單克隆抗體的制備1975年英國科學家米爾斯坦和柯勒發(fā)明了單克隆抗體的制備技術(shù)，于1984年獲得了諾貝爾生理學或醫(yī)學獎?？茖W思維：采用模型與建模的方法，闡明單克隆抗體的制備過程。生命觀念：通過學習雜交瘤細胞的篩選原理，強化生命的物質(zhì)觀和結(jié)構(gòu)功能觀。社會責任：了解單克隆抗體在醫(yī)學領(lǐng)域上的應(yīng)用，認同其優(yōu)勢和發(fā)展?jié)摿ΑW習目標：視頻視頻-抗癌單抗藥物提出問題如何獲得單克隆抗體？傳統(tǒng)抗體制備方法抗原傳統(tǒng)抗血清（多種抗體混合）免疫1

1234缺陷：產(chǎn)量低、純度低，特異性差。如何解決上述缺陷呢？資料（P49）：①小鼠在外界環(huán)境中會接觸多種抗原，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類多達百萬種以上②每個B淋巴細胞（漿細胞）只分泌一種特異性的抗體每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體單一B淋巴細胞單一B淋巴細胞群選擇克隆產(chǎn)生大量純度高特異性強的抗體（單克隆抗體）克隆單一的B淋巴細胞，形成B淋巴細胞群，由細胞群產(chǎn)生大量的純度高的抗體一個正常的B淋巴細胞不可能無限增殖的。怎樣才能使B細胞在產(chǎn)生抗體的同時，具備無限增殖能力呢？大量制備單一抗體的思路：一個極富創(chuàng)造力的方案：動物細胞融合雜交瘤細胞動物細胞培養(yǎng)單克隆抗體骨髓瘤細胞（癌細胞）能無限增殖一個B淋巴細胞能分泌專一特異性抗體既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體1975年英國科學家米爾斯坦和柯勒發(fā)明了單克隆抗體的制備技術(shù)，于1984年獲得了諾貝爾生理學或醫(yī)學獎。①用特定抗原對小鼠進行免疫的原因？②從免疫小鼠脾臟中得到的B淋巴細胞是否都能產(chǎn)生抗特定抗原的特異性抗體？③骨髓瘤細胞、免疫的B淋巴細胞各有何特點？④

免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后，得到的細胞是否都是雜交瘤細胞？雜交瘤細胞有何特點？單克隆抗體的制備過程活動一：請大家結(jié)合教材P48—49相關(guān)內(nèi)容，以小組為單位，討論單克隆抗體制備過程(2min)，回答下列問題活動二：建構(gòu)模型（5min）嘗試利用下列素材構(gòu)建單克隆抗體制備流程圖（用素材+箭頭的形式）特定抗原免疫小鼠體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔培養(yǎng)骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合B2B3B1瘤瘤瘤瘤B2瘤B3瘤瘤瘤B1特定培養(yǎng)基篩選克隆化培養(yǎng)和抗體檢測B1瘤瘤瘤瘤單克隆抗體BnBnBn單克隆抗體的制備過程①用特定抗原對小鼠進行免疫的原因？②從免疫小鼠脾臟中得到的B淋巴細胞是否都能產(chǎn)生抗特定抗原的特異性抗體？③骨髓瘤細胞、免疫的B淋巴細胞各有何特點？④

免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后，得到的細胞是否都是雜交瘤細胞？雜交瘤細胞有何特點？⑤雜交瘤細胞是如何篩選出來的？⑥是否所有的雜交瘤細胞都能產(chǎn)生所需的抗體？單克隆抗體的制備過程拓展：雜交瘤細胞的篩選通常用HAT培養(yǎng)基,其中含有次黃嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷3種關(guān)鍵成分。哺乳動物正常細胞的DNA合成有D和S兩條途徑,淋巴細胞中雖有D途徑和S途徑,但一般不分裂增殖;鼠骨髓瘤細胞雖只有D途徑,但能不斷分裂增殖。氨基蝶呤可阻斷D途徑,S途徑需要HGPRT和TK兩種酶的參與,以催化次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷用于DNA合成。據(jù)此分析,HAT培養(yǎng)基上只有

細胞能生長,其他類別細胞不能生長的原因是，該類細胞能生長的原因是

。雜交瘤細胞是如何篩選出來的？（第1次篩選）請大家閱讀下列相關(guān)內(nèi)容，以小組為單位，討論(2min)，嘗試回答問題單克隆抗體的制備過程方法：用培養(yǎng)液

稀釋培養(yǎng)雜交瘤細胞(多種)每一個孔中盡量只接種一個雜交瘤細胞抗原—抗體雜交抗原—抗體特異性結(jié)合原理：抗體檢測呈

陽性的雜交瘤細胞

多孔細胞培養(yǎng)板陽性孔中的細胞還不能保證是來自單個細胞，挑選陽性孔的細胞繼續(xù)進行有限稀釋，一般需進行3～4次，直至確信每個孔中增殖的細胞為單克隆細胞?？寺』囵B(yǎng)和抗體篩選（第2次篩選）是否所有的雜交瘤細胞都能產(chǎn)生所需的抗體？單克隆抗體第二次篩選雜交細胞多種雜交瘤細胞體外或體內(nèi)培養(yǎng)第一次篩選骨髓瘤細胞

誘導(dǎo)融合分泌特異抗體的雜交瘤細胞雜交瘤細胞群提取免疫的多種B淋巴細胞既能大量繁殖又能產(chǎn)生抗體注射抗原小結(jié)：單克隆抗體的制備過程腫瘤是引起老齡犬死亡的主要原因之一,寵物腫瘤治療目前仍以手術(shù)、放療、化療為主。研究發(fā)現(xiàn),cPD-1單克隆抗體可用于進行腫瘤免疫治療。下圖是通過小鼠雜交瘤細胞制備cPD-1單克隆抗體的流程。請回答下列問題:(1)如圖所示,從小鼠脾臟中獲取已免疫的B淋巴細胞之前,需要用

注射多只小鼠。(2)圖中①表示誘導(dǎo)細胞融合,動物細胞特有的融合方法是

_。(3)圖中③進行的原理是

。鞏固新知cPD-1滅活病毒誘導(dǎo)法抗原抗體特異性結(jié)合（2020·江蘇·高考真題）新型冠狀病毒可通過表面的棘突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細胞的ACE2受體結(jié)合，侵入人體，引起肺炎。圖2為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：據(jù)圖2所示，研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射

免疫小鼠以激活小鼠的免疫細胞，再提取激活的B細胞與骨髓瘤細胞融合，用HAT培養(yǎng)基篩選獲得

細胞。因為同一種抗原可能激活

細胞