(12)發(fā)明專利(10)授權(quán)公告號CN109310648B(65)同一申請的已公布的文獻(xiàn)號(30)優(yōu)先權(quán)數(shù)據(jù)(85)PCT國際申請進(jìn)入國家階段日(86)PCT國際申請的申請數(shù)據(jù)PCT/IL2016/0511662016(87)PCT國際申請的公布數(shù)據(jù)WO2017/072773EN2(73)專利權(quán)人杰伊制藥公司地址加拿大多倫多A·J·吉拉爾尼克(74)專利代理機(jī)構(gòu)中國貿(mào)促會專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司11038專利代理師崔錫強(qiáng)A61K31/05(2006.01)A61K45/00(2006.01)鄭蕓等.腫瘤化療增敏劑的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用進(jìn)展.《西南軍醫(yī)》.2010,第12卷(第3期),審查員辛鐵鋼(54)發(fā)明名稱用于治療癌癥的包含大麻二酚和第二治療劑的組合物本發(fā)明提供了對治療癌癥有效的大麻二酚(CBD)和第二治療劑、如一種或多種ChEH制劑、萘醌或其衍生物或其任何組合的協(xié)同組21.包含大麻二酚和替米利芬的協(xié)同組合的組合物在用于制備治療癌癥的藥物中的用途，其中所述癌癥選自急性白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、乳腺癌和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，其中大麻二酚和替米利芬的摩爾比為50:1至1:50。2.權(quán)利要求1的用途，其中所述組合物還包含藥學(xué)上可接受的載體。3.權(quán)利要求1或2的用途，其中大麻二酚和替米利芬的摩爾比為30:1至1:30。4.權(quán)利要求1或2的用途，其中大麻二酚和替米利芬的摩爾比為10:1至1:10。5.權(quán)利要求1或2的用途，其中大麻二酚和替米利芬的摩爾比為5:1至1:5。6.權(quán)利要求1或2的用途，其中大麻二酚和替米利芬的摩爾比為2:1至1:2。7.權(quán)利要求1或2的用途，其中大麻二酚和替米利芬的摩爾比為1:1。3發(fā)明領(lǐng)域[0001]本發(fā)明涉及有效治療癌癥的大麻二酚和第二治療劑的組合。第二治療劑包括一種[0002]發(fā)明背景[0003]大麻二酚(CBD)是大麻的主要非精神活性成分，基于其對腫瘤細(xì)胞的體外和體內(nèi)活性而被認(rèn)為是抗腫瘤劑。由于缺乏精神活性，其藥理學(xué)和治療潛力正在深入研究之中。最精神病、神經(jīng)保護(hù)和抗惡心作用。加拿大最近批準(zhǔn)含有大約相等量的A9-四氫大麻酚(THC)和CBD的基于大麻素的藥物以減輕與多發(fā)性硬化相關(guān)的神經(jīng)性疼痛，從而進(jìn)一步證實(shí)了其治療潛力。[0004]已知癌癥影響身體的許多區(qū)域，其中最常見的癌癥類型包括：膽管癌、膀胱癌、骨癌、腸癌(包括結(jié)腸癌和直腸癌)、腦癌、乳腺癌、神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)癌(通常稱為類癌)、宮頸[0005]常規(guī)的癌癥治療選擇經(jīng)常受限于毒性或獲得性耐藥性，并且需要新穎的藥劑。大麻二酚(CBD)是一種有效的天然化合物，有報(bào)道對多種癌癥類型有活性。CBD屬于大麻素家族，一組與特定G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合的藥理活性化合物。植物大麻素(Phytocannabinoid)是來自大麻的植物衍生產(chǎn)物；內(nèi)源性大麻素是在動(dòng)物和人體組織中制成的；合成大麻素是實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)的。G蛋白偶聯(lián)受體CB1主要在腦和神最近的數(shù)據(jù)表明，一些大麻素也能通過香草素受體引發(fā)信號，而其他大麻素可能以不依賴于受體的方式發(fā)揮功能。大麻素可以調(diào)控癌癥生長和傳播的核心信號通路。它們抑制細(xì)胞周期進(jìn)程和趨化性，并阻斷血管生成。最近的研究表明大麻素也會誘導(dǎo)自噬性細(xì)胞死亡?！?-四氫大麻酚(THC)是最好表征的大麻素之一；然而，其治療應(yīng)用受其精神作用效應(yīng)的限[0006]已有一些關(guān)于CBD組合療法與選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERM)的實(shí)用性的報(bào)道，但是關(guān)于這種治療方案的真實(shí)用途僅有有限的信息。[0007]仍然需要新的癌癥療法，其比迄今為止的可用藥物和療法更有效且對抗其他癌癥類型有效。[0008]在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了有效治療癌癥的包含大麻二酚(CBD)和第二治AEBS抑制劑化合物。在一些實(shí)施方案中，第二治療劑是一種或多種的萘醌和/或其衍生物、一種或多種ChEH/AEBS抑制劑化合物或其任何組合。所述組合物預(yù)期用于治療癌癥，且在一些實(shí)施方案中，預(yù)期治療雌激素受體陰性癌癥的治療，且在一些實(shí)施方案中，預(yù)期用于雌激素受體陽性癌癥。4[0009]在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了包含大麻二酚和至少一種為ChEH/AEBS抑制劑類別的一部分的第二治療劑的組合的組合物，以及其在治療癌癥中的用途。[0010]ChEH/AEBS抑制劑包含不同藥理學(xué)類別的天然或合成化合物。膽固醇環(huán)氧化物水complex),其包含3b-羥基甾醇-D8-D7-異構(gòu)酶(D8D7I)和3b-羥基甾醇-D7-還原酶(DHCR7)。[0011]ChEH/AEBS抑制劑包含許多化合物，其中特別包括替米利芬(DPPE,N,NO-二乙基氨碘酮；膽固醇生物合成抑制劑例如曲帕拉醇、特比萘芬、U-18666A、Ro48-8071、AY9944、術(shù)人員將會理解的那些(參見例如Silvente-PoirotS,PoirotM.Cholesterolepoxidehydrolaseandcancer.CurrentopinioninMedinaP,PaillasseMR,SegalaG,PoirotM,Silvente-PoirotS:Identificatpharmacologicalcharacterizationofcholesterol-5,6-epoxidehydrolaseasatargetfortamoxifenandAEBSligands.ProcNatlAcadSciUSA2010,107:13520-13525,所有這些文獻(xiàn)均并入本文在此全部引用作為參考)。[0012]在另一個(gè)實(shí)施方案中，第二治療劑是萘醌或其衍生物。[0013]本發(fā)明的組合療法/組合物通過不依賴雌激素受體的機(jī)制具有活性，且在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明特別考慮用于治療雌激素受體陰性癌癥/腫瘤的組合物。[0014]根據(jù)這個(gè)方面，并且在一些實(shí)施方案中，用于所述組合療法的ChEH/AEBS抑制劑可以包括選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERM),其包含陽離子氨基乙氧基側(cè)鏈、如氯米芬、他莫昔[0015]當(dāng)使用多種類型的ChEH/AEBS抑制劑(實(shí)施例1)時(shí)，本發(fā)明的組合物在實(shí)施例中如本文所呈現(xiàn)顯示具有抗癌活性。[0016]本發(fā)明的組合物在實(shí)施例中如本文所呈現(xiàn)顯示同樣具有抗癌活性、例如抗白血病活性，并且同樣通過不依賴雌激素受體的機(jī)制清楚地介導(dǎo)，如與氯米芬和CBD的組合治療抑[0017]根據(jù)關(guān)于無雌激素受體的癌癥/腫瘤的該方面，在一個(gè)實(shí)施方案中，ChEH/AEBS抑制劑是三苯基乙烯(TPE)或其衍生物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，三苯基乙烯衍生物選自：抗雌激素(AE)、氯米芬(CL)和他莫昔芬(Tam)或其組合。[0018]本發(fā)明提供包含大麻二酚(CBD)和至少一種ChEH/AEBS抑制劑化合物的協(xié)同組合合物是ChEH/AEBS的選擇性抑制劑，且在一些實(shí)施方案中，ChEH/AEBS的選擇性抑制劑是PBPE或者替米利芬(DPPE)。5[0019]在一些實(shí)施方案中，所述抑制劑是膽固醇生物合成抑制劑，其在一些實(shí)施方案中[0020]在一些實(shí)施方案中，抑制劑化合物是環(huán)B氧化固醇，其在一些實(shí)施方案中是6-酮膽甾烷醇、7-酮膽甾烷醇、7-酮膽固醇和膽甾烷-3b,5a,6b-三醇(CT)或其組合。[0021]在一些實(shí)施方案中，抑制劑化合物為不飽和脂肪酸，其在一些實(shí)施方案中為油酸，花生四烯酸(ARA)或二十二碳六烯酸(DHA)或其組合。[0022]在一些實(shí)施方案中，抑制劑化合物是萘醌或其衍生物。在一些實(shí)施方案中，該化合物是甲萘醌或其衍生物。[0023]本發(fā)明提供包含大麻二酚(CBD)和至少一種ChEH/AEBS抑制劑化合物的協(xié)同組合的組合物，其用于治療雌激素受體陰性癌癥。[0024]根據(jù)這個(gè)方面，并且在一些實(shí)施方案中，ChEH/AEBS抑制劑化合物是含有陽離子氨基乙氧基側(cè)鏈的選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERM)。在一些實(shí)施方案中，SERM是氯米芬、他莫其含有陽離子氨基乙氧基側(cè)鏈的衍生物或其組合。[0025]在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物還包含藥學(xué)上可接受的載體。[0026]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療癌癥的方法，其包括向有需要的受試者施用治療有效量的如本文所述的組合物。在一些實(shí)施方案中，特別排除使用具有SERM活性的ChEH/AEBS抑制劑。[0027]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療有效量的本文所述組合物在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。[0028]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療癌癥的方法，所述方法包括向有需要的受試者施用治療有效量的大麻二酚(CBD)和ChEH/AEBS抑制劑的協(xié)同組合，所述ChEH/AEBS抑制劑化合物不是SERM。[0029]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療癌癥的方法，所述方法包括向有需要的受試者施用治療有效量的大麻二酚(CBD)和至少一種萘醌或其衍生物或其組合的協(xié)同組合。部癌(該組包括起始于形成口腔、鼻、喉、耳的內(nèi)層或覆蓋舌頭的表層的細(xì)胞的癌)、卡波西[0031]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于在需要的受試者中治療患有血液或骨髓相關(guān)癌癥的受試者的方法，所述方法包括向所述受試者施用治療有效量的大麻二酚(CBD)和ChEH/AEBS抑制劑的協(xié)同組合，所述ChEH/AEBS抑制劑化合物不是SERM。[0032]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于在需要的受試者中治療患有血液或骨髓相關(guān)癌癥的受試者的方法，所述方法包括向所述受試者施用治療有效量的大麻二酚(CBD)和萘醌或其衍生物的協(xié)同組合。[0033]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了在有需要的受試者中治療患有血液或骨髓相關(guān)癌癥的受試者的方法，其包括向所述受試者施用治療有效量的如本文所述的組合物。在一6些實(shí)施方案中，組合物包含CBD和ChEH/AEBS抑制劑，且在一些實(shí)施方案中，組合物包含CBD和萘醌或其衍生物，且在一些實(shí)施方案中，組合物包含CBD以及ChEH/AEBS抑制劑和/或萘醌[0034]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了在有需要的受試者中治療患有膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的受試者的方法，其包括向所述受試者施用治療有效量的大麻二酚(CBD)和ChEH/AEBS抑制劑的協(xié)同組合。在一些實(shí)施方案中，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤是雌激素受體陰性的。在一些實(shí)施例中，膠[0035]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了在有需要的受試者中治療患有膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的受試者的方法，其包括向所述受試者施用治療有效量的大麻二酚(CBD)和萘醌或其衍生物的協(xié)同組合。[0036]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了在有需要的受試者中治療患有膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的受試者的方法，其包括向所述受試者施用治療有效量的如本文所述的組合物。在一些實(shí)施方案中，特別排除使用具有SERM活性的ChEH/AEBS抑制劑。[0037]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了在有需要的受試者中治療罹患乳腺癌的受試者的方法，其包括向所述受試者施用治療有效量的大麻二酚(CBD)和ChEH/AEBS抑制劑的協(xié)同組合。在一些實(shí)施方案中，乳腺癌是雌激素受體陰性的。在一些實(shí)施方案中，乳腺癌是雌激[0038]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了在有需要的受試者中治療患有乳腺癌的受試者的方法，所述方法包括向所述受試者施用治療有效量的大麻二酚(CBD)和萘醌或其衍生物的協(xié)同組合。[0039]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了在有需要的受試者中治療患有乳腺癌的受試者的方法，其包括向所述受試者施用治療有效量的如本文所述的組合物。在一些實(shí)施方案中，組合物包含CBD和ChEH/AEBS抑制劑，且在一些實(shí)施方案中，組合物包含CBD和萘醌或其衍生[0040]附圖的簡要說明[0041]圖1.圖示了大麻二酚與DPPE對抑制HL-60細(xì)胞系生長的協(xié)同作用。[0043]圖3.圖示了大麻二酚與7-酮膽固醇對抑制HL-60細(xì)胞系生長的協(xié)同作用。[0044]圖4.圖示了大麻二酚與7-酮膽固醇對抑制CCRF-CEM細(xì)胞系生長的協(xié)同作用。[0045]圖5.圖示了大麻二酚與曲帕拉醇對抑制H1-60細(xì)胞系生長的協(xié)同作用。[0046]圖6.圖示了大麻二酚與曲帕拉醇對抑制CCRF-CEM細(xì)胞系生長的協(xié)同作用。[0047]圖7.圖示了大麻二酚與ICI182,780對抑制H1-60細(xì)胞系生長的協(xié)同作用的缺乏。[0048]圖8.圖示了大麻二酚與ICI182,780對抑制CCRF-CEM細(xì)胞系生長的協(xié)同作用的缺[0049]圖9A圖示了大麻二酚對HL-60細(xì)胞的存活力的作用，所述HL-60細(xì)胞用不同濃度的[0050]圖9B圖示了大麻二酚對用不同濃度的大麻二酚和溶媒在不含血清和5%血清的培7[0051]圖9C圖示描述大麻二酚對用不同濃度的大麻二酚和溶媒在5%含血清培養(yǎng)基中溫[0052]圖9D圖示了大麻二酚對用不同濃度的大麻二酚和溶媒在5%含血清培養(yǎng)基中溫育48小時(shí)的A-172細(xì)胞的存活力的作用。細(xì)胞活力通過XTT測定來確定。[0053]圖10A圖示了氯米芬對用不同濃度的氯米芬和溶媒在5%含血清培養(yǎng)基中溫育24小時(shí)的HL-60細(xì)胞的存活力的作用。細(xì)胞活力通過XTT測定來確定。[0054]圖10B圖示了氯米芬對用不同濃度的氯米芬和溶媒在5%含血清培養(yǎng)基中溫育24h[0055]圖10C圖示了氯米芬對用不同濃度的氯米芬和溶媒在5%含血清培養(yǎng)基中溫育48h的A-172細(xì)胞的存活力的作用。細(xì)胞活力通過XTT測定來確定。[0056]圖11A圖示了他莫昔芬對用不同濃度的他莫昔芬和溶媒在5%含血清培養(yǎng)基中溫育24h的HL-60細(xì)胞的存活力的作用。圖11B圖示了他莫昔芬對用不同濃度的他莫昔芬和溶媒在5%含血清培養(yǎng)基中溫育24h的CCRF細(xì)胞的存活力的作用。[0057]圖11C圖示描述了他莫昔芬對用不同濃度的他莫昔芬和賦形劑在5%含血清培養(yǎng)[0058]圖12A圖示了大麻二酚與氯米芬、他莫昔芬和甲萘醌(Mena)對用不同濃度的大麻二酚、氯米芬和溶媒在5%FCS培養(yǎng)基中溫育24h的HL-60細(xì)胞的生長抑制的協(xié)同作用。[0059]圖12B圖示了大麻二酚與氯米芬、他莫昔芬和甲萘醌(Mena)對用不同濃度的大麻二酚、他莫昔芬和溶媒在5%FCS培養(yǎng)基中溫育24h的HL-60細(xì)胞的生長抑制的協(xié)同作用。[0060]圖12C圖示了大麻二酚與氯米芬、他莫昔芬和甲萘醌(Mena)對用不同濃度的大麻二酚、甲萘醌和溶媒在5%FCS培養(yǎng)基中溫育24小時(shí)的CCRF細(xì)胞的生長抑制的協(xié)同作用。細(xì)[0061]圖13圖示了大麻二酚與多柔比星對用不同濃度的大麻二酚、多柔比星(Dox)和溶媒在5%和10%FCS培養(yǎng)基中溫育24小時(shí)的HL-60細(xì)胞的生長抑制的相加作用。細(xì)胞活力通過XTT測定來確定。[0062]圖14A圖示了大麻二酚與氯米芬和他莫昔芬對用不同濃度的大麻二酚、氯米芬和溶媒在5%FCS培養(yǎng)基中溫育24h的CCRF-CEM細(xì)胞的生長抑制的協(xié)同作用。細(xì)胞活力通過XTT測定來確定。[0063]圖14B圖示了大麻二酚與氯米芬和他莫昔芬對用不同濃度的大麻二酚、他莫昔芬和溶媒在5%FCS培養(yǎng)基中溫育24h的CCRF-CEM細(xì)胞的生長抑制的協(xié)同作用。[0064]圖15A圖示了大麻二酚與他莫昔芬對用不同濃度的大麻二酚、他莫昔芬和溶媒在5%FCS培養(yǎng)基中溫育24小時(shí)的MCF-7細(xì)胞的生長抑制的協(xié)同作用。細(xì)胞活力通過XTT測定來確定。[0065]圖15B圖示了大麻二酚與他莫昔芬對用10nM雌二醇預(yù)處理30分鐘、然后用不同濃度的大麻二酚、他莫昔芬和溶媒在5%FCS培養(yǎng)基中溫育24小時(shí)的MCF-7細(xì)胞的生長抑制的協(xié)同作用。細(xì)胞活力通過XTT測定來確定。[0066]圖16圖示了大麻二酚與他莫昔芬對MCF-7細(xì)胞系的生長抑制的協(xié)同作用。將A-172細(xì)胞用不同濃度的大麻二酚、氯米芬和溶媒在5%FCS培養(yǎng)基中溫育48小時(shí)。細(xì)胞活力通過8[0067]圖17A圖示了大麻二酚、氯米芬和甲萘醌對HL-60細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)。顯示了大麻二酚、氯米芬和甲萘醌對用大麻二酚和溶媒在5%FCS培養(yǎng)基中溫育24h和48h的HL-60細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡的劑量響應(yīng)作用。[0068]圖17B圖示了大麻二酚、氯米芬和甲萘醌對HL-60細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)。顯示了大麻二酚、氯米芬和甲萘醌對用大麻二酚、氯米芬和溶媒在5%FCS培養(yǎng)基中溫育24h的HL-60細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡的劑量響應(yīng)作用。[0069]圖17C圖示了大麻二酚、氯米芬和甲萘醌對HL-60細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)。顯示了大麻二酚、氯米芬和甲萘醌對用大麻二酚、甲萘醌和溶媒在5%FCS培養(yǎng)基中溫育24h的HL-60細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡的劑量響應(yīng)作用。[0070]圖18A圖示了大麻二酚、氯米芬和他莫昔芬在用大麻二酚和溶媒在無血清和5%FCS培養(yǎng)基中溫育24h的CCRF-CEM細(xì)胞中對CCRF-CEM細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)。[0071]圖18B圖示了大麻二酚、氯米芬和他莫昔芬在用大麻二酚、氯米芬和溶媒在5%FCS[0072]圖18C圖示了大麻二酚、氯米芬和他莫昔芬在用大麻二酚、他莫昔芬和溶媒在5%FCS培養(yǎng)基中溫育24h的CCRF-CEM細(xì)胞中對CCRF-CEM細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)。[0073]圖19是描繪正常HL-60細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征的顯微照片，且通過熒光顯微鏡觀察凋[0074]圖20描繪了大麻二酚和氯米芬在用20μM大麻二酚處理所示時(shí)間點(diǎn)的CCRF-CEM細(xì)胞中對Mcl-1下調(diào)的作用。收集細(xì)胞并用PBS洗滌兩次，然后使用RIPA緩沖液制備細(xì)胞裂解物。將蛋白質(zhì)進(jìn)行SDS并用針對MCl-1和鈣網(wǎng)蛋白(CRN)用抗體進(jìn)行免疫印跡。[0075]圖21A圖示了在移植了HL-60細(xì)胞的小鼠異種移植模型中大麻二酚、氯米芬和大麻二酚+氯米芬對腫瘤體積的影響。用卡尺每周測量一次腫瘤體積(n=6)。(*:P<0.05;**:P<[0076]圖21B描繪了在移植有HL-60細(xì)胞的小鼠異種移植模型中大麻二酚、氯米芬和大麻二酚+氯米芬對腫瘤體積的影響，其中收集腫瘤，并顯示每組中腫瘤的代表性圖像。[0077]圖22A圖示了大麻二酚和氯米芬對在有和無氯米芬的情況下溫育24小時(shí)的AML原代細(xì)胞的作用。通過XTT減少來測量細(xì)胞活力。[0078]圖22B圖示了大麻二酚和氯米芬對在有和無大麻二酚的情況下溫育24h的CLL原代[0080]在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明是包含大麻二酚(CBD)和至少一種ChEH/AEBS抑制劑的[0081]本發(fā)明提供了包含大麻二酚(CBD)和至少一種萘醌或其衍生物的組合物，其有效[0082]如本文所用的術(shù)語“大麻二酚”(CBD)是指由大麻種產(chǎn)生的植物大麻素。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明中使用的CBD為純化形式。在其他實(shí)施方案中，CBD是植物提取物的組在一些實(shí)施方案中，植物提取物包含至少10%至95%的CBD。在一些實(shí)施方案中，植物提取物包含至少20%至80%的CBD。在一些實(shí)施方案中，植物提取物包含至少30%至70%的CBD。9在一些實(shí)施方案中，植物提取物包含至少40%至60%的CBD。月的美國健康和人類服務(wù)部藥物評價(jià)和研究食品和藥物管理中心的工業(yè)植物藥物產(chǎn)品指導(dǎo)草案指南中定義為：“藥物衍生自一種或多種植物、藻類或微觀真菌。其由植物原料通過不包括源自天然來源的高度純化或化學(xué)修飾的物質(zhì)。[0084]在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)使用合成CBD時(shí)，該術(shù)語旨在包括化合物、代謝物或其衍[0085]在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物包含完全脫羧的CBD的化學(xué)修飾的衍生物，其保留了期望的活性，或更優(yōu)選根據(jù)藥物化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)原理制備的顯示改善的活性的天然衍生物。在一些實(shí)施方案中，完全脫羧的CBD衍生物可以顯示出比原料更低的活性程度，只要它們保持足夠的活性以治療有效或表現(xiàn)出藥學(xué)活性劑期望的性質(zhì)的改善，例如改善的溶解[0086]在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物包含萘醌或其衍生物。萘醌是一類衍生自1,4-萘二酮、5-羥基-1,4-萘二酮、2-甲氧基-1,4-萘醌、五羥基-1,4-萘二酮和2,3,5,7-四羥基-1,4-萘二酮。[0087]如本文所用的術(shù)語“ChEH/AEBS抑制劑”是指如本文所述的化合物，并且如本領(lǐng)域已知的被鑒定為相同含義。[0088]在一些方面，ChEH/AEBS抑制劑包含不同藥理學(xué)類別的天然或合成化合物。膽固醇環(huán)氧化物水解酶(ChEH)催化膽固醇-5,6-環(huán)氧化物(5,6-EC)水合為膽甾烷-3β,5α,6β-三醇。ChEH是被稱為微粒體抗雌激素結(jié)合位點(diǎn)(AEBS)的異源-寡聚體復(fù)合物，其包含3b-羥基生物合成和腫瘤細(xì)胞生長分化、死亡和癌癥進(jìn)展。[0089]ChEH/AEBS抑制劑包含許多化合物，其中特別包括替米利芬(DPPE,N,NO-二乙基氨碘酮；膽固醇生物合成抑制劑例如曲帕拉醇、特比萘芬、U-18666A、Ro48-8071、AY9944、6-酮-5-羥基膽甾烷醇，膽甾烷-3β,5α,6β-三醇(CT)和其他如本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解的那些(參見例如Silvente-PoirotS,PoirotM.Cholesterolepoxidehydrolaseandcancer.Currentopinioninpharmacology.2012;12(6PaillasseMR,SegalaG,PoirotM,Silvente-PoirotS:Identificapharmacologicalcharacterizationofcholesterol-5,6-epoxidehydrolaseasatargetfortamoxifenandAEBSl13525,所有這些文獻(xiàn)均并入本文在此全部引用作為參考)。[0090]在一些方面，特別是關(guān)于用于治療雌激素受體陰性癌的組合物、方法和應(yīng)用的方面，ChEH/AEBS抑制劑包括三苯基乙烯(T髓癌癥或骨髓相關(guān)癌癥。在另一個(gè)實(shí)施方案中，術(shù)語“癌癥”是乳腺癌。在另一個(gè)實(shí)施方案中，血癌是急性早幼粒細(xì)胞白血病(AML)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，血癌是原粒細(xì)胞性白血病。在另一個(gè)實(shí)施方案中，血癌是非霍奇金淋巴瘤。在另一個(gè)實(shí)施方案中，血癌是骨髓瘤。在另[0092]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物用于治療罹患癌癥的受試者。在一些實(shí)施方案中，與單獨(dú)使用每種化合物的組合效果相比，使用本發(fā)明的組合物治療患有癌癥的受試者誘導(dǎo)協(xié)同作用。協(xié)同作用是兩種或更多種化合物的協(xié)調(diào)或相關(guān)作用，因此組合作用大于各化合物單獨(dú)作用的總和。當(dāng)與CBD共同施用時(shí)具有協(xié)同作用的本發(fā)明化合物的非限制性激素受體陰性癌癥中具有協(xié)同作用的本發(fā)明化合物的非限制性實(shí)例包括三苯乙烯(TPE)衍時(shí)的協(xié)同作用包括萘醌衍生物甲萘醌。[0093]在其他實(shí)施方案中，與單獨(dú)施用各化合物的組合的作用相比，用CBD和ChEH/AEBS抑制劑和/或萘醌或其衍生物的組合來治療罹患癌癥的受試者誘導(dǎo)的作用大于相加作用。術(shù)語相加作用是指兩種或多種化合物的組合作用等于各化合物分開作用的總和。[0094]參考實(shí)施例1和圖1-6,無論使用選擇性ChEH/AEBS抑制劑(DPPE)或例如環(huán)B氧化固醇(7-酮膽固醇)或膽固醇生物合成類別的抑制劑(曲帕拉醇),都證實(shí)代表性的ChEH/AEBS抑制劑具有抗癌活性，當(dāng)與CBD聯(lián)合使用時(shí)，表現(xiàn)出真正的協(xié)同作用。[0095]參考實(shí)施例2,代表性的萘醌或其衍生物、甲萘醌也顯示具有抗癌活性，當(dāng)與CBD組[0096]如圖13所示，當(dāng)與CBD共同施用時(shí)具有相加作用的其他化合物的實(shí)例是多柔比星和蒽環(huán)霉素(anthracyline)。[0097]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物在治療癌癥中的協(xié)同作用為通過分別施用相同組合物的化合物治療癌癥時(shí)的相加作用的至少1.1倍高。[0098]在一些實(shí)施方案中，使用本發(fā)明的組合物治療癌癥的協(xié)同作用為通過分別施用相同組合物的化合物治療癌癥時(shí)的相加作用的1.1倍至2倍高、2倍至3倍高、3倍至4倍高、4倍至5倍高。[0099]在一些實(shí)施方案中，使用本發(fā)明的組合物治療癌癥的協(xié)同作用為通過分別施用相同組合物的化合物治療癌癥時(shí)的相加作用的5倍以上高。ChEH/AEBS抑制劑的摩爾比為50:1至1:50(CBD:ChEH/AEBS抑制劑)。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物是CBD和萘醌或其衍生物的組合，其中CBD與萘醌或其衍生物的摩爾比在50:1至1:50之間(CBD:萘醌或其衍生物)。[0101]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物是CBD和ChEH/AEBS抑制劑的組合，其中CBD與[0102]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物是CBD和萘醌或其衍生物的組合，其中CBD與11萘醌或其衍生物的摩爾比為30:1至1:30(CBD:萘醌或其衍生物)。[0104]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物是CBD和萘醌或其衍生物的組合，其中CBD與萘醌或其衍生物的摩爾比為10:1至1:10(CBD:萘醌或其衍生物)。萘醌的摩爾比為5:1至1:5(CBD:ChEH/AEBS抑制劑)。[0106]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物是CBD和萘醌或其衍生物的組合，其中CBD與萘醌或其衍生物的摩爾比為5:1至1:5(CBD:萘醌或其衍生物)[0107]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物是CBD和ChEH/AEBS抑制劑的組合，其中CBD與[0108]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物是CBD和萘醌或其衍生物的組合，其中CBD與萘醌或其衍生物的摩爾比為2:1至1:2(CBD:萘醌或其衍生物)。[0109]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物是CBD和ChEH/AEBS抑制劑的組合，其中CBD與[0110]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物是CBD和萘醌或其衍生物的組合，其中CBD與萘醌或其衍生物的摩爾比為1:1(CBD:萘醌或其衍生物)。[0111]在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物被配制為藥物組合物，其還包含一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。[0112]在一些實(shí)施方案中，本文使用的術(shù)語“治療”是指對哺乳動(dòng)物、特別是人的醫(yī)學(xué)病癥的任何應(yīng)答或預(yù)測，并且包括但不限于：預(yù)防受試者發(fā)生醫(yī)學(xué)病癥，所述受試者可能或不可能易患有該病癥但尚未診斷出該病癥，因此該治療構(gòu)成對該病癥的預(yù)防性治療；抑制醫(yī)學(xué)病癥的消退或減輕醫(yī)療狀況的癥狀。[0114]在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文使用的術(shù)語“施用”包括通過任何適當(dāng)?shù)姆椒▽⒔M合物或一種或多種藥物活性成分遞送至受試者，所述方法用于將組合物或其活性成分或其他藥學(xué)上可接受的有效成分遞送至受試者。在另一個(gè)實(shí)施方案中，施用方法可根據(jù)各種因素而變化，例如藥物組合物的組分或藥物活性或惰性成分的性質(zhì)、潛在或?qū)嶋H疾病的部位、受試者的年齡和身體狀況。向受試者施用本發(fā)明組合物的方法的一些非限制性例子包括：口服、[0115]如本文所用，“治療有效量”是指將一定量的本發(fā)明組合物施用于有需要的受試者，其在有需要的受試者中實(shí)現(xiàn)癌癥的預(yù)防、[0116]在一些實(shí)施方案中，施用于受試者的組合物中CBD的量為0.1mg/kg(體重)/天至50mg/kg(體重)/天。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物中CBD的量為10mg/kg(體重)/天至1000mg/kg(體重)/天。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物中CB500mg/kg(體重)/天。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明組合物中CBD的量為500mg/kg劑的量或萘醌或其衍生物的量為50mg/kg(體重)/天至500mg/kg(體重)/天。在一些實(shí)施方實(shí)施例生物學(xué)和重組DNA技術(shù)。這些技術(shù)在文獻(xiàn)中有充分的解釋。參見，例如，"MolecularCloning:AlaboratoryManual"Sambrook等人，(1989);"MolecularBiology"第I-III卷Ausubel,R.M.編撰(1994);Ausubel等人，"CurrentHarborLaboratoryPress,NewYork(1998);在美國專利號4,666,828;4,683,202;4,801,Immunology"第I-III卷ColiganJ.E.編撰.(1994);Stites等人(編撰),"BasicandClinicalImmunology"(第八版),Appleton&Lange,Norwalk,CT(1994);(編撰),"SelectedMethods932;3,839,153;3,850,752;3,850,578;3,853,987;3,867,517;3,879,262935,074;3,984,533;3,996,345;4,034,074;4,098,876;4,879,219;5,011,771和5,281,521;"0ligonucleotideSynthesis"Gait,M.J.編撰.(1984);"NucleicAcidHybridization"Hames,B.D.和HigginsS.J.編撰(1985);"TranscriptionandR.I.編撰(1986);"ImmobilizedCellsandEnzymes"IRLPress,(1986);"APracticalGuidetoMolecularCloning"Perbal,B.,(1984)和"MethodsinEnzymology"第1-317PurificationandCharacter(1996);所有這些都通過引用并入。本文檔中提供了其他一般參考。[0122]材料和方法[0123]試劑：試劑購自商業(yè)供應(yīng)商，溶于100%DMSO中并儲存于-20℃。最終的DMSO濃度為0.1%。在PBS中以1mg/ml的濃度制備吖啶橙/溴化乙錠染色劑。XTT和所有其他化學(xué)品均購自Sigma(密蘇里州圣路易斯)。對照培養(yǎng)物含有本身不起作用的溶媒。系在補(bǔ)充有10%(v/v)熱滅活胎牛血清、2mML-谷氨酰胺、100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的RPMI-1640中培養(yǎng)。將MCF-7、乳腺癌和A-172、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系在補(bǔ)充有10%(v/v)養(yǎng)物保持在37℃、含有5%CO2的潮濕空氣中，并且每2-3天通過轉(zhuǎn)移至新鮮培養(yǎng)基保持在指數(shù)期。實(shí)驗(yàn)在無血清培養(yǎng)基和5%或10%FCS培養(yǎng)基中進(jìn)行。在光學(xué)顯微鏡下使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，使用臺盼蘭染料排除法[17]。[0125]細(xì)胞活力的測定：通過其(2,3-[-二-2-甲氧基-4-硝基-5-磺基苯基]-2H-四唑-5-甲?；桨?2,3[-bis-2-methoxy-4-nitro-5-sulphophenyl]-2H-tetrazolium-5-1mg.mlXTT溶液(含0.2mM的吩嗪硫酸甲酯(PMS)),將細(xì)胞再溫育1h。使用ELISA讀數(shù)器在450nm處測量OD值，參考波長為650nm,數(shù)據(jù)表示為三次平行測定的平均百分比，歸一化到未處理的溶媒。[0126]細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)定量：為了測定細(xì)胞凋亡，收獲細(xì)胞(650g,7min),并用終濃度為0.05mg/ml的吖啶橙/溴化乙錠染色。該方法可區(qū)分活細(xì)胞、壞死細(xì)胞和凋亡細(xì)胞(圖11)。如果細(xì)胞核呈現(xiàn)正常形態(tài)且為綠色，則將細(xì)胞評分為活的。表現(xiàn)出正常形態(tài)和橙色的細(xì)胞被標(biāo)示為壞死。如果它們的細(xì)胞核表現(xiàn)出染色質(zhì)的凝縮和/或核碎裂，則細(xì)胞被評分為凋亡。在熒光顯微鏡下計(jì)數(shù)至少100個(gè)細(xì)胞并計(jì)算受影響細(xì)胞的百分比。20μM氯米芬(CL)處理指定的時(shí)間段。將細(xì)胞用冰冷的PBS洗滌兩次，并在冰上在RIPA緩沖液心后，將含有細(xì)胞可溶性級分的核后上清液載至12%SDS凝膠上。電泳后，將凝膠印跡至PVDF膜(Bio-Rad,Hercules,CA)上，用5%(w/v)牛奶在4℃溫度封閉過夜，在Tris-緩沖鹽水Tween-20(TBST)中短暫洗滌，然后在4℃用抗小鼠人類抗MC1-1和鈣網(wǎng)蛋白(CRN)一抗探測過夜。根據(jù)制造商的說明，用綴合辣根過氧化物酶的抗小鼠IgG(JacksonImmunoresearch,Avondale,PA)檢測一抗結(jié)合，并通過增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光(ECL)(BiologicalIndustries,Israel)使其可見。針對MC1-1和鈣網(wǎng)蛋白(CRN)的抗體購自美國加利福尼亞州圣克魯斯市。[0128]CBD和CL的體內(nèi)抗腫瘤效力：將NOD/SCID小鼠培育并飼養(yǎng)在以色列Negev的Ben-Gurion大學(xué)的動(dòng)物設(shè)施中。所有動(dòng)物均在7-8周齡使用。為了誘導(dǎo)腫瘤，用2.7Gy的X射線照射小鼠2分鐘。接下來的5小時(shí)，將小鼠在右側(cè)面注射100萬個(gè)活HL-60細(xì)胞。監(jiān)測小鼠的腫瘤發(fā)生。在14天內(nèi)測量腫瘤，并且如(d2XD)/2(其中d是腫瘤的最短直徑以mm表示)計(jì)算其體積(mm3)。一天后，將小鼠分成四組(6只小鼠/組):溶媒組(veh),大麻二注射10mgCL/kg,且CBD+CL組注射5mgCBD+10mgCL(溶于0.1ml補(bǔ)充有5mg/ml脫脂和透析的牛血清白蛋白的無菌PBS中)或其溶媒。注射每天重復(fù)一次，每周5天，每周檢查兩次腫瘤體積，直到溶媒消逝并且將剩余的動(dòng)物處死。[0129]數(shù)據(jù)表達(dá)和統(tǒng)計(jì)分析：活力實(shí)驗(yàn)一式三份進(jìn)行，并且實(shí)驗(yàn)重復(fù)至少兩次或三次。進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析時(shí)，通過學(xué)生t檢驗(yàn)進(jìn)行評估。一些數(shù)據(jù)顯示在所提供的圖中，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異*p<0.05,**p<0.01。[0131]大麻二酚和ChEH/AEBS抑制劑的組合導(dǎo)致癌細(xì)胞活力的降低和MCF-7細(xì)胞系活力的效應(yīng)。為此，將腫瘤細(xì)胞在補(bǔ)充有10%FCS的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并且暴露的大麻二酚達(dá)48h處理導(dǎo)致存活細(xì)胞數(shù)量顯著減少。細(xì)胞活力的降低是劑量響應(yīng)性的，即使[0134]類似地，在雌激素受體缺陷型CCRF-CEM細(xì)胞系中，當(dāng)與ChEH/AEBS抑制劑組合時(shí)，暴露于濃度為1μM或更高的大麻二酚的組合的結(jié)果顯示存活細(xì)胞的數(shù)量顯著減少。細(xì)胞活力的降低是劑量響應(yīng)性的，即使在各自非常低的濃度1μM或5μM下也對細(xì)胞活力降低具有極大影響。劑(DPPE)還是例如環(huán)B氧化固醇(7-酮膽固醇))表現(xiàn)出強(qiáng)效的抗癌活性。[0136]為了進(jìn)一步闡述CBD與使用廣泛的ChEH/AEBS抑制劑的組合療法應(yīng)用是有效的，對6)。在這種情況下，選擇和使用濃度為30、60、100和200μM的膽固醇生物合成類抑制劑的ChEH/AEBS抑制劑(曲帕拉醇)。盡管評估了較高濃度的曲帕拉醇，但存活細(xì)胞的數(shù)量顯著減非陽離子抗雌激素的組合治療，其與CBD的組合不提供額外益處。[0138]因此，當(dāng)作為與CBD的組合療法提供時(shí)，代表性類別的ChEH/AEBS抑制劑表現(xiàn)出顯著的抗癌活性。[0140]大麻二酚、TPEs(氯米芬和他莫昔芬)和甲萘醌導(dǎo)致細(xì)胞活力下降[0141]檢測大麻二酚-暴露對體外HL-60和CCRF-CEM、A-172和MCF-7細(xì)胞系活力的影響。為此，將腫瘤細(xì)胞在補(bǔ)充有10%FCS的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并暴露于在含10%或5%FCS的培養(yǎng)基中的各種濃度的大麻二酚(5、10、15、20和30μM)達(dá)24h和48h和在無血清培養(yǎng)基中的0.01、48h暴露下細(xì)胞生存力的降低都是劑量響應(yīng)(圖9A,9B,9C和9D)。即使在無血清條件下以非養(yǎng)基中獲得16μM的IC??值。隨著培養(yǎng)基中血清濃度(5%FCS)的降低，IC??也在24h內(nèi)獲得。在無血清培養(yǎng)基中，24h的IC??為0.26μM。在1024h。細(xì)胞活力降低的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性為P<0.05。[0142]還檢測了氯米芬和他莫昔芬對HL-60、CCRF-CEM、A-172和MCF-7細(xì)胞系的作用。為此，使用在5%血清補(bǔ)充培養(yǎng)基中的氯米芬觀察細(xì)胞活力的劑量依賴性降低，對于HL-60、[0144]CBD與TPE和萘醌的協(xié)同作用萘醌時(shí)，甲萘醌和CBD顯示細(xì)胞活力的降低大于相加作用(圖12C)。常規(guī)化療藥蒽環(huán)霉素、多柔比星在減少HL-60細(xì)胞活力方面與CBD具有相加作用(圖13)。引起CCRF-CEM細(xì)胞活力的協(xié)同降低。這一發(fā)現(xiàn)支持大麻二酚與TPE相互作用而不依賴于ER參與的減少細(xì)胞活力機(jī)制的觀點(diǎn)。發(fā)現(xiàn)最有效的組合為10μMCBD和10μM他莫昔芬，其協(xié)同降低MCF-7細(xì)胞活力(圖15)。還發(fā)現(xiàn)在5%血清培養(yǎng)基中暴露于CBD和氯米芬48小時(shí)后協(xié)同降低了人類膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系、A-172細(xì)胞活力(圖16)。[0147]為了評估使用CBD和他莫昔芬的組合在MCF-7的細(xì)胞活力中ER參與的作用，在藥物治療前30分鐘加入β雌二醇以阻斷ER。有趣的是，β雌二醇治療組和未治療組之間的細(xì)胞活力沒有顯著差異(圖15A和15B)。因此，這些結(jié)果強(qiáng)烈表明這些藥物在降低細(xì)胞活力方面獨(dú)立于ER起作用。[0149]核形態(tài)變化是細(xì)胞凋亡的特征胞凋亡的劑量和時(shí)間依賴性誘導(dǎo)(圖17A和圖18A)。CBD與TPE的組合在凋亡的誘導(dǎo)中具有協(xié)同作用，而與甲萘醌，CBD在誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞系的細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)中顯示出超過相加作用(圖[0153]Mcl-1的過度表達(dá)與白血病細(xì)胞的存活相關(guān)；CBD下調(diào)CCRF-CEM細(xì)胞中的Mcl-1表[0154]實(shí)施例6[0155]在移植了HL-60細(xì)胞的小鼠異種移植模型中腫瘤生長的抑制[0156]用5mg/kgCBD、10mg/k