1、臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)課件模板-42，臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第2部分標(biāo)本采集，第2部分標(biāo)本采集：1。羊水檢查的適應(yīng)癥羊水檢查是一種侵入性檢查，只能在下列適應(yīng)癥之一下進(jìn)行。1 .當(dāng)高危妊娠有引產(chǎn)指征時(shí)，結(jié)合胎盤功能測(cè)定，可了解胎兒成熟度，確定引產(chǎn)時(shí)間，從而降低圍產(chǎn)兒死亡率。2 .有許多原因不明的流產(chǎn)、早產(chǎn)或死胎，以及那些懷疑胎兒有遺傳病的人；與染色體異常嬰兒結(jié)婚的人；一對(duì)或兩對(duì)夫婦都有染色體異?；蛩麄兊母改赣写x缺陷。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第2節(jié)標(biāo)本采集，第2、3節(jié)標(biāo)本采集。35-40歲以上的老年孕婦有異常的胎兒染色體。4 .胎兒必要的性別診斷。5 .在懷孕早期遭受嚴(yán)重病毒感染或暴露于大劑量電離輻射。6 .母胎血型

2、不合可以判斷胎兒的預(yù)后。7 .如果胎膜早破的診斷不能得到證實(shí)，陰道液的酸堿度和涂片可以用來檢查羊水中是否有可見的成分晶體和脂肪細(xì)胞，以確定它是否是羊水。其次，標(biāo)本采集羊膜穿刺術(shù)主要由產(chǎn)科醫(yī)生和婦科醫(yī)生進(jìn)行。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二季度標(biāo)本采集，第二季度標(biāo)本采集：根據(jù)不同的檢查目的選擇不同的穿刺次數(shù)。為了診斷遺傳性疾病和胎兒性別，應(yīng)在妊娠16-20周經(jīng)腹羊膜穿刺術(shù)抽取20-30毫升羊水，并在妊娠晚期進(jìn)行穿刺以解釋胎兒成熟度。一般來說，羊水必須在服用后立即送去檢查。三。羊水的一般特征正常的羊水在妊娠的前半段是無色、透明或淡黃色的，在妊娠的后半段是微乳液白色的，因?yàn)檠蛩c胎兒脂肪混合并從上皮和其他有形成

3、分上脫落。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第二部分標(biāo)本采集：如果是黃綠色，則表示羊水骨中混有胎糞，這是一種胎兒窘迫現(xiàn)象；如果數(shù)量是紅棕色或棕色，胎兒已經(jīng)死亡；金黃色羊水可能是由于母兒血型不合造成羊水中膽紅素過多所致；厚厚的刷黃色羊水表明過期妊娠或胎盤功能障礙；混濁的膿必須打開，氣味不好，表明子宮腔骨已被明顯感染。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查：胎兒成熟度的監(jiān)測(cè)是確定高危妊娠的合理分離時(shí)間和治療策略的重要依據(jù)，主要是通過觀察羊水中物質(zhì)的消長(zhǎng)，胎兒器官功能是否發(fā)育良好。一、胎肺成熟度檢查胎肺成熟度檢查對(duì)判斷新生兒特發(fā)性呼吸窘迫綜合征(IRDS)即新生兒肺透明膜病具有重要意義。臨床基礎(chǔ)檢

4、驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查：這種情況主要見于妊娠37周前離婚的早產(chǎn)兒。病死率為50%-70%。這種疾病也可見于剖腹產(chǎn)嬰兒和新生兒，他們的母親患有糖尿病和妊娠高血壓。呼吸窘迫綜合征占所有新生兒死亡的19.5%?；加泻粑狡染C合征的新生兒患有肺泡表面活性物質(zhì)，主要是由于卵磷脂缺乏。因此，肺泡表面張力增加，穩(wěn)定性喪失，導(dǎo)致呼氣末肺泡塌陷和進(jìn)行性雙側(cè)肺功能不全。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查：機(jī)體缺氧，肺泡上皮細(xì)胞被破壞，透明度增加，含纖維蛋白原的液體不能滲入肺泡壁形成透明膜，阻礙通氣并導(dǎo)致死亡。常用的檢測(cè)方法包括羊水泡沫振蕩試驗(yàn)、羊水吸光度測(cè)定、卵磷

5、脂與鞘磷脂比值的薄層色譜測(cè)定、卵磷脂酶定量和熒光偏振測(cè)定。1 .羊水泡沫試驗(yàn)：羊水中的某些物質(zhì)可以降低水的表面張力，振蕩后，可以形成穩(wěn)定的泡沫這是最常用的床邊測(cè)試。一般來說，需要兩個(gè)試管。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查：第一管中羊水與95%乙醇的比例為1: 1，第二管中的比例為1: 2。強(qiáng)烈振蕩15-20秒后，靜置15分鐘。如果在第二個(gè)管的表面上有一個(gè)完整的泡沫環(huán)，L/S比大于或等于2，表明胎兒已經(jīng)成熟。如果在第一個(gè)管的表面上只有一個(gè)完整的泡沫環(huán)，則L/S比可以是2；如果兩個(gè)管中沒有泡沫環(huán)，則表明胎兒不成熟。進(jìn)一步精確的羊水泡沫試驗(yàn)還可以對(duì)羊水和95%乙醇進(jìn)行一系列

6、稀釋試驗(yàn)。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查，2。羊水吸光度測(cè)量：羊水吸光度測(cè)量基于羊水中磷脂含量與濁度之間的關(guān)系。當(dāng)波長(zhǎng)為650納米時(shí)，羊水中磷脂越多，A650越大，胎兒越成熟。在測(cè)定中，使用蒸餾水調(diào)節(jié)至零，光程為1cm，波長(zhǎng)為650nm，并讀取A值。據(jù)報(bào)道，A650 0.075為陽性，表明胎兒已成熟。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查：如果A650小于或等于0.050，則表示胎兒不成熟。3 .薄層色譜法測(cè)定的早期妊娠羊水中卵磷脂/鞘磷脂的比例很低，35個(gè)書號(hào)后突然升高，而鞘磷脂在妊娠32-40周內(nèi)穩(wěn)定，因此L和S成分的變化可以反映胎兒肺的成熟

7、度，薄層色譜法具有較高的準(zhǔn)確性。最初的量是用有機(jī)溶劑氯仿提取羊水中的磷脂，然后將標(biāo)本和L/S標(biāo)準(zhǔn)放在鋪有硅膠G或H的薄層板上，可以選擇不同的染料如鉬藍(lán)、羅丹明B氧化鉍、磷鉬酸、氧化亞錫或飽和碘蒸氣。著色后，可根據(jù)層速度標(biāo)準(zhǔn)顯示磷酸甘油基、磷酸甘油基絲氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、卵磷脂和鞘磷脂的位置。將樣品與標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較，測(cè)量樣品的L和S色譜斑點(diǎn)面積，或通過密度計(jì)掃描獲得L/S比。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查：L/S2.0作為判斷胎兒肺成熟度的閾值。用該值預(yù)測(cè)IRDS的敏感性為84%，但非IRDS孕婦的發(fā)病率高于正常孕婦的新生兒，這一點(diǎn)不容忽視。近年來，對(duì)IR

8、DS及其方法論的研究取得了長(zhǎng)足的進(jìn)展。除上述方法外，雞蛋磷肥和磷脂酰甘油也可通過酶法直接測(cè)定。例如，卵磷脂40毫克/升表明胎兒不成熟。如果在羊水中檢測(cè)到磷脂酰甘油，即使在出生體重指數(shù)為2.0的新生兒中也不會(huì)出現(xiàn)IRDS。熒光偏振微粘度測(cè)量的原理是表面活性物質(zhì)越高，產(chǎn)生的偏振值越低，熒光偏振值與出生年齡呈負(fù)相關(guān)。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查：敏感性為87%，特異性為92%。第二，胎兒腎臟成熟度檢查1。肌酐測(cè)定：羊水中的肌酐是胎兒的代謝產(chǎn)物，其排泄量反映了腎小球的成熟度。雖然肌酐是反映胎兒成熟度的可靠化學(xué)指標(biāo)，但其濃度受多種因素的干擾，因此應(yīng)注意：羊水中肌酐濃度受羊水

9、量和胎兒肌肉發(fā)育程度的影響；孕婦血漿肌酐濃度會(huì)影響羊水肌酐濃度。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查：羊水肌酐在159.1-353.6mol/L之間，一般高于血漿值。肌酐濃度大于或等于176.8mol/L表示胎兒成熟，而肌酐濃度小于或等于131.7mol/L表示胎兒不成熟。2 .葡萄糖測(cè)定：羊水葡萄糖主要來自母體，部分來自胎兒尿液。隨著孕23周前羊膜面積的增大，羊水生理性增加，羊水指數(shù)逐漸增加，24周達(dá)到峰值2.29mol/L。之后，隨著胎兒腎臟的成熟，臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查，0.56毫摩爾/升，提示胎兒腎臟成熟；0.80mol/l a

10、fg不成熟。三。胎兒肝臟成熟度檢查羊水中無膽紅素物質(zhì)隨著胎兒肝臟酶系統(tǒng)的逐漸改善而減少，因此羊水中膽紅素濃度可作為判斷胎兒肝臟成熟度的指標(biāo)。根據(jù)膽紅素在450納米處的吸收峰，取5-10毫升羊水，用濾紙除去上皮細(xì)胞和胎兒脂肪，用蒸餾水調(diào)至零，用1.0厘米的光程讀取450納米處的吸光度，臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查：A4500.02表示胎兒肝臟成熟度；0.02-0.04是可疑的，0.04是不成熟的。此外，該試驗(yàn)有助于診斷胎兒溶血和估計(jì)溶血進(jìn)展，并為忽視出生前后的臨床情況提供依據(jù)。如果孕婦因某種原因出現(xiàn)溶血性貧血或嚴(yán)重肝功能障礙，也會(huì)導(dǎo)致羊水中膽紅素升高，應(yīng)引起重視。羊

11、水中膽紅素的含量應(yīng)為0.43微克/升.臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查：四。胎兒皮脂腺成熟度檢查羊水和脂肪細(xì)胞是從胎兒皮脂腺和汗腺脫落的細(xì)胞。妊娠晚期，羊水中脂肪細(xì)胞的出現(xiàn)率隨著胎齡的增加而增加，可作為胎兒皮膚成熟度的指標(biāo)。將羊水的離心沉淀物滴在載玻片上，并加入1滴1.36毫摩爾/升的尼羅藍(lán)硫酸鹽水溶液以充分混合。1-2分鐘后，覆蓋膜，脂肪細(xì)胞在50-60攝氏度下緩慢加熱2-3分鐘。在顯微鏡下觀察后，脂肪細(xì)胞是無籽的，它煞費(fèi)苦心地將楊橙和其他細(xì)胞染成藍(lán)色。計(jì)算200-500個(gè)細(xì)胞，并計(jì)算脂肪細(xì)胞的出現(xiàn)率。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查：如果

12、發(fā)生率為20%成熟，10-20%可疑，10%不成熟，但大于或等于50%，則為過熟。5.胎兒唾液腺成熟度試驗(yàn)羊水中的淀粉酶來自胎兒胰腺和唾液腺。胰腺同工酶自始至終變化不大，而唾液腺同工酶從妊娠28周左右開始迅速增加，表明胎兒唾液腺具有分泌血液的功能，妊娠36周后其活性顯著增加。因此，羊水淀粉酶含量的測(cè)定可作為判斷胎兒成熟度的指標(biāo)。在胎齡38周時(shí)，如果酶活性為120索氏單位，則為成熟兒童，否則為未成熟兒童。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):第3節(jié)胎兒成熟度檢查，第3節(jié)胎兒成熟度檢查：肌酐、葡萄糖、膽紅素、淀粉酶的測(cè)定方法參見“臨床生化及生化檢查”。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):先天性遺傳病的產(chǎn)前診斷，先天性遺傳病的產(chǎn)前診斷包括遺

13、傳病，即當(dāng)配子結(jié)合形成合子時(shí)，父母的病態(tài)基因傳給其后代的疾病，以及非遺傳因素，如配子形成和染色體結(jié)合過程中的一些遺傳突變，以及受精卵繁殖過程中的一些外部因素引起的疾病。這種疾病的特點(diǎn)是兒童的智力、器官結(jié)構(gòu)和功能以及各種缺陷。先天性遺傳病在產(chǎn)前診斷中可分為三類：1 .臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):先天性遺傳病的產(chǎn)前診斷，先天性遺傳病的產(chǎn)前診斷：染色體疾?。河蛇z傳或環(huán)境因素引起的染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常引起的疾病。臨床上可以發(fā)現(xiàn)新生兒有多種畸形，常伴有精神發(fā)育遲滯。這種疾病占出生總數(shù)的0.5%，占產(chǎn)前診斷的25-50%。2 .單基因遺傳?。簝H由一對(duì)基因突變或異常引起的疾病。大多數(shù)都顯示出酶的缺陷。臨床上，它被稱為先

14、天性代謝疾病。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):先天性遺傳病的產(chǎn)前診斷：目前，可通過生化方法診斷的約有300種，其中50%為常染色體顯性遺傳，40%為常染色體隱性遺傳，10%為性別連鎖遺傳。一般來說，它占出生總數(shù)的1.8%，占產(chǎn)前診斷的6-10%。3 .多基因遺傳?。簝蓪?duì)以上的基因每一對(duì)基因都是共顯性的，每一對(duì)基因的影響都很小，但一些基因?qū)Ψe累或形成了明顯的影響。臨床上有一個(gè)疾病群，主要表現(xiàn)為一些先天性畸形，如唇、腭裂、畸形足、脊柱裂、無腦兒、神經(jīng)管畸形、幽門狹窄、先天性髖關(guān)節(jié)脫位、先天性心臟病等。這些疾病占出生總數(shù)的2.6%，占產(chǎn)前診斷的40%。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):先天性遺傳病的產(chǎn)前診斷，先天性遺傳病的產(chǎn)前診斷：

15、一些多基因異常遺傳病，如1型糖尿病、高血壓、冠心病、哮喘、精神分裂癥等。往往是遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果，所以它的分布和復(fù)發(fā)率只能從人口調(diào)查和空譜系的發(fā)生率中得知。一、染色體疾病的核型分析核型分析主要用于檢查染色體結(jié)構(gòu)異常引起的遺傳病。通常，將20-30毫升新鮮羊水離心以獲得羊水中的細(xì)胞，將其在RPMI1640培養(yǎng)液和25%小牛血清中培養(yǎng)8-10天，然后用秋水仙堿處理以使細(xì)胞停止在M期。在獲得有絲分裂期的細(xì)胞后，用低參照處理細(xì)胞，固定并壓片，然后進(jìn)行姬姆薩染色或顯帶，然后進(jìn)行核型分析。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):先天性遺傳病的產(chǎn)前診斷，先天性遺傳病的產(chǎn)前診斷：2。性染色質(zhì)檢查和性基因診斷(1)羊水細(xì)

16、胞的性染色質(zhì)檢查有助于診斷性連鎖遺傳病，如血友病甲和血友病乙、原發(fā)性低丙種球蛋白血癥、自毀性外觀綜合征和肌營養(yǎng)不良。粘多糖病2型，糖原代謝病2型如果父親是X連鎖隱性基因的攜帶者，其攜帶者和父親是正常的，那么一半的男性胎兒是正常的，一半的男性胎兒是病人；一半的女性胎兒是正常的，一半是基因攜帶者，因此可以根據(jù)檢測(cè)結(jié)果決定是否繼續(xù)妊娠。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):先天性遺傳性疾病的產(chǎn)前診斷，先天性遺傳性疾病的產(chǎn)前診斷：常規(guī)檢查方法是將10毫升呂洋注射到離心管中，以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心0分鐘，棄去上清液，用8毫升甲醇冰醋酸溶液固定管底沉淀物30分鐘，根據(jù)上述條件離心棄去上清液，加入少量新鮮固定液制成細(xì)胞懸液，在載玻片上滴1-2滴。羊水細(xì)胞制備方法選擇如下：檢查X染色質(zhì)或巴氏染色法：通常用硫堇或甲苯胺藍(lán)染色，用油顯微鏡觀察。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):先天性遺傳病產(chǎn)前診斷，先天性遺傳病產(chǎn)前診斷：顯微鏡下可見兩種類型的細(xì)胞核，一種大，核膜完整，結(jié)構(gòu)清晰，染色質(zhì)均勻，稱為可數(shù)細(xì)胞；添加一類收縮小或染色過深、結(jié)構(gòu)不清或細(xì)胞核重疊、有損傷的細(xì)胞核，它們不是或細(xì)胞。在可數(shù)細(xì)胞的核膜內(nèi)緣，可見深藍(lán)色三角形、半圓形或饅頭形染色質(zhì)塊，大小約為1.2m0.7m，即X染色質(zhì)，通過選擇項(xiàng)目計(jì)算記錄X染色質(zhì)的細(xì)胞百分比。臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué):先天性遺傳病產(chǎn)前診斷，先天性遺傳