1、克利斯蒂娜的世界,45歲進(jìn)入了腫瘤發(fā)病高峰，且腫瘤風(fēng)險隨年齡增加呈幾何倍數(shù)上升65歲的老年人患腫瘤的幾率是25歲年輕人的50多倍,40歲后腫瘤發(fā)病率逐年增長,惡性腫瘤離我們有多遠(yuǎn)?,我國每年新發(fā)腫瘤病例約為312萬例平均每天8550人（全國每分鐘有6人被診斷為癌癥）肺癌、肝癌、胃癌、結(jié)直腸癌、食管癌、胰腺癌、白血病、淋巴瘤、腦腫瘤和乳腺癌,腫瘤的治療,攻克癌癥人類的第一次,手術(shù)1809年德國醫(yī)生McDowell第一次用手術(shù)切除卵巢癌，并取得36年生存期的良好效果。放療1895年倫琴發(fā)現(xiàn)了X線,1896年即用X線治療了第1例晚期乳腺癌?；熁瘜W(xué)治療上世紀(jì)40年代用氮芥治療惡性淋巴瘤取得顯著療效，

2、自此開始了腫瘤的化學(xué)治療。50年代以環(huán)磷酰胺、氟尿嘧啶合成為標(biāo)志是化療的第二里程碑，70年代順鉑及阿霉素進(jìn)入臨床并得以廣泛應(yīng)用是化療的第三里程碑。90年代以后，抗腫瘤的新藥不斷推出。,ChesterSoutham:在五十年代首次給志愿者注射活的癌細(xì)胞,結(jié)果:注射的癌細(xì)胞在健康人體內(nèi)不生長.注射的癌細(xì)胞在癌癥病人體內(nèi)可長成大腫瘤。結(jié)論：癌癥病人體內(nèi)失去健康人所具有廣譜抗癌活性。研究項目受到倫理學(xué)及法律的極大挑戰(zhàn)。研究結(jié)果為抗癌界帶來極大提示，1968年被推選成全美抗癌學(xué)會主席。,Science，1957年一月125:158-160,首次證明人體內(nèi)天然抗癌活性的存在,人體免疫與腫瘤的發(fā)生,臨床信息

3、部,腫瘤細(xì)胞免疫治療,免疫器官,免疫細(xì)胞,免疫分子,免疫系統(tǒng)是人體的防御體系，一方面清除細(xì)菌、病毒等外來異物，另一方面清除體內(nèi)衰老的無功能細(xì)胞以及發(fā)生突變的細(xì)胞。一個人身上每天有數(shù)萬億個細(xì)胞在復(fù)制，在復(fù)制中，約有萬分之一到百萬分之一的細(xì)胞會出現(xiàn)差錯，也就是說，每天約有50-100萬個細(xì)胞可發(fā)生突變。有的突變細(xì)胞進(jìn)一步變?yōu)榘┘?xì)胞。,免疫系統(tǒng)免疫防御、免疫監(jiān)視、免疫自穩(wěn),“Inlarge,long-livedanimals,likemostofthewarm-bloodedvertebrates,inheritablegeneticchangesmustbecommoninsomaticcells

4、andaproportionofthesechangeswillrepresentasteptowardmalignancy.Itisanevolutionarynecessitythatthereshouldbesomemechanismforeliminatingorinactivatingsuchpotentiallydangerousmutantcellsanditispostulatedthatthismechanismisofimmunologicalcharacter.”SirFrankMacfarlaneBurnet諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎1960,腫瘤免疫治療理論“免疫監(jiān)視”理論

5、(ImmuneSurveillanceTheory),“腫瘤免疫編輯”(TumorImmunoediting）Elimination:免疫消除Equilibrium:免疫平衡Escape:免疫逃逸,發(fā)病時,健康時,腫瘤的潛伏期長達(dá)10年以上,癌細(xì)胞反復(fù)進(jìn)行分裂，約30次后大小約0.7cm時，初次被影像學(xué)識別為“癌癥”；早期癌癥被發(fā)現(xiàn)時的大小約是1cm，重量約是1g，其中癌細(xì)胞的個數(shù)約是10億個；據(jù)統(tǒng)計，腫瘤發(fā)展到臨床診斷，所經(jīng)過的時間約為10年，這期間是防治的黃金時間。,腫瘤的治療,？,？,？,臨床信息部,FDA批準(zhǔn)第一個免疫細(xì)胞,樹突狀細(xì)胞在抗腫瘤免疫中發(fā)揮重要作用,2010.4.29美國食

6、品藥品管理局批準(zhǔn)Provenge(sipuleucel-T)，作為一種治療晚期前列腺癌患者的免疫活性細(xì)胞，這標(biāo)志著癌癥進(jìn)入一種新的治療：自身免疫活性細(xì)胞治療。Provenge誘導(dǎo)作用是通過抗原提呈細(xì)胞(APCs)負(fù)載前列腺癌酸性磷酸酶（PAP）抗原，繼而激活腫瘤特異的CD8+T細(xì)胞，誘導(dǎo)抗前列腺癌免疫應(yīng)答。這是FDA首次批準(zhǔn)的自體免疫細(xì)胞用于治療腫瘤。,發(fā)病率高,病情進(jìn)展緩慢,腫瘤相關(guān)抗原表達(dá),化療療效有限,“非必需”組織,前列腺癌細(xì)胞免疫治療獲得成功的原因,PSA、PAP等,內(nèi)分泌治療無效的患者，此時腫瘤負(fù)荷較小，機(jī)體具有一定的抗腫瘤能力,NatRevImmunol.2010,10:580-

7、593.,Provenge疫苗治療晚期前列腺癌的機(jī)制,治療結(jié)果,受試者：512名總體生存期：對照組:21.7個月，治療組:25.8個月。3年存活率：治療組32%，對照組23%。副作用：主要是發(fā)燒、發(fā)冷、疲勞和疼痛。,2011年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎,BruceA.BeutlerJulesA.HoffmannRalphM.Steinman,2011年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎揭曉，美國、法國三位科學(xué)家因在免疫學(xué)方面的發(fā)現(xiàn)獲獎。其中一半的獎金歸于BruceA.Beutler和JulesA.Hoffmann，獲獎理由是在“Toll樣受體和先天免疫激活方面的發(fā)現(xiàn)”；另一半獎金歸于RalphM.Steinman

8、，獲獎理由是“發(fā)現(xiàn)樹突狀細(xì)胞及其在獲得性免疫中的作用”。美籍科學(xué)家比尤特勒和盧森堡籍科學(xué)家霍夫曼是因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)“Toll樣受體（Toll-likeReceptors，TLRs）及其配體”獲得2011年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎,腫瘤的免疫治療時代已經(jīng)來臨,權(quán)威醫(yī)學(xué)雜志紛紛刊文，高度評價免疫細(xì)胞治療技術(shù)的前景,腫瘤的免疫治療時代已經(jīng)來臨,癌癥免疫療法是2013年最值得關(guān)注的六大科學(xué)領(lǐng)域之一,DC細(xì)胞治療技術(shù)正走進(jìn)腫瘤免疫治療的前沿,臨床信息部,個體化體細(xì)胞免疫治療方案,根據(jù)不同腫瘤的生物學(xué)特性（腫瘤類型、分期和腫瘤的免疫源性）、患者的遺傳背景（是否具有家族傾向？）、目前的病情狀況（體質(zhì)，免疫狀況）、前期治

9、療方法、年齡等，在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，制定出適合病人的個體化體細(xì)胞免疫治療方案。,（一）針對老年腫瘤晚期患者，體質(zhì)弱、免疫功能極度低下采取抽少量血多次回輸?shù)闹委煼桨?抽血30-40ml外周血,第1天,第3次CIK回輸,第2次CIK回輸,第4天,第8天,第12天,第14天,第16天,開始下一個療程的治療,第1次CIK回輸,(二）化療聯(lián)合細(xì)胞治療的增效方案,化療前1天抽血50ml，進(jìn)行CIK或D-CIK免疫細(xì)胞培養(yǎng),第一周,第二周,7天,第1次開始化療,第2次開始化療,回輸CIK或D-CIK等細(xì)胞,化療前1天抽血50ml，進(jìn)行CIK或D-CIK免疫細(xì)胞培養(yǎng),（三）體細(xì)胞免疫治療聯(lián)合放療的增效方案,放

10、療前抽外周血50ml，上午放療前,放療,放療,放療,兩周后，當(dāng)天放療后回輸免疫細(xì)胞,第2天周二,第3天周三,第1天周一,第4天周四,第6天周六,第7天周日,第5天周五回輸培養(yǎng)的CIK、NK、D-CIK等細(xì)胞,休息,休息,（四）抗腫瘤效應(yīng)細(xì)胞交替使用方案,第二周D-CIK,第三周NK,第四周D-CIK,抽血30ml,回輸NK,抽血50ml,抽血30ml，回輸NK細(xì)胞,抽血50ml，回輸D-CIK細(xì)胞,第五周NK,第六周D-CIK,回輸D-CIK,第一周NK,臨床信息部,細(xì)胞產(chǎn)品,一、CIK細(xì)胞,CIK細(xì)胞(Cytokine-InducedKiller，CIK)，即細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞，是一種新

11、型的免疫活性細(xì)胞，該細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的識別能力很強(qiáng)，如同“細(xì)胞導(dǎo)彈”，能精確“點(diǎn)射”腫瘤細(xì)胞，但不會傷及“無辜”的正常細(xì)胞。尤其對手術(shù)后或放化療后患者效果顯著，能消除殘留微小的轉(zhuǎn)移病灶，防止癌細(xì)胞擴(kuò)散和復(fù)發(fā)，提高機(jī)體免疫力。,DC細(xì)胞尋找腫瘤細(xì)胞的“雷達(dá)”DC又稱樹突狀細(xì)胞。它是目前發(fā)現(xiàn)的功能最為強(qiáng)大的專職抗原遞呈細(xì)胞，也是唯一能激活幼稚T細(xì)胞的抗原遞呈細(xì)胞，在免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)中具有獨(dú)特地位。經(jīng)臨床研究的結(jié)果顯示，DC細(xì)胞可促使患者T細(xì)胞增殖分化，還可激活B淋巴細(xì)胞，全面啟動抗體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生高效而特異的抗腫瘤效應(yīng)，幫助重建腫瘤患者對腫瘤細(xì)胞的免疫監(jiān)視功能。DC細(xì)胞的功能如同“雷達(dá)”，通過在體內(nèi)隨著

12、血液全身各處主動搜索、識別腫瘤細(xì)胞，并把信息傳遞給免疫活性細(xì)胞，促進(jìn)其激活和大量繁殖。,二、DC細(xì)胞,三、DC-CIK,通過負(fù)載腫瘤抗原的DC與CIK的有機(jī)結(jié)合（即DC-CIK細(xì)胞）能產(chǎn)生特異性和非特異性的雙重抗腫瘤效應(yīng)，二者具有一定的互補(bǔ)作用。DC-CIK細(xì)胞不僅能激發(fā)、增強(qiáng)腫瘤患者特異性抗腫瘤免疫應(yīng)答，有效清除體內(nèi)殘留病灶，且在患者體內(nèi)誘發(fā)免疫記憶，從而獲得長期的抗瘤效應(yīng)。DC-CIK自體細(xì)胞免疫治療可以有效殺滅術(shù)后的殘留腫瘤細(xì)胞，防治復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，減輕放化療的毒副作用，減輕患者痛苦，提高患者自身免疫機(jī)制和生活質(zhì)量，延長患者生命。,擴(kuò)增活化的自體淋巴細(xì)胞（AutologousImmunoth

13、erapyLymphocytes,AIL），又稱為高效CIK細(xì)胞。是從患者自體外周血（50-100ml）中分離單個核細(xì)胞，經(jīng)過體外激活擴(kuò)增培養(yǎng)，得到的一種在生理條件下能夠殺傷腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞群，主要效應(yīng)細(xì)胞包括MHC限制性效應(yīng)細(xì)胞（CD3+CD8+細(xì)胞毒性T細(xì)胞、CD3+CD4+輔助性T細(xì)胞）、非MHC限制性效應(yīng)細(xì)胞（CD3+CD56+細(xì)胞、CD3-CD56+NK細(xì)胞），可有效輔助惡性腫瘤的治療。,四、AIL細(xì)胞,AIL與CIK培養(yǎng)方法比較,50ml外周血,PBMC,A培養(yǎng)法：,B培養(yǎng)法：,A培養(yǎng)法（傳統(tǒng)CIK）：DI：IFN-1000U.ml-1D2：OKT3mAb.100ng.ml-1、IL

14、-21000U.ml-1、PHA100ug.ml-1,B培養(yǎng)法（AIL）：DI：IFN-1000U.ml-1D2：OKT3mAb.100ng.ml-1、IL-21000U.ml-1、PHA100ug.ml-1，AIL擴(kuò)增試劑,自然殺傷細(xì)胞（Naturalkillercell，NK）是一種細(xì)胞質(zhì)中具有大顆粒的細(xì)胞，來源于骨髓，主要存在于外周血、脾臟和骨髓中。對靶細(xì)胞殺傷時既不需特異性抗體參加，也不需抗原預(yù)先致敏。自然殺傷細(xì)胞可在接觸病原體或腫瘤細(xì)胞后，立即發(fā)揮非特異性殺傷靶細(xì)胞的作用，尤其是對多種腫瘤細(xì)胞有迅速殺傷和溶解作用。因此，NK細(xì)胞對癌癥的監(jiān)視作用已越來越受到重視。,五、NK細(xì)胞,一、N

15、K細(xì)胞是人體內(nèi)抗癌活性的第一道防線，可直接殺死癌細(xì)胞，抑制腫瘤的生長及擴(kuò)散；二、NK細(xì)胞會抑制腫瘤附近新血管的增生，因此可限制腫瘤取得所需要的養(yǎng)份進(jìn)而限制腫瘤生長；三、NK細(xì)胞可直接改善并調(diào)節(jié)患者的免疫力及神經(jīng)系統(tǒng)，間接提高患者之生活品質(zhì)；四、副作用低或幾乎無副作用。,NK細(xì)胞作用原理,六、iAPA-細(xì)胞,SOCS1是維持機(jī)體免疫耐受的重要分子,Si-YiChenetal.發(fā)現(xiàn)：SOCS1(SuppressorofCytokineSignaling1)是一種重要的免疫負(fù)調(diào)節(jié)因子(antigenpresentationattenuator,APA)，對DC細(xì)胞的抗原呈遞起負(fù)調(diào)節(jié)作用，限制抗原呈遞

16、的時間和強(qiáng)度，從而限制自體抗腫瘤免疫反應(yīng)。該研究第一次提出了抑制免疫負(fù)調(diào)控因子來增強(qiáng)DC疫苗的概念,NatureBiotechnol.2004;22:1521-2評述：NatureBiotechnol.2004;22:1546-53J.Clin.Invest.2006;116:90100,STAT,SOCS1,JAK,Cytokine,IFN,IFN,IL-2,IL-3,IL-4,IL-6,IL-12,IL-7,IL-15,M-CSF,etc.,LPS,MyD88,TRAF6,IKK,IKK,RelA,p50,IB,IKK,IRAK,Mal,SOCS1,TLR配體,TAA,s-Flagelli

17、n,SOCS1-siRNA:解除DC免疫耐受(persistentandenhancedSignals2/3),腫瘤相關(guān)抗原(tumor-associatedantigen,TAA)intracellularSurvivin(Tcells)surfaceMUC1(TcellsandAb),分泌型FliC:TLR5ligandauto-andparacrineactivationofAPCs(enhancedSignals2/3),siSOCS1-TT,iAPA技術(shù)治療腫瘤,iAPA-細(xì)胞,與傳統(tǒng)免疫細(xì)胞治療相比，iAPA技術(shù)的優(yōu)勢,結(jié)構(gòu)新穎：iAPA因子包含抑制SOCS1的siRNA、腫瘤抗原

18、（Survivin,muc1）和鞭毛蛋白。機(jī)制新穎：iAPA技術(shù)不但針對性增強(qiáng)DC免疫活性，而且去除了免疫負(fù)性調(diào)控因素，從而更有效的增強(qiáng)了免疫效應(yīng)。創(chuàng)新靶點(diǎn)：iAPA技術(shù)作用的靶點(diǎn)獨(dú)創(chuàng)性針對免疫活化通絡(luò)上的關(guān)鍵性分子iAPA分子-SOCS1,44,45,2020年7月4日星期六,iAPA技術(shù)完全打破了傳統(tǒng)的免疫治療理念與方法，代表了免疫學(xué)理論的一場新的革命，為國際首創(chuàng)、世界一流。許多研究成果已分別發(fā)表在國際一流權(quán)威雜志，包括Naturebiotechnology、Naturemedicine與JCI等。,基礎(chǔ)研究：國際首創(chuàng)世界一流為國際醫(yī)學(xué)界所公認(rèn),CTL(CytotoxicTLymphocyte)，細(xì)胞毒性T細(xì)胞，其表面標(biāo)志是CD8。這些細(xì)胞的功能就像一個“殺手”，它們可以直接攻擊帶有特殊抗原的靶細(xì)胞，在抗病毒感染和抗腫瘤免疫中具有極其重要的用，細(xì)胞毒性T細(xì)胞也被稱為殺手T細(xì)胞。,七、CTL細(xì)胞,腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（TumorInfiltratingLymphocytes，TIL）是通過采集患者胸腔積水或者腹水，經(jīng)過體外激活擴(kuò)增培養(yǎng)，得到的一種在生理條件下能夠殺傷腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞群。它是新一代的特異性免疫活性細(xì)胞療法，具有高效、特異、