第一章藥物代謝產(chǎn)物的概述及其重要性第二章藥物代謝的酶促反應(yīng)機制第三章藥物代謝產(chǎn)物的分離技術(shù)第四章藥物代謝產(chǎn)物的鑒定方法第五章藥物代謝產(chǎn)物的定量分析方法第六章藥物代謝產(chǎn)物的安全性評估與臨床應(yīng)用01第一章藥物代謝產(chǎn)物的概述及其重要性藥物代謝產(chǎn)物的定義與分類PhaseI代謝產(chǎn)物PhaseII代謝產(chǎn)物對乙酰氨基酚的代謝氧化、還原、水解反應(yīng)生成結(jié)合反應(yīng)生成PhaseI產(chǎn)生NAPQI，PhaseII通過葡萄糖醛酸結(jié)合降低毒性藥物代謝產(chǎn)物的生物學(xué)意義降低藥物親脂性使其易于通過尿液或膽汁排泄環(huán)孢素的代謝代謝產(chǎn)物通過結(jié)合反應(yīng)增加水溶性，減少腎毒性風險氯丙嗪的代謝產(chǎn)物硫雜蒽酮具有抗組胺作用異煙肼的代謝產(chǎn)物N-羥基異煙肼是致癌物，生成量需嚴格控制藥物代謝產(chǎn)物的檢測方法高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS）核磁共振（NMR）技術(shù)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）靈敏度高，可同時檢測多種代謝產(chǎn)物用于結(jié)構(gòu)確證，顯示葡萄糖醛酸結(jié)合的特征峰提高檢測選擇性，提供特征碎片離子藥物代謝產(chǎn)物的實際案例羅非昔布的研發(fā)案例地西泮的臨床藥物監(jiān)測諾氟沙星的環(huán)境藥物代謝研究代謝產(chǎn)物COX-2選擇性抑制劑導(dǎo)致撤市代謝產(chǎn)物1-去甲地西泮與原形藥物比例評估CYP3A4活性光致毒性需關(guān)注其在環(huán)境中的持久性02第二章藥物代謝的酶促反應(yīng)機制酶促代謝的基本原理細胞色素P450（CYP450）酶系谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶（GST）CYP2C9的基因多態(tài)性高度特異性，不同亞型催化不同反應(yīng)結(jié)合反應(yīng)解毒導(dǎo)致華法林劑量個體差異顯著CYP450酶系的反應(yīng)類型氧化反應(yīng)還原反應(yīng)水解反應(yīng)包括單加氧酶和雙加氧酶反應(yīng)主要由黃素單加氧酶（FMO）催化由酯酶和酰胺酶催化非酶促代謝反應(yīng)腸道中的氧化反應(yīng)光照誘導(dǎo)的非酶促反應(yīng)pH值對非酶促反應(yīng)的影響異煙肼被NADH氧化為活性代謝物沙丁胺醇N-氧化物產(chǎn)生活性代謝物地西泮N-去甲基化反應(yīng)速率提高代謝酶的調(diào)控機制藥物誘導(dǎo)或抑制代謝酶活性基因表達調(diào)控代謝酶活性環(huán)境因素影響代謝酶表達苯巴比妥誘導(dǎo)CYP450表達，加速對乙酰氨基酚代謝CYP3A4的啟動子區(qū)域存在藥物反應(yīng)元件（DRE），受甾體激素調(diào)控吸煙可誘導(dǎo)CYP1A2表達，加速華法林的代謝03第三章藥物代謝產(chǎn)物的分離技術(shù)高效液相色譜（HPLC）技術(shù)反相HPLC分離度熒光檢測器靈敏度流動相優(yōu)化水楊尿酸和龍膽酸分離度>1.5地西泮代謝產(chǎn)物特征發(fā)射峰，靈敏度達0.1ng/mL乙腈-水梯度洗脫提高分離效率氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）技術(shù)檢測限衍生化技術(shù)離子源地西泮代謝產(chǎn)物1-去甲地西泮，檢測限可達0.01ng/mLMTBSTFA提高諾氟沙星代謝產(chǎn)物靈敏度EI模式提供特征碎片離子，用于結(jié)構(gòu)確證液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）技術(shù)檢測限地西泮代謝產(chǎn)物，檢測限可達0.1ng/mL離子化方式ESI模式提供多電荷離子，提高檢測靈敏度04第四章藥物代謝產(chǎn)物的鑒定方法質(zhì)譜（MS）的鑒定原理離子化與檢測MS/MS結(jié)構(gòu)信息HRMS分子式確認ESI模式下產(chǎn)生[M+H]+離子，分子量匹配理論值179.1地西泮代謝產(chǎn)物1-去甲地西泮，特征碎片離子m/z328諾氟沙星代謝產(chǎn)物，精確質(zhì)量匹配理論值核磁共振（NMR）的鑒定原理1HNMR特征質(zhì)子信號二維NMR官能團連接HMBC遠程連接信息阿司匹林代謝產(chǎn)物水楊尿酸，匹配文獻數(shù)據(jù)地西泮代謝產(chǎn)物1-去甲地西泮，HSQC譜顯示1H和13C的關(guān)聯(lián)諾氟沙星代謝產(chǎn)物，13C和1H的遠程關(guān)聯(lián)紅外光譜（IR）的鑒定原理官能團信息指紋圖譜確認化合物定量分析水楊尿酸IR譜顯示羧酸（1718cm?1）和酚（1590cm?1）地西泮代謝產(chǎn)物1-去甲地西泮，IR譜與文獻數(shù)據(jù)一致諾氟沙星代謝產(chǎn)物，尿液濃度達0.5μg/mL比旋光度（[α]）的鑒定原理手性化合物確認監(jiān)測代謝過程測量條件控制硫雜蒽酮[α]為-25°，文獻值為-23°利福平治療結(jié)核病中，比旋光度的變化反映代謝產(chǎn)物生成地西泮代謝產(chǎn)物，恒溫槽和標準光源提高測量準確性薄層色譜（TLC）的鑒定原理Rf值初步鑒定顯色反應(yīng)確認官能團定量分析檢測水楊尿酸Rf值為0.4，與文獻數(shù)據(jù)一致地西泮代謝產(chǎn)物，F(xiàn)eCl?試劑變藍諾氟沙星代謝產(chǎn)物，尿液濃度達0.3μg/mL熱重分析（TGA）的鑒定原理熱分解信息DTG分解速率定量分析檢測水楊尿酸TGA顯示在200°C開始分解地西泮代謝產(chǎn)物，DTG譜顯示在250°C出現(xiàn)主要分解峰諾氟沙星代謝產(chǎn)物，環(huán)境樣品中殘留量為0.2μg/g05第五章藥物代謝產(chǎn)物的定量分析方法高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（HPLC-MS/MS）定量靈敏度與選擇性定量方法方法驗證阿司匹林代謝產(chǎn)物，靈敏度可達0.1ng/mL內(nèi)標法（硫雜蒽酮），RSD<5%線性范圍0.1-100ng/mL，R2>0.99，回收率90-110%氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（GC-MS/MS）定量檢測限與選擇性定量方法方法驗證諾氟沙星代謝產(chǎn)物，檢測限可達0.01ng/mL內(nèi)標法（諾氟沙星），RSD<3%線性范圍0.05-50ng/mL，R2>0.98，回收率88-112%液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）技術(shù)檢測限與適用性定量方法方法驗證地西泮代謝產(chǎn)物，檢測限可達0.1ng/mL內(nèi)標法（1-去甲地西泮），RSD<4%線性范圍0.2-200ng/mL，R2>0.97，回收率92-108%06第六章藥物代謝產(chǎn)物的安全性評估與臨床應(yīng)用放射免疫分析（RIA）定量檢測限與適用性定量方法方法驗證地西泮代謝產(chǎn)物，檢測限可達0.01