溶瘤病毒介導(dǎo)的腫瘤免疫原性死亡機(jī)制演講人2026-01-08

04/免疫原性死亡的核心特征與信號(hào)通路03/溶瘤病毒與腫瘤細(xì)胞的相互作用基礎(chǔ)02/引言：溶瘤病毒與腫瘤免疫治療的交匯01/溶瘤病毒介導(dǎo)的腫瘤免疫原性死亡機(jī)制06/影響溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD效率的關(guān)鍵因素05/溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD的具體機(jī)制08/結(jié)論：溶瘤病毒介導(dǎo)ICD機(jī)制的核心價(jià)值與未來展望07/溶瘤病毒介導(dǎo)ICD的臨床轉(zhuǎn)化與挑戰(zhàn)目錄01ONE溶瘤病毒介導(dǎo)的腫瘤免疫原性死亡機(jī)制02ONE引言：溶瘤病毒與腫瘤免疫治療的交匯

引言：溶瘤病毒與腫瘤免疫治療的交匯在腫瘤治療領(lǐng)域，傳統(tǒng)手術(shù)、放療、化療雖已取得一定成效，但“轉(zhuǎn)移”“復(fù)發(fā)”“耐藥”仍是懸在患者頭頂?shù)倪_(dá)摩克利斯之劍。近年來，免疫治療的崛起為腫瘤治療帶來了革命性突破，其中，以免疫原性死亡（ImmunogenicCellDeath,ICD）為核心的策略，因能打破腫瘤免疫微環(huán)境的“冷”狀態(tài)，激活機(jī)體長期抗腫瘤免疫記憶，成為研究熱點(diǎn)。與此同時(shí)，溶瘤病毒（OncolyticVirus,OV）作為一種“生物導(dǎo)彈”，憑借其天然腫瘤選擇性、自我復(fù)制放大效應(yīng)及免疫激活特性，逐漸從實(shí)驗(yàn)室走向臨床。而溶瘤病毒與ICD的相遇，并非偶然——病毒感染導(dǎo)致的腫瘤細(xì)胞裂解，本質(zhì)上是向機(jī)體發(fā)出的“危險(xiǎn)信號(hào)”，這種信號(hào)正是ICD的核心。

引言：溶瘤病毒與腫瘤免疫治療的交匯作為長期從事腫瘤病毒免疫治療的科研工作者，我深知這一機(jī)制的研究價(jià)值：它不僅是溶瘤病毒發(fā)揮“直接溶瘤+免疫激活”雙重效力的關(guān)鍵，更是連接“局部治療”與“系統(tǒng)性免疫”的橋梁。本文將從溶瘤病毒與腫瘤細(xì)胞的相互作用基礎(chǔ)出發(fā)，系統(tǒng)梳理ICD的核心特征、信號(hào)通路，深入解析溶瘤病毒如何通過多種途徑誘導(dǎo)ICD，闡述ICD介導(dǎo)的抗腫瘤免疫應(yīng)答級(jí)聯(lián)效應(yīng)，并探討影響這一機(jī)制效率的關(guān)鍵因素與臨床轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)。希望通過對(duì)這一機(jī)制的全面剖析，為溶瘤病毒的臨床應(yīng)用提供更精準(zhǔn)的理論指導(dǎo)，也為腫瘤免疫治療的發(fā)展開辟新思路。03ONE溶瘤病毒與腫瘤細(xì)胞的相互作用基礎(chǔ)

溶瘤病毒與腫瘤細(xì)胞的相互作用基礎(chǔ)溶瘤病毒是一類天然或經(jīng)過基因改造后，能在腫瘤細(xì)胞中選擇性復(fù)制、裂解腫瘤細(xì)胞，而對(duì)正常細(xì)胞影響較小的病毒。其“靶向性”與“免疫原性”兩大特性，使其成為誘導(dǎo)ICD的理想工具。要理解溶瘤病毒如何介導(dǎo)ICD，首先需明確其與腫瘤細(xì)胞的相互作用機(jī)制，這是后續(xù)所有效應(yīng)的生物學(xué)基礎(chǔ)。

1溶瘤病毒的腫瘤選擇性感染機(jī)制溶瘤病毒的腫瘤選擇性是其安全應(yīng)用的前提，這一特性主要通過以下途徑實(shí)現(xiàn)：

1溶瘤病毒的腫瘤選擇性感染機(jī)制1.1腫瘤細(xì)胞特有的受體表達(dá)差異不同血清型的溶瘤病毒通過識(shí)別細(xì)胞表面的特異性受體進(jìn)入細(xì)胞。例如，腺病毒（如Ad5）通過柯薩奇病毒-腺病毒受體（CAR）進(jìn)入細(xì)胞，而多數(shù)腫瘤細(xì)胞因表觀遺傳修飾導(dǎo)致CAR表達(dá)下調(diào)，這正是傳統(tǒng)腺病毒在臨床中療效有限的原因。為此，研究者通過基因改造構(gòu)建了CAR非依賴型腺病毒，如Ad5/3-Δ24，其纖維knob結(jié)構(gòu)域替換為腺病毒3型，可通過腫瘤高表達(dá)的CD46受體進(jìn)入細(xì)胞；單純皰疹病毒（HSV-1）則通過結(jié)合腫瘤細(xì)胞高表達(dá)的神經(jīng)生長因子受體（NGFR）或硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）進(jìn)入細(xì)胞；麻疹病毒（MV）通過結(jié)合CD46（補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白）進(jìn)入細(xì)胞，而CD46在多種腫瘤（如霍奇金淋巴瘤、卵巢癌）中高表達(dá)，在正常組織（如淋巴細(xì)胞、上皮細(xì)胞）中也有表達(dá)，但病毒復(fù)制周期在腫瘤細(xì)胞中更高效。

1溶瘤病毒的腫瘤選擇性感染機(jī)制1.2腫瘤細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路的異常激活腫瘤細(xì)胞中，抑癌基因（如p53、Rb）失活或原癌基因（如Ras、Myc）激活，導(dǎo)致細(xì)胞周期調(diào)控、DNA損傷修復(fù)等通路異常，為溶瘤病毒復(fù)制提供了“溫床”。例如，ONYX-015（一種E1B-55kD缺失的腺病毒）因無法結(jié)合并降解p53，在p53野生型的正常細(xì)胞中無法復(fù)制，而在p53突變或失活的腫瘤細(xì)胞（如頭頸癌、卵巢癌）中，病毒可高效復(fù)制并裂解細(xì)胞；Δ24-RGD腺病毒（Ad5-Δ24-RGD）通過刪除E1A區(qū)的24個(gè)堿基（破壞與Rb蛋白的結(jié)合），使其僅在Rb通路異常的腫瘤細(xì)胞中復(fù)制。

1溶瘤病毒的腫瘤選擇性感染機(jī)制1.3腫瘤微環(huán)境的免疫抑制特性腫瘤微環(huán)境（TME）中，免疫抑制細(xì)胞（如調(diào)節(jié)性T細(xì)胞、髓源性抑制細(xì)胞）、免疫抑制性細(xì)胞因子（如IL-10、TGF-β）及免疫檢查點(diǎn)分子（如PD-L1）的高表達(dá)，不僅抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)，也為溶瘤病毒提供了“免疫逃逸”空間。例如，溶瘤病毒在免疫抑制性TME中可避免被先天免疫細(xì)胞（如NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞）快速清除，從而在腫瘤局部實(shí)現(xiàn)“復(fù)制-擴(kuò)散-再感染”的級(jí)聯(lián)放大效應(yīng)。

2溶瘤病毒在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制與裂解溶瘤病毒進(jìn)入腫瘤細(xì)胞后，需完成“吸附-穿入-脫殼-生物合成-組裝-釋放”的完整生命周期，其裂解腫瘤細(xì)胞的機(jī)制主要包括：

2溶瘤病毒在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制與裂解2.1病毒復(fù)制導(dǎo)致的細(xì)胞資源耗竭病毒利用宿主細(xì)胞的核糖體、tRNA、氨基酸、核苷酸等資源大量復(fù)制自身基因組并合成病毒蛋白，這一過程會(huì)“劫持”細(xì)胞的正常代謝通路，導(dǎo)致細(xì)胞能量耗竭（如ATP耗竭）、蛋白質(zhì)合成失衡，最終觸發(fā)細(xì)胞死亡。例如，痘苗病毒在感染細(xì)胞后，可快速表達(dá)早期蛋白抑制宿主細(xì)胞的DNA和RNA合成，同時(shí)啟動(dòng)自身的病毒基因轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)胞資源被大量消耗，細(xì)胞裂解。

2溶瘤病毒在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制與裂解2.2病毒結(jié)構(gòu)蛋白的直接裂解作用部分溶瘤病毒在復(fù)制后期，會(huì)編碼病毒結(jié)構(gòu)蛋白（如病毒的衣殼蛋白、包膜蛋白）或病毒蛋白酶，這些蛋白可直接破壞細(xì)胞骨架、細(xì)胞膜或細(xì)胞器結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)胞裂解。例如，HSV-1編碼的US22蛋白可降解細(xì)胞骨架蛋白肌動(dòng)蛋白，破壞細(xì)胞的形態(tài)穩(wěn)定性；水泡性口炎病毒（VSV）的M蛋白可抑制宿主細(xì)胞的mRNA轉(zhuǎn)錄，同時(shí)干擾細(xì)胞膜的完整性，導(dǎo)致細(xì)胞快速裂解。

2溶瘤病毒在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制與裂解2.3病毒感染誘發(fā)的細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)病毒感染會(huì)激活細(xì)胞的應(yīng)激通路，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）、氧化應(yīng)激（OS）及DNA損傷應(yīng)激（DDS）是其中最重要的三種。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激由病毒蛋白的過度表達(dá)或錯(cuò)誤折疊引發(fā)，通過激活PERK-eIF2α-ATF4、IRE1-XBP1、ATF6三條通路，一方面促進(jìn)細(xì)胞存活，另一方面在應(yīng)激過度時(shí)通過CHOP等分子誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；氧化應(yīng)激由病毒復(fù)制導(dǎo)致線粒體功能障礙引發(fā)，活性氧（ROS）過度積累會(huì)損傷細(xì)胞膜、DNA和蛋白質(zhì)，觸發(fā)細(xì)胞死亡；DNA損傷應(yīng)激由病毒復(fù)制過程中的核酸摻入或病毒蛋白對(duì)DNA復(fù)制的干擾引發(fā)，通過激活p53、ATM/ATR-Chk1/2通路，誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯或凋亡。

3溶瘤病毒感染與腫瘤細(xì)胞死亡模式的關(guān)聯(lián)溶瘤病毒感染腫瘤細(xì)胞后，可誘導(dǎo)多種死亡模式，包括凋亡、壞死性凋亡、自噬性死亡及ICD，其中ICD因其能激活免疫應(yīng)答，成為溶瘤病毒抗腫瘤的核心機(jī)制。不同溶瘤病毒誘導(dǎo)的死亡模式存在差異，這取決于病毒的血清型、復(fù)制效率及宿主細(xì)胞的遺傳背景。例如，低復(fù)制效率的溶瘤病毒（如部分腺病毒）主要誘導(dǎo)凋亡，而高復(fù)制效率的溶瘤病毒（如VSV、新城疫病毒NDV）則更易誘導(dǎo)壞死性凋亡或ICD；p53野生型的腫瘤細(xì)胞更易發(fā)生凋亡，而p53突變的腫瘤細(xì)胞則可能通過壞死性凋亡或ICD死亡。值得注意的是，ICD并非一種獨(dú)立的死亡模式，而是在凋亡、壞死性死亡等過程中，因“危險(xiǎn)信號(hào)”的主動(dòng)釋放而具有免疫原性的特殊死亡形式。因此，溶瘤病毒能否有效誘導(dǎo)ICD，不僅取決于其是否導(dǎo)致細(xì)胞死亡，更取決于死亡過程中是否伴隨“免疫原性信號(hào)”的釋放。04ONE免疫原性死亡的核心特征與信號(hào)通路

免疫原性死亡的核心特征與信號(hào)通路免疫原性死亡（ICD）是指細(xì)胞在受到特定刺激（如化療藥物、放療、溶瘤病毒感染）后，除發(fā)生死亡外，還能釋放或暴露特定“危險(xiǎn)信號(hào)分子”（Damage-AssociatedMolecularPatterns,DAMPs），這些分子被抗原提呈細(xì)胞（APCs，如樹突狀細(xì)胞DCs）識(shí)別后，可激活適應(yīng)性免疫應(yīng)答，產(chǎn)生針對(duì)腫瘤抗原的特異性T細(xì)胞免疫，并形成免疫記憶。ICD的“免疫原性”是其區(qū)別于其他死亡模式的核心特征，這一特征依賴于特定的信號(hào)分子與信號(hào)通路。

1ICD的核心特征：“三聯(lián)信號(hào)”模型根據(jù)目前的研究，ICD的典型特征可概括為“三聯(lián)信號(hào)”模型，即“eat-me”信號(hào)、DAMPs釋放信號(hào)和炎癥信號(hào)協(xié)同作用，共同驅(qū)動(dòng)APCs的激活與T細(xì)胞免疫應(yīng)答。

1ICD的核心特征：“三聯(lián)信號(hào)”模型1.1“Eat-me”信號(hào)：腫瘤抗原的“暴露”“Eat-me”信號(hào)是腫瘤細(xì)胞表面暴露的“請(qǐng)吃我”分子，其主要功能是吸引并激活A(yù)PCs（如DCs），促進(jìn)APCs對(duì)腫瘤細(xì)胞抗原的吞噬與提呈。ICD中最關(guān)鍵的“eat-me”信號(hào)是鈣網(wǎng)蛋白（Calreticulin,CRT）。在正常細(xì)胞中，CRT位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)，而在ICD過程中，CRT通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-高爾基體-細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)位，暴露于細(xì)胞表面。表面CRT可與APCs表面的低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1（LRP1/CD91）結(jié)合，觸發(fā)DCs的吞噬作用。除CRT外，其他“eat-me”信號(hào)如磷酸絲氨酸（PS，通過“磷脂酰絲氨酸翻轉(zhuǎn)酶”如XKR家族蛋白暴露于細(xì)胞外膜）、CD47（在ICD中表達(dá)下調(diào)，解除“別吃我”信號(hào)的抑制）等，也參與調(diào)節(jié)APCs的吞噬活性。

1ICD的核心特征：“三聯(lián)信號(hào)”模型1.2DAMPs釋放信號(hào)：免疫應(yīng)答的“啟動(dòng)子”DAMPs是細(xì)胞在應(yīng)激或損傷時(shí)釋放的分子，可被模式識(shí)別受體（PatternRecognitionReceptors,PRRs，如TLRs、NLRs）識(shí)別，激活固有免疫應(yīng)答，為適應(yīng)性免疫應(yīng)答提供“第一信號(hào)”。ICD中關(guān)鍵的DAMPs包括：-三磷酸腺苷（ATP）：作為“能量分子”，在ICD過程中通過細(xì)胞膜上的pannexin-1通道或Connexin蛋白組成的間隙連接釋放至細(xì)胞外。細(xì)胞外ATP可與APCs表面的P2X7受體結(jié)合，促進(jìn)DCs的成熟與炎癥因子（如IL-1β、IL-18）的分泌。

1ICD的核心特征：“三聯(lián)信號(hào)”模型1.2DAMPs釋放信號(hào)：免疫應(yīng)答的“啟動(dòng)子”-高遷移率族蛋白B1（HMGB1）：一種非組蛋白染色體結(jié)合蛋白，在正常細(xì)胞中位于細(xì)胞核內(nèi)，而在ICD過程中，因細(xì)胞核膜破裂或主動(dòng)釋放轉(zhuǎn)移至細(xì)胞外。HMGB1可與APCs表面的TLR4（主要受體）或RAGE（晚期糖基化終產(chǎn)物受體）結(jié)合，促進(jìn)DCs的抗原提呈能力與T細(xì)胞的活化。-熱休克蛋白（HSPs，如HSP70、HSP90、GRP94）：在ICD過程中，因內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激或蛋白錯(cuò)誤折疊而表達(dá)升高，并通過細(xì)胞膜釋放至細(xì)胞外。HSPs可與APCs表面的CD91、TLR2/4等受體結(jié)合，促進(jìn)腫瘤抗原的交叉提呈，激活CD8+T細(xì)胞。

1ICD的核心特征：“三聯(lián)信號(hào)”模型1.3炎癥信號(hào)：免疫微環(huán)境的“調(diào)節(jié)器”ICD過程中，除DAMPs外，還可釋放多種炎癥性細(xì)胞因子（如IL-1α、IL-6、TNF-α）和趨化因子（如CXCL10、CCL5），這些分子共同構(gòu)成炎癥信號(hào)，招募固有免疫細(xì)胞（如中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、DCs）至腫瘤局部，促進(jìn)免疫微環(huán)境的“冷轉(zhuǎn)熱”。其中，IL-1α是ICD中關(guān)鍵的“早期炎癥因子”，在細(xì)胞死亡早期即可釋放，通過IL-1R信號(hào)激活NF-κB通路，促進(jìn)其他炎癥因子的表達(dá)；CXCL10和CCL5則通過招募DCs和CD8+T細(xì)胞，增強(qiáng)免疫細(xì)胞的浸潤與活化。3.2ICD的信號(hào)通路：從應(yīng)激到DAMPs釋放的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)ICD的“三聯(lián)信號(hào)”并非孤立存在，而是通過復(fù)雜的信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò)協(xié)同調(diào)控，這一網(wǎng)絡(luò)的核心是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）、活性氧（ROS）積累及細(xì)胞死亡通路的交叉對(duì)話。

1ICD的核心特征：“三聯(lián)信號(hào)”模型1.3炎癥信號(hào)：免疫微環(huán)境的“調(diào)節(jié)器”3.2.1內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）通路：CRT暴露與HMGB1釋放的“開關(guān)”ERS是ICD的始動(dòng)信號(hào)之一，由病毒感染導(dǎo)致的蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)鈣離子失衡引發(fā)。ERS通過三條通路調(diào)控ICD：-PERK-eIF2α-ATF4通路：PERK（蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶）被激活后，磷酸化eIF2α，抑制蛋白質(zhì)翻譯，同時(shí)選擇性翻譯ATF4（激活轉(zhuǎn)錄因子4）。ATF4可上調(diào)CHOP（C/EBP同源蛋白）的表達(dá)，CHOP一方面下調(diào)Bcl-2（抗凋亡蛋白），促進(jìn)細(xì)胞死亡；另一方面促進(jìn)CRT的表達(dá)與轉(zhuǎn)位，暴露于細(xì)胞表面。-IRE1α-XBP1通路：IRE1α（內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到細(xì)胞核信號(hào)激酶1α）被激活后，通過剪接XBP1（X盒結(jié)合蛋白1）mRNA，產(chǎn)生活化的XBP1s。XBP1s可上調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)伴侶蛋白（如GRP78、GRP94）的表達(dá)，促進(jìn)蛋白質(zhì)折疊，同時(shí)可誘導(dǎo)HMGB1的表達(dá)與釋放。

1ICD的核心特征：“三聯(lián)信號(hào)”模型1.3炎癥信號(hào)：免疫微環(huán)境的“調(diào)節(jié)器”-ATF6通路：ATF6（激活轉(zhuǎn)錄因子6）在ERS時(shí)從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)轉(zhuǎn)移至高爾基體，被S1P/S2P蛋白酶剪切后活化?；罨腁TF6可轉(zhuǎn)位至細(xì)胞核，上調(diào)GRP78、CRT等基因的表達(dá)，促進(jìn)CRT的細(xì)胞表面暴露。

1ICD的核心特征：“三聯(lián)信號(hào)”模型2.2活性氧（ROS）通路：DAMPs釋放的“催化劑”ROS是ICD過程中的關(guān)鍵介質(zhì)，由病毒感染導(dǎo)致線粒體電子傳遞鏈（ETC）功能障礙或NADPH氧化酶（NOX）激活引發(fā)。ROS通過多種機(jī)制促進(jìn)ICD：-氧化修飾CRT：ROS可修飾CRT的半胱氨酸殘基，使其構(gòu)象改變，增強(qiáng)與LRP1的結(jié)合能力，促進(jìn)DCs的吞噬作用。-激活MAPK通路：ROS可激活p38MAPK和JNK通路，促進(jìn)HMGB1的核轉(zhuǎn)位與釋放，同時(shí)上調(diào)炎癥因子（如IL-6、TNF-α）的表達(dá)。-破壞溶酶體膜：ROS可導(dǎo)致溶酶體膜通透性增加（LMP），釋放溶酶體酶（如組織蛋白酶B、D）至細(xì)胞質(zhì)，組織蛋白酶可進(jìn)一步激活Caspase-1（炎癥小體通路），促進(jìn)IL-1β、IL-18的成熟與釋放。

1ICD的核心特征：“三聯(lián)信號(hào)”模型2.3細(xì)胞死亡通路的交叉對(duì)話：ICD的“執(zhí)行器”ICD可在凋亡、壞死性凋亡等死亡過程中發(fā)生，關(guān)鍵在于死亡過程中DAMPs的釋放方式（主動(dòng)釋放vs被動(dòng)釋放）。-凋亡與ICD：傳統(tǒng)凋亡被認(rèn)為是“免疫沉默”的死亡模式，但在特定條件下（如病毒感染、化療藥物刺激），凋亡可通過“凋亡小體”包裹CRT、ATP等DAMPs，實(shí)現(xiàn)“主動(dòng)釋放”。例如，溶瘤病毒感染后，細(xì)胞通過Caspase-3依賴的凋亡死亡，Caspase-3可激活RhoGDI（RhoGDP解離抑制因子），促進(jìn)CRT的細(xì)胞表面轉(zhuǎn)位；同時(shí)，凋亡小體被DCs吞噬后，可促進(jìn)DCs的成熟與抗原提呈。-壞死性凋亡與ICD：壞死性凋亡是一種“程序性壞死”，由RIPK1（受體相互作用蛋白激酶1）、RIPK3（受體相互作用蛋白激酶3）和MLKL（混合譜系激酶結(jié)構(gòu)域樣蛋白）調(diào)控。

1ICD的核心特征：“三聯(lián)信號(hào)”模型2.3細(xì)胞死亡通路的交叉對(duì)話：ICD的“執(zhí)行器”在溶瘤病毒感染下，當(dāng)Caspase-8被抑制（如病毒蛋白抑制）或死亡受體被激活（如TNF-α刺激），RIPK1-RIPK3-MLKL通路被激活，MLKL發(fā)生寡聚化并破壞細(xì)胞膜，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物（包括HMGB1、ATP）被動(dòng)釋放，這種“被動(dòng)釋放”在病毒高復(fù)制時(shí)尤為顯著，可強(qiáng)效激活免疫應(yīng)答。05ONE溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD的具體機(jī)制

溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD的具體機(jī)制溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD并非單一機(jī)制實(shí)現(xiàn)，而是通過“病毒自身特性+宿主細(xì)胞應(yīng)答”的協(xié)同作用，最終觸發(fā)“三聯(lián)信號(hào)”的釋放。不同溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD的機(jī)制存在共性，也存在個(gè)性，這主要取決于病毒的血清型、復(fù)制效率及基因修飾背景。

1病毒復(fù)制導(dǎo)致的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與CRT暴露溶瘤病毒在腫瘤細(xì)胞內(nèi)大量復(fù)制時(shí)，會(huì)合成大量病毒蛋白，這些蛋白的錯(cuò)誤折疊或過度積累會(huì)引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS），從而激活CRT的細(xì)胞表面暴露。以腺病毒為例，腺病毒E1A蛋白是病毒復(fù)制的“啟動(dòng)子”，可與宿主細(xì)胞的Rb蛋白結(jié)合，釋放E2F轉(zhuǎn)錄因子，啟動(dòng)病毒基因轉(zhuǎn)錄；但同時(shí)，E1A蛋白也可干擾內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能，導(dǎo)致蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊，激活PERK-eIF2α-ATF4-CHOP通路，促進(jìn)CRT的表達(dá)與轉(zhuǎn)位。在HSV-1感染中，病毒立即早期蛋白ICP34.5是一種神經(jīng)毒性蛋白，可抑制蛋白激酶R（PKR）的活性，避免PKR介導(dǎo)的eIF2α磷酸化（抑制病毒蛋白翻譯）；但同時(shí)，ICP34.5的缺失（如改良型HSV-1G207）會(huì)增強(qiáng)ERS，因?yàn)镻KR未被抑制，eIF2α磷酸化后，宿主細(xì)胞的蛋白質(zhì)翻譯被抑制，病毒蛋白的過度積累會(huì)進(jìn)一步加劇ERS，從而通過IRE1α-XBP1通路促進(jìn)CRT暴露與HMGB1釋放。

2病毒復(fù)制導(dǎo)致的氧化應(yīng)激與DAMPs釋放溶瘤病毒復(fù)制會(huì)干擾線粒體功能，導(dǎo)致活性氧（ROS）積累，這是DAMPs釋放的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)力。以VSV為例，VSV的M蛋白可抑制宿主細(xì)胞的mRNA轉(zhuǎn)錄與翻譯，同時(shí)干擾線粒體電子傳遞鏈復(fù)合物Ⅰ的功能，導(dǎo)致電子泄漏，產(chǎn)生大量超氧陰離子（O??），O??在超氧化物歧化酶（SOD）作用下轉(zhuǎn)化為過氧化氫（H?O?），H?O?通過Fenton反應(yīng)轉(zhuǎn)化為羥自由基（OH），OH可氧化細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)和DNA，觸發(fā)HMGB1的釋放與炎癥因子的表達(dá)。NDV是一種副黏病毒，其HN蛋白（血凝素-神經(jīng)氨酸酶）在感染細(xì)胞后，可激活NADPH氧化酶（NOX），產(chǎn)生ROS；同時(shí)，NDV的F蛋白（融合蛋白）可誘導(dǎo)線粒體膜通透性轉(zhuǎn)換孔（mPTP）開放，導(dǎo)致細(xì)胞色素C釋放，進(jìn)一步加劇ROS積累。ROS積累不僅促進(jìn)DAMPs釋放，還可激活NLRP3炎癥小體，促進(jìn)IL-1β的成熟與分泌，增強(qiáng)DCs的活化。

3病毒結(jié)構(gòu)蛋白與DAMPs的直接調(diào)控部分溶瘤病毒的結(jié)構(gòu)蛋白可直接參與DAMPs的調(diào)控，增強(qiáng)ICD的效應(yīng)。例如，痘苗病毒編碼的A41蛋白是一種趨化因子結(jié)合蛋白，可與CXCL10、CCL5等趨化因子結(jié)合，抑制其活性，從而招募調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）至腫瘤局部，抑制免疫應(yīng)答；但另一方面，痘苗病毒編碼的B18R蛋白可中和IFN-α/β，避免病毒被過早清除，同時(shí)IFN-α/β的適度缺失可增強(qiáng)ROS積累與HMGB1釋放，促進(jìn)ICD。在溶瘤腺病毒Ad5-D24-RGD中，RGD肽（精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸）被插入到纖維蛋白的HI環(huán)中，通過與腫瘤細(xì)胞表面的整合素（如αvβ3、αvβ5）結(jié)合，增強(qiáng)病毒的感染效率；同時(shí)，RGD肽可激活整合素下游的FAK（focaladhesionkinase）通路，促進(jìn)ROS產(chǎn)生與NF-κB激活，上調(diào)IL-6、TNF-α等炎癥因子的表達(dá)，增強(qiáng)ICD的免疫原性。

4病毒感染誘導(dǎo)的“免疫原性死亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)”溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD并非“一步到位”，而是形成“局部裂解-信號(hào)釋放-免疫激活-系統(tǒng)性免疫”的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。具體而言，當(dāng)溶瘤病毒在腫瘤局部感染并裂解部分腫瘤細(xì)胞后，釋放的CRT、ATP、HMGB1等DAMPs會(huì)招募并激活樹突狀細(xì)胞（DCs）；激活的DCs通過吞噬腫瘤細(xì)胞抗原，遷移至淋巴結(jié)，通過MHC-I/II分子向T細(xì)胞提呈抗原，同時(shí)通過CD80/CD86與T細(xì)胞的CD28結(jié)合，提供“第二信號(hào)”；在IL-12等細(xì)胞因子的作用下，CD8+T細(xì)胞被活化，分化為細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTLs），殺傷剩余的腫瘤細(xì)胞；同時(shí)，CD4+T細(xì)胞輔助DCs成熟和B細(xì)胞產(chǎn)生抗體，形成“體液免疫+細(xì)胞免疫”的雙重應(yīng)答；更重要的是，記憶T細(xì)胞（如中央記憶T細(xì)胞Tcm、效應(yīng)記憶T細(xì)胞Tem）的形成，可預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)，實(shí)現(xiàn)“長期免疫監(jiān)視”。

4病毒感染誘導(dǎo)的“免疫原性死亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)”這一級(jí)聯(lián)反應(yīng)的關(guān)鍵在于“DCs的成熟與抗原提呈”，而ICD正是通過釋放DAMPs，為DCs提供了“抗原+信號(hào)+共刺激”的三重激活條件，從而打破腫瘤免疫微環(huán)境的“免疫耐受”。06ONE影響溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD效率的關(guān)鍵因素

影響溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD效率的關(guān)鍵因素盡管溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD的機(jī)制已逐漸明確，但在臨床應(yīng)用中，不同患者對(duì)溶瘤病毒治療的響應(yīng)存在顯著差異，這主要受病毒特性、腫瘤微環(huán)境及宿主免疫狀態(tài)等多種因素的影響。

1病毒特性：血清型、復(fù)制效率與基因修飾1.1病毒血清型的選擇不同血清型的溶瘤病毒因其受體結(jié)合特性、復(fù)制能力及免疫原性差異，誘導(dǎo)ICD的效率不同。例如，HSV-1對(duì)神經(jīng)組織有天然嗜性，在腦膠質(zhì)瘤中表現(xiàn)出良好的ICD誘導(dǎo)能力；NDV作為一種禽源病毒，對(duì)人類細(xì)胞感染效率較低，但可通過基因改造（如插入人類受體結(jié)合位點(diǎn)）增強(qiáng)其靶向性，同時(shí)其強(qiáng)免疫原性（如HN蛋白、F蛋白）可強(qiáng)效激活DCs；腺病毒血清型種類繁多，Ad5因CAR依賴性在臨床中應(yīng)用廣泛，但CAR低表達(dá)的腫瘤限制了其療效，而Ad3、Ad11等CAR非依賴型腺病毒則具有更廣的腫瘤靶向性。

1病毒特性：血清型、復(fù)制效率與基因修飾1.2病毒復(fù)制效率溶瘤病毒的復(fù)制效率直接影響ICD的強(qiáng)度：高復(fù)制效率的病毒（如VSV、NDV）可在短時(shí)間內(nèi)裂解大量腫瘤細(xì)胞，釋放大量DAMPs，強(qiáng)效激活免疫應(yīng)答；但高復(fù)制效率也可能導(dǎo)致病毒過早清除，或引發(fā)過強(qiáng)的炎癥反應(yīng)（如“細(xì)胞因子風(fēng)暴”）。低復(fù)制效率的病毒（如部分腺病毒）雖然裂解腫瘤細(xì)胞較慢，但可在腫瘤局部持續(xù)存在，通過“持續(xù)釋放”DAMPs，誘導(dǎo)更持久的免疫應(yīng)答。因此，優(yōu)化病毒復(fù)制效率（如通過基因調(diào)控復(fù)制開關(guān)）是提升ICD誘導(dǎo)效率的關(guān)鍵。

1病毒特性：血清型、復(fù)制效率與基因修飾1.3病毒基因修飾通過基因改造可增強(qiáng)溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD的能力，常見策略包括：-免疫刺激因子插入：在病毒基因組中插入免疫刺激因子（如GM-CSF、IL-12、IL-15），可增強(qiáng)DCs的招募與活化，促進(jìn)ICD的免疫應(yīng)答。例如，T-VEC（talimogenelaherparepvec，一種GM-CSF修飾的HSV-1）是首個(gè)被FDA批準(zhǔn)的溶瘤病毒，其通過表達(dá)GM-CSF，招募DCs至腫瘤局部，增強(qiáng)抗原提呈，已用于黑色素瘤的治療。-免疫檢查點(diǎn)分子干擾：在病毒基因組中插入PD-1抗體、CTLA-4抗體等，可阻斷免疫檢查點(diǎn)通路，解除T細(xì)胞的抑制，增強(qiáng)ICD介導(dǎo)的T細(xì)胞殺傷。例如，溶瘤腺病毒Ad5-Δ24-CTLA-4在誘導(dǎo)ICD的同時(shí)，局部表達(dá)CTLA-4抗體，可逆轉(zhuǎn)腫瘤微環(huán)境的免疫抑制，療效優(yōu)于單一溶瘤病毒治療。

1病毒特性：血清型、復(fù)制效率與基因修飾1.3病毒基因修飾-病毒復(fù)制調(diào)控元件插入：插入腫瘤特異性啟動(dòng)子（如survivin、hTERT）可調(diào)控病毒復(fù)制，使病毒僅在腫瘤細(xì)胞中高效復(fù)制，增強(qiáng)靶向性；插入microRNA應(yīng)答元件（如miR-122、miR-145）可抑制病毒在正常組織中的復(fù)制，提高安全性。

2腫瘤微環(huán)境：免疫抑制與抗原異質(zhì)性2.1免疫抑制性細(xì)胞與因子腫瘤微環(huán)境中，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）、髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs）、腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs，M2型）等免疫抑制細(xì)胞，以及IL-10、TGF-β、PD-L1等免疫抑制性因子，可抑制DCs的成熟與T細(xì)胞的活化，從而削弱ICD的免疫應(yīng)答。例如，Tregs通過分泌IL-10、TGF-β，抑制DCs的抗原提呈能力；MDSCs通過產(chǎn)生精氨酸酶、iNOS，耗竭微環(huán)境中的精氨酸，抑制T細(xì)胞的增殖；TAMs（M2型）通過分泌VEGF、IL-10，促進(jìn)腫瘤血管生成與免疫逃逸。

2腫瘤微環(huán)境：免疫抑制與抗原異質(zhì)性2.2腫瘤抗原異質(zhì)性腫瘤抗原異質(zhì)性（如不同腫瘤細(xì)胞表達(dá)不同的腫瘤抗原）可導(dǎo)致ICD誘導(dǎo)的T細(xì)胞免疫僅針對(duì)部分抗原陽性的腫瘤細(xì)胞，而抗原陰性的腫瘤細(xì)胞逃避免疫殺傷。例如，在黑色素瘤中，不同腫瘤細(xì)胞可能表達(dá)不同的黑色素瘤抗原（如MART-1、gp100、Tyrosinase），溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD后，產(chǎn)生的特異性T細(xì)胞主要針對(duì)高表達(dá)抗原的細(xì)胞，低表達(dá)或不表達(dá)抗原的細(xì)胞則存活并復(fù)發(fā)。

2腫瘤微環(huán)境：免疫抑制與抗原異質(zhì)性2.3腫瘤細(xì)胞固有特征腫瘤細(xì)胞的遺傳背景（如p53突變、Rb突變）、代謝狀態(tài)（如糖酵解增強(qiáng)、線粒體功能障礙）等固有特征，可影響溶瘤病毒的感染效率與ICD的誘導(dǎo)能力。例如，p53突變的腫瘤細(xì)胞對(duì)溶瘤腺病毒（如ONYX-015）更敏感，因?yàn)閜53缺失使細(xì)胞無法通過凋亡抑制病毒復(fù)制，但同時(shí)也可能通過壞死性凋亡死亡，釋放更多DAMPs，增強(qiáng)ICD效應(yīng)；糖酵解增強(qiáng)的腫瘤細(xì)胞（如Warburg效應(yīng)）可能通過乳酸分泌抑制DCs的成熟，削弱ICD的免疫應(yīng)答。

3宿主免疫狀態(tài)：先天免疫與適應(yīng)性免疫3.1先天免疫的清除作用宿主的先天免疫（如NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、補(bǔ)體系統(tǒng)）可快速識(shí)別并清除溶瘤病毒，降低其在腫瘤局部的濃度，從而削弱ICD的誘導(dǎo)效率。例如，NK細(xì)胞可通過識(shí)別病毒感染細(xì)胞表面的MHC-I分子下調(diào)（“丟失自我”），釋放穿孔素、顆粒酶，裂解感染細(xì)胞；補(bǔ)體系統(tǒng)可通過經(jīng)典途徑（抗體依賴）或替代途徑（病毒表面蛋白直接激活）形成膜攻擊復(fù)合物（MAC），裂解病毒顆粒。

3宿主免疫狀態(tài)：先天免疫與適應(yīng)性免疫3.2適應(yīng)性免疫的預(yù)存免疫部分人群對(duì)溶瘤病毒存在預(yù)存免疫（如通過既往感染或疫苗接種），這種免疫可導(dǎo)致病毒在進(jìn)入腫瘤局部前就被中和，降低療效。例如，人群中約50%-80%對(duì)腺病毒Ad5存在中和抗體，這些抗體可與Ad5結(jié)合，阻止其進(jìn)入腫瘤細(xì)胞；對(duì)麻疹病毒MV的人群免疫率也較高，可影響MV的感染效率。

3宿主免疫狀態(tài)：先天免疫與適應(yīng)性免疫3.3免疫衰老與免疫缺陷老年患者或免疫缺陷患者（如HIV感染者、器官移植受者）的免疫功能低下，DCs的成熟與抗原提呈能力減弱，T細(xì)胞的增殖與殺傷能力下降，可導(dǎo)致ICD誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答不足，影響溶瘤病毒的療效。07ONE溶瘤病毒介導(dǎo)ICD的臨床轉(zhuǎn)化與挑戰(zhàn)

溶瘤病毒介導(dǎo)ICD的臨床轉(zhuǎn)化與挑戰(zhàn)溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD機(jī)制的闡明，為其臨床應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)，目前已有多種溶瘤病毒進(jìn)入臨床試驗(yàn)，并顯示出良好的抗腫瘤活性。然而，從實(shí)驗(yàn)室到臨床，仍面臨諸多挑戰(zhàn)，需要從病毒優(yōu)化、聯(lián)合策略、個(gè)體化治療等方面進(jìn)行突破。

1溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD的臨床研究進(jìn)展1.1單一溶瘤病毒治療的臨床研究目前，全球已有十余種溶瘤病毒進(jìn)入Ⅲ期臨床試驗(yàn)，其中部分已獲批上市。例如：-T-VEC（talimogenelaherparepvec）：GM-CSF修飾的HSV-1，用于治療不可切除的晚期黑色素瘤，Ⅲ期臨床試驗(yàn)顯示，其客觀緩解率（ORR）為26.4%，顯著優(yōu)于GM-CSF對(duì)照組（10.8%），且可誘導(dǎo)腫瘤抗原特異性T細(xì)胞的產(chǎn)生。-DNX-2401（Δ24-RGD）：一種E1A區(qū)缺失24個(gè)堿基、RGD肽修飾的腺病毒，用于治療惡性膠質(zhì)瘤，Ⅰ/Ⅱ期臨床試驗(yàn)顯示，其6個(gè)月生存率為83%，12個(gè)月生存率為35%，且部分患者出現(xiàn)遠(yuǎn)轉(zhuǎn)移灶的消退（“遠(yuǎn)位效應(yīng)”），提示ICD介導(dǎo)的系統(tǒng)性免疫應(yīng)答。

1溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD的臨床研究進(jìn)展1.1單一溶瘤病毒治療的臨床研究-PVS-RIPO（poliovirus-RIPO）：脊髓灰質(zhì)炎病毒（Sabin株）的RNA依賴性RNA聚合酶（IRES）替換為人類鼻病毒（HRV2）的IRES，用于治療惡性膠質(zhì)瘤，Ⅰ期臨床試驗(yàn)顯示，其3年生存率為21%，顯著于歷史對(duì)照（4%），且安全性良好。

1溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD的臨床研究進(jìn)展1.2溶瘤病毒聯(lián)合免疫治療的臨床研究單一溶瘤病毒治療雖可誘導(dǎo)ICD，但受腫瘤微環(huán)境免疫抑制的影響，療效有限。與免疫檢查點(diǎn)抑制劑（如PD-1/PD-L1抗體、CTLA-4抗體）、化療、放療等聯(lián)合，可顯著增強(qiáng)療效。例如：-T-VEC+Pembrolizumab（PD-1抗體）：用于治療晚期黑色素瘤，Ⅰb期臨床試驗(yàn)顯示，其ORR高達(dá)62.5%，顯著高于單一T-VEC（26.4%）或單一Pembrolizumab（33.3%），且安全性可控，聯(lián)合治療可通過ICD增強(qiáng)DCs的成熟，促進(jìn)PD-1抗體的T細(xì)胞活化。-DNX-2401+Nivolumab（PD-1抗體）：用于治療惡性膠質(zhì)瘤，Ⅰ期臨床試驗(yàn)顯示，其6個(gè)月無進(jìn)展生存率為44%，12個(gè)月總生存率為58%，且部分患者出現(xiàn)腫瘤消退，聯(lián)合治療可通過ICD釋放DAMPs，逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)瘤的免疫抑制微環(huán)境。

1溶瘤病毒誘導(dǎo)ICD的臨床研究進(jìn)展1.2溶瘤病毒聯(lián)合免疫治療的臨床研究-溶瘤腺病毒Ad5-Δ24+放療：用于治療頭頸癌，Ⅱ期臨床試驗(yàn)顯示，其ORR為58%，顯著高于單一放療（39%），放療可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞ICD，釋放DAMPs，同時(shí)增強(qiáng)溶瘤病毒的感染效率，形成“放療-ICD-溶瘤病毒”的協(xié)同效應(yīng)。

2溶瘤病毒臨床轉(zhuǎn)化面臨的挑戰(zhàn)2.1遞送效率與腫瘤靶向性溶瘤病毒的遞送效率是限制其療效的關(guān)鍵因素之一。全身給藥（如靜脈注射）時(shí)，病毒可被肝臟、脾臟等器官的吞噬細(xì)胞清除，或在血液中被中和抗體滅活，到達(dá)腫瘤局部的病毒量不足；局部給藥（如瘤內(nèi)注射）雖可提高腫瘤局部的病毒濃度，但僅適用于淺表腫瘤或可穿刺的腫瘤，對(duì)深部實(shí)體瘤效果有限。此外，腫瘤血管異常、間質(zhì)壓力高、纖維化等屏障，可阻礙病毒在腫瘤內(nèi)的擴(kuò)散，影響其感染效率。

2溶瘤病毒臨床轉(zhuǎn)化面臨的挑戰(zhàn)2.2安全性與不良反應(yīng)溶瘤病毒的安全性是臨床應(yīng)用的核心問題。雖然溶瘤病毒對(duì)正常細(xì)胞影響較小，但仍可引發(fā)不良反應(yīng)，包括：01-發(fā)熱、寒戰(zhàn)、疲勞等流感樣癥狀：由病毒感染誘發(fā)的炎癥因子釋放（如IL-6、TNF-α）引起，多為輕中度，可通過對(duì)癥治療緩解。02-肝毒性、腎毒性：由病毒顆粒在肝臟、腎臟的積聚或免疫介導(dǎo)的組織損傷引起，需監(jiān)測肝腎功能。03-細(xì)胞因子風(fēng)暴：由過度激活的免疫細(xì)胞釋放大量炎癥因子引起，可導(dǎo)致多器官功能衰竭，嚴(yán)重時(shí)可危及生命，需密切監(jiān)測并及時(shí)處理（如使用糖皮質(zhì)激素）。04

2溶瘤病毒臨床轉(zhuǎn)化面臨的挑戰(zhàn)2.3耐藥性產(chǎn)生部分患者對(duì)溶瘤病毒治療不響應(yīng)或產(chǎn)生耐藥性，其機(jī)制包括：-病毒受體表達(dá)下調(diào)：腫瘤細(xì)胞通過表觀遺傳修飾（如DNA