1、.,1,臨床實驗室生物安全,.,2,一、總論,凡是為預防、診斷、治療任何人類疾病或損傷、或者評價人類健康而對人體的物質(zhì)進行生物、微生物、血清化學、血液、生物物理、細胞或者其他類型檢驗的部門，統(tǒng)稱為臨床實驗室。,.,3,臨床實驗室每天要處理來自臨床的標本，如血液、穿刺液、分泌物等，對這些“未知疾病標本”無法知其危險程度，因此，每個臨床實驗室每天都面臨生物安全隱患。,.,4,臨床實驗室危害源,細菌,病毒,真菌,寄生蟲,易燃性、 腐蝕性、 有毒性、 強酸性化學品等,電器設備、 輻射、 噪聲等,.,5,臨床實驗室生物污染的原因和種類,對空氣的污染,對水的污染,對物體表面的污染,實驗室排出及擴散出 的空

2、氣是重要原因之一,醫(yī)院污水,操作不當或感染性 物質(zhì)的溢出造成 地面、儀器等的污染,.,6,實驗室工作人員在實驗過程中 受到實驗室生物污染而發(fā)生的感染。,實驗室感染,.,7,實驗室感染的途徑,空氣傳播：接種環(huán)、吸管、注射器使用時 經(jīng)口傳播 直接接種：針刺、劃傷等 黏膜接觸：如HIV能通過眼結(jié)膜進入人體 節(jié)肢動物媒介,.,8,臨床實驗室安全管理,硬件管理,實驗室設備,個人防護設備,一級防護,二級防護,軟件管理：包括組織機構(gòu)、管理制度、操作規(guī)程、人員素質(zhì)等。,.,9,管理責任,實驗室管理層對所有員工和實驗室來訪者的安全負責，實驗室負責人應制定規(guī)定和程序，以確保實驗室符合國家有關(guān)安全要求，并定期檢查、

3、維護、更新。,.,10,實驗室標準操作程序（SOP）,根據(jù)實驗對象、生物危害程度評估、研究內(nèi)容和設備設施等特點，對涉及的任何危險以及如何在風險最小的情況下開展工作的詳細作業(yè)指導書。,.,11,實驗室人員培訓制度,持證上崗 新工作人員經(jīng)過培訓通過考核后，還須與有資格的工作人員一同工作1個月，才能獲得上崗證。 所有人員每年至少要接受一次新的培訓 建立并保存人員培訓和考核記錄檔案,.,12,實驗室設施設備監(jiān)測、檢測和維護制度,特別關(guān)注高效過濾器、高壓滅菌器的檢查、維護和更新 生物安全柜檢測 高壓滅菌器定期檢測滅菌效果,.,13,安全記錄,職業(yè)性疾病、傷害和不利事件記錄,危害評估記錄,危險標識,危險廢

4、棄物記錄,事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病的報告,.,14,實驗室分區(qū),清潔區(qū)(工作區(qū))：包括辦公室、休息室、培養(yǎng)基室等 半污染區(qū)（防護區(qū)）：包括緩沖間、更衣室和衛(wèi)生通道等 污染區(qū)（核心工作間）：包括樣本收集區(qū)、處理區(qū)、培養(yǎng)區(qū)和廢棄物處理區(qū)等,.,15,.,16,實驗室的出口和通道必須保持暢通無 阻，不準堆放物品、垃圾、裝置或設備。,出口通路,.,17,臨床實驗室工作人員安全的一般要求,食物不能存放在血液或其他有潛在傳染性的材料存放處，應禁止在實驗室工作區(qū)內(nèi)吸煙 工作區(qū)內(nèi)應禁止化妝（手霜除外）和處理隱形眼鏡 不應佩戴戒指，耳環(huán)，腕表和手鐲等,.,18,利器，包括用過的針頭不應折斷、重新戴套或被動戴

5、套。 應鼓勵所有實驗室工作人員接受免疫以預防其可能被接觸的生物體感染。 丟棄的利器應立即放入耐扎容器中 所有離心機應該有封閉的蓋子，旋轉(zhuǎn)時不能掀開,.,19,禁止使用口吸吸液 所有樣本和廢棄物應假定含有活性病原體，應以安全方式處理。 所有進行渦流攪拌的樣本應置于有蓋容器內(nèi) 標本應以確保承運人員、公眾和接收實驗室的安全的方式運送，并遵守法規(guī)要求（危險物品運輸法規(guī)）,.,20,二、臨床實驗室生物安全管理措施,臨床實驗室理化安全準則,臨床實驗室生物安全防護,臨床實驗室廢物處理通則,.,21,臨床實驗室生物安全防護,實驗室生物安全防護（biosafety containment for laborat

6、ories）是指實驗室工作人員所處理的實驗對象含有致病的微生物及其毒素時，通過在實驗室設計建造、個體防護裝置、嚴格遵守標準化操作程序和規(guī)程確保實驗室工作人員不受實驗對象侵染，確保周圍環(huán)境不受其污染。,.,22,病原微生物危險度分級,WHO&通用要求 危險度14級(漸高) 條例 危險度一四類（漸低） 危險度1級 無或極低的個體和群體危險 危險度2級 個體危險中等，群體危險低 危險度3級 個體危險高，群體危險低 危險度4級 個體和群體危險均高,.,23,.,24,.,25,臨床檢驗相關(guān)生物危險等級分布,.,26,實驗室生物危害評估,評估應從三個方面予以考量 微生物的致病性和流行性 實驗室環(huán)境及實驗

7、室操作的特殊性 實驗室工作人員的免疫狀態(tài),.,27,在對相對信息了解較少時進行危險度評估時，應謹慎地采取一些較為保守的標本處理方法。在臨床實驗室，標本取自患者，處理此類標本時最低需要二級生物安全水平。,.,28,實驗室生物安全防護水平,根據(jù)使用的一級和二級防護屏障的不同，實驗室生物安全防護水平（biosafety level, BSL）分為四級。 按防護水平由低到高排列即： 一級生物安全水平（BSL-1） 二級生物安全水平（BSL-2） 三級生物安全水平（BSL-3） 四級生物安全水平（BSL-4）,.,29,一級生物安全防護（BSL-1）實驗室 如用于教學的普通微生物實驗室等，適用于非常熟悉

8、的致病因子，在開放的實驗臺上開展工作。 二級生物安全防護（BSL-2）實驗室 實驗人員接受過致病因子處理的培訓，進行實驗時，限制進入。某些可能產(chǎn)生傳染性氣溶膠的過程，應在生物安全柜中或其他物理安全設備中進行。,.,30,用于主要通過呼吸途徑使人感染上嚴重的甚至是可導致生命危害的致病微生物及其毒素。,三級生物安全防護（BSL-3）實驗室,.,31,適用于對人體具有高度危險性的、通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明的、目前尚無有效疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。 目前世界上最先進的高危病毒實驗室讓梅里厄 P4實驗室。,四級生物安全防護（BSL-4）實驗室,.,32,1.澳大利亞： （1）Geelo

9、ng澳大利亞動物健康實驗室（VIC）。 （2）Coopers平原昆士蘭衛(wèi)生署（QLD）的病毒學實驗室。 （3）國家高安全性實驗室，維多利亞傳染病參考實驗室在北墨爾本（VIC）的主持下運作。 2.法國 LABORATOIRE P4讓梅里厄在里昂。 德國 (1)菲利普斯的馬爾堡大學病毒學研究所， (2) the Bernhard Nocht熱帶醫(yī)學研究所在漢堡。 意大利 （1）拉扎羅斯帕蘭扎尼醫(yī)院國家傳染病研究所。 （2） Polo Universitario - (Milano). 美國保持至少8個生物安全4級設施，目前正在規(guī)劃至少7個：,國際（BSL-4）實驗室,.,33,防護裝備,壁掛式洗眼

10、器,護目鏡,防護服,.,34,2003年7月23日，中國科學院與武漢市人民政府簽署共建生物安全四級（ P4）實驗室協(xié)議書，這意味著中國內(nèi)地首座 P4實驗室將落戶武漢。,.,35,臨床實驗室基本安全操作規(guī)程,臨床實驗室標本處理 所有操作戴手套 采血人員受過培訓 血清分離時注意眼和黏膜的保護 規(guī)范操作技術(shù)以減少氣溶膠產(chǎn)生 使用消毒劑處理使用后的移液管和溢出標本,.,36,用于顯微鏡觀察的蓋玻片和涂片 應用鑷子夾取，丟棄前應清除污染和高壓滅菌。 移液管和移液輔助器的使用 禁止口吸，污染的移液管應完全浸泡在盛有消毒液的容器中。,.,37,銳利物品 禁止直接用手處理破碎的玻璃器具 離心機 所有能夠產(chǎn)生氣

11、溶膠進行播散的生物制品或標本，都應使用密封的離心管。,.,38,生物安全柜 保持負壓 每隔一段時間應對其運行性能進行驗證 可減少氣溶膠暴露,.,39,有關(guān)實驗室意外處理規(guī)程,泄露事故： 立即清洗發(fā)生泄漏的區(qū)域，上報,吸凈漏出的液體,清洗發(fā)生泄漏 的區(qū)域,盡可能使用漂白劑、酒精或苯酚對工作臺進行消毒,.,40,血液或其他體液發(fā)生泄漏或工作結(jié)束后，均應使用合適的化學殺菌劑對實驗室工作區(qū)進行表面消毒。 無法徹底消毒的設備必須貼上生物危害的標簽。 個人防護服裝應定期更換以保持清潔，遇被危險物品嚴重污染時，則應立即更換 。,.,41,銳器所致事故性劃傷或擦傷 用肥皂液和流動水清洗污染的皮膚；如有傷口，應

12、當在傷口旁端輕輕擠壓，盡可能擠出損傷處的血液，再用肥皂液和流動水進行沖洗，禁止進行傷口的局部擠壓。 受傷部位的傷口沖洗后，應當用消毒液，如75%酒精或0.5%碘伏進行消毒，并包扎傷口。 隨即向有關(guān)負責人報告,.,42,美國調(diào)查：醫(yī)務人員中每年至少發(fā)生60萬次鈍器傷 埃及：醫(yī)務人員中69.4%一生中至少發(fā)生1次針刺傷，35.6%醫(yī)務人員最近3個月曾發(fā)生過針刺傷； 臺灣：醫(yī)務人員每年高達87.3%發(fā)生針刺傷和其他銳傷； 醫(yī)生中42.5%的銳器傷是侵入性操作；護士中39.1%銳器傷是處理針頭；清潔工中95.4%是清理醫(yī)療垃圾污染的針頭刺傷。,銳器所致事故性劃傷或擦傷,.,43,傳染性物質(zhì)濺入黏膜 標

13、本或傳染性物質(zhì)濺入黏膜或間接接觸，應立即用專用裝置清洗，再用滴眼液或漱口液清洗。 向有關(guān)負責人報告。,.,44,微生物實驗室相關(guān)安全準則,微生物實驗室有關(guān)標志 在實驗室門口應貼上生物危險標志，并顯示以下信息: 有關(guān)致病因子名稱、生物安全級別、免疫接種要求、研究人員姓名電話、實驗室中佩戴的個人設施、出入實驗室的特殊要求與程序,.,45,微生物菌種的分類及保存 分類：依其危險程度的大小分為四類。 保存：詳細歷史和實驗資料； 對菌種采取妥善可靠的保存； 建立嚴密的安全保管制度。,.,46,臨床實驗室廢物處理,廢物（waste）： 使用者不再使用的一切物品稱為廢物。,化學廢物安全處理,感染性廢物安全處

14、理,銳利物安全處理,無害廢物處理,.,47,化學廢物安全處理,1.廢物分離: 有害化學廢物不能與一般廢物、無害化學廢物、放射性或感染性廢物相混合。有害化學廢物在產(chǎn)生后應分別收集、運輸、貯存和處理。 2.工程控制: 通風措施、相對封閉及隔離系統(tǒng)、安全措施、防火措施和安全通道。 3. 操作控制: 實驗室應有完備的處理技術(shù)，以確保儀器、工作面和防護設備的污染在最低水平,.,48,4.化學廢物處理的選擇 對無法確定特性的廢物，不能做任何處理 清除廢物前盡量減少其有害程度 嚴格禁止有害廢料與一般廢料或固體廢料混合處理,.,49,感染性廢物安全處理,感染性廢物指能傳播感染性疾病的廢物 操作感染性或任何有潛在危害的廢物時，必須穿戴手套和防