1、常見凝血項目的檢測及臨床意義解讀,1,學(xué)習(xí)交流PPT,凝血瀑布學(xué)說,2,學(xué)習(xí)交流PPT,D-Dimer,E,纖維蛋白凝塊,纖維蛋白原,D,E,D,纖維蛋白單體 + 纖維蛋白肽,可溶性纖維蛋白 聚合體,XIIIa,凝血酶,纖溶酶,凝血和纖溶,纖維蛋白降解產(chǎn)物,纖維蛋白原 降解 產(chǎn)物,3,學(xué)習(xí)交流PPT,凝血,我們實驗室凝血檢測包括PT、APTT、TT、纖維蛋白原含量、 D-Dimer 、AT-和FDP的測定?，F(xiàn)主要用于手術(shù)前患者、產(chǎn)前孕婦凝血功能篩查，某些凝血因子異常疾病的檢測以及口服抗凝藥物的監(jiān)測等。,4,學(xué)習(xí)交流PPT,凝血檢測的方法學(xué),目前可開展的血栓/止血成分檢測主要包括三種方法：凝固法

2、、底物顯色法、免疫比濁法。 Stago公司： PT、APTT、FIB、TT：凝固法。 D-二聚體/ FDP：免疫比濁法。 AT-：發(fā)色底物速率法。,5,學(xué)習(xí)交流PPT,擺動磁珠法,6,學(xué)習(xí)交流PPT,擺動磁珠法,7,學(xué)習(xí)交流PPT,檢測原理,D-二聚體/ FDP檢測原理：免疫比濁法。 用光度計檢測含有乳膠顆粒的懸濁液吸光度的變化。含有共價包被特異抗體的乳膠顆粒懸濁液與待檢樣本進(jìn)行混合?？乖贵w發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致乳膠顆粒發(fā)生凝集，誘導(dǎo)反應(yīng)介質(zhì)濁度增加。濁度的增加反映在吸光度的增加上，用來測試樣本中D-二聚體/ FDP的水平。 AT-檢測原理:發(fā)色底物速率法。 AT在肝素存在時是快速有力的凝血酶抑制物

3、。待測血漿與肝素和過量凝血酶（試劑1）共同孵育；剩余凝血酶通過對合成產(chǎn)色底物（試劑2）的酶促反應(yīng)來定量。由于凝血酶的數(shù)量在第一步中被血漿AT成比例地消耗，因此剩余的凝血酶在第二步反應(yīng)中與血漿AT水平呈反比。此測定不受治療劑量肝素影響。,8,學(xué)習(xí)交流PPT,PT,PT是檢查涉及外源性和共同凝血途徑的過篩實驗，如因子VII，X，V，II和 I。 PT同時用于監(jiān)測口服抗凝劑的用量，是監(jiān)測口服抗凝劑的首選指標(biāo)。 PT試劑含肝素拮抗劑。,9,學(xué)習(xí)交流PPT,PT,一、PT延長： 1、先天性因子、缺乏癥和低（無）纖 維蛋白原血癥； 2、獲得性凝血因子缺乏：DIC、原發(fā)性纖溶亢進(jìn)、 肝病阻塞性黃疸和維生素K

4、缺乏癥； 3、血循環(huán)中有抗凝物質(zhì)：口服抗凝劑如肝素和抗凝血因子抗體、抗體。 二、PT縮短：先天性因子增多癥、口服避孕藥、高凝狀態(tài)和血栓性疾病。 三、口服抗凝劑的檢測：據(jù)報道，在口服抗凝劑過程中，維持PT在正常對照的1-2倍最為適宜。,10,學(xué)習(xí)交流PPT,APTT,APTT是在體外模擬內(nèi)源性凝血的全部條件，測定血漿凝固需要的時間，用以反應(yīng)內(nèi)源性和共同凝血途徑凝血因子（因子XII，XI，IX，VIII，X，V，II 和I）是否異常。,11,學(xué)習(xí)交流PPT,APTT,一、APTT延長： 見于血友病、凝血因子、和纖維蛋白原缺乏；口服抗凝劑、血循環(huán)中有凝血因子抑制物、狼瘡抗凝物等。 二、縮短： 見于D

5、IC早期，血栓前狀態(tài)及血栓性疾病。 三、監(jiān)測肝素治療： 肝素治療期間，APTT維持在正常對照的1.5-3.0倍為宜。 肝素通過AT-發(fā)揮抗凝作用， AT-是抑制XII、XI、 IX、 X 等發(fā)揮作用，主要是和內(nèi)源性凝血途徑相關(guān)。,12,學(xué)習(xí)交流PPT,TT,TT是一評估纖維蛋白形成過程的檢測項目，TT同樣也是一用于補充PT和APTT的篩選實驗。 原理：在預(yù)定量凝血酶作用下，正常血漿會在有限的和穩(wěn)定的時間內(nèi)發(fā)生凝固。,13,學(xué)習(xí)交流PPT,TT,TT延長表示 FIB異常 質(zhì)量（異常纖維蛋白原血癥） 數(shù)量： 先天性低或無纖維蛋白原血癥； 獲得性低纖維蛋白原血癥（肝病，DIC）； 存在肝素、水蛭素；

6、 存在FDP。,14,學(xué)習(xí)交流PPT,FIB,纖維蛋白原在肝臟和巨核細(xì)胞內(nèi)合成，半衰期為3-5d，含量，成人：2-4g/L；新生兒：1.25-3g/L。 在過量凝血酶的作用下，稀釋血漿的凝固時間與血漿中的纖維蛋白原水平有直接關(guān)系。,15,學(xué)習(xí)交流PPT,FIB臨床應(yīng)用,手術(shù)前的篩選試驗 診斷 質(zhì)量缺陷（異常纖維蛋白原血癥） 數(shù)量缺陷（先天性或獲得性） FIB水平升高 炎性綜合征，糖尿病，肥胖，血栓性相關(guān)性疾病。,16,學(xué)習(xí)交流PPT,D-Dimer,交聯(lián)纖維蛋白的特異性降解產(chǎn)物(FnDPs) 繼發(fā)性纖溶特有代謝產(chǎn)物，反映凝血與纖溶激活的標(biāo)志物。 生理性：抗血栓； 降解纖維蛋白/原； 降解凝血因

7、子（ FV、FVIII、FX、FVII、FXI、 FXIII）； 病理性：纖溶亢進(jìn)出血。,17,學(xué)習(xí)交流PPT,FDP,FgDPs和FnDPs（ D-Dimer）統(tǒng)稱纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物（FDPs），具有抗血小板聚集和抗凝作用。 FgDPs：Fg降解產(chǎn)物。,18,學(xué)習(xí)交流PPT,AT-檢測的臨床應(yīng)用,AT-是一種由肝臟合成的分子量約為58000道爾頓的糖蛋白，是一種凝血酶的抑制劑。 一、診斷遺傳或獲得性AT-缺乏癥； 二、疑難DIC診斷標(biāo)準(zhǔn)； 三、監(jiān)測肝素是否有效：肝素抗凝作用依賴AT； 四、肝?。ˋT合成不足）：與肝功能受損程度或病情嚴(yán)重程度相關(guān)。,19,學(xué)習(xí)交流PPT,影響凝血指標(biāo)的相關(guān)

8、因素,1.放置時間對檢測結(jié)果的影響與性別和年齡無統(tǒng)計學(xué)意義。 2.樣本量過少2ml, 樣本存放時間過長， 采血部位為輸液同側(cè)， 標(biāo)本含有凝塊。,20,學(xué)習(xí)交流PPT,樣本量,結(jié)論：血量減少使凝固時間延長，血量增加使凝固時間縮短。,21,學(xué)習(xí)交流PPT,放置時間長短（4）,結(jié)論：PT在0-8h呈現(xiàn)下降趨勢，可能與因子活化有關(guān)，PT在24h略有升高；APTT （4h）隨時間有逐漸上升的趨勢，各時間點的均值均高于基線水平，可能與因子活性逐漸降低有關(guān)；TT隨時間呈逐漸上升的趨勢。FIB 值隨時間的增加呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，但差異并無統(tǒng)計學(xué)意義，PT、APTT與TT在多次測量的時間點上差異均由統(tǒng)計學(xué)意義。

9、,22,學(xué)習(xí)交流PPT,輸液同側(cè)采血,23,學(xué)習(xí)交流PPT,凝塊,24,學(xué)習(xí)交流PPT,凝固反應(yīng)曲線,整個反應(yīng)過程包括基線期、加速器、減速期和平臺期（終點）?；€期代表凝血因子被激活，生成凝血酶的過程，也就是凝血的啟動階段，時間相對較長；加速和減速期代表凝血酶發(fā)揮作用，纖維蛋白凝塊形成的過程；平臺期凝固反應(yīng)完成。 研究表明：在正常情況下，20%-50%的凝原物質(zhì)就能滿足凝血要求。所以體外實驗時，一部分凝血因子消耗在一定范圍對凝血影響相對較小。 血液有凝塊，反應(yīng)基線期幾乎是沒有的，反應(yīng)開始前，凝血因子大部分已經(jīng)處于活化狀態(tài)，縮短的基線期時間可能遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于因為凝血因子減少而延長的時間。,25,學(xué)習(xí)交流PPT,樣本采集,另外，樣本采集時，