2025年衛(wèi)生高級(jí)職稱考試(預(yù)防疾控微生物檢驗(yàn)技術(shù))練習(xí)題附答案一、單項(xiàng)選擇題（共20題，每題1分，每題僅有一個(gè)正確選項(xiàng)）1.結(jié)核分枝桿菌的典型染色特性是A.革蘭陽性，抗酸染色陰性B.革蘭陰性，抗酸染色陽性C.革蘭陽性，抗酸染色陽性D.革蘭陰性，抗酸染色陰性答案：C解析：結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞壁含大量分枝菌酸，革蘭染色不易著色（呈陽性），但抗酸染色呈紅色（陽性）。2.流感病毒分型的主要依據(jù)是A.血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）B.核蛋白（NP）和基質(zhì)蛋白（M1）C.包膜糖蛋白ED.聚合酶復(fù)合體（PB1、PB2、PA）答案：B解析：流感病毒根據(jù)核蛋白（NP）和基質(zhì)蛋白（M1）抗原性不同分為甲、乙、丙三型；亞型劃分依據(jù)為HA和NA。3.高壓蒸汽滅菌法的標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)是A.100℃，30分鐘B.115℃，15分鐘C.121℃，1520分鐘D.134℃，3分鐘答案：C解析：常規(guī)高壓蒸汽滅菌參數(shù)為121℃、103.4kPa（1.05kg/cm2）維持1520分鐘，可殺滅包括芽胞在內(nèi)的所有微生物。4.用于分離霍亂弧菌的選擇性培養(yǎng)基是A.SS瓊脂B.麥康凱瓊脂C.TCBS瓊脂D.巧克力瓊脂答案：C解析：TCBS（硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖）瓊脂通過高pH（8.59.5）抑制革蘭陽性菌，蔗糖發(fā)酵產(chǎn)酸使霍亂弧菌呈黃色菌落。5.以下哪種病原體需在生物安全三級(jí)（BSL3）實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作？A.金黃色葡萄球菌B.新型冠狀病毒（Omicron變異株）C.麻疹病毒D.沙門菌答案：B解析：根據(jù)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》，新型冠狀病毒（原代分離培養(yǎng)、感染性材料操作）需在BSL3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。6.檢測(cè)梅毒螺旋體最常用的血清學(xué)試驗(yàn)是A.快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)（RPR）B.甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）C.梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（TPPA）D.以上均是答案：D解析：RPR和TRUST為非特異性初篩試驗(yàn)，TPPA為特異性確認(rèn)試驗(yàn)，臨床常聯(lián)合使用。7.以下哪項(xiàng)是革蘭染色的關(guān)鍵步驟？A.結(jié)晶紫初染B.碘液媒染C.95%乙醇脫色D.沙黃復(fù)染答案：C解析：脫色時(shí)間過長會(huì)使革蘭陽性菌被誤染為陰性，過短則革蘭陰性菌被誤染為陽性，是染色成敗的關(guān)鍵。8.用于檢測(cè)軍團(tuán)菌的特異性培養(yǎng)基是A.BCYE瓊脂（緩沖活性炭酵母浸膏瓊脂）B.血瓊脂C.營養(yǎng)瓊脂D.中國藍(lán)瓊脂答案：A解析：BCYE瓊脂含L半胱氨酸和鐵離子，是軍團(tuán)菌生長的必需成分，可抑制其他細(xì)菌生長。9.以下哪種病毒不能通過細(xì)胞培養(yǎng)分離？A.脊髓灰質(zhì)炎病毒B.輪狀病毒C.諾如病毒D.單純皰疹病毒答案：C解析：諾如病毒目前尚無穩(wěn)定的細(xì)胞培養(yǎng)體系，主要通過RTPCR檢測(cè)。10.實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制中，“室內(nèi)質(zhì)控”的核心目的是A.評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室間檢測(cè)結(jié)果的一致性B.監(jiān)測(cè)檢測(cè)過程的穩(wěn)定性C.驗(yàn)證新方法的準(zhǔn)確性D.確保儀器設(shè)備的正常運(yùn)行答案：B解析：室內(nèi)質(zhì)控通過定期檢測(cè)質(zhì)控品，監(jiān)測(cè)檢測(cè)系統(tǒng)的精密度和準(zhǔn)確性，及時(shí)發(fā)現(xiàn)批內(nèi)/批間變異。11.肺炎支原體的主要致病物質(zhì)是A.莢膜B.黏附素P1蛋白C.內(nèi)毒素D.外毒素答案：B解析：P1蛋白介導(dǎo)肺炎支原體黏附于呼吸道上皮細(xì)胞，是定植和致病的關(guān)鍵。12.檢測(cè)乙型肝炎病毒（HBV）復(fù)制活躍的指標(biāo)是A.HBsAgB.HBeAgC.抗HBsD.抗HBc答案：B解析：HBeAg陽性提示HBV復(fù)制活躍，傳染性強(qiáng)；HBsAg為感染標(biāo)志，抗HBs為保護(hù)性抗體。13.以下哪種真菌可引起“鵝口瘡”？A.皮膚癬菌B.新生隱球菌C.白假絲酵母菌D.曲霉菌答案：C解析：白假絲酵母菌是機(jī)會(huì)致病菌，免疫低下時(shí)可引起口腔黏膜白色假膜（鵝口瘡）。14.用于檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌耐藥性的常用方法是A.紙片擴(kuò)散法（KB法）B.比例法（Proportionmethod）C.Etest法D.以上均是答案：D解析：結(jié)核分枝桿菌生長緩慢，比例法為金標(biāo)準(zhǔn)，KB法和Etest法也可用于快速檢測(cè)。15.以下哪種細(xì)菌的鞭毛為周鞭毛？A.霍亂弧菌（單鞭毛）B.傷寒沙門菌C.銅綠假單胞菌（單端叢鞭毛）D.空腸彎曲菌（雙端單鞭毛）答案：B解析：傷寒沙門菌周身有鞭毛，運(yùn)動(dòng)活躍；霍亂弧菌為單端單鞭毛。16.檢測(cè)腦膜炎奈瑟菌的最佳標(biāo)本是A.痰液B.腦脊液C.尿液D.糞便答案：B解析：腦膜炎奈瑟菌主要引起化膿性腦膜炎，腦脊液中細(xì)菌濃度高，需保溫快速送檢。17.以下哪種方法可用于區(qū)分腸桿菌科細(xì)菌和非發(fā)酵菌？A.氧化酶試驗(yàn)B.觸酶試驗(yàn)C.凝固酶試驗(yàn)D.尿素酶試驗(yàn)答案：A解析：腸桿菌科細(xì)菌氧化酶陰性，非發(fā)酵菌（如銅綠假單胞菌）氧化酶陽性，是重要鑒別點(diǎn)。18.人乳頭瘤病毒（HPV）分型的主要依據(jù)是A.L1基因序列B.E6/E7基因C.包膜蛋白D.核衣殼蛋白答案：A解析：HPV分型基于L1基因的核酸序列差異，WHO推薦使用PCR結(jié)合測(cè)序或基因芯片方法。19.以下哪種消毒方法屬于濕熱消毒？A.紫外線照射B.環(huán)氧乙烷氣體滅菌C.巴氏消毒法（62℃，30分鐘）D.干熱滅菌（160℃，2小時(shí)）答案：C解析：濕熱消毒利用水蒸氣或熱水，巴氏消毒、高壓蒸汽滅菌均屬此類；干熱滅菌為干熱法。20.布魯菌的主要傳播途徑是A.呼吸道飛沫B.消化道（食入未消毒乳制品）C.蟲媒叮咬D.性接觸答案：B解析：布魯菌可通過接觸感染動(dòng)物或食入未消毒的牛奶、奶酪等傳播，職業(yè)暴露（獸醫(yī)、牧民）為高危人群。二、多項(xiàng)選擇題（共10題，每題2分，每題有25個(gè)正確選項(xiàng)，錯(cuò)選、漏選均不得分）1.以下屬于高致病性病原微生物的有A.鼠疫耶爾森菌B.炭疽芽胞桿菌（肺炭疽）C.新型冠狀病毒（原始株）D.金黃色葡萄球菌答案：ABC解析：根據(jù)《人間傳染的病原微生物名錄》，鼠疫耶爾森菌、肺炭疽芽胞桿菌、新型冠狀病毒（感染性材料操作）屬于第一類/第二類高致病性病原微生物。2.實(shí)驗(yàn)室生物安全柜的作用包括A.保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員B.保護(hù)實(shí)驗(yàn)樣本C.保護(hù)環(huán)境D.替代通風(fēng)系統(tǒng)答案：ABC解析：生物安全柜通過定向氣流和高效過濾器（HEPA）實(shí)現(xiàn)人員、樣本和環(huán)境的三重保護(hù)，但不能替代實(shí)驗(yàn)室整體通風(fēng)。3.以下哪些是結(jié)核分枝桿菌的特性？A.生長緩慢（代時(shí)1824小時(shí)）B.耐干燥（在痰液中可存活68個(gè)月）C.對(duì)75%乙醇敏感D.對(duì)紫外線敏感答案：ABCD解析：結(jié)核分枝桿菌因細(xì)胞壁含大量脂質(zhì)，耐干燥、酸、堿，但對(duì)乙醇、紫外線（30分鐘）和濕熱敏感。4.檢測(cè)病毒核酸的常用方法有A.實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）B.逆轉(zhuǎn)錄PCR（RTPCR）C.核酸雜交（如FISH）D.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）答案：ABC解析：ELISA檢測(cè)病毒抗原或抗體，不屬于核酸檢測(cè)；qPCR、RTPCR、FISH均為核酸檢測(cè)技術(shù)。5.以下哪些措施可用于控制實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌污染？A.定期進(jìn)行環(huán)境微生物監(jiān)測(cè)（如沉降菌計(jì)數(shù)）B.操作前用75%乙醇擦拭臺(tái)面C.污染區(qū)域用含氯消毒劑（有效氯5000mg/L）消毒D.所有廢棄物高壓滅菌后處理答案：ABCD解析：實(shí)驗(yàn)室污染控制需結(jié)合環(huán)境監(jiān)測(cè)、表面消毒、污染物處理等綜合措施。6.以下屬于腸道正常菌群的有A.大腸埃希菌B.雙歧桿菌C.產(chǎn)氣莢膜梭菌D.霍亂弧菌答案：ABC解析：霍亂弧菌為外來致病菌，正常腸道無定植；大腸埃希菌、雙歧桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌（少量）為正常菌群。7.以下哪些是金黃色葡萄球菌的致病物質(zhì)？A.血漿凝固酶B.腸毒素C.殺白細(xì)胞素D.鏈激酶答案：ABC解析：鏈激酶是A群鏈球菌的致病物質(zhì)；血漿凝固酶、腸毒素（引起食物中毒）、殺白細(xì)胞素均為金葡菌致病因子。8.以下哪些病毒可通過垂直傳播（母嬰傳播）？A.乙型肝炎病毒（HBV）B.風(fēng)疹病毒C.人類免疫缺陷病毒（HIV）D.甲型肝炎病毒（HAV）答案：ABC解析：HAV主要通過糞口傳播，無垂直傳播；HBV（產(chǎn)時(shí)）、風(fēng)疹病毒（宮內(nèi)）、HIV（宮內(nèi)/產(chǎn)時(shí)/哺乳）可垂直傳播。9.以下哪些是真菌的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法？A.直接鏡檢（KOH濕片法）B.真菌培養(yǎng)（沙保弱培養(yǎng)基）C.血清學(xué)檢測(cè)（G試驗(yàn)、GM試驗(yàn)）D.核酸檢測(cè)（ITS區(qū)測(cè)序）答案：ABCD解析：真菌檢測(cè)包括形態(tài)學(xué)（鏡檢）、培養(yǎng)、血清學(xué)（G試驗(yàn)檢測(cè)βD葡聚糖，GM試驗(yàn)檢測(cè)半乳甘露聚糖）及分子生物學(xué)方法。10.以下哪些是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的關(guān)鍵要素？A.人員培訓(xùn)與考核B.儀器設(shè)備校準(zhǔn)C.標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用D.室間質(zhì)評(píng)（EQA）參與答案：ABCD解析：質(zhì)量控制涵蓋人員、設(shè)備、試劑、操作、結(jié)果驗(yàn)證等全流程，室間質(zhì)評(píng)用于評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室間一致性。三、填空題（共10題，每題1分）1.細(xì)菌的基本形態(tài)包括球狀、桿狀和__________。答案：螺旋狀2.檢測(cè)軍團(tuán)菌抗體的常用方法是__________（如間接免疫熒光法）。答案：血清學(xué)試驗(yàn)3.生物安全柜II級(jí)A2型的氣流模式為__________（垂直層流）。答案：部分循環(huán)，部分外排4.支原體缺乏__________，因此對(duì)青霉素類抗生素不敏感。答案：細(xì)胞壁5.用于分離培養(yǎng)流感病毒的常用細(xì)胞系是__________（如MDCK細(xì)胞）。答案：狗腎傳代細(xì)胞6.結(jié)核菌素試驗(yàn)（PPD試驗(yàn)）的原理是__________（遲發(fā)型超敏反應(yīng)）。答案：IV型超敏反應(yīng)7.霍亂弧菌的主要致病物質(zhì)是__________（可引起劇烈腹瀉）。答案：霍亂腸毒素（CT）8.實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)HIV的“金標(biāo)準(zhǔn)”是__________（如WesternBlot）。答案：蛋白印跡法9.真菌的無性孢子包括分生孢子、孢囊孢子和__________。答案：芽生孢子10.高壓蒸汽滅菌效果監(jiān)測(cè)的生物指示劑是__________（需121℃、15分鐘被殺滅）。答案：嗜熱脂肪芽胞桿菌四、簡(jiǎn)答題（共5題，第12題每題5分，第35題每題8分）1.簡(jiǎn)述革蘭染色的操作步驟及各步驟的作用。答案：（1）初染：結(jié)晶紫染色1分鐘，使所有細(xì)菌著色（紫色）。（2）媒染：碘液處理1分鐘，與結(jié)晶紫結(jié)合形成復(fù)合物，增強(qiáng)染料與細(xì)胞的結(jié)合力。（3）脫色：95%乙醇脫色30秒1分鐘，革蘭陽性菌因細(xì)胞壁肽聚糖層厚，保留紫色；革蘭陰性菌肽聚糖層薄，脫色后無色。（4）復(fù)染：沙黃（或稀釋石碳酸復(fù)紅）染色30秒，革蘭陰性菌被染成紅色，革蘭陽性菌保持紫色。2.列舉5種實(shí)驗(yàn)室常用的分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)及其應(yīng)用。答案：（1）實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）：定量檢測(cè)病原體核酸（如新冠病毒載量）。（2）聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）：擴(kuò)增特定基因片段（如結(jié)核分枝桿菌IS6110基因）。（3）基因測(cè)序（如Sanger測(cè)序）：確定病原體基因序列（如流感病毒分型）。（4）基因芯片：同時(shí)檢測(cè)多種病原體（如呼吸道病毒多重檢測(cè)）。（5）環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）：快速檢測(cè)病原體（如登革病毒現(xiàn)場(chǎng)篩查）。3.分析實(shí)驗(yàn)室發(fā)生細(xì)菌交叉污染的可能原因及預(yù)防措施。答案：可能原因：（1）操作不規(guī)范：如未在生物安全柜內(nèi)操作、樣本開蓋時(shí)氣溶膠擴(kuò)散。（2）實(shí)驗(yàn)室分區(qū)不合理：清潔區(qū)與污染區(qū)未嚴(yán)格分隔。（3）設(shè)備污染：移液槍、離心管架未定期消毒。（4）樣本處理不當(dāng)：同一操作臺(tái)同時(shí)處理多份樣本。（5）培養(yǎng)基或試劑污染：滅菌不徹底的培養(yǎng)基含雜菌。預(yù)防措施：（1）嚴(yán)格遵守生物安全操作規(guī)范（如戴手套、穿隔離衣）。（2）實(shí)驗(yàn)室分區(qū)管理（清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū)），單向流動(dòng)。（3）定期對(duì)設(shè)備（如生物安全柜、離心機(jī)）進(jìn)行消毒（75%乙醇擦拭，紫外線照射30分鐘）。（4）樣本處理時(shí)使用一次性吸頭，避免重復(fù)使用。（5）培養(yǎng)基滅菌后做無菌試驗(yàn)（37℃培養(yǎng)24小時(shí)無細(xì)菌生長）。4.簡(jiǎn)述新型冠狀病毒（SARSCoV2）實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的主要方法及質(zhì)量控制要點(diǎn)。答案：主要檢測(cè)方法：（1）核酸檢測(cè)：RTPCR（檢測(cè)ORF1ab、N基因），為確診依據(jù)。（2）抗原檢測(cè)：膠體金法（快速篩查，適用于高流行區(qū)）。（3）抗體檢測(cè)：ELISA/化學(xué)發(fā)光法（檢測(cè)IgM、IgG，用于流行病學(xué)調(diào)查）。質(zhì)量控制要點(diǎn)：（1）樣本采集：鼻咽拭子需規(guī)范操作（深入咽后壁/鼻甲，旋轉(zhuǎn)3圈），避免唾液污染。（2）核酸提?。菏褂媒?jīng)認(rèn)證的試劑盒，設(shè)置陰/陽性對(duì)照（如內(nèi)標(biāo)基因RNP）。（3）擴(kuò)增過程：嚴(yán)格分區(qū)（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增分析區(qū)），避免氣溶膠污染。（4）結(jié)果判讀：Ct值＜37為陽性，≥40為陰性，3740需復(fù)檢。（5）設(shè)備校準(zhǔn)：實(shí)時(shí)熒光PCR儀定期校準(zhǔn)（溫度、熒光強(qiáng)度）。5.試述腸出血性大腸埃希菌（EHEC，如O157:H7）的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)流程。答案：檢測(cè)流程：（1）樣本處理：糞便/食品樣本接種選擇性培養(yǎng)基（如山梨醇麥康凱瓊脂，SMAC）。（2）初步篩選：O157:H7不發(fā)酵山梨醇，在SMAC上形成無色菌落（普通大腸埃希菌為粉紅色）。（3）生化鑒定：氧化酶陰性，靛基質(zhì)陽性，IMViC試驗(yàn)（++）。（4）血清學(xué)確認(rèn)：用O157和H7抗血清做玻片凝集試驗(yàn)。（5）毒力檢測(cè)：PCR檢測(cè)志賀樣毒素基因（stx1、stx2）和eae基因（黏附素）。（6）分型檢測(cè)（可選）：脈沖場(chǎng)凝膠電泳（PFGE）用于爆發(fā)株溯源。五、應(yīng)用題（共3題，第1題10分，第23題每題15分）1.某醫(yī)院檢驗(yàn)科報(bào)告1例疑似炭疽病例（皮膚黑痂樣本），請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方案（包括樣本處理、檢測(cè)方法及結(jié)果判讀）。答案：檢測(cè)方案：（1）樣本處理：皮膚黑痂用無菌生理鹽水濕潤后研磨，制成懸液。（2）涂片鏡檢：革蘭染色見革蘭陽性粗大桿菌，呈竹節(jié)狀排列；莢膜染色可見明顯莢膜（在含血清培養(yǎng)基中更易觀察）。（3）分離培養(yǎng)：接種血瓊脂平板（37℃，24小時(shí)），觀察典型菌落（灰白色、卷發(fā)狀邊緣）；同時(shí)接種碳酸氫鈉瓊脂（5%CO?環(huán)境），形成黏液型菌落（有莢膜）。（4）生化鑒定：觸酶陽性，分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，動(dòng)力陰性（與其他需氧芽胞桿菌鑒別）。（5）毒力檢測(cè)：PCR檢測(cè)炭疽毒素基因（pagA、lef、cya）和莢膜基因（capBCAD）。（6）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)（可選）：小鼠皮下接種培養(yǎng)物，72小時(shí)內(nèi)死亡，剖檢可見脾臟腫大，心血涂片見大量有莢膜的革蘭陽性桿菌。結(jié)果判讀：鏡檢、培養(yǎng)、生化及毒力基因檢測(cè)均陽性可確診為炭疽芽胞桿菌；若僅鏡檢或培養(yǎng)陽性需結(jié)合臨床癥狀。2.某社區(qū)爆發(fā)諾如病毒胃腸炎疫情（50例患者，癥狀為嘔吐、水樣便），作為疾控中心微生物檢驗(yàn)人員，需完成以下任務(wù)：（1）設(shè)計(jì)樣本采集與運(yùn)輸方案；（2）制定實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)流程；（3）提出防控建議。答案：（1）樣本采集與運(yùn)輸：采集對(duì)象：急性期患者（發(fā)病2448小時(shí)內(nèi)）糞便/肛拭子，至少10份；環(huán)境樣本（患者嘔吐物、水龍頭表面）。采集量：糞便510g/份，肛拭子用含病毒保存液的管收集。運(yùn)輸條件：樣本置于4℃冷藏（避免凍融），24小時(shí)內(nèi)送檢；若需長途運(yùn)輸，加冰袋（20℃以下可長期保存）。（2）實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)流程：核酸提取：糞便樣本用RNA提取試劑盒（如QIAampViralRNAMiniKit）提取病毒RNA。RTPCR檢測(cè)：擴(kuò)增諾如病毒RNA依賴的RNA聚合酶（RdRp）基因或衣殼蛋白（VP1）基因，引物覆蓋GI、GII群。基因測(cè)序：陽性樣本進(jìn)行VP1區(qū)測(cè)序，確定基因型（如GII.4型）。環(huán)境樣本檢測(cè)：嘔吐物用