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A01G22/00(2018.01)地址410205湖南省長沙市岳麓區(qū)公司11002本發(fā)明涉及一種培育大麻幼苗的方法,包括:在大麻幼苗的培養(yǎng)基中加入葡萄籽原花青于葡萄籽,是植物體內(nèi)存在的一種天然抗氧化三CKGSP21.一種培育大麻幼苗的方法,其特征在于,包括:在大麻幼苗的培養(yǎng)基中加入葡萄籽原花青素,加入所述葡萄籽原花青素至少12h后,再將所述大麻幼苗移植至鎘脅迫的環(huán)境中;加入所述葡萄籽原花青素的時機(jī)為大麻幼苗生長4~6天后,所述葡萄籽原花青素的用量為2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種培育大麻幼苗的方法,其特征在于,所述葡萄籽原花青素的用量為50mg/L。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種培育大麻幼苗的方法,其特征在于,包括:先將大麻種子浸泡滅菌后浸種催芽,再對催芽后的幼苗進(jìn)行水培,待幼苗生長4~6天后,加入所述葡萄籽原花青素。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種培育大麻幼苗的方法,其特征在于,所述水培采用的培養(yǎng)液pH值為6~7。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種培育大麻幼苗的方法,其特征在于,所述水培采用的培養(yǎng)液pH值為6.5。6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種培育大麻幼苗的方法,其特征在于,所述培養(yǎng)液的配方如MnSO43.2~3.8mg/L,H?BO?2.5~2.9mg/L,ZnSO?0.6~0.7mg/L,CuSO?0.07Na?MoO?0.1~0.2mg/L,FeSO4·7H?07.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種培育大麻幼苗的方法,其特征在于,所述培養(yǎng)液的配方如L,H?BO?2.86mg/L,ZnSO?0.604mg/L,CuSO?0.08mg/L,Na?Mo0?0.12mg/5.57mg/L,EDTA-Na27.45mg/L,余量為水。8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種培育大麻幼苗的方法,其特征在于,所述水培的條件為:光照16h,間歇8h,依此循環(huán),晝夜溫度分別為30℃、26℃,晝夜相對濕度分別為60、100,光強(qiáng)3技術(shù)領(lǐng)域[0001]本發(fā)明涉及麻類作物栽培領(lǐng)域,更具體地,涉及一種培育大麻幼苗的方法。背景技術(shù)[0002]土壤重金屬污染現(xiàn)已成為了最備受關(guān)注的環(huán)境污染問題之一。重金屬由于其獨(dú)有的長期性、隱蔽性和不可逆等性質(zhì),能夠在生物體中不斷富集,而且不能被降解消除,與其他污染形式相比更難治理。鎘(Cadmium,Cd)作為環(huán)境中一種常見的重金屬,通常來源于工害人體健康。復(fù)鎘污染。但是當(dāng)植物受到外界重金屬脅迫時,植物體內(nèi)可誘導(dǎo)產(chǎn)生大量的活性氧積累,植物自身抗氧化系統(tǒng)不能抵御時,就會導(dǎo)致質(zhì)膜過氧化,胞內(nèi)電解質(zhì)大量外滲,引起細(xì)胞損傷?,F(xiàn)有的降低鎘對植物的毒性的方法,一般是外源加入重金屬鰲合劑或者在土壤中加入重金屬吸附微生物。這些方法雖可以降低鎘毒害,但也存在其他問題,重金屬螯合劑雖可以鰲合重金屬,但其本身對植物也是一種污染,可能會引起二次污染。而吸附重金屬微生物的使用對土壤的自身條件要求很高,過酸、過堿都不利于微生物生長,而且還可能對土壤中其他原有的微生物種群造成威脅,破壞原有的生態(tài)平衡,給環(huán)境帶來更大的傷害。[0004]因此,需要找到一種能提高大麻幼苗耐受鎘脅迫的方法,同時又不對大麻本身和環(huán)境帶來負(fù)面影響。發(fā)明內(nèi)容[0005]針對現(xiàn)有技術(shù)的不足,本發(fā)明提供一種培育大麻幼苗的方法,該方法通過在大麻幼苗的培養(yǎng)基中加入葡萄籽原花青素,能有效提高大麻幼苗耐受鎘脅迫,且不存在負(fù)面影[0006]為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用以下的技術(shù)[0007]一種培育大麻幼苗的方法,包括:在大麻幼苗的培養(yǎng)基中加入葡萄籽原花[0008]上述技術(shù)方案中,在大麻幼苗的培養(yǎng)基中加入葡萄籽原花青素(Grapeseedproanthocyanidins,GSP),由于葡萄籽原花青素是天然抗氧化劑,極易被大麻幼苗吸收,所以能提高大麻幼苗耐受鎘脅迫,且在沒有或含量很低的鎘脅迫情況下,也不會對大麻幼苗造成負(fù)面影響。[0009]優(yōu)選地,加入所述葡萄籽原花青素的時機(jī)為大麻幼苗生長4~6天后。因?yàn)樯L4~6天的大麻幼苗已出現(xiàn)大量的毛根,根系已足夠發(fā)達(dá),此時加入葡萄籽原花青素,大麻幼苗可與其充分接觸,此時,葡萄籽原花青素對于大麻幼苗的保護(hù)作用最佳。如果在浸種或催芽時就加入,不能保證種子吸收充分且均勻,最終大麻幼苗耐受鎘脅迫效果欠佳。[0010]優(yōu)選地,所述葡萄籽原花青素的用量為30~70mg/L,更優(yōu)選為50mg/L。濃度過低,4保護(hù)作用不明顯,濃度過高,葡萄籽原花青素本身對于其他微量元素的吸收會有一定影響。[0011]優(yōu)選地,所述培育大麻幼苗的方法包括:先將大麻種子浸泡滅菌后浸種催芽,再對催芽后的幼苗進(jìn)行水培,待幼苗生長4~6天后,加入所述葡萄籽原花青素。[0012]上述技術(shù)方案中,催芽2天后最適合移栽進(jìn)行水培。因?yàn)槿粜∮?天,則苗太小,容[0014]優(yōu)選地,所述培養(yǎng)液的配方如下:Ca(NO?)2260~300mg/L,KNO?250~280mg/L,KH?PO470~80mg/L,MgSO4240~260mg/L,MnSO43.2~3.8mg/L,H?BO?2.5~2.9mEDTA-Na27.2~7.5mg/L,余量為水。75.5mg/L,MgSO4245mg/L,MnSO?3.49mg/L,H?BO?2.86mg/L,ZnSO40.08mg/L,Na2MoO40.12mg/L,FeSO4·7H?05.57mg/L,EDTA-Na27.45mg/L,余量為水。[0017]優(yōu)選地,加入所述葡萄籽原花青素至少12h后,再將所述大麻幼苗移植至鎘脅迫的環(huán)境中。加入所述葡萄籽原花青素后,給予一定時間讓大麻幼苗充分吸收利用,之后才能起到良好的耐受鎘脅迫作用。[0018]本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)具有的有益效果:[0019](1)本發(fā)明的方法中加入的葡萄籽原花青素來源于葡萄籽,是植物體內(nèi)存在的一種天然抗氧化劑,極易溶于水,容易被大麻幼苗吸收,從而提高大麻幼苗對鎘脅迫的耐受,且在沒有或含量很低的鎘脅迫情況下,也不會對大麻幼苗造成負(fù)面影響;[0020](2)本發(fā)明的方法與傳統(tǒng)的加入重金屬螯合劑或重金屬吸附微生物相比,不會造成二次污染或破壞生態(tài)平衡;[0021](3)本發(fā)明的方法見效快、可控性好,非常適用于大麻的培育中,從而更好地讓大麻進(jìn)行鎘污染土壤的修復(fù)。附圖說明[0022]圖1為不同情況下大麻幼苗根長變化;[0023]圖2為不同情況下大麻幼苗中丙二醛(MDA)含量變化;[0024]圖3為不同情況下大麻生長實(shí)物圖。具體實(shí)施方式[0025]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例,對本發(fā)明的具體實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)描述。以下實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明,并不用來限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。5[0027]實(shí)施例1[0028]本實(shí)施例提供了一種培育大麻幼苗的方法,包括以下步驟:[0030]選取顆粒飽滿的大麻種子,先用質(zhì)量體積比為10%的NaCl0溶液浸泡滅菌10min,再用無菌水反復(fù)沖洗10min,然后將種子置于無菌水浸泡8h,再將浸泡過的種子置于鋪有三層濾紙的無菌培養(yǎng)盒中,加入10mL無菌水后,將培養(yǎng)盒置于25℃光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)催芽,每隔1天補(bǔ)一次水;[0032]將催芽2天的幼苗移入培養(yǎng)液中,培養(yǎng)液的配方如下:Ca(NO?)2295mg/L,KNO3252.8mg/L,KH?PO475.5mg/L,MgSO4245mg/L,MnSO?3.49mg/L,H?BO?2.80.604mg/L,CuSO?0.08mg/L,Na2MoO40.12mg/L,FeSO4·7H?05.57mg/L,ED余量為水,然后加入NaOH調(diào)節(jié)pH至6.5,光照16h,間歇8h,依此循環(huán),晝夜溫度分別為30℃、26℃,晝夜相對濕度分別為60、100,光強(qiáng)為700μmol·m2·s,營養(yǎng)液隔天換一次;[0033](3)加入葡萄籽原花青素[0034]待幼苗長至5天,取50mg葡萄籽原花青素溶于1L培養(yǎng)液中,供大麻幼苗吸收12h。[0035]實(shí)施例2[0036]本實(shí)施例提供了一種培育大麻幼苗的方法,包括以下步驟:[0038]選取顆粒飽滿的大麻種子,先用質(zhì)量體積比為10%的NaCl0溶液浸泡滅菌10min,再用無菌水反復(fù)沖洗10min,然后將種子置于無菌水浸泡8h,再將浸泡過的種子置于鋪有三層濾紙的無菌培養(yǎng)盒中,加入10mL無菌水后,將培養(yǎng)盒置于25℃光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)催芽,每隔1天補(bǔ)一次水;[0040]將催芽2天的幼苗移入培養(yǎng)液中,培養(yǎng)液的配方如下:Ca(NO?)2295mg/L,KNO?252.8mg/L,KH?PO475.5mg/L,MgSO4245mg/L,MnSO?3.49mg/L,H?BO?2.80.604mg/L,CuSO?0.08mg/L,Na?MoO?0.12mg/L,FeSO?·7H?05.57mg/L,ED余量為水,然后加入NaOH調(diào)節(jié)pH至6.5,光照16h,間歇8h,依此循環(huán),晝夜溫度分別為30℃、26℃,晝夜相對濕度分別為60、100,光強(qiáng)為700μmol·m2·s,營養(yǎng)液隔天換一次;[0041](3)加入葡萄籽原花青素[0042]待幼苗長至5天,取80mg葡萄籽原花青素溶于1L培養(yǎng)液中,供大麻幼苗吸收16h。[0043]實(shí)施例3[0044]本實(shí)施例提供了一種培育大麻幼苗的方法,其余與實(shí)施例1相同,不同的是加入葡萄籽原花青素的時機(jī),本方法中浸種時即加入50mg/L葡萄籽原花青素。[0045]實(shí)施例4[0046]本實(shí)施例提供了一種培育大麻幼苗的方法,其余與實(shí)施例1相同,不同的是加入葡萄籽原花青素的時機(jī),本方法在幼苗生長2天后即加入50mg/L葡萄籽原花青素。[0047]實(shí)施例5[0048]本實(shí)施例提供了一種培育大麻幼苗的方法,其余與實(shí)施例1相同,不同的是步驟(2)中水培采用的培養(yǎng)液pH值為6.5。6[0050]本實(shí)施例提供了一種培育大麻幼苗的方法,其余與實(shí)施例1相同,不同的是步驟(2)中水培條件:設(shè)置光照16h,間歇8h,依此循環(huán),保持恒溫25℃,晝夜相對濕度分別為70、90,光強(qiáng)為800μmol·m2·s,營養(yǎng)液隔天換一次。[0052]本對比例提供了一種培育大麻幼苗的方法,其余與實(shí)施例1相同,不同的是沒有加入葡萄籽原花青素。[0054]本對比例提供了一種培育大麻幼苗的方法,其余與實(shí)施例1相同,不同的是步驟(3)中加入的是茶多酚。[0056]將實(shí)施例1和對比例1的大麻幼苗分別用100μM的CdCl?處理三天,此時大麻幼苗根長與沒有進(jìn)行鎘處理的大麻幼苗根長如圖1所示。由圖1可以看出,加入了50mg/L葡萄籽原花青素(實(shí)施例1,即圖中GSP)的大麻幼苗根長與不加葡萄籽原花青素(對比例1,即圖中CK)的大麻幼苗根長沒有顯著差異,說明葡萄籽原花青素基本對大麻幼苗沒有毒性;對比例1的大麻幼苗經(jīng)過100μMCdCl?處理后(即圖中Cd),大麻幼苗根長增長受到了鎘脅迫,顯著減小,而實(shí)施例1的大麻幼苗在鎘脅迫下(即圖中Cd+GSP),脅迫得到明顯緩解,大麻幼苗根長相對于未加入葡萄籽原花青素的情況下增長明顯。[0057]將實(shí)施例1和對比例1的大麻幼苗分別用100μM的CdCl?處理三天,分別取鎘處理過物,被認(rèn)為是氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷的良好指標(biāo)。結(jié)果如圖2所示,實(shí)施例1中經(jīng)過葡萄籽原花青素處理的大麻幼苗MDA含量相比于對比例1沒有顯著升高,說明葡萄籽原花青素對大麻幼苗本身沒有毒害作用;鎘脅迫下的大麻幼根MDA含量顯著增高,說明鎘脅迫誘導(dǎo)大麻幼根細(xì)胞損傷,而實(shí)施例1中經(jīng)過葡萄籽原花青素處理的大麻幼苗在鎘脅迫下,MDA含量明顯減少,脅迫得到明顯緩解,說明葡萄籽原花青素能提高大麻幼苗對鎘脅迫的耐受能力。[0058]將實(shí)施例1和對比例1的大麻幼苗分別用100μM的CdCl?處理十天,此時大麻幼苗根長與沒有進(jìn)行鎘處理的大麻幼苗根長如圖3所示。由圖3可以看出,加入了50mg/L葡萄籽原花青素(GSP組)的大麻幼苗根長與不加葡萄籽原花青素(CK組)的大麻幼苗根長沒有顯著差異,說明葡萄籽原花青素基本對大麻幼苗沒有毒性;對比例1的大麻幼苗經(jīng)過100μMCdCl?處理后(Cd組),大麻幼苗根長增長受到了鎘脅迫,生長緩慢、植株矮小,而加入了50mg/L葡萄籽原花青素的大麻幼苗在鎘脅迫下(Cd+GSP組),植株生長明顯優(yōu)于Cd組,鎘脅迫得到改善,進(jìn)一步說明了葡萄籽原花青素對鎘脅
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