方案制定。預(yù)處理評估輸入患者身高體重計算TBV（總血容量），設(shè)定目標(biāo)紅細(xì)胞壓積（如鐮狀細(xì)胞病維持<30%）、置換液類型（洗滌紅細(xì)胞/血漿代用品）及液體平衡參數(shù)（±10%以內(nèi)）。參數(shù)設(shè)置階段每30分鐘監(jiān)測靜脈壓、血流速（通常50-80mL/min）、ACD比率（1:12至1:16）及患者生命體征，出現(xiàn)枸櫞酸反應(yīng)需立即調(diào)整輸鈣速度。動態(tài)監(jiān)測過程穿刺點壓迫止血20分鐘，監(jiān)測血紅蛋白48小時，記錄單采效率（紅細(xì)胞去除率≥85%為理想）及不良事件（如低血壓/溶血）。術(shù)后管理要點操作流程步驟包括鐮狀細(xì)胞危象（HbS%降至<30%）、真性紅細(xì)胞增多癥（Hct>45%有癥狀）、血栓性微血管病（TTP血漿置換）及高白細(xì)胞血癥（WBC>100×10?/L）。治療性適應(yīng)癥造血干細(xì)胞采集（CD34+目標(biāo)劑量≥2×10?/kg）、CAR-T細(xì)胞制備（需≥1×10?淋巴細(xì)胞）、治療性血小板去除（血小板>1000×10?/L伴出血）。采集性適應(yīng)癥活動性出血（INR>2.0）、血流動力學(xué)不穩(wěn)定（MAP<65mmHg）、嚴(yán)重低鈣血癥（iCa2?<0.8mmol/L）及對抗凝劑過敏史。絕對禁忌癥妊娠（需胎兒監(jiān)測）、嚴(yán)重貧血（Hb<70g/L需預(yù)處理輸血）、心律失常（避免枸橄酸誘發(fā)）及血管通路困難（需超聲引導(dǎo)置管）。相對禁忌癥適應(yīng)癥與禁忌癥細(xì)胞產(chǎn)品收集規(guī)范3.采集目標(biāo)細(xì)胞類型造血干細(xì)胞（HSC）：主要用于造血系統(tǒng)重建，需通過CD34+細(xì)胞計數(shù)評估采集量，目標(biāo)劑量通常為2-5×10?CD34+細(xì)胞/kg受體體重，采集前需進行動員方案優(yōu)化（如G-CSF聯(lián)合普樂沙福）。淋巴細(xì)胞亞群（如CAR-T細(xì)胞）：重點采集CD3+T細(xì)胞，需通過流式細(xì)胞術(shù)確認(rèn)純度（>90%），同時避免粒細(xì)胞污染，采集體積控制在10-15L全血處理量，采用白細(xì)胞分離術(shù)富集靶細(xì)胞。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）：多從骨髓或脂肪組織中獲取，要求每批次采集≥1×10?有核細(xì)胞，并通過表面標(biāo)志物（CD73+/CD90+/CD105+）鑒定，采集時需嚴(yán)格控制供體年齡（<50歲）和組織來源一致性。01采用臺盼藍拒染法或流式AnnexinV檢測，要求活細(xì)胞比例≥85%，對于冷凍產(chǎn)品復(fù)蘇后活性需≥70%，并記錄復(fù)蘇后24小時內(nèi)的增殖能力（CFUassay驗證）。細(xì)胞活性檢測02嚴(yán)格執(zhí)行無菌檢測（需氧/厭氧培養(yǎng)14天）、內(nèi)毒素檢測（<5EU/kg）和支原體PCR，對于異體產(chǎn)品還需進行HBV/HCV/HIV/HTLV核酸擴增檢測（NAT）。微生物安全性03通過多參數(shù)流式分析關(guān)鍵表面標(biāo)志物，如HSC要求CD34+≥70%，CAR-T產(chǎn)品需確認(rèn)CD3/CD28共刺激分子表達，同時排除CD19+B細(xì)胞殘留（<1%）。表型特征驗證04包括體外增殖試驗（CFU-GM≥50/10?細(xì)胞）、細(xì)胞因子分泌譜分析（如IFN-γ釋放試驗）及體內(nèi)動物模型驗證治療效應(yīng)，需建立批次間的釋放標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD<15%）。功能效力評估質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)儲存與運輸要求采用程序降溫儀（1℃/min）配合DMSO凍存液（終濃度5-10%），儲存于氣相液氮（-150℃以下）或機械冰箱（-80℃±5℃），要求溫度記錄系統(tǒng)具備實時報警功能，偏差超過±10℃需啟動應(yīng)急轉(zhuǎn)移。低溫保存規(guī)范干冰運輸需維持<-60℃（驗證72小時穩(wěn)定性），冷鏈運輸需使用溫度記錄儀（數(shù)據(jù)不可篡改），對于跨國運輸還需符合IATA602包裝標(biāo)準(zhǔn)及海關(guān)生物樣本申報規(guī)范。運輸條件控制實施雙人雙鎖管控，電子化記錄存取信息（包括位置編號、存取時間、操作人員），定期進行庫存盤點與液氮補充，建立樣本銷毀審批流程（需質(zhì)量部門簽字確認(rèn)）。庫存管理系統(tǒng)患者治療應(yīng)用4.需進行包括血常規(guī)、凝血功能、肝腎功能及傳染病篩查在內(nèi)的全套實驗室檢查，重點評估患者心血管狀態(tài)（如通過心電圖和超聲心動圖）以排除禁忌癥。對于老年患者或合并基礎(chǔ)疾病者，需額外進行營養(yǎng)狀態(tài)和免疫功能評估。全面臨床評估根據(jù)治療目的（如紅細(xì)胞置換、血小板清除等）選擇特定單采程序參數(shù)，校準(zhǔn)血細(xì)胞分離機并驗證抗凝劑配比。需準(zhǔn)備應(yīng)急預(yù)案，包括低鈣血癥處理方案和過敏反應(yīng)搶救流程，同時確保血管通路建立（中心靜脈導(dǎo)管或外周靜脈評估）。設(shè)備與方案確認(rèn)治療前評估準(zhǔn)備過程中管理策略持續(xù)監(jiān)測血壓、心率和血氧飽和度，特別關(guān)注體外循環(huán)導(dǎo)致的血容量變化。對于血漿置換患者，需動態(tài)調(diào)整置換液速度和成分（如白蛋白與新鮮冰凍血漿比例），預(yù)防低血壓或凝血異常。血流動力學(xué)監(jiān)測采用個體化抗凝方案，常規(guī)使用ACD-A抗凝劑時需同步補鈣（口服或靜脈），對于高出血風(fēng)險患者可選用肝素抗凝。每30分鐘檢測一次ACT（活化凝血時間），調(diào)整抗凝劑與全血比例（通常1:12至1:16）。抗凝管理實驗室指標(biāo)追蹤治療后24小時內(nèi)檢測靶標(biāo)成分清除率（如病理性IgG降低≥60%），每周隨訪血紅蛋白、血小板及電解質(zhì)水平。對于惡性血液病患者，需通過流式細(xì)胞術(shù)監(jiān)測循環(huán)腫瘤細(xì)胞殘留情況。長期預(yù)后評估建立3-6個月隨訪計劃，通過功能量表（如Karnofsky評分）和生活質(zhì)量問卷評價臨床獲益。對于自身免疫性疾病患者，需定期檢測相關(guān)自身抗體滴度及器官功能（如肌酐清除率或肺彌散功能），評估疾病活動度變化。療效監(jiān)測與隨訪安全與質(zhì)量控制5.無菌操作流程單采術(shù)全過程需嚴(yán)格執(zhí)行無菌技術(shù)規(guī)范，包括穿刺部位消毒（使用2%氯己定或70%異丙醇）、設(shè)備管路預(yù)充無菌生理鹽水，以及操作人員穿戴無菌手套和口罩。對于免疫功能低下患者，需額外增加環(huán)境消毒頻次（如紫外線空氣凈化）。病原體篩查所有細(xì)胞治療產(chǎn)品供體必須完成多重病原體檢測（如HIV-1/2、HBV、HCV、HTLV-1/2、梅毒螺旋體及EBV），采用核酸擴增技術(shù)（NAT）提高窗口期檢出率。采集后產(chǎn)品需在-196℃液氮中保存前再次復(fù)核病原體標(biāo)志物。感染風(fēng)險控制不良反應(yīng)處理低鈣血癥管理：枸櫞酸鹽抗凝劑可能導(dǎo)致離子鈣降低，引發(fā)手足抽搐或心律失常。需實時監(jiān)測患者血鈣水平（目標(biāo)>1.1mmol/L），靜脈備用10%葡萄糖酸鈣注射液，癥狀出現(xiàn)時按0.5-1mg/kg劑量緩慢推注。低血壓應(yīng)對：循環(huán)血量波動可能引發(fā)收縮壓下降>20mmHg。立即暫停采集，調(diào)整患者體位為Trendelenburg位（頭低腳高15°），快速輸注等滲晶體液（如0.9%NaCl）200-500mL，必要時使用血管活性藥物如去甲腎上腺素。過敏反應(yīng)預(yù)案：對羥乙基淀粉或設(shè)備材料過敏者可能出現(xiàn)蕁麻疹或支氣管痙攣。預(yù)處理需備妥腎上腺素（1:1000稀釋液0.3-0.5mg肌注）和糖皮質(zhì)激素（甲強龍40-80mg靜脈注射），建立氣道管理應(yīng)急小組。全流程追溯系統(tǒng)采用區(qū)塊鏈技術(shù)記錄單采術(shù)關(guān)鍵參數(shù)（如離心力設(shè)置、抗凝劑用量、采集體積偏差），確保從供體篩選到終產(chǎn)品釋放的數(shù)據(jù)鏈不可篡改。每份文檔需包含操作者電子簽名及獨立QA人員復(fù)核標(biāo)記。要點一要點二不良反應(yīng)報告表按MHRA（英國藥品和健康產(chǎn)品管理局）標(biāo)準(zhǔn)格式記錄事件細(xì)節(jié)，包括發(fā)生時間（精確至分鐘）、干預(yù)措施、轉(zhuǎn)歸及因果關(guān)系評估（采用WHO-UMC分級系統(tǒng)），72小時內(nèi)上傳至國家細(xì)胞治療不良事件數(shù)據(jù)庫。文檔記錄規(guī)范實施與維護6.人員培訓(xùn)要求所有參與單采術(shù)的醫(yī)護人員需完成血液成分分離技術(shù)、抗凝劑使用原理及不良反應(yīng)處理等理論課程，并通過模擬設(shè)備操作考核，確保熟練掌握細(xì)胞分離程序與緊急情況應(yīng)對措施。理論知識與操作技能培訓(xùn)需涵蓋嚴(yán)格的無菌技術(shù)規(guī)范、生物安全防護（如穿戴防護裝備、廢棄物處理）及傳染病篩查流程，以降低患者和操作者的交叉感染風(fēng)險。感染控制與無菌操作醫(yī)護人員應(yīng)接受溝通技巧培訓(xùn)，包括向患者解釋單采術(shù)流程、潛在副作用及術(shù)后護理要點，同時具備安撫焦慮情緒的能力，提升患者配合度?；颊邷贤ㄅc心理支持定期性能驗證單采設(shè)備需每月進行流量校準(zhǔn)、離心轉(zhuǎn)速測試及管路密閉性檢查，并記錄數(shù)據(jù)；每年由廠家或認(rèn)證工程師進行全面性能評估，確保符合BS指南的精度要求。預(yù)防性維護計劃制定每日開機自檢、每周濾器更換及季度傳感器校準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)化流程，使用原廠配件替換耗材，避免因部件老化導(dǎo)致細(xì)胞收集效率下降或溶血風(fēng)險。環(huán)境監(jiān)測與校準(zhǔn)操作間需維持恒溫（20-24℃）、濕度（40-60%）及空氣潔凈度（ISO7級標(biāo)準(zhǔn)），設(shè)備存放區(qū)域應(yīng)避震防塵，定期檢測電磁干擾對電子系統(tǒng)的影響。故障應(yīng)急處理建立設(shè)備突發(fā)故障的應(yīng)急預(yù)案，包括備用設(shè)備調(diào)用、手動模式切換流程及患者緊急脫離方案，確保治療中斷時能優(yōu)先保障患者安全。01020304設(shè)備維護標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)回溯與分析通過電子病歷