實(shí)驗(yàn)室消毒管理制度第一章總則1.1目的為阻斷病原微生物在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)交叉?zhèn)鞑?，保障人員、動(dòng)物、樣本及環(huán)境安全，依據(jù)《中華人民共和國(guó)生物安全法》《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》《消毒管理辦法》《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB194892008）以及本單位《生物安全手冊(cè)》第3版，制定本制度。1.2適用范圍本制度覆蓋本單位所有開展微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)、分子生物學(xué)、動(dòng)物解剖、化學(xué)毒理等實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的房間、緩沖間、傳遞窗、污物通道、空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)、實(shí)驗(yàn)廢棄物暫存點(diǎn)、人員淋浴間及配套公共區(qū)域。制度適用于在編人員、研究生、外來合作者、設(shè)備維保商、保潔公司、醫(yī)療廢物轉(zhuǎn)運(yùn)人員。1.3管理原則“誰操作、誰消毒、誰記錄、誰負(fù)責(zé)”原則；“分區(qū)分類、定時(shí)定點(diǎn)、定量定人”原則；“消毒劑合法、濃度可測(cè)、作用可證、殘留可控”原則；“事件倒查、記錄溯源、整改閉環(huán)”原則。第二章組織與職責(zé)2.1生物安全委員會(huì)（簡(jiǎn)稱“生安會(huì)”）主任由單位法人擔(dān)任，副主任由實(shí)驗(yàn)室與設(shè)備管理處處長(zhǎng)擔(dān)任，成員包括檢驗(yàn)科、動(dòng)物中心、后勤保障部、保衛(wèi)科、感控科、法務(wù)部負(fù)責(zé)人。生安會(huì)每季度召開一次消毒專題會(huì)議，審議消毒效果評(píng)價(jià)報(bào)告，批準(zhǔn)新消毒技術(shù)或變更方案。2.2消毒責(zé)任人（DisinfectionOfficer,DO）每個(gè)實(shí)驗(yàn)單元設(shè)1名DO，由PI提名、生安會(huì)考核通過后任命，任期2年。DO必須持有“生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室培訓(xùn)合格證”和“消毒員特種作業(yè)證”。職責(zé)：a)編制本單元年度消毒計(jì)劃及預(yù)算；b)建立消毒劑臺(tái)賬，每月盤點(diǎn)一次；c)組織月度消毒效果監(jiān)測(cè)，出具報(bào)告；d)發(fā)生生物安全事件時(shí)，30min內(nèi)到場(chǎng)指揮消毒處置；e)每年至少開展2次消毒應(yīng)急演練。2.3實(shí)驗(yàn)人員a)掌握本制度全部條款及本實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目專用消毒SOP；b)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后30min內(nèi)完成臺(tái)面、設(shè)備、容器消毒并填寫記錄；c)發(fā)現(xiàn)消毒失敗或疑似污染，立即報(bào)告DO并暫停實(shí)驗(yàn)。2.4后勤保障部a)負(fù)責(zé)采購(gòu)、儲(chǔ)存、發(fā)放國(guó)家批準(zhǔn)文號(hào)的消毒劑；b)建立5–30℃避光庫(kù)，雙人雙鎖，安裝防爆燈及泄漏報(bào)警器；c)每月5日前向生安會(huì)提交上月消毒劑消耗報(bào)表。2.5感控科a)每季度對(duì)實(shí)驗(yàn)室高頻接觸表面（門把手、鍵盤、電話、水龍頭）進(jìn)行ATP生物熒光隨機(jī)抽檢，樣本量≥30點(diǎn)；b)對(duì)檢出RLU>200的表面，24h內(nèi)下發(fā)整改通知并跟蹤復(fù)測(cè)。第三章消毒分區(qū)與等級(jí)3.1分區(qū)代碼A區(qū)：普通公共走廊、辦公室；B區(qū)：緩沖間、準(zhǔn)備間；C區(qū)：生物安全一級(jí)（BSL1）實(shí)驗(yàn)間；D區(qū)：生物安全二級(jí)（BSL2）實(shí)驗(yàn)間；E區(qū)：生物安全三級(jí)（BSL3）核心工作間；F區(qū)：動(dòng)物負(fù)壓隔離器、解剖室；G區(qū)：醫(yī)療廢物暫存冷庫(kù)。3.2消毒等級(jí)Level1：預(yù)防性消毒，降低一般微生物負(fù)荷；Level2：靶向消毒，針對(duì)已知病原（如結(jié)核分枝桿菌、金黃色葡萄球菌）；Level3：終末消毒，生物安全柜泄漏、容器破損、人員暴露后。3.3交叉索引表D區(qū)日常操作后→Level1；D區(qū)操作含呼吸道樣本→Level2；D區(qū)發(fā)生樣本溢灑→Level3；E區(qū)無論何種操作→每日Level2+每周Level3。第四章消毒劑準(zhǔn)入與配制4.1準(zhǔn)入白名單僅允許使用下列國(guó)家批準(zhǔn)產(chǎn)品，且須在有效期內(nèi)：a)含氯類：次氯酸鈉（有效氯5–6%）、二氯異氰尿酸鈉粉（60%）；b)過氧化物類：7.5%過氧化氫、2%過氧乙酸；c)醛類：2%堿性戊二醛；d)醇類：75%乙醇、70%異丙醇；e)季銨鹽類：0.2%苯扎溴銨；f)復(fù)方類：含0.5%次氯酸+0.1%過氧化氫的霧化液。4.2配制室要求獨(dú)立負(fù)壓房間，通風(fēng)次數(shù)≥12次/h，配備洗眼器、應(yīng)急噴淋、防腐蝕手套箱。4.3配制步驟（以1L有效氯1000mg/L為例）步驟1：穿戴C級(jí)防護(hù)服、護(hù)目鏡、丁腈長(zhǎng)手套；步驟2：量取20℃純化水900mL倒入防腐蝕量筒；步驟3：用移液管吸取5%次氯酸鈉原液20mL，沿壁緩慢加入；步驟4：補(bǔ)純化水至1L，顛倒混勻3次；步驟5：用DPD比色法測(cè)定游離氯，讀數(shù)應(yīng)在950–1050mg/L；步驟6：貼標(biāo)簽“1000mg/LCl?，配制人××，日期時(shí)間”，限24h內(nèi)使用；步驟7：廢液用1%硫代硫酸鈉中和至無色，pH7–8后排放。4.4濃度監(jiān)測(cè)每批次配制后必測(cè)；使用中的含氯消毒液每4h復(fù)測(cè)；記錄于《消毒劑濃度監(jiān)測(cè)表》，保存3年。第五章日常消毒方法與流程5.1工作臺(tái)面消毒a)操作前：75%乙醇噴霧均勻，靜置1min，無菌紗布單向擦拭；b)操作中：每30min重復(fù)一次；c)操作后：先移除所有可移動(dòng)器具，用1000mg/L含氯消毒液浸漬紗布覆蓋臺(tái)面10min，再擦拭；d)遇核酸污染：立即用2%過氧乙酸覆蓋30min，之后用0.1MNaOH二次擦拭，最后純水擦凈。5.2生物安全柜消毒類型：Ⅱ級(jí)A2型為例a)關(guān)機(jī)前消毒：①取出全部物品，廢液缸內(nèi)加5g/L過氧乙酸浸泡；②用75%乙醇噴內(nèi)壁，10min后擦干；③開啟紫外燈30min（記錄累計(jì)時(shí)間，燈管壽命≤2000h）；b)每月深度消毒：①斷電，拆下前窗玻璃面板；②2%堿性戊二醛擦拭風(fēng)機(jī)葉輪、高效濾框，作用30min；③用無菌水擦凈，晾干后復(fù)位；④更換手套，進(jìn)行柜內(nèi)沉降菌檢測(cè)，≤1CFU/皿合格。5.3離心機(jī)消毒a)每日：轉(zhuǎn)子取出，75%乙醇擦拭；b)每周：轉(zhuǎn)子浸沒于500mg/L含氯消毒液，30min后純水沖洗，烘干；c)發(fā)生試管破裂：①停機(jī)30min待氣溶膠沉降；②用鑷子夾碎片，投入1%含氯消毒液的銳器盒；③離心艙內(nèi)用1000mg/L含氯紗布覆蓋1h；④用ATP測(cè)試儀檢測(cè)，RLU<50方可重新啟用。5.4移液器消毒a)每日：外表面75%乙醇擦拭；b)每月：拆卸下半支，浸泡于75%乙醇15min，晾干后潤(rùn)滑Oring；c)處理感染性樣本后：立即整體浸入2%戊二醛30min，再按常規(guī)清洗。5.5地面消毒a)每日閉館后：①用500mg/L含氯消毒液濕拖，停留15min；②再用清水二次拖凈；b)出現(xiàn)溢灑：①用吸附巾覆蓋5min；②5000mg/L含氯消毒液傾倒覆蓋30min；③鏟入生物危害袋，地面重新拖洗3遍。5.6手部消毒a)進(jìn)入BSL2前：用速干手消毒劑（75%乙醇+1%氯己定）3mL，六步搓手法≥30s；b)脫除手套后：同上；c)發(fā)生手套破損：立即撤離，用流動(dòng)水+抗菌洗手液沖洗2min，再速干消毒。5.7個(gè)人防護(hù)裝備（PPE）消毒a)重復(fù)用防護(hù)服：①脫下前用2000mg/L含氯消毒液噴霧全身；②裝入水溶性洗衣袋，扎口；③交醫(yī)院洗衣房，專機(jī)90℃熱水+含氯洗滌劑洗滌30min；b)一次性PPE：按醫(yī)療廢物直接丟棄，不消毒。第六章空氣消毒6.1紫外燈消毒a)安裝高度1.8–2.2m，功率≥1.5W/m3；b)每日22:00–24:00自動(dòng)開啟，累計(jì)計(jì)時(shí)；c)燈管每半年用乙醇棉球擦拭灰塵；d)強(qiáng)度<70μW/cm2時(shí)立即更換。6.2過氧化氫干霧消毒a)適用場(chǎng)景：BSL3終末、BSL2疫情加強(qiáng)期；b)設(shè)備：6%H?O?干霧發(fā)生器，粒徑<10μm；c)參數(shù)：劑量8mL/m3，噴霧45min，密閉靜置120min，通風(fēng)60min；d)驗(yàn)證：用1×10?CFU枯草芽孢桿菌指示劑6點(diǎn)布放，殺滅對(duì)數(shù)值≥6.0；e)人員：操作者穿C級(jí)防護(hù)服，佩戴正壓呼吸器；f)記錄：打印溫濕度、濃度曲線，PDF版上傳LIMS系統(tǒng)。第七章污水與廢棄物消毒7.1實(shí)驗(yàn)室污水a(chǎn))BSL2及以上實(shí)驗(yàn)室洗手池、洗眼器下水匯入專用收集罐；b)罐內(nèi)預(yù)先投加10%次氯酸鈉，維持余氯≥10mg/L，接觸時(shí)間≥90min；c)排放前用N,N二乙基對(duì)苯二胺（DPD）比色法檢測(cè)，余氯6–9mg/L方可排入市政管網(wǎng)；d)記錄液位、投藥量、余氯值，保存3年。7.2醫(yī)療廢物a)分類：感染性、損傷性、藥物性、化學(xué)性；b)包裝：①感染性廢物用黃色生物危害袋，厚度≥0.05mm；②損傷性廢物投入硬質(zhì)銳器盒，裝載量≤3/4；c)消毒：①袋外噴灑1000mg/L含氯消毒液，靜置10min；②封扎后貼“已消毒”標(biāo)簽，注明日期、科室、重量；d)暫存：專用冷庫(kù)2–8℃，≤48h；e)轉(zhuǎn)運(yùn)：交有資質(zhì)公司，聯(lián)單簽字，電子秤精確到0.1kg。第八章消毒效果監(jiān)測(cè)與評(píng)價(jià)8.1監(jiān)測(cè)項(xiàng)目a)微生物指標(biāo)：沉降菌、表面涂抹、手指涂抹；b)化學(xué)指標(biāo)：消毒劑殘留、中和劑驗(yàn)證；c)物理指標(biāo)：紫外強(qiáng)度、過氧化氫濃度。8.2采樣方法a)沉降菌：Φ90mmTSA平皿，暴露30min，36℃培養(yǎng)48h；b)表面涂抹：用無菌拭子蘸取0.1%硫代硫酸鈉中和液，在5cm×5cm規(guī)格板內(nèi)橫豎各涂抹5次，投入10mL中和管，振蕩80次，取1mL傾注培養(yǎng)；c)手指涂抹：被檢人五指并攏在10mL中和液中來回揉搓30次，取1mL培養(yǎng)。8.3判定標(biāo)準(zhǔn)a)BSL2工作臺(tái)面：≤3CFU/cm2；b)BSL3工作臺(tái)面：≤1CFU/cm2；c)手套指尖：≤5CFU/手；d)紫外燈強(qiáng)度≥70μW/cm2；e)過氧化氫殘留<1ppm。8.4不合格處置a)立即通知DO，暫停相關(guān)區(qū)域?qū)嶒?yàn)；b)重新清潔消毒；c)復(fù)測(cè)合格后方可恢復(fù)使用；d)生安會(huì)48h內(nèi)召開分析會(huì)，形成CAPA報(bào)告。第九章應(yīng)急預(yù)案9.1溢灑事件a)立即廣播“紅色溢灑”，關(guān)閉空調(diào)，設(shè)置1m隔離圈；b)操作人員穿雙層手套、防水圍裙，用吸附巾覆蓋；c)配置5000mg/L含氯消毒液，由外向內(nèi)傾倒，作用30min；d)鏟入生物危害袋，表面再用75%乙醇擦拭；e)填寫《溢灑處置記錄》，拍照上傳LIMS；f)DO在24h內(nèi)完成追蹤培養(yǎng)，結(jié)果陰性方可解除封鎖。9.2離心破裂a(bǔ))停機(jī)30min，關(guān)閉艙門；b)后續(xù)流程同9.1，增加轉(zhuǎn)子高壓滅菌121℃30min；c)若氣溶膠可能擴(kuò)散至走廊，啟動(dòng)樓宇過氧化氫干霧消毒。9.3人員刺傷a)立即擠出傷口血液，流動(dòng)水沖洗5min；b)75%乙醇+碘伏雙重消毒；c)報(bào)告感控科，填寫《職業(yè)暴露登記表》；d)根據(jù)病原類型啟動(dòng)PEP（暴露后預(yù)防）；e)對(duì)操作區(qū)域進(jìn)行終末消毒。第十章培訓(xùn)與考核10.1培訓(xùn)對(duì)象新入職員工、研究生、進(jìn)修生、保潔員、維保工程師。10.2培訓(xùn)內(nèi)容a)法規(guī)與制度；b)消毒劑配制與濃度檢測(cè)；c)不同場(chǎng)景消毒流程；d)應(yīng)急演練。10.3考核方式a)理論：閉卷筆試，80分合格；b)實(shí)操：隨機(jī)抽考“溢灑處置”或“生物安全柜消毒”，評(píng)分表30項(xiàng)，≥90分合格；c)未通過者補(bǔ)考，仍不合格調(diào)離崗位。10.4再培訓(xùn)a)每12個(gè)月復(fù)訓(xùn)一次；b)制度或法規(guī)更新時(shí)，2周內(nèi)完成專項(xiàng)培訓(xùn)；c)培訓(xùn)記錄保存5年，掃描件上傳人事檔案。第十一章文件與記錄管理11.1記錄清單a)《消毒劑配制與濃度監(jiān)測(cè)表》；b)《工作臺(tái)面消毒記錄》；c)《生物安全柜消毒記錄》；d)《紫外燈使用/更換記錄》；e)《過氧化氫干霧消毒驗(yàn)證報(bào)告》；f)《醫(yī)療廢物交接單》；g)《培訓(xùn)與考核登記表》。11.2保存期限原始記錄≥3年，電子備份≥5年，高壓滅菌記錄永久保存。11.3審計(jì)追蹤任何修改須由DO填寫《記錄更改申請(qǐng)》，注明理由，原記錄劃雙線，旁簽姓名日期，不得涂黑或撕頁(yè)。第十二章監(jiān)督與獎(jiǎng)懲12.1監(jiān)督a)生安會(huì)組織季度抽查，覆蓋率≥30%實(shí)驗(yàn)間；b)感控科月度暗訪，拍照取證；c)外部評(píng)審：每年接受衛(wèi)健委、市場(chǎng)監(jiān)管局聯(lián)合檢查。12.2獎(jiǎng)勵(lì)a)連續(xù)一年抽查全部合格，獎(jiǎng)勵(lì)團(tuán)隊(duì)5000元科研經(jīng)費(fèi)；b)個(gè)人提出消毒改進(jìn)方案被采納，獎(jiǎng)勵(lì)1000元。12.3處罰a)未記錄消毒一次，扣績(jī)效500元；b)濃度監(jiān)測(cè)造假，視為學(xué)術(shù)不端，記過處分；c)造成生物安