2025年水生植物疫病檢疫員技能考核試卷及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共30分）1.下列不屬于水生植物檢疫性有害生物的是：A.水葫蘆細(xì)菌性萎蔫病菌（Ralstoniasolanacearum）B.眼子菜霜霉（Plasmoparapotamogetonis）C.普通小球藻（Chlorellavulgaris）D.茨藻線蟲（Ditylenchuszannichelliae）2.水生植物調(diào)運(yùn)檢疫中，對(duì)批量500株以下的浮葉植物（如睡蓮）采樣比例應(yīng)為：A.5%B.10%C.15%D.20%3.采用PCR技術(shù)檢測(cè)水生植物病毒時(shí)，引物設(shè)計(jì)的關(guān)鍵參數(shù)不包括：A.引物長(zhǎng)度B.熔解溫度（Tm值）C.引物GC含量D.引物顏色4.以下關(guān)于水生植物疫霉菌（Phytophthora）的描述，錯(cuò)誤的是：A.屬于卵菌門B.可通過游動(dòng)孢子在水中傳播C.感染后植株葉片會(huì)出現(xiàn)白色粉狀物D.高溫高濕環(huán)境易爆發(fā)5.依據(jù)《水生植物檢疫技術(shù)規(guī)程》（NY/T4123-2023），對(duì)帶根水生植物進(jìn)行藥劑處理時(shí)，常用的浸泡藥劑為：A.75%酒精B.2%次氯酸鈉C.10%硫酸銅D.5%高錳酸鉀6.某批次水鱉（Hydrocharisdubia）葉片出現(xiàn)水漬狀病斑，鏡檢發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性桿菌，最可能的病原是：A.假單胞菌屬（Pseudomonas）B.鐮刀菌屬（Fusarium）C.鏈格孢屬（Alternaria）D.疫霉菌屬（Phytophthora）7.水生植物產(chǎn)地檢疫中，對(duì)沉水植物（如苦草）的疫情監(jiān)測(cè)周期應(yīng)為：A.每10天一次B.每15天一次C.每月一次D.每季度一次8.下列不屬于水生植物病毒病典型癥狀的是：A.葉片黃化斑駁B.植株矮化C.莖稈腐爛D.花葉褪綠9.依據(jù)《進(jìn)出境水生植物檢疫管理辦法》，進(jìn)境水生植物隔離檢疫期最短為：A.7天B.15天C.30天D.45天10.檢測(cè)水生植物線蟲時(shí)，常用的分離方法是：A.貝爾曼漏斗法B.血球計(jì)數(shù)板法C.蔗糖離心法D.濾膜過濾法11.某濕地引進(jìn)的再力花（Thaliadealbata）出現(xiàn)全株枯萎，剖莖可見維管束變褐，最可能的病害是：A.細(xì)菌性枯萎病B.霜霉病C.銹病D.根腐病12.水生植物檢疫中，對(duì)疑似病毒病樣品的保存條件應(yīng)為：A.4℃冷藏B.-20℃冷凍C.常溫干燥D.37℃恒溫13.以下關(guān)于水生植物檢疫處理的說法，正確的是：A.感染根腐病的植株可通過修剪病部后直接調(diào)運(yùn)B.帶疫土壤需用121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘C.藥劑浸泡時(shí)間越長(zhǎng)，處理效果越好D.植物檢疫證書有效期為30天14.下列屬于非限定的有害生物的是：A.列入《中華人民共和國(guó)進(jìn)境植物檢疫性有害生物名錄》的物種B.本地常見但未造成經(jīng)濟(jì)損失的藻類C.國(guó)際植物保護(hù)公約（IPPC）規(guī)定的A1類有害生物D.導(dǎo)致水生植物大面積死亡的外來真菌15.水生植物檢疫中，對(duì)浮水植物（如浮萍）的抽樣應(yīng)優(yōu)先選擇：A.邊緣區(qū)域植株B.中心區(qū)域植株C.隨機(jī)混合取樣D.病健交界植株二、判斷題（每題1分，共10分）1.水生植物檢疫僅針對(duì)活體植株，干燥標(biāo)本無需檢疫。（）2.疫霉菌的厚垣孢子可在土壤中存活5年以上。（）3.水生植物病毒可通過昆蟲介體（如葉蟬）傳播。（）4.采樣時(shí)，同一批次不同品種的水生植物可混合裝袋。（）5.硫酸銅溶液處理水生植物時(shí)，濃度越高防效越好。（）6.水生植物產(chǎn)地檢疫需在生長(zhǎng)周期內(nèi)至少開展2次現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查。（）7.線蟲分離時(shí)，貝爾曼漏斗法適用于活動(dòng)性強(qiáng)的幼蟲。（）8.植物檢疫證書需由省級(jí)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門簽發(fā)。（）9.感染細(xì)菌性病害的植株，其病部溢出液經(jīng)革蘭氏染色呈紫色。（）10.水生植物調(diào)運(yùn)時(shí)，檢疫處理記錄需保存至少2年。（）三、簡(jiǎn)答題（每題8分，共40分）1.簡(jiǎn)述水生植物疫霉菌（Phytophthora）的檢測(cè)流程。2.列舉3種水生植物細(xì)菌性病害的典型癥狀及對(duì)應(yīng)的病原屬。3.說明水生植物產(chǎn)地檢疫與調(diào)運(yùn)檢疫的主要區(qū)別。4.當(dāng)發(fā)現(xiàn)水生植物疑似感染檢疫性病毒病時(shí)，應(yīng)采取哪些應(yīng)急處置措施？5.簡(jiǎn)述PCR檢測(cè)水生植物病毒的操作要點(diǎn)及質(zhì)量控制措施。四、案例分析題（每題10分，共20分）案例1：某花卉公司從江蘇調(diào)運(yùn)一批荷花（Nelumbonucifera）至廣東，檢疫員現(xiàn)場(chǎng)查驗(yàn)發(fā)現(xiàn)部分葉片出現(xiàn)圓形褐色病斑，邊緣有黃色暈圈，病斑上可見黑色小點(diǎn)。經(jīng)鏡檢，黑色小點(diǎn)為分生孢子器，孢子單胞無色，橢圓形。問題：（1）推測(cè)可能的病原種類；（2）提出下一步檢測(cè)及處理建議。案例2：某濕地引進(jìn)的水盾草（Cabombacaroliniana）種植1個(gè)月后，出現(xiàn)植株倒伏、莖基部軟腐、有惡臭氣味，剖莖可見組織解離，顯微鏡下觀察到大量短桿狀細(xì)菌。問題：（1）判斷病害類型及可能的病原；（2）制定該批次水盾草的檢疫處理方案。答案一、單項(xiàng)選擇題1.C2.B3.D4.C5.B6.A7.B8.C9.C10.A11.A12.A13.B14.B15.C二、判斷題1.×（干燥標(biāo)本若可能攜帶病原仍需檢疫）2.√3.√4.×（需分品種單獨(dú)包裝）5.×（濃度過高會(huì)導(dǎo)致藥害）6.√7.√8.×（由縣級(jí)以上農(nóng)業(yè)農(nóng)村部門簽發(fā)）9.×（革蘭氏陰性菌呈紅色）10.√三、簡(jiǎn)答題1.檢測(cè)流程：（1）樣品采集：選取病健交界組織，無菌操作取樣；（2）組織分離：用選擇性培養(yǎng)基（如PARP培養(yǎng)基）分離病原菌；（3）形態(tài)鑒定：觀察菌絲形態(tài)、孢子囊及卵孢子特征；（4）分子檢測(cè)：提取DNA，擴(kuò)增ITS或COI基因，測(cè)序比對(duì)；（5）致病性測(cè)定：回接健康植株，驗(yàn)證是否致病。2.（1）細(xì)菌性葉斑病：葉片出現(xiàn)水漬狀小斑，擴(kuò)大后褐色，邊緣暈圈，病原為假單胞菌屬（Pseudomonas）；（2）細(xì)菌性軟腐?。呵o基部軟腐、惡臭，組織解離，病原為歐文氏菌屬（Erwinia）；（3）細(xì)菌性枯萎病：維管束褐變，全株萎蔫，病原為拉爾斯通氏菌屬（Ralstonia）。3.主要區(qū)別：（1）對(duì)象不同：產(chǎn)地檢疫針對(duì)種植期間的水生植物，調(diào)運(yùn)檢疫針對(duì)流通中的植株；（2）目的不同：產(chǎn)地檢疫預(yù)防疫情發(fā)生，調(diào)運(yùn)檢疫阻斷疫情傳播；（3）方法不同：產(chǎn)地檢疫需定期田間監(jiān)測(cè)，調(diào)運(yùn)檢疫側(cè)重現(xiàn)場(chǎng)查驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)；（4）證書效力不同：產(chǎn)地檢疫合格出具產(chǎn)地檢疫證明，調(diào)運(yùn)檢疫合格出具植物檢疫證書。4.應(yīng)急處置措施：（1）立即隔離疑似植株，設(shè)置警示標(biāo)識(shí)；（2）采樣封存，送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行PCR、ELISA等檢測(cè)確認(rèn)；（3）對(duì)同批次植物暫停調(diào)運(yùn)，限制移動(dòng)范圍；（4）消毒處理污染區(qū)域（如用2%次氯酸鈉噴灑）；（5）向上級(jí)檢疫機(jī)構(gòu)報(bào)告疫情，啟動(dòng)應(yīng)急預(yù)案；（6）若確診，對(duì)感染植株進(jìn)行銷毀（如深埋或焚燒），對(duì)未感染植株進(jìn)行藥劑處理（如病毒A噴霧）。5.操作要點(diǎn)：（1）樣品處理：取0.1g葉片，加入裂解液研磨，提取總RNA；（2）反轉(zhuǎn)錄：使用反轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA；（3）PCR擴(kuò)增：加入特異性引物、Taq酶、dNTP，設(shè)置反應(yīng)程序（95℃預(yù)變性5min，95℃30s，55℃30s，72℃30s，35循環(huán)）；（4）電泳檢測(cè)：擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳，觀察目標(biāo)條帶。質(zhì)量控制措施：設(shè)置陽性對(duì)照（已知病毒樣品）、陰性對(duì)照（無菌水）、空白對(duì)照（健康植物樣品），確保無交叉污染；定期校準(zhǔn)儀器（如PCR儀、電泳儀）；使用標(biāo)準(zhǔn)化試劑，記錄實(shí)驗(yàn)條件。四、案例分析題案例1：（1）病原推測(cè)為荷花褐斑病菌（如柱盤孢屬，Cylindrocladium），分生孢子器及單胞無色孢子符合該屬特征；（2）檢測(cè)建議：進(jìn)一步進(jìn)行病原菌分離培養(yǎng)，觀察菌落形態(tài)，提取DNA進(jìn)行ITS測(cè)序確認(rèn)；處理建議：若確診為檢疫性有害生物，對(duì)感染植株進(jìn)行銷毀（深埋或焚燒），未感染植株用50%多菌靈500倍液浸泡30分鐘，運(yùn)輸工具用1%次氯酸鈉消毒，后續(xù)加強(qiáng)田間監(jiān)測(cè)。案例2：（1）病害類型為細(xì)菌性軟腐病，病原可能為胡蘿卜軟腐歐文氏菌（Erw