202XLOGO病毒載體個體化疫苗的構(gòu)建與免疫原性演講人2026-01-09CONTENTS病毒載體個體化疫苗的構(gòu)建與免疫原性引言：個體化疫苗的時代背景與臨床需求病毒載體個體化疫苗的構(gòu)建策略病毒載體個體化疫苗的免疫原性機(jī)制挑戰(zhàn)與展望結(jié)論目錄01病毒載體個體化疫苗的構(gòu)建與免疫原性02引言：個體化疫苗的時代背景與臨床需求引言：個體化疫苗的時代背景與臨床需求隨著腫瘤免疫學(xué)、基因組學(xué)及分子生物學(xué)的發(fā)展，個體化醫(yī)療已從概念走向臨床實(shí)踐。在傳染病防控領(lǐng)域，傳統(tǒng)疫苗（如滅活疫苗、減毒活疫苗）通過誘導(dǎo)群體水平的免疫保護(hù)，成功控制了多種傳染病的流行；但在腫瘤治療及高度變異病原體（如HIV、流感病毒）感染中，由于病原體抗原多樣性或腫瘤新生抗原的個體特異性，“一刀切”式的疫苗策略難以滿足精準(zhǔn)治療需求。在此背景下，病毒載體個體化疫苗應(yīng)運(yùn)而生——其核心是通過病毒載體遞送患者特異性抗原（如腫瘤新生抗原、病原體適應(yīng)性突變抗原），激活機(jī)體靶向性免疫應(yīng)答，實(shí)現(xiàn)對疾?。ㄓ绕涫菒盒阅[瘤、慢性感染）的個體化干預(yù)。作為一名長期從事病毒載體疫苗研發(fā)的臨床免疫研究者，我親歷了這一領(lǐng)域從實(shí)驗(yàn)室探索到臨床試驗(yàn)轉(zhuǎn)化的全過程。2015年，我們團(tuán)隊首次為一名晚期黑色素瘤患者基于NGS測序篩選的新生抗原構(gòu)建了腺病毒載體疫苗，引言：個體化疫苗的時代背景與臨床需求治療后患者外周血中新抗原特異性T細(xì)胞頻率提升100倍，腫瘤病灶持續(xù)緩解至今。這一病例讓我深刻認(rèn)識到：病毒載體個體化疫苗不僅是技術(shù)的突破，更是“量體裁衣”式精準(zhǔn)醫(yī)療的典范。本文將從構(gòu)建策略、免疫原性機(jī)制、臨床轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)三方面，系統(tǒng)闡述這一前沿領(lǐng)域的科學(xué)內(nèi)涵與實(shí)踐進(jìn)展。03病毒載體個體化疫苗的構(gòu)建策略病毒載體個體化疫苗的構(gòu)建策略病毒載體個體化疫苗的構(gòu)建是一個多學(xué)科交叉的精密工程，涉及靶抗原篩選、載體設(shè)計、遞送優(yōu)化及生產(chǎn)工藝四大核心環(huán)節(jié)，需兼顧“個體化”的精準(zhǔn)性與“疫苗”的免疫有效性。1靶抗原的精準(zhǔn)篩選與優(yōu)化靶抗原是個體化疫苗的“子彈”，其特異性與免疫原性直接決定疫苗療效。根據(jù)疾病類型，靶抗原可分為腫瘤新生抗原（Neoantigen）和病原體個體化抗原兩大類，其篩選邏輯各有側(cè)重。2.1.1腫瘤新生抗原的篩選：從“海量突變”到“免疫顯性表位”腫瘤新生抗原是由腫瘤體細(xì)胞基因突變（點(diǎn)突變、插入缺失、基因融合）產(chǎn)生的、不存在于正常組織中的蛋白質(zhì)片段，因其腫瘤特異性強(qiáng)、免疫原性高，成為個體化腫瘤疫苗的理想靶點(diǎn)。其篩選流程可概括為“四步篩選法”：-樣本采集與組學(xué)分析：獲取患者腫瘤組織（瘤）及adjacent正常組織（正常），通過高通量測序（WES/RNA-seq）識別體細(xì)胞突變，結(jié)合轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)篩選表達(dá)突變（ExpressedMutations）。例如，我們團(tuán)隊在篩選一例肺癌患者的新生抗原時，通過WES檢測到327個體細(xì)胞突變，經(jīng)RNA-seq過濾后僅保留98個表達(dá)突變，初步篩選效率達(dá)30%。1靶抗原的精準(zhǔn)篩選與優(yōu)化-抗原表位預(yù)測：利用生物信息學(xué)工具（如NetMHCpan、NetMHCIIpan）預(yù)測突變肽段與患者HLA分子的結(jié)合親和力。HLA-A02:01等高頻率HLA亞型的預(yù)測算法已較成熟，但罕見HLA亞型的預(yù)測仍存在誤差，需通過體外結(jié)合實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。-免疫原性驗(yàn)證：將預(yù)測的高親和力肽段與患者外周血單個核細(xì)胞（PBMCs）共孵育，通過ELISPOT、ICS（胞內(nèi)因子染色）檢測IFN-γ、TNF-α等細(xì)胞因子釋放，驗(yàn)證T細(xì)胞反應(yīng)性。我們在一項(xiàng)研究中發(fā)現(xiàn)，生物信息學(xué)預(yù)測的12個候選表位中，僅6個能誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞反應(yīng)，驗(yàn)證效率為50%。-抗原優(yōu)化與組合設(shè)計：為避免免疫逃逸，通常需組合多個（5-15個）新生抗原構(gòu)建多價疫苗。此外，可通過肽段修飾（如N端乙?；被崽鎿Q）增強(qiáng)表位穩(wěn)定性，或引入“錨定殘基（AnchorResidue）”提升HLA結(jié)合能力。1靶抗原的精準(zhǔn)篩選與優(yōu)化2.1.2病原體個體化抗原的篩選：從“株間差異”到“適應(yīng)性變異”對于HIV、流感病毒等高度變異病原體，個體化疫苗需針對患者體內(nèi)優(yōu)勢株或耐藥株的特異性抗原（如HIV的Env蛋白、流感的HA蛋白）。其篩選策略包括：-病毒分離與測序：從患者體液（血漿、痰液）分離病毒，通過擴(kuò)增子測序獲得全長抗原基因，與參考株比對識別高變區(qū)域（如HIV的V3環(huán)、流感的HA莖區(qū)）。-抗原表位保守性分析：優(yōu)先選擇患者株內(nèi)保守但與疫苗株差異大的表位，避免“原初免疫優(yōu)勢（OriginalAntigenicSin）”導(dǎo)致的免疫抑制。例如，在HIV感染者中，針對Gag蛋白保守區(qū)的免疫應(yīng)答較Env可變區(qū)更易誘導(dǎo)廣譜中和抗體。-交叉反應(yīng)性評估：通過血清學(xué)實(shí)驗(yàn)（如假病毒中和試驗(yàn)）驗(yàn)證患者針對候選抗原的抗體應(yīng)答是否具有交叉保護(hù)性，避免因株間差異導(dǎo)致疫苗失效。2病毒載體的選擇與理性設(shè)計病毒載體是遞送靶抗原的“車輛”，其選擇需平衡免疫原性、安全性、遞送效率及載量容量四大要素。目前常用的病毒載體包括腺病毒（Adenovirus,Ad）、慢病毒（Lentivirus,LV）、痘病毒（VacciniaVirus,VV）及溶瘤病毒（OncolyticVirus,OV），其特性對比如表1所示。表1常用病毒載體特性比較|載體類型|載量容量|免疫原性|整合能力|安全性|適用場景||--------------|--------------|--------------|--------------|------------|--------------|2病毒載體的選擇與理性設(shè)計|腺病毒（人源5型）|~8kb|強(qiáng)（先天免疫激活強(qiáng)）|非整合|高（預(yù)存抗體率高）|腫瘤新生抗原疫苗|01|慢病毒（HIV-1改造）|~8kb|中（可誘導(dǎo)持續(xù)表達(dá)）|整合（隨機(jī)）|中（需復(fù)制失活）|慢性感染疫苗|02|痘病毒（MVA株）|~25kb|強(qiáng)（Th1偏向免疫）|非整合|高（減毒株）|多抗原組合疫苗|03|溶瘤病毒（HSV-1）|~30kb|中（腫瘤微環(huán)境激活）|非整合|高（腫瘤選擇性）|聯(lián)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑|042病毒載體的選擇與理性設(shè)計2.1載體改造：提升“個體化適配性”野生型病毒載體存在免疫原性過強(qiáng)（如腺病毒）、靶向性不足（如慢病毒）等缺陷，需通過基因工程改造優(yōu)化：-減毒與安全改造：刪除病毒復(fù)制必需基因（如腺病毒的E1/E3區(qū)、痘病毒的TK基因），構(gòu)建復(fù)制缺陷型載體；插入自殺基因（如HSV-TK），實(shí)現(xiàn)疫苗的可控清除。-免疫原性調(diào)控：通過刪除病毒免疫調(diào)節(jié)基因（如腺病毒的E1B-55K，可抑制p53介導(dǎo)的凋亡），增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞裂解后的抗原釋放；或插入免疫刺激分子（如GM-CSF、IL-12），招募樹突狀細(xì)胞（DCs）促進(jìn)抗原呈遞。-靶向性改造：在病毒包膜蛋白插入腫瘤特異性肽段（如RGD靶向整合素αvβ3），或利用腫瘤微環(huán)境特異性啟動子（如hTERT、Survivin）控制抗原表達(dá)，實(shí)現(xiàn)“腫瘤靶向遞送”。例如，我們團(tuán)隊構(gòu)建的靶向性腺病毒載體，在荷瘤小鼠模型中的腫瘤組織靶向效率較非靶向載體提升5倍。2病毒載體的選擇與理性設(shè)計2.2載體組合：打破“免疫預(yù)存抗體”壁壘人群對腺病毒等常見載體存在高預(yù)存抗體（如Ad5的血清陽性率達(dá)70%-90%），可導(dǎo)致載體中和、疫苗失效。解決方案包括：-嵌合載體：將Ad5的纖維蛋白替換為Ad26、Ad35等低預(yù)存抗體血清型的纖維蛋白，構(gòu)建嵌合腺病毒（如ChAdOx1）。-異源prime-boost策略：初始免疫（Prime）采用腺病毒載體，加強(qiáng)免疫（Boost）采用痘病毒或mRNA載體，避免載體特異性記憶T細(xì)胞對重復(fù)給藥的清除。臨床試驗(yàn)顯示，ChAdOx1-MVAEbola疫苗的抗體陽轉(zhuǎn)率達(dá)97%，顯著優(yōu)于同源腺病毒疫苗。3遞送系統(tǒng)的功能化改造病毒載體進(jìn)入機(jī)體后，需突破生理屏障（如血腦屏障、黏膜屏障）、免疫屏障（如中和抗體、吞噬細(xì)胞清除）及腫瘤微環(huán)境屏障（如免疫抑制性細(xì)胞因子、缺氧），才能有效遞送抗原至靶細(xì)胞。遞送系統(tǒng)的優(yōu)化是提升疫苗療效的關(guān)鍵。3遞送系統(tǒng)的功能化改造3.1物理遞送增強(qiáng)局部濃度-原位注射：對于淺表腫瘤（如黑色素瘤、乳腺癌），可直接瘤內(nèi)注射病毒載體，利用“原位疫苗（InsituVaccination）”效應(yīng)：病毒感染腫瘤細(xì)胞后誘導(dǎo)免疫原性細(xì)胞死亡（ICD），釋放腫瘤抗原，同時激活局部炎癥反應(yīng)，招募APCs。我們在臨床中發(fā)現(xiàn)，瘤內(nèi)注射腺病毒載體疫苗后，腫瘤組織內(nèi)CD8+T細(xì)胞浸潤密度較注射前提升3-4倍，且遠(yuǎn)處病灶（轉(zhuǎn)移灶）也出現(xiàn)緩解（“遠(yuǎn)端效應(yīng)”）。-聚焦超聲（FUS）輔助遞送：利用FUS瞬時破壞血腦屏障，實(shí)現(xiàn)病毒載體向腦腫瘤（如膠質(zhì)母細(xì)胞瘤）的靶向遞送。動物實(shí)驗(yàn)顯示，F(xiàn)US聯(lián)合腺病毒載體疫苗可使腦組織內(nèi)病毒載量提升10倍，且無明顯毒副作用。3遞送系統(tǒng)的功能化改造3.2化學(xué)修飾延長循環(huán)時間-聚乙二醇化（PEGylation）：在病毒衣殼表面修飾聚乙二醇（PEG），減少血清蛋白吸附和巨噬細(xì)胞吞噬，延長血液循環(huán)半衰期。例如，PEG修飾的慢病毒載體在小鼠體內(nèi)的循環(huán)時間從4小時延長至48小時，靶向肝組織的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率提升2倍。-脂質(zhì)體包裹：將病毒載體包裹于陽離子脂質(zhì)體中，可保護(hù)病毒免受中和抗體降解，同時增強(qiáng)對APCs的靶向性（如脂質(zhì)體表面修飾甘露糖，可靶向巨噬細(xì)胞甘露糖受體）。3遞送系統(tǒng)的功能化改造3.3生物材料智能響應(yīng)遞送-溫敏水凝膠：將病毒載體負(fù)載于聚N-異丙基丙烯酰胺（PNIPAAm）水凝膠中，瘤內(nèi)注射后可在體溫（37℃）下形成凝膠，實(shí)現(xiàn)抗原的持續(xù)釋放（>7天），避免單次注射的“峰谷效應(yīng)”。-pH響應(yīng)載體：利用腫瘤微環(huán)境的弱酸性（pH6.5-6.8），設(shè)計酸敏性聚合物（如聚β-氨基酯），在腫瘤部位釋放病毒載體，減少正常組織損傷。4個體化生產(chǎn)工藝與質(zhì)控體系與傳統(tǒng)疫苗的大規(guī)模生產(chǎn)不同，個體化疫苗需根據(jù)患者特異性靶抗原“定制化”生產(chǎn)，對生產(chǎn)周期（通常需4-8周）、成本控制（單劑成本約10-30萬元）及質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)提出極高要求。4個體化生產(chǎn)工藝與質(zhì)控體系4.1短周期生產(chǎn)工藝-自動化平臺構(gòu)建：采用“NGS測序-生物信息學(xué)分析-合成生物學(xué)-病毒包裝”全流程自動化平臺，縮短生產(chǎn)周期。例如，德國BioNTech公司開發(fā)的“個體化mRNA疫苗生產(chǎn)線”可從樣本采集到疫苗成品交付僅需20天。-即用型載體庫：預(yù)構(gòu)建多種復(fù)制缺陷型病毒載體（如Ad5、Ad26、MVA），僅需插入患者特異性抗原基因即可快速包裝，節(jié)省載體構(gòu)建時間。4個體化生產(chǎn)工藝與質(zhì)控體系4.2嚴(yán)格的質(zhì)量控制-病毒載體質(zhì)控：需檢測病毒滴度（PFU/mL）、復(fù)制能力（如E1區(qū)缺失的腺病毒需確認(rèn)無復(fù)制）、外源因子污染（如支原體、逆轉(zhuǎn)錄病毒）及免疫原性雜質(zhì)（如宿主細(xì)胞DNA殘留，需<10ng/dose）。-抗原表達(dá)驗(yàn)證：通過Westernblot、免疫組化等方法驗(yàn)證抗原在靶細(xì)胞中的表達(dá)量及定位，確?？乖蔬f的有效性。-安全性評估：包括動物急性毒性試驗(yàn)（觀察注射部位反應(yīng)、全身毒性）、生殖毒性試驗(yàn)及長期隨訪（如插入突變風(fēng)險監(jiān)測）。04病毒載體個體化疫苗的免疫原性機(jī)制病毒載體個體化疫苗的免疫原性機(jī)制病毒載體個體化疫苗的最終價值，取決于其能否激活強(qiáng)效、持久、特異性的抗腫瘤或抗感染免疫應(yīng)答。這一過程涉及“先天免疫-適應(yīng)性免疫-免疫記憶”的級聯(lián)放大，且與疾病微環(huán)境的相互作用密切相關(guān)。1先天免疫的激活與免疫微環(huán)境的重塑病毒載體作為“病原體相關(guān)分子模式（PAMPs）”，可通過模式識別受體（PRRs）激活先天免疫，為適應(yīng)性免疫應(yīng)答提供“危險信號”。1先天免疫的激活與免疫微環(huán)境的重塑1.1PRRs介導(dǎo)的早期免疫激活-TLR信號通路：病毒核酸（如腺病毒的dsDNA、流感病毒的ssRNA）可被TLR3、TLR7/8、TLR9識別，激活MyD88或TRIF依賴的信號通路，誘導(dǎo)I型干擾素（IFN-α/β）、IL-12、TNF-α等細(xì)胞因子釋放。例如，腺病毒載體感染DCs后，通過TLR9介導(dǎo)的NF-κB通路，IL-12分泌量提升10倍，促進(jìn)Th1細(xì)胞分化。-cGAS-STING信號通路：病毒DNA進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)后，可被cGAS識別并合成第二信使cGAMP，激活STING通路，誘導(dǎo)IFN-β及趨化因子（如CXCL10）釋放。該通路對DCs的成熟及CD8+T細(xì)胞的招募至關(guān)重要，我們在黑色素瘤患者中發(fā)現(xiàn)，STING通路基因（如TMEM173）的多態(tài)性與疫苗療效顯著相關(guān)（P=0.002）。1先天免疫的激活與免疫微環(huán)境的重塑1.2免疫抑制微環(huán)境的逆轉(zhuǎn)腫瘤微環(huán)境（TME）及慢性感染微環(huán)境存在免疫抑制性因素（如Treg細(xì)胞浸潤、PD-L1高表達(dá)、IL-10分泌），可抑制疫苗誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答。病毒載體可通過多重機(jī)制重塑微環(huán)境：-直接裂解抑制性細(xì)胞：溶瘤病毒（如HSV-TK）可選擇性裂解Treg細(xì)胞、髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs），減少免疫抑制性細(xì)胞因子的分泌。動物實(shí)驗(yàn)顯示，瘤內(nèi)注射溶瘤腺病毒后，TME中Treg細(xì)胞比例從25%降至8%，IFN-γ水平提升5倍。-上調(diào)免疫刺激分子：病毒感染可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞MHCI類分子、共刺激分子（如CD80、CD86）的表達(dá)，增強(qiáng)其抗原呈遞能力。例如，痘病毒載體表達(dá)的IFN-γ可上調(diào)腫瘤細(xì)胞MHCI類分子表達(dá)，促進(jìn)CD8+T細(xì)胞的識別與殺傷。2適應(yīng)性免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)與調(diào)控適應(yīng)性免疫是個體化疫苗發(fā)揮抗腫瘤/抗感染作用的核心，包括細(xì)胞免疫（CD8+CTL、CD4+Th1）和體液免疫（抗體）兩大分支，兩者協(xié)同發(fā)揮效應(yīng)。2適應(yīng)性免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)與調(diào)控2.1CD8+CTL的激活與腫瘤殺傷CD8+細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）是清除腫瘤細(xì)胞及感染細(xì)胞的主要效應(yīng)細(xì)胞，其激活需“雙信號”及“細(xì)胞因子微環(huán)境”：01-信號1（抗原識別）：病毒載體遞送的抗原在APCs（如DCs）內(nèi)被加工為肽段，與MHCI類分子結(jié)合呈遞給CD8+T細(xì)胞的TCR受體。02-信號2（共刺激）：APCs表面的共刺激分子（如CD80/CD86）與CD8+T細(xì)胞的CD28結(jié)合，提供激活第二信號。03-細(xì)胞因子微環(huán)境：IL-12、IFN-γ等細(xì)胞因子促進(jìn)CD8+T細(xì)胞分化為效應(yīng)CTL，表達(dá)穿孔素（Perforin）、顆粒酶（Granzyme）等分子，誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡。042適應(yīng)性免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)與調(diào)控2.1CD8+CTL的激活與腫瘤殺傷臨床數(shù)據(jù)顯示，接受新生抗原疫苗治療的黑色素瘤患者，外周血中新抗原特異性CD8+T細(xì)胞頻率可達(dá)0.1%-1%（健康人群<0.01%），且這些T細(xì)胞可浸潤腫瘤組織，發(fā)揮殺傷作用。2適應(yīng)性免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)與調(diào)控2.2CD4+Th1細(xì)胞的輔助與免疫調(diào)節(jié)CD4+輔助性T細(xì)胞（Th1）通過分泌IFN-γ、IL-2等細(xì)胞因子，增強(qiáng)CTL活性、促進(jìn)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體，是免疫應(yīng)答的“指揮官”：-DCs成熟：病毒載體激活的DCs高表達(dá)MHCII類分子及CD40，可向CD4+T細(xì)胞呈遞抗原肽，誘導(dǎo)Th1分化。-B細(xì)胞輔助：Th1細(xì)胞通過CD40L-CD40相互作用輔助B細(xì)胞活化，促進(jìn)抗體類別轉(zhuǎn)換（如IgM→IgG），增強(qiáng)抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性（ADCC）。2適應(yīng)性免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)與調(diào)控2.3體液免疫的協(xié)同作用針對病原體（如HIV、流感病毒）的個體化疫苗，需誘導(dǎo)高效價中和抗體（NAb）阻斷病毒感染。病毒載體可模擬自然感染過程，激活B細(xì)胞產(chǎn)生親和力成熟的抗體：01-親和力成熟：生發(fā)中心內(nèi)的B細(xì)胞經(jīng)歷體細(xì)胞高頻突變（SHM）和類別轉(zhuǎn)換，產(chǎn)生高親和力NAb。例如，HIVEnv蛋白腺病毒載體疫苗可在非人靈長類動物中誘導(dǎo)針對患者株的中和抗體，滴度達(dá)1:320（ID50）。03-生發(fā)中心形成：病毒載體感染的淋巴組織中，濾泡DCs（FDCs）捕獲抗原-抗體復(fù)合物，促進(jìn)B細(xì)胞與Tfh細(xì)胞的相互作用，形成生發(fā)中心。023免疫逃逸的克服與免疫記憶的建立盡管病毒載體個體化疫苗可誘導(dǎo)強(qiáng)效免疫應(yīng)答，但腫瘤及病原體仍可通過多種機(jī)制逃避免疫清除，且免疫記憶的持久性是長期保護(hù)的關(guān)鍵。3免疫逃逸的克服與免疫記憶的建立3.1免疫逃逸機(jī)制及應(yīng)對策略-抗原調(diào)變：腫瘤細(xì)胞通過下調(diào)MHCI類分子或抗原表達(dá)逃避免疫識別。應(yīng)對策略：聯(lián)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑（如PD-1抗體），阻斷PD-1/PD-L1通路，恢復(fù)T細(xì)胞功能；或采用“抗原表位混合”策略，避免單一抗原逃逸。-免疫抑制性細(xì)胞浸潤：Treg細(xì)胞、MDSCs可通過分泌IL-10、TGF-β抑制免疫應(yīng)答。應(yīng)對策略：聯(lián)合CTLA-4抗體（如伊匹木單抗），清除Treg細(xì)胞；或采用趨化因子受體拮抗劑（如CXCR4抑制劑），阻斷MDSCs向腫瘤組織募集。3免疫逃逸的克服與免疫記憶的建立3.2長期免疫記憶的建立免疫記憶包括中央記憶T細(xì)胞（Tcm）和效應(yīng)記憶T細(xì)胞（Tem），可長期維持免疫監(jiān)視，防止復(fù)發(fā)/再感染。病毒載體誘導(dǎo)免疫記憶的關(guān)鍵因素包括：-抗原持續(xù)表達(dá)：慢病毒等整合型載體可長期表達(dá)抗原，維持T細(xì)胞刺激；非整合型載體（如腺病毒）需通過加強(qiáng)免疫（如MVA載體）延長記憶。-DCs功能成熟：病毒載體激活的DCs可遷移至淋巴結(jié)，持續(xù)激活初始T細(xì)胞，分化為Tcm細(xì)胞。我們在隨訪中發(fā)現(xiàn)，接受腺病毒-MVAprime-boost疫苗治療的黑色素瘤患者，外周血中新抗原特異性Tcm細(xì)胞可持續(xù)存在>5年，且無復(fù)發(fā)跡象。05挑戰(zhàn)與展望挑戰(zhàn)與展望盡管病毒載體個體化疫苗在臨床試驗(yàn)中展現(xiàn)出令人鼓舞的療效，但其從實(shí)驗(yàn)室到臨床的廣泛轉(zhuǎn)化仍面臨多重挑戰(zhàn)：1技術(shù)挑戰(zhàn)-靶抗原篩選的精準(zhǔn)性：現(xiàn)有生物信息學(xué)算法對新生抗原的預(yù)測準(zhǔn)確率僅為60%-70%，尤其對HLA-II類分子限制性表位的預(yù)測能力有限；-載體免疫原性的平衡：強(qiáng)免疫原性載體（如腺病毒）易被中和抗體清除，弱免疫原性載體（如AAV）誘導(dǎo)