生理學(xué)血液循環(huán)實(shí)驗(yàn)操作及習(xí)題一、經(jīng)典血液循環(huán)實(shí)驗(yàn)操作（一）蛙心灌流實(shí)驗(yàn)（斯氏法）實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察蛙心節(jié)律性活動，分析離子、藥物、溫度等因素對心肌生理特性（自律性、收縮性）的影響，理解心肌活動的調(diào)控機(jī)制。實(shí)驗(yàn)原理蛙心離體后可在任氏液中維持節(jié)律性收縮，心肌活動受離子濃度、神經(jīng)遞質(zhì)、溫度等因素調(diào)控：如Ca2?促進(jìn)心肌收縮（過量可致“鈣僵”），K?過高抑制心??；腎上腺素增強(qiáng)心肌收縮與心率，乙酰膽堿則起抑制作用。實(shí)驗(yàn)材料蟾蜍、蛙類手術(shù)器械、斯氏蛙心套管、灌流液（任氏液、高Ca2?/K?液、腎上腺素/乙酰膽堿溶液）、張力換能器、生物信號采集系統(tǒng)。操作步驟1.標(biāo)本制備：破壞蟾蜍腦脊髓，仰臥固定。剪開胸部暴露心臟，在動脈圓錐下方剪口，將斯氏套管插入心室（液面隨心跳升降為成功標(biāo)志），結(jié)扎后游離心臟。2.記錄裝置連接：蛙心夾夾住心尖，通過絲線連張力換能器，采集心搏曲線（幅度、頻率）。3.因素干預(yù)：依次更換灌流液（任氏液→高Ca2?液→沖洗→高K?液→沖洗→腎上腺素→沖洗→乙酰膽堿），觀察心搏變化并記錄；還可通過溫水/冰水浴觀察溫度影響。結(jié)果分析與注意事項(xiàng)結(jié)果：高Ca2?使收縮增強(qiáng)（鈣僵），高K?使心率減慢、收縮減弱；腎上腺素加快心率、增強(qiáng)收縮，乙酰膽堿反之；溫度升高心率加快，降低則減慢。注意：腦脊髓破壞要徹底，套管插入勿損傷心肌，更換灌流液需排盡氣泡并充分沖洗。（二）家兔動脈血壓直接測量實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆談用}血壓直接測量方法，分析神經(jīng)（減壓/迷走神經(jīng)）、體液（腎上腺素/去甲腎上腺素）、機(jī)械刺激（夾閉頸總動脈）對血壓的影響機(jī)制。實(shí)驗(yàn)原理動脈血壓由心臟射血和外周阻力形成。減壓神經(jīng)為壓力感受性反射的傳入神經(jīng)，迷走神經(jīng)直接抑制心臟；腎上腺素興奮α/β受體升高血壓，去甲腎上腺素主要興奮α受體升高舒張壓。實(shí)驗(yàn)材料家兔、手術(shù)器械、動脈套管、壓力換能器、20%烏拉坦、肝素、腎上腺素/去甲腎上腺素。操作步驟1.麻醉固定：耳緣靜脈注射烏拉坦（5ml/kg），仰臥固定后分離頸部血管神經(jīng)。2.動脈插管：分離頸總動脈，遠(yuǎn)心端結(jié)扎，近心端夾閉后剪口，插入充有肝素的動脈套管，連接換能器記錄血壓波形（收縮壓、舒張壓、脈壓）。3.因素干預(yù)：夾閉對側(cè)頸總動脈（10~20s）、電刺激減壓/迷走神經(jīng)、靜脈注射腎上腺素/去甲腎上腺素，觀察血壓變化。結(jié)果分析與注意事項(xiàng)結(jié)果：夾閉頸總動脈→血壓升高（減壓反射減弱）；刺激減壓神經(jīng)→血壓降低（傳入沖動增加）；刺激迷走神經(jīng)→血壓降低（心率減慢）；腎上腺素使收縮壓升高更明顯，去甲腎上腺素使舒張壓升高更明顯。注意：麻醉劑量適中，動脈插管前充肝素防凝血，神經(jīng)刺激避免短路。（三）蟾蜍腸系膜微循環(huán)觀察實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察微循環(huán)血流狀態(tài)與血管類型（微動脈、毛細(xì)血管、微靜脈），分析代謝、藥物對微循環(huán)的調(diào)節(jié)作用。實(shí)驗(yàn)原理微循環(huán)是物質(zhì)交換的場所，微動脈受神經(jīng)體液調(diào)節(jié)，局部代謝產(chǎn)物（如CO?、H?）或藥物（腎上腺素、組胺）可改變血管舒縮與血流量。實(shí)驗(yàn)材料蟾蜍、顯微鏡、恒溫灌流裝置、腎上腺素/組胺溶液。操作步驟1.標(biāo)本制備：破壞蟾蜍腦脊髓，拉出小腸袢，將腸系膜展開鋪于載玻片（保持濕潤）。2.顯微鏡觀察：低倍鏡下識別血管：微動脈（管徑細(xì)、血流快、有搏動）、毛細(xì)血管（單行紅細(xì)胞、血流慢）、微靜脈（管徑粗、血流慢、無搏動）。3.因素干預(yù)：滴加溫?zé)?冰生理鹽水觀察代謝影響，滴加腎上腺素/組胺觀察藥物作用。結(jié)果分析與注意事項(xiàng)結(jié)果：溫?zé)岽碳な刮用}舒張（代謝產(chǎn)物增多），腎上腺素收縮微動脈（α受體興奮），組胺舒張血管（通透性增加）。注意：腸系膜需持續(xù)保濕，操作輕柔避免牽拉，顯微鏡調(diào)焦緩慢。二、習(xí)題解析（一）選擇題（單選）1.斯氏蛙心灌流中，高鉀任氏液灌流后，蛙心活動變化為：A.心率加快，收縮增強(qiáng)B.心率減慢，收縮減弱C.心率先快后慢，收縮先強(qiáng)后弱D.心率不變，收縮增強(qiáng)答案：B解析：高K?抑制Ca2?內(nèi)流（興奮-收縮耦聯(lián)關(guān)鍵），同時(shí)減慢自律細(xì)胞4期去極化，故心率減慢、收縮減弱。2.家兔夾閉頸總動脈后，血壓變化的機(jī)制是：A.頸動脈竇壓力感受器傳入沖動減少B.頸動脈竇壓力感受器傳入沖動增加C.頸動脈體化學(xué)感受器傳入沖動增加D.迷走神經(jīng)興奮答案：A解析：夾閉頸總動脈使頸動脈竇壓力降低，減壓反射減弱，交感神經(jīng)興奮增強(qiáng)，血壓升高。（二）簡答題1.簡述腎上腺素、乙酰膽堿對蛙心活動的影響及機(jī)制。答案：腎上腺素：心率加快、收縮增強(qiáng)。機(jī)制為與心肌β?受體結(jié)合，激活腺苷酸環(huán)化酶，cAMP增多，Ca2?內(nèi)流增加，加速興奮-收縮耦聯(lián)，同時(shí)提高自律細(xì)胞4期去極化速度。乙酰膽堿：心率減慢、收縮減弱。機(jī)制為與心肌M受體結(jié)合，抑制腺苷酸環(huán)化酶，cAMP減少，K?外流增加（超極化），減慢4期去極化；同時(shí)抑制Ca2?內(nèi)流，減弱收縮。2.刺激減壓神經(jīng)與迷走神經(jīng)對血壓的影響有何不同？答案：刺激減壓神經(jīng)：血壓降低（反射性調(diào)節(jié)）。減壓神經(jīng)為壓力感受性反射的傳入神經(jīng)，電刺激使傳入沖動增加，中樞整合后心迷走興奮、交感抑制，心輸出量與外周阻力降低。刺激迷走神經(jīng)：血壓降低（直接作用心臟）。迷走神經(jīng)為心迷走神經(jīng)的傳出神經(jīng)